Рекомендации по применению плотной и жидкой сред Шедлера. Агаризованная и жидкая среды Шедлера относятся к числу широко применяемых в мировой микробиологической практике питательных сред для культивирования неспорообразующих облигатно анаэробных бактерий, включая бактероиды, фузобактерии и другие требовательные микроорганизмы-анаэробы. В качестве источников питания в среду включены гидролизаты казеина, сои, мяса, экстракт дрожжей, глюкоза. Редокс-потенциал и рН среды обеспечивают гемин, L-цистин, витамин К, трис-буфер, дикалия гидрофосфат, натрия хлорид. Это определяет высокий ростовой потенциал среды именно для анаэробных микроорганизмов - возбудителей заболеваний человека. Кроме того, среда может использоваться для роста любых требовательных микроорганизмов (в том числе аэробных). Наиболее широко используют плотную питательную среду Шедлера. С соблюдением правил асептики заменяют резиновую пробку на ватномарлевую. Помещают флакон на водяную баню до расплавления среды (не кипятить!) и разливают в чашки Петри по 15-20 мл. Перед употреблением в охлажденную до 50°С среду рекомендуют добавлять 5% крови. Среда не обладает селективными свойствами, поэтому при необходимости в нее могут быть внесены антимикробные добавки для выделения анаэробных или иных бактерий. Посев чистой культуры осуществляют по общепринятой методике. Посев биологического субстрата производят нанесением его на поверхность среды в чашке Петри (1 капля гноя или 2-3 капли другого биосубстрата). Распределяют посевной материал по поверхности агара. Инкубацию ведут в анаэробных и аэробных условиях в течение суток. СРЕДЫ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ МИКРООРГАНИЗМОВ К ПРОТИВОМИКРОБНЫМ ЛЕКАРСТВЕННЫМ СРЕДСТВАМ Получение точных и воспроизводимых результатов при определении чувствительности микроорганизмов к противомикробным лекарственным средствам в значительной степени зависит от качества и стандартности питательной среды. Вот почему во всем мире принято использовать среду Мюллера-Хинтон. Она была предложена авторами для иных целей, но многолетние исследования показали, что среда обеспечивает стандартность анализа чувствительности лучше, чем среды другого состава. Плотную среду Мюллера-Хинтон используют при определении чув- ствительности методом диффузии антимикробного вещества в засеянный агар из дисков («метод дисков») и методом серийных разведений в плотной питательной среде (определение минимальных подавляющих концентраций, МПК). Бульон Мюллера-Хинтон - для определения чувствительности (МПК) методом серийных разведений в двух вариантах: макроразведений в пробирках и микроразведений в планшетах. Прежде чем среда попадает в микробиологическую лабораторию, она проходит специальный контроль. Оценивают цветность, прозрачность, содержание кальция и магния, рН, плотность геля (для агаризованной среды), ростовые свойства, процесс зонообразования при диффузии антибиотиков в засеянный тест-культурами агар и МГК антибиотиков для тест-культур при использовании метода серийных разведений. Диаметр зон и МПК должны соответствовать ранее установленным показателям. Для отечественной практики плотный и жидкий варианты среды Мюллера-Хинтон имеют особое значение при определении минимальных подавляющих концентраций методом серийных разведений. О критериях чувствительности микроорганизма (чувствительный, промежуточный, устойчивый) судят, сопоставляя результат с ранее найденными критическими концентрациями. Они установлены только для МПК, полученных на среде Мюллера-Хинтон. Например, МПК гентамицина для стафилококков в этом случае ≤ 4 мкг/мл - штамм чувствителен, 8 мкг/мл промежуточен, ≥ 16 мкг/мл - резистентен; для эритромицина ≤ 0,5; 1 - 4; ≥8 мкг/мл; для многих цефалоспоринов - ≤ 8; 16; ≥ 32 мкг/мл и т.д.