ÎÃËßÄÈ ÓÄÊ 577.12:616.379-008.64 ÂÈÐÓÑÛ ÊÀÊ ÝÒÈÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÉ ÔÀÊÒÎÐ ÄÈÀÁÅÒÀ 1-ãî ÒÈÏÀ. ÌÎÄÅËÈÐÎÂÀÍÈÅ ÍÀ ÆÈÂÎÒÍÛÕ Ò. Ì. ÊÓ×ÌÅÐÎÂÑÊÀß1, À. Â. ÊÀÐÏÎÂ2, Ã. Â. ÄÎÍ×ÅÍÊÎ1 1 Èíñòèòóò áèîõèìèè èì. À.Â. Ïàëëàäèíà ÍÀÍ Óêðàèíû, Êèåâ; 2 Íàöèîíàëüíûé óíèâåðñèòåò ïèùåâûõ òåõíîëîãèé, Êèåâ; e-mail: kuch@biochem.kiev.ua Öóêðîâèé ä³àáåò 1-ãî òèïó âèíèêຠâíàñë³äîê ðóéíóâàííÿ β-êë³òèí ï³äøëóíêîâî¿ çàëîçè. Íåçâàæàþ÷è íà òå, ùî îñíîâíîþ ïðè÷èíîþ éîãî ðîçâèòêó º ãåíåòè÷íà ñõèëüí³ñòü, çíà÷íó ðîëü â åò³îëî㳿 çàõâîðþâàííÿ â³ä³ãðàþòü íåãåíåòè÷í³ ôàêòîðè, ñåðåä ÿêèõ ñóòòºâèìè º â³ðóñè. Ðîçãëÿíóòî ïàòîãåíåòè÷í³ ìåõàí³çìè â³ðóñ³íäóêîâàíîãî ä³àáåòó 1-ãî òèïó. Äî ïàòîãåíåçó â³ðóñè ìîæóòü çàëó÷àòèñÿ, ÿê ì³í³ìóì, äâîìà øëÿõàìè: ïî-ïåðøå, çàïóñêàþ÷è ñïåöèô³÷íó àâòî³ìóíí³ñòü β-êë³òèí ï³äøëóíêîâî¿ çàëîçè ó ðàç³ ïðÿìî¿ àáî íåïðÿìî¿ ³íôåêö³¿ â îðãàí³çì³ ³, ïî-äðóãå, áåçïîñåðåäíüî ³íô³êóþ÷è òà ðóéíóþ÷è β-êë³òèíè. Á³ëüøå òîãî, â³ðóñè çäàòí³ ÿê ñïðè÷èíþâàòè ä³àáåò, òàê ³ çàïîá³ãàòè éîìó ó òâàðèí ÷óòëèâèõ äî öüîãî çàõâîðþâàííÿ. Äëÿ ç’ÿñóâàííÿ ïàòîãåíåòè÷íèõ ìåõàí³çì³â â³ðóñ³íäóêîâàíîãî ä³àáåòó 1-ãî òèïó ó ëþäèíè íåîáõ³äíî ïðîâîäèòè ïîäàëüø³ äîñë³äæåííÿ â öüîìó àñïåêò³. Ê ë þ ÷ î â ³ ñ ë î â à: ä³àáåò 1-ãî òèïó, â³ðóñè, β-êë³òèíè ï³äøëóíêîâî¿ çàëîçè, ïàòîãåíåç. ðåäè ýíäîêðèííûõ çàáîëåâàíèé îäíèì èç íàèáîëåå òÿæåëûõ ÿâëÿåòñÿ ñàõàðíûé äèàáåò (ÑÄ).  ïîñëåäíèå äåñÿòèëåòèÿ âî ìíîãèõ ñòðàíàõ ìèðà çàáîëåâàåìîñòü ÑÄ, à òàêæå ïðîÿâëåíèå åãî îñëîæíåíèé ðåçêî âîçðîñëè. Ïðè÷èíû âîçíèêíîâåíèÿ ýòîé áîëåçíè, ïðèâîäÿùèå ê íàðóøåíèþ ýíäîêðèííîé, èììóííîé è íåðâíîé ñèñòåì, âåñüìà ðàçíîîáðàçíû. Ïðîãðåññèðóþùàÿ äåñòðóêöèÿ èíñóëèíïðîäóöèðóþùèõ β-êëåòîê ïîäæåëóäî÷íîé æåëåçû âûçûâàåò ãèïîèíñóëèíåìèþ è ãèïåðãëèêåìèþ, ÷òî ïðèâîäèò ê ðàçâèòèþ ÑÄ 1-ãî òèïà [1–5]. Çíà÷èòåëüíàÿ ðîëü â åãî ýòèîëîãèè ïðèíàäëåæèò ãåíåòè÷åñêèì ôàêòîðàì. Ïîêàçàíî, ÷òî ñóùåñòâóåò òåñíàÿ ñâÿçü ìåæäó ïðåäðàñïîëîæåííîñòüþ ê çàáîëåâàíèþ è ñïåöèôè÷åñêèìè àëëåëÿìè ãåíîâ ãëàâíîãî êîìïëåêñà ãèñòîñîâìåñòèìîñòè êëàññà II (ÌÍÑ ²² – major histocompatibility complex) [6, 7]. Îäíàêî íåñìîòðÿ íà òî, ÷òî ãåíåòè÷åñêàÿ îáóñëîâëåííîñòü çàáîëåâàíèÿ ïðåäñòàâëÿåòñÿ âåñüìà ïðàâäîïîäîáíîé, èçó÷åíèå ôàêòîðîâ ðèñêà ðàçâèòèÿ ÑÄ 1-ãî òèïà íà áëèçíåöàõ ïîêàçàëî, ÷òî èõ ñîâïàäåíèå áûëî íà óðîâíå òîëüêî 40% [8]. Ñåé÷àñ óñòàíîâëåíî, ÷òî çà ðàçâèòèå äàííîãî çàáîëåâàíèÿ ìîãóò áûòü îòâåòñòâåííû òàêæå ýòèîëîãè÷åñêèå ôàêòîðû, â ÷àñòíîñòè ñòðåññû, áåëêè ïèùè, òîêñèíû è âèðóñû [5, 9]. Èìåþùèåñÿ â íàñòîÿùåå âðåìÿ ýêñïåðèìåíòàëüíûå äàííûå ïîçâîëÿþò óòâåðæäàòü, ÷òî âèðóñíûå èíôåêöèè ìîãóò áûòü íå òîëüêî ïðè÷èíîé âîçíèêíîâåíèÿ ÑÄ, íî è ÿâëÿòüñÿ åãî ñóùåñòâåííûì ïàòîãåíåòè÷åñêèì ôàêòîðîì. Íàñòîÿùàÿ ðàáîòà ñôîêóñèðîâàíà íà àíàëè- Ñ çå âèðóñíîé ýòèîëîãèè ÑÄ. Èçâåñòíû äàííûå, ñîãëàñíî êîòîðûì âèðóñû ðàññìàòðèâàþòñÿ êàê ôàêòîðû îêðóæàþùåé ñðåäû, âûçûâàþùèå ÑÄ 1-ãî òèïà. Òàê, ïî÷òè 70 ëåò òîìó íàçàä áûëà îáíàðóæåíà ñåçîííîñòü îáîñòðåíèÿ ýòîãî çàáîëåâàíèÿ, ïèê êîòîðîãî ïðèõîäèëñÿ íà îñåíü. Ïîñêîëüêó ñåçîííîñòü çàáîëåâàíèé, êàê ïðàâèëî, ñâÿçûâàþò ñ âèðóñíûìè èíôåêöèÿìè, ïîÿâèëîñü ìíîãî îøèáî÷íûõ ñîîáùåíèé î âèðóñíûõ èíôåêöèÿõ, âûçûâàþùèõ ðàçâèòèå ÑÄ 1-ãî òèïà, à òàêæå î âûäåëåíèè âèðóñîâ èç ïîäæåëóäî÷íîé æåëåçû ïàöèåíòîâ â îñòðîé ñòàäèè çàáîëåâàíèÿ è îá èíäóêöèè åãî ó æèâîòíûõ, ÷óâñòâèòåëüíûõ ê èíôèöèðîâàíèþ èçîëèðîâàííûìè âèðóñàìè [10, 11]. Èññëåäîâàíèÿ ïàöèåíòîâ íà ðàííèõ ñòàäèÿõ áîëåçíè íà ïðèñóòñòâèå ó íèõ âèðóññïåöèôè÷íûõ àíòèòåë IgM ñâèäåòåëüñòâóþò î ñóùåñòâåííîé ðîëè âèðóñîâ â ýòèîëîãèè äàííîãî çàáîëåâàíèÿ [12]. Ñåé÷àñ ñ íèì ñâÿçûâàþò âèðóñ êîêñàêè  [13], âèðóñ êðàñíóõè [14], âèðóñ èíôåêöèîííîãî ïàðîòèòà (ñâèíêè) [15, 16], öèòîìåãàëîâèðóñ [17], âèðóñ Ýïñòàéíà–Áàððà [18] è âèðóñ âåòðÿíîé îñïû – îïîÿñûâàþùåãî ëèøàÿ (Varicella zostår) [19]. Ó æèâîòíûõ, â ÷àñòíîñòè ó ìûøåé, êðûñ, õîìÿêîâ, êîç, ñâèíåé è ïðèìàòîâ, ñâÿçü ñ ðàçâèòèåì ÑÄ 1-ãî òèïà ïðîñëåæåíà äëÿ äåâÿòè âèðóñîâ. Òàê, ïîêàçàíî, ÷òî âèðóñû ýíöåôàëîìèîêàðäèòà (ÝÌÊ) [20, 21] è Ìåíãî [22], ðåîâèðóñ [23] è ðåòðîâèðóñ [24, 25] àññîöèèðîâàíû ñ ðàçâèòèåì ýòîé áîëåçíè ó ìûøåé; âèðóñ êîêñàêè  è îñîáåííî Â4 – ó ìûøåé [26, 27] è ïðèìàòîâ [28]; âèðóñ ÿùóðà – ó ñâèíåé è îâåö [29]; âèðóñ êðàñíóõè – ó õîìÿêîâ è êðîëèêîâ [30]; 32 ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1 Ò. Ì. ÊÓ×ÌÅÐÎÂÑÊÀß, À. Â. ÊÀÐÏÎÂ, Ã. Â. ÄÎÍ×ÅÍÊÎ âèðóñ áû÷üåé âèðóñíîé äèàðåè-ñëèçèñòîé – ó îâåö [31] è âèðóñ Êèëõàìà ó êðûñ (KRV) [32]. 1. Êîíöåïöèÿ âèðóñíîé ýòèîëîãèè ýíäîêðèííûõ çàáîëåâàíèé  ïàòîãåíåç àóòîèììóííûõ çàáîëåâàíèé âèðóñíûå èíôåêöèè âîâëåêàþòñÿ ïîñðåäñòâîì íåñêîëüêèõ ìåõàíèçìîâ [33–37]. Íåêîòîðûå èç íèõ ñâÿçàíû ñ òåì, ÷òî ïîòåíöèàëüíî àóòîðåàêòèâíûå, îäíàêî ïîêîÿùèåñÿ ëèìôîöèòû, êîòîðûå íå ïîäâåðãëèñü òèìóñíîé íåãàòèâíîé ñåëåêöèè, ïðèñóòñòâóþò â ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè áîëüøèíñòâà èíäèâèäóóìîâ [38–40]. Ñóùåñòâóþò ìíîæåñòâåííûå “âñòðîåííûå” ïðåäîõðàíèòåëüíûå ìåõàíèçìû äëÿ ïðåäîòâðàùåíèÿ àêòèâàöèè ýòèõ êëåòîê â íîðìàëüíûõ óñëîâèÿõ. Îäíàêî âèðóñíûå èíôåêöèè, ïðèâîäÿùèå ê èììóííîé àêòèâàöèè, ìîãóò íàðóøèòü óñòàíîâèâøååñÿ ðàâíîâåñèå ñàìîòîëåðàíòíîñòè [41]. Òåì íå ìåíåå ïðÿìûõ äîêàçàòåëüñòâ òîãî, ÷òî âèðóñíàÿ èíôåêöèÿ âûçûâàåò àóòîèììóííûå çàáîëåâàíèÿ ó ÷åëîâåêà, ïîëó÷èòü òðóäíî.  òå÷åíèå æèçíè ÷åëîâåê ïîäâåðæåí ìíîæåñòâó èíôåêöèé è ïîýòîìó ïðÿìóþ ïðè÷èííóþ ñâÿçü ìåæäó îòäåëüíûì âèðóñîì è áîëåçíüþ óñòàíîâèòü äîñòàòî÷íî ñëîæíî. Ê òîìó æå âèðóñû ñïîñîáíû ÷àñòî ìóòèðîâàòü: îäèí âèðóñíûé øòàìì ìîæåò ñîäåðæàòü ìíîæåñòâî ðàçëè÷íûõ êâàçèñïåöèôè÷íûõ ïîñëåäîâàòåëüíîñòåé, ðàçëè÷àþùèõñÿ ïî äèàáåòîãåííîñòè. Äëÿ ñîçäàíèÿ óñëîâèé, ïðè êîòîðûõ âèðóñû èíäóöèðóþò èëè îñëàáëÿþò àóòîèììóííîñòü, à òàêæå äëÿ àíàëèçà ïðèíöèïîâ, ñîãëàñíî êîòîðûì ýòè ïðîöåññû ìîãóò îñóùåñòâëÿòüñÿ ïðè ÑÄ 1-ãî òèïà, áûëà ðàçðàáîòàíà è èçó÷åíà âèðóñèíäóöèðîâàííàÿ ìîäåëü ñ èñïîëüçîâàíèåì òðàíñãåííûõ ìûøåé [42, 43]. Ýòî äàëî âîçìîæíîñòü â äàëüíåéøåì ðàçâèòü êîíöåïöèþ î òîì, êàê àíòèâèðóñíûé îòâåò âëèÿåò íà àóòîèììóííîñòü, è ÷òî àêòèâàöèÿ àóòîðåàêòèâíûõ ëèìôîöèòîâ íå âñåãäà óñèëèâàåò çàáîëåâàíèå, à èíîãäà èìååò è îáðàòíûé ýôôåêò. Ýêñïåðèìåíòû ñ äàííîé ìîäåëüþ ïîçâîëèëè ñäåëàòü ïðåäïîëîæåíèå, ÷òî èììóííûé îòâåò ïðîòèâ äåòåðìèíàíò, îáùèõ äëÿ âèðóñà è äëÿ êëåòêè-õîçÿèíà, ìîæåò èíäóöèðîâàòü ðàçðóøåíèå êëåòîê è òêàíåé. Âîçìîæíûì ìåõàíèçìîì, ðåàëèçóþùèìñÿ â ñëó÷àå òàêîãî îòâåòà, ÿâëÿåòñÿ ãåíåðàöèÿ ðåàãèðóþùèõ ïåðåêðåñòíî ýôôåêòîðíûõ ëèìôîöèòîâ èëè àíòèòåë, ðàñïîçíàþùèõ ñïåöèôè÷åñêèå äåòåðìèíàíòû íà êëåòêàõ-ìèøåíÿõ [44]. Ñëåäóåò òàêæå îòìåòèòü, ÷òî íåêîòîðûå âèðóñíûå èíôåêöèè íàðóøàþò àóòîèììóííûé ïðîöåññ è îáåñïå÷èâàþò, ïî êðàéíåé ìåðå â ýêñïåðèìåíòàëüíûõ ìîäåëÿõ, èçëå÷åíèå îò áîëåçíè. Òàê, âèðóñ ëåéêîöèòàðíîãî õîðèîìåíèíãèòà, âåISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1 ðîÿòíî, ïðåäîòâðàùàåò ðàçâèòèå àóòîèììóííîãî ÑÄ 1-ãî òèïà ó BioBreeding (BB)-êðûñ – îäíîé èç ìîäåëåé ýòîãî ñïîíòàííîãî çàáîëåâàíèÿ ó æèâîòíûõ [45], à âèðóñ ìûøèíîãî ãåïàòèòà – ó íåòó÷íûõ äèàáåòè÷åñêèõ (NOD) ìûøåé [46]. Ýòî, â ñâîþ î÷åðåäü, ñâèäåòåëüñòâóåò î òîì, ÷òî ïðè åñòåñòâåííîì è ýêñïåðèìåíòàëüíîì èíôèöèðîâàíèè æèâîòíûõ âèðóñû ñïîñîáíû âîâëåêàòüñÿ â ïàòîãåíåç ÑÄ 1-ãî òèïà. Ýòî ìîæåò ïðîèñõîäèòü, êàê ìèíèìóì, äâóìÿ ðàçëè÷íûìè ïóòÿìè. Ñ îäíîé ñòîðîíû, âèðóñû íåïîñðåäñòâåííî èíôèöèðóþò è ðàçðóøàþò β-êëåòêè ïîäæåëóäî÷íîé æåëåçû, à ñ äðóãîé, ëèáî îïðåäåëåííûì îáðàçîì çàïóñêàþò àóòîèììóííîå ðàçðóøåíèå β-êëåòîê, ëèáî åìó ñïîñîáñòâóþò. Äîêàçàòåëüñòâà òîãî, ÷òî âèðóñû èíäóöèðóþò ó æèâîòíûõ ÑÄ 1-ãî òèïà, ïîëó÷åíû ïðè èçó÷åíèè âèðóñîâ ÝÌÊ ó ìûøåé [21, 47] è KRV ó êðûñ [32, 48, 49]. Ïîêàçàíî, ÷òî âûñîêî äèàáåòîãåííûé âèðóñ ÝÌÊ D ÿâëÿåòñÿ ïåðâè÷íûì àãåíòîì, êîòîðûé ñåëåêòèâíî ïîâðåæäàåò β-êëåòêè ïîäæåëóäî÷íîé æåëåçû, â òî âðåìÿ êàê KRV ðàññìàòðèâàåòñÿ â êà÷åñòâå àãåíòà, âêëþ÷àþùåãî ñïåöèôè÷åñêóþ ê β-êëåòêàì àóòîèììóííîñòü áåç èõ èíôèöèðîâàíèÿ. 2. Äèàáåò, èíäóöèðóåìûé âèðóñîì ÝÌÊ ó ìûøåé Âèðóñ ÝÌÊ ïðèíàäëåæèò ê ñåìåéñòâó ïèêîðíàâèðóñîâ (Picornaviridae) è ÿâëÿåòñÿ ìåëêèì âèðóñîì, ñîäåðæàùèì îäíîöåïî÷å÷íóþ ÐÍÊ. Åãî äèàáåòîãåííûé âàðèàíò ñåëåêòèâíî èíôèöèðóåò, à çàòåì ðåïëèöèðóåòñÿ âíóòðè β-êëåòîê ãåíåòè÷åñêè ÷óâñòâèòåëüíûõ ëèíèé ìûøåé. Ðåïëèêàöèÿ ÝÌÊ â β-êëåòêàõ îñóùåñòâëÿåòñÿ â ìàêðîôàãàõ ïàíêðåàòè÷åñêèõ îñòðîâêîâ. Ñåêðåöèÿ öèòîêèíîâ, òàêèõ êàê èíòåðëåéêèí IL-1 è ôàêòîð íåêðîçà îïóõîëè TNF-α, à òàêæå îêñèäà àçîòà (NO) àêòèâèðîâàííûìè ìàêðîôàãàìè ïðèâîäèò ê äàëüíåéøåé äåñòðóêöèè îñòàâøèõñÿ β-êëåòîê, âûçûâàÿ äèàáåò ó ìûøåé. Âàðèàíò Ì âèðóñà ÝÌÊ èíäóöèðóåò ñèíäðîì ïîäîáíûé ÑÄ, êîòîðûé õàðàêòåðèçóåòñÿ ãèïîèíñóëèíåìèåé, ãèïåðãëèêåìèåé, ãëþêîçóðèåé, ïîëèäèñïåïñèåé è ïîëèôàãèåé ó ãåíåòè÷åñêè ÷óâñòâèòåëüíûõ âèäîâ ìûøåé [50, 20]. Î÷èñòêà âèðóñà ÝÌÊ-Ì ïîçâîëèëà èçîëèðîâàòü äâà åãî ñòàáèëüíûõ âàðèàíòà: îäèí, âûñîêîäèàáåòîãåííûé (ÝÌÊ-D), âûçûâàþùèé ÑÄ ïðàêòè÷åñêè ó 90% èíôèöèðîâàííûõ æèâîòíûõ, è äðóãîé – íåäèàáåòîãåííûé (ÝÌÊ-Â) [21]. Îäíàêî ýòè äâà âàðèàíòà íå ðàçëè÷àþòñÿ àíòèãåíàìè. Ðàçëè÷èå ìåæäó íèìè ïî 14 íóêëåîòèäàì áûëî îáíàðóæåíî ïðè èññëåäîâàíèè ïîëíîé íóêëåîòèäíîé ïîñëåäîâàòåëüíîñòè ãåíîìîâ ýòèõ âàðèàíòîâ [50]. Ïðè ýòîì òîëüêî îäíà àìèíîêèñëîòà – àëàíèí 776 – 33 ÎÃËßÄÈ ÿâëÿåòñÿ êðèòè÷åñêîé äëÿ äèàáåòîãåííîñòè âèðóñà ÝMÊ [51]. À îñíîâàíèå “G” â ïîëîæåíèè 3155 íóêëåîòèäà – Ala(GCC)776 â ïîëèïðîòåèíå – èìååòñÿ ó âñåõ äèàáåòîãåííûõ âàðèàíòîâ, â òî âðåìÿ êàê îñíîâàíèå “À” â òîì æå ïîëîæåíèè – Thr(ACC)776 – íàõîäèòñÿ âî âñåõ íåäèàáåòîãåííûõ âàðèàíòàõ. Äëÿ îöåíêè âëèÿíèÿ Ala776 íà Thr776 èëè Thr776 íà Ala776 áûëà ðàçðàáîòàíà ñïåöèàëüíàÿ ìåòîäèêà, âêëþ÷àþùàÿ ñîçäàíèå õèìåðíîé ÐÍÊ ïóòåì ïðèñîåäèíåíèÿ ó÷àñòêà ïîëè(C) âèðóñíîé ÐÍÊ ê 5′-óñå÷åííîìó ÐÍÊ òðàíñêðèïòó êÄÍÊ âèðóñà ÝMÊ [52]. Ýòî ïîçâîëèëî ïðîâåñòè ñàéòñïåöèôè÷åñêèé ìóòàãåíåç â ïîëîæåíèè íóêëåîòèäîâ 3155 ãåíîìà âèðóñà ÝMÊ, ïîñëå ÷åãî ìûøåé SJL/J èíôèöèðîâàëè îáðàçîâàâøèìèñÿ õèìåðíûìè ÝMÊ-âèðóñàìè. Îêàçàëîñü, ÷òî âñå Ala776-ñîäåðæàùèå ðåêîìáèíàíòíûå ÝMÊ-âèðóñû èíäóöèðîâàëè ÑÄ, â òî âðåìÿ êàê íè îäèí èç Thr776ñîäåðæàùèõ ðåêîìáèíàíòíûõ âàðèàíòîâ âèðóñîâ ÝMÊ íå âûçûâàë çàáîëåâàíèå ó ãåíåòè÷åñêè ÷óâñòâèòåëüíûõ ìûøåé [53]. Òàêèì îáðàçîì, áûëî äîêàçàíî, ÷òî åäèíñòâåííûé àìèíîêèñëîòíûé îñòàòîê â ïîëîæåíèè 776 ïîëèïðîòåèíà âèðóñà ÝMÊ îïðåäåëÿåò åãî äèàáåòîãåííîñòü. Çàìåíà àìèíîêèñëîòû (Ala→Thr) â ïîëîæåíèè 776 ïîëèïðîòåèíà ó âèðóñà ÝMÊ ïðèâîäèëà ê ïîòåðå äèàáåòîãåííîñòè.  òî æå âðåìÿ ïðè çàìåíå àìèíîêèñëîòû Thr íà Ala â òîì æå ïîëîæåíèè íåäèàáåòîãåííûé âèðóñ ÝMÊ ïðèîáðåòàåò äèàáåòîãåííîñòü.  ñâÿçè ñ ýòèì âîçíèêàåò âîïðîñ, ïî÷åìó èìåííî 776-é àìèíîêèñëîòíûé îñòàòîê Ala ÿâëÿåòñÿ êðèòè÷åñêèì äëÿ ÝÌÊ-èíäóöèðóåìîãî äèàáåòà ó ìûøåé. Ïîêàçàíî, ÷òî àëàíèí ðàñïîëîæåí â âûñîêîêîíñåðâàòèâíîì è î÷åíü ãèäðîôîáíîì ó÷àñòêå îñíîâíîãî êàïñèäíîãî âèðóñíîãî áåëêà VP1, ñîäåðæàùåãî òðè ïðîêñèìàëüíûõ îñòàòêà ïðîëèíà (Pro-Thr-Gly-Thr-Pro-Ala776-Lys-Pro). Ýòîò ó÷àñòîê áûë èäåíòèôèöèðîâàí êàê ñàéò, ó÷àñòâóþùèé â ïðèñîåäèíåíèè âèðóñà ê β-êëåòêàì. Çàìåíà Thr (ÝMÊ-Â) íà Ala (ÝMÊ-D) â äàííîì ïîëîæåíèè óìåíüøàåò ãèäðîôîáíîñòü áåëêà íà 37%. Ïîýòîìó î÷åâèäíî, ÷òî òàêîå èçìåíåíèå â äèàáåòîãåííîì âàðèàíòå âèðóñà ÝÌÊ îòâå÷àåò çà åãî äèàáåòîãåííîñòü, ïðè ýòîì óâåëè÷èâàåòñÿ ýôôåêòèâíîñòü ïðèñîåäèíåíèÿ âèðóñà ê β-êëåòêàì [54]. Ïðèâåäåííàÿ ãèïîòåçà ïîäòâåðæäàåòñÿ íàáëþäåíèåì, ÷òî ó ñàìöîâ ìûøåé ëèíèè JCR Swiss âèðóñ ÝMÊ-D ïðèñîåäèíÿåòñÿ ê ïåðâè÷íûì β-êëåòêàì â øåñòü ðàç ýôôåêòèâíåå, ÷åì ÝMÊ- [55]. Ýòó ãèïîòåçó ïðîâåðÿëè, îöåíèâàÿ ñâÿçûâàþùóþ ñïîñîáíîñòü êàæäîãî èç ðåêîìáèíàíòíûõ õèìåðíûõ âèðóñîâ ÝMÊ ñ β-êëåòêàìè. Âèðóñû, ñîäåðæàùèå Thr, Ser, Pro, Asp è Val â ïîëîæåíèè 152 îñíîâíîãî êàïñèäíîãî áåëêà VP1 (ïîëîæåíèå 776 ïîëèïðîòåèíà), ñëàáî ñâÿçûâàëèñü ñ β-êëåòêàìè.  îòëè÷èå îò íèõ, ðåêîìáèíàíòíûå õèìåðíûå âèðóñû ÝMÊ, ñîäåðæàùèå â ïîëîæåíèè 152 áåëêà VP1 Ala, ýôôåêòèâíî àññîöèèðîâàëèñü è èíôèöèðîâàëè β-êëåòêè, âûçûâàÿ ðàçâèòèå ÑÄ. Ñ ïîìîùüþ òðåõìåðíîãî ìîëåêóëÿðíîãî ìîäåëèðîâàíèÿ áûëî ïîêàçàëî, ÷òî âàíäåð-âààëüñîâîå âçàèìîäåéñòâèå ÿâëÿåòñÿ îïðåäåëÿþùèì â ñòàáèëüíîñòè áåëêà VP1, è ÷òî îñòàòêè, îêðóæàþùèå áåëîê â ïîëîæåíèè 152, áîëåå òåñíî óïàêîâàíû ó ðåêîìáèíàíòíûõ âèðóñîâ, ñîäåðæàùèõ Thr, Ser, Pro, Asp è Val â ïîëîæåíèè 152, ÷åì ó ðåêîìáèíàíòíûõ âèðóñîâ, ñîäåðæàùèõ â ýòîì ïîëîæåíèè Ala. Òàêèì îáðàçîì, ïîâåðõíîñòü ïðîñòðàíñòâà, îêðóæàþùåãî Ala â ïîëîæåíèè 152 áåëêà VP1, áîëåå äîñòóïíà, âñëåäñòâèå ÷åãî ïðèãîäíîñòü ñàéòîâ äëÿ ïðèñîåäèíåíèÿ ê ðåöåïòîðàì β-êëåòîê óâåëè÷èâàåòñÿ, ÷òî âûðàæàåòñÿ â âèðóñíîé èíôåêöèè è ðàçâèòèè ÑÄ [56]. ×òî æå êàñàåòñÿ ãåíåòè÷åñêîãî êîíòðîëÿ âèðóñèíäóöèðîâàííîãî ÑÄ, òî ïðè èíôèöèðîâàíèè âèðóñîì ÝÌÊ-Ì òîëüêî ó íåñêîëüêèõ èíáðåäíûõ ëèíèé ìûøåé (SJL, SWR, DBA/1, DBA/2), â îòëè÷èå îò ëèíèé (C57BL/6, CBA, AKR, BALB/C), ðàçâèâàåòñÿ çàáîëåâàíèå [57]. Ïðåäïîëàãàåòñÿ, ÷òî ÷óâñòâèòåëüíîñòü ê âèðóñèíäóöèðóåìîìó ÑÄ ÿâëÿåòñÿ íàñëåäñòâåííîé, êàê àóòîñîìíàÿ ðåöåññèâíàÿ ÷åðòà. Ýòî òàêæå ñîãëàñóþòñÿ ñ èäååé î òîì, ÷òî èíäóöèðîâàíèå ÝÌÊ-âèðóñîì ÑÄ àññîöèèðîâàíî ñ çàêîíîì íàñëåäîâàíèÿ ïî Ìåíäåëþ, è ÷òî ÷óâñòâèòåëüíîñòü ê íåìó êîíòðîëèðóåòñÿ îäèíî÷íûì ëîêóñîì [57]. Ñ÷èòàåòñÿ, ÷òî ÷óâñòâèòåëüíîñòü ê ÑÄ, èíäóöèðîâàííàÿ âèðóñîì ÝÌÊ-D, êîíòðîëèðóåòñÿ ó ìûøåé îäèíî÷íûì ãåíîì è ìîæåò áûòü óïðàâëÿåìà ïóòåì ìîäóëèðîâàíèÿ ýêñïðåññèè âèðóñíûõ ðåöåïòîðîâ íà β-êëåòêàõ [58]. 34 ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1 3. Ìåõàíèçì ïàòîãåííîñòè ÝÌÊ-D âèðóñèíäóöèðóåìîãî äèàáåòà ó ìûøåé Ðàíåå áûëî ïîêàçàíî, ÷òî èíôèöèðîâàíèå ãåíåòè÷åñêè ÷óâñòâèòåëüíîé ëèíèè ìûøåé SJL/J âèðóñîì ÝMÊ-D óæå ÷åðåç òðè äíÿ ïðèâîäèò ê ðàçâèòèþ ÑÄ ïóòåì áûñòðîãî ðàçðóøåíèÿ β-êëåòîê [21]. Ýòî ïðîèñõîäèò âñëåäñòâèå ðåïëèêàöèè âèðóñà â êëåòêàõ â ïåðèîä äî èíäóêöèè ñîîòâåòñòâóþùèõ íåéòðàëèçóþùèõ àíòèòåë ïðîòèâ âèðóñà ÝMÊ-D. Äëÿ âûÿñíåíèÿ òîãî, áóäåò ëè ïîäàâëåíèå Ò-êëåòîê âëèÿòü íà ÑÄ, èíäóöèðóåìûé âèðóñîì ÝMÊ-D, ìûøåé SJL/J îáðàáàòûâàëè àíòèòåëàìè ê Ò-êëåòêàì êàê ïåðåä, òàê è ïîñëå èíôèöèðîâàíèÿ âèðóñîì. Ïðè ýòîì ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíûõ ðàçëè÷èé â ðàçâèòèè ÑÄ ó æèâîòíûõ, îáðàáîòàííûõ è íåîáðàáîòàííûõ òàêèìè àíòèòåëàìè, íå îáíàðóæåíî [59, 60]. Ñ öåëüþ óñòàíîâëåíèÿ ðîëè ìàêðîôàãîâ â ðàçðóøåíèè β-êëåòîê ó Ò. Ì. ÊÓ×ÌÅÐÎÂÑÊÀß, À. Â. ÊÀÐÏÎÂ, Ã. Â. ÄÎÍ×ÅÍÊÎ ÝMÊ-D âèðóñèíôèöèðîâàííûõ æèâîòíûõ, ìûøåé SJL/J îáðàáàòûâàëè àíòèìàêðîôàãàëüíûìè àíòèòåëàìè äî è ïîñëå èíôèöèðîâàíèÿ ýòèì âèðóñîì. Îêàçàëîñü, ÷òî âèðóñèíäóöèðîâàííûé ÑÄ ó ìûøåé, îáðàáîòàííûõ àíòèìàêðîôàãàëüíûìè àíòèòåëàìè, ðàçâèâàåòñÿ ìåíåå èíòåíñèâíî, ÷åì ó íåîáðàáîòàííûõ, ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î âàæíîé ðîëè ìàêðîôàãîâ â ïðîöåññå ðàçðóøåíèÿ β-êëåòîê ó SJL/J-ìûøåé, èíôèöèðîâàííûõ âèðóñîì ÝMÊ-D [60]. Ñëåäóåò, îäíàêî, îòìåòèòü, ÷òî âèðóñíûå èíôåêöèè ó æèâîòíûõ è ÷åëîâåêà âîçíèêàþò ïðè îòíîñèòåëüíî íèçêîì êîëè÷åñòâå â êëåòêàõ âèðóñà. Èíôèöèðîâàíèå òêàíè âèðóñàìè ñ âûñîêèìè òèòðàìè, èñïîëüçóåìûìè â ýêñïåðèìåíòàõ, â ïðèðîäå íå ïðîèñõîäèò. Ïîýòîìó äëÿ èçó÷åíèÿ èììóííûõ ìåõàíèçìîâ, ó÷àñòâóþùèõ â ðàçðóøåíèè β-êëåòîê, áûëà ðàçðàáîòàíà äðóãàÿ âèðóñíàÿ ìîäåëü, â êîòîðîé ìûøè èíôèöèðîâàëèñü âèðóñîì ÝMÊ-D â íèçêèõ äîçàõ. Áûëî ïîêàçàíî, ÷òî ó òàêèõ ìûøåé öåíòðàëüíóþ ðîëü â äåñòðóêöèè β-êëåòîê èãðàþò ìàêðîôàãè [61].  äàëüíåéøåì óñòàíîâèëè, ÷òî ñåëåêòèâíàÿ ÝMÊ-D-âèðóñíàÿ èíôåêöèÿ β-êëåòîê ñïîñîáñòâóåò âîâëå÷åíèþ ìàêðîôàãîâ â ïàíêðåàòè÷åñêèå îñòðîâêè ïóòåì èíôèëüòðàöèè äðóãèõ èììóíîöèòîâ, âêëþ÷àÿ Ò-êëåòêè: êëåòêè-íàòóðàëüíûå êèëëåðû (ÍÊ) è Â-êëåòêè [60]. Òåì íå ìåíåå ðîëü ìàêðîôàãîâ â ðàçðóøåíèè β-êëåòîê ïîëíîñòüþ íå óñòàíîâëåíà. Äàëüíåéøèå èññëåäîâàíèÿ ïîêàçàëè, ÷òî âèðóñ ÝMÊ-D èíôèöèðóåò è àêòèâèðóåò ìàêðîôàãè, îäíàêî ñàì âíóòðè èõ íå ðåïëèöèðóåòñÿ [62]. Ïîñêîëüêó ìàêðîôàãè, êàê èçâåñòíî, ïðîäóöèðóþò ðàñòâîðèìûå ìåäèàòîðû – IL-1β, TNF-α è NO, òî âîçíèê èíòåðåñ ê èññëåäîâàíèþ âîâëå÷åíèÿ ýòèõ ñîåäèíåíèé â äåñòðóêöèþ β-êëåòîê ó ìûøåé, èíôèöèðîâàííûõ âèðóñîì ÝMÊ-D â íèçêèõ äîçàõ. Äåéñòâèòåëüíî, â ïàíêðåàòè÷åñêèõ îñòðîâêàõ, èíôèöèðîâàííûõ âèðóñîì ÝMÊ-D â íèçêèõ äîçàõ, îïðåäåëÿåòñÿ ñåëåêòèâíàÿ ýêñïðåññèÿ IL-1β, TNF-α è èíäóöèáåëüíîé NO-ñèíòàçû (iNOS). Ê òîìó æå îáðàáîòêà âèðóñèíôèöèðîâàííûõ ìûøåé àíòèòåëàìè ïðîòèâ IL-1β èëè TNF-α, à òàêæå èíãèáèòîðîì iNOS, àìèíîãóàíèäèíîì, ïðèâîäèò ê çíà÷èòåëüíîìó ñíèæåíèþ ðàçâèòèÿ ÑÄ [63]. Ýòî äîêàçûâàåò, ÷òî ïðîèçâîäèìûå ìàêðîôàãàìè ìåäèàòîðû èãðàþò êðèòè÷åñêóþ ðîëü â äåñòðóêöèè β-êëåòîê, âûçûâàÿ ðàçâèòèå çàáîëåâàíèÿ ó ìûøåé, èíôèöèðîâàííûõ âèðóñîì ÝMÊ-D â íèçêèõ äîçàõ. Îäíàêî ìîëåêóëÿðíûé ìåõàíèçì äåéñòâèÿ ýòèõ ìåäèàòîðîâ íåèçâåñòåí. Ïîêàçàíî, ÷òî IL-1β èíäóöèðóåò àïîïòîç ïóòåì èíäóêöèè ýêñïðåññèè iNOS è ïðîäóêöèè NO â îñòðîâêîâûõ êëåòêàõ êðûñû [64–66]. Ïðè ýòîì IL-1β è TNF-α óâåëè÷èâàþò ýêñïðåññèþ àíòèãåíà Fas, êîòîðûé ïðè- íèìàåò ó÷àñòèå â àïîïòîçå [67]. Ïîýòîìó âîçìîæíî, ÷òî îãðàíè÷åííàÿ ðåïëèêàöèÿ âèðóñà ÝMÊ-D â β-êëåòêàõ îáóñëîâëåíà âîâëå÷åíèåì ìàêðîôàãîâ, àêòèâèðîâàííûõ âèðóñàìè, à òàêæå IL-1β è TNF-α, ïðîäóöèðîâàííûõ àêòèâèðîâàííûìè ìàêðîôàãàìè â ïàíêðåàòè÷åñêèõ îñòðîâêàõ, â ïðîöåññ èíäóêöèè ýêñïðåññèè Fas â β-êëåòêàõ è(èëè) ýêñïðåññèè iNOS è ïðîäóêöèè NO, âûçûâàþùèõ ãèáåëü β-êëåòîê ïóòåì àïîïòîçà. Áûëè ïðîâåäåíû èññëåäîâàíèÿ ïî âûÿñíåíèþ âîïðîñà, ìîæåò ëè òèðîçèíêèíàçíûé ïóòü èìåòü îòíîøåíèå ê èíäóöèðóåìîé âèðóñîì ÝMÊ-D àêòèâàöèè ìàêðîôàãîâ in vitro, è, åñëè ýòî ïðîèñõîäèò, òî áóäåò ëè îáðàáîòêà èíãèáèòîðîì òèðîçèíêèíàçû in vivo ïðåäîòâðàùàòü ðàçâèòèå âèðóñèíäóöèðîâàííîãî ÑÄ.  äàííûõ îïûòàõ iNOS â ìàêðîôàãàõ, àêòèâèðîâàííûõ âèðóñîì ÝMÊ-D, ýêñïðåññèðîâàëàñü íà áîëåå âûñîêîì óðîâíå, ÷åì IL-1β è TNF-α.  ýòèõ êëåòêàõ òàêæå íàáëþäàåòñÿ èíòåíñèâíàÿ ïðîäóêöèÿ NO, îäíàêî ñëåäóþùåå ïîêîëåíèå âèðóñîâ íå ïðîäóöèðóåòñÿ [62]. Ïðèâåäåííûå ðåçóëüòàòû ïîêàçûâàþò, ÷òî èíôèöèðîâàíèå ìàêðîôàãîâ âèðóñàìè ÝMÊ-D íå ñïîñîáñòâóåò ïîñëåäóþùåé ðåïëèêàöèè âèðóñà, îäíàêî ìîæåò âûçûâàòü èõ àêòèâàöèþ. Äëÿ äàëüíåéøåãî èçó÷åíèÿ ñèãíàëüíîãî ìåõàíèçìà òàêîãî ïðîöåññà ñ ïîìîùüþ âèðóñà ÝMÊ-D â ïåðèòîíåàëüíûõ ìàêðîôàãàõ DBA/2 ìûøåé, èíôèöèðîâàííûõ âèðóñîì, èññëåäîâàëè ýêñïðåññèþ è àêòèâàöèþ ïåðåäàþùèõ ñèãíàë ìîëåêóë, â ÷àñòíîñòè òèðîçèí-êèíàçû ñåìåéñòâà Srñ. Îäíà èç êèíàç òåñòèðóåìîãî ñåìåéñòâà, hck, õàðàêòåðèçóåòñÿ çíà÷èòåëüíûì óâåëè÷åíèåì àóòîôîñôîðèëèðîâàíèÿ è ôîñôîðèëèðîâàíèÿ Sam 68 (ñóáñòðàò äëÿ Src êèíàçû). Ýòî ñâèäåòåëüñòâóåò, ÷òî êèíàçà hck âîâëå÷åíà â àêòèâàöèþ ìàêðîôàãîâ ìûøåé, èíôèöèðîâàííûõ âèðóñîì ÝMÊ-D. ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1 35 4. KRV-èíäóöèðîâàííûé àóòîèììóííûé äèàáåò ó êðûñ KRV ïðèíàäëåæèò ê ñåìåéñòâó ïàðâîâèðóñîâ. Âèðèîí ïàðâîâèðóñîâ (äèàìåòð 18–26 íì) èìååò îòíîñèòåëüíî ïðîñòóþ ñòðóêòóðó, ñîñòîÿùóþ èç òðåõ áåëêîâ è ëèíåéíîé ìîëåêóëû îäíîöåïî÷å÷íîé ÄÍÊ. Ïàðâîâèðóñ ðåïëèöèðóåòñÿ â ÿäðå äåëÿùèõñÿ êëåòîê (îòñþäà ñêëîííîñòü åãî ê êîñòíîìó ìîçãó, ëèìôîèäíûì îðãàíàì, êèøêàì è ðàçâèâàþùèìñÿ çàðîäûøàì) è èìååò ãåíîì, ñïîñîáíûé èíòåãðèðîâàòüñÿ ñ ãåíîìîì èíôèöèðîâàííîé êëåòêè. KRV îáû÷íî èçîëèðóþò èç êðûñèíîé ñàðêîìû è îáíàðóæèâàþò â ñëó÷àå ñìåðòåëüíîé íåîíàòàëüíîé áîëåçíè, ôèçè÷åñêîé äåôîðìàöèè è óìñòâåííîé çàäåðæêè ó íîâîðîæäåííûõ êðûñ. Ïîêàçàíî, ÷òî îí âûçûâàåò àóòîèììóííûé ÑÄ â óñòîé÷èâûõ ê íåìó êðûñ BioBreeding (DR- ÎÃËßÄÈ BB) áåç çàìåòíîãî èíôèöèðîâàíèÿ β-êëåòîê [32]. Äèàáåòè÷åñêèé ñèíäðîì, ñõîäíûé ñ ÑÄ 1-ãî òèïà ó ÷åëîâåêà, ñïîíòàííî ðàçâèâàåòñÿ ó ñêëîííûõ ê ÑÄ DP-BB-êðûñ è NOD-ìûøåé [68]. Ó DP-BBêðûñ ðàçâèâàåòñÿ ëèìôîïåíèÿ, ïðè ýòîì 70–80% æèâîòíûõ ïðèîáðåòàþò ÑÄ ÷åðåç 120 äíåé ïîñëå ðîæäåíèÿ.  ñëó÷àå èíôèöèðîâàíèÿ KRV 21– 25-äíåâíûõ DR-BB-êðûñ, ïî÷òè ó 30% æèâîòíûõ ÷åðåç 2–4 íåäåëè ïîñëå èíôèöèðîâàíèÿ ðàçâèâàåòñÿ àóòîèììóííûé ÑÄ [32]. Ê òîìó æå ó 31% êðûñ âîçíèêàþò ëèìôîöèòàðíûå èíñóëèòû áåç ÑÄ. Èíôèöèðîâàíèå β-êëåòîê ìûøåé ÿâëÿåòñÿ àáñîëþòíî íåîáõîäèìûì óñëîâèåì äëÿ ðàçâèòèÿ ÑÄ, èíäóöèðîâàííîãî âèðóñîì ÝMÊ-D.  îòëè÷èå îò ýòîãî âèðóñ KRV ìîæåò âûçûâàòü àóòîèììóííûé ÑÄ ó DR-BB-êðûñ, èíôèöèðóÿ òàêèå ëèìôîèäíûå îðãàíû, êàê ñåëåçåíêó, òèìóñ èëè êîñòíûé ìîçã, íå çàòðàãèâàÿ ïðè ýòîì β-êëåòêè. ÂÂ-êðûñû, óñòîé÷èâûå ê çàáîëåâàíèþ, ñîäåðæàò àóòîðåàêòèâíûå Ò-êëåòêè, êîòîðûå îáû÷íî ïðåáûâàþò â “çàãëóøåííîì” ñîñòîÿíèè âñëåäñòâèå èììóíîðåãóëÿòîðíîãî êîíòðîëÿ [69, 70]. Ïîêàçàíî, ÷òî KRV-èíôåêöèÿ ó DR-BB-êðûñ àêòèâèðóåò òàêèå àóòîðåàêòèâíûå Ò-êëåòêè [71]. Ïîýòîìó ïðè àêòèâàöèè ïîñëåäíèå, âåðîÿòíî, ÿâëÿþòñÿ ñïåöèôè÷íûìè äëÿ β-êëåòîê. Òåì íå ìåíåå òî÷íûé ìåõàíèçì, ñ ïîìîùüþ êîòîðîãî KRV èíäóöèðóåò àóòîèììóííûé ÑÄ 1-ãî òèïà áåç èíôèöèðîâàíèÿ β-êëåòîê, èçó÷åí íåäîñòàòî÷íî. Âûÿñíÿëàñü òàêæå ðîëü ìàêðîôàãîâ è ïðîäóöèðóåìûõ èìè öèòîêèíîâ â ðàçâèòèè KRVèíäóöèðîâàííîãî ÑÄ ó êðûñ DR-BB [48]. Èíàêòèâàöèÿ ìàêðîôàãîâ ëèïîñîìíûì äèõëîðìåòèëåíäèôîñôîíàòîì, êîòîðûé ñåëåêòèâíî òîêñè÷åí äëÿ ìàêðîôàãîâ, ïî÷òè ïîëíîñòüþ ïðåäîòâðàùàåò èíñóëèòû è ÑÄ ó òàêèõ æèâîòíûõ. Èçìåðåíèå êîíöåíòðàöèè öèòîêèíîâ IL-12, TNF-α è IL-1β, ïðîäóöèðóåìûõ ìàêðîôàãàìè, ñâèäåòåëüñòâóåò î ñåëåêòèâíîì óâåëè÷åíèè èõ ýêñïðåññèè (ïîñëå èíôèöèðîâàíèÿ KRV ìàêðîôàãîâ) â ñåëåçåíî÷íûõ ëèìôîöèòàõ è èíôèëüòðàòàõ ïàíêðåàòè÷åñêèõ îñòðîâêîâ. Ïîêàçàíî òàêæå, ÷òî ãåííàÿ ýêñïðåññèÿ IL-2 è IFN-γ, ïðîäóöèðóåìûõ Ò-êëåòêàìè CD4+, òåñíî êîððåëèðóåò ñ óâåëè÷åíèåì ãåííîé ýêñïðåññèè IL-12, â òî âðåìÿ êàê ãåííàÿ ýêñïðåññèÿ IL-4 è IL-10 íå èçìåíÿåòñÿ. Èíûìè ñëîâàìè, íåñáàëàíñèðîâàííîñòü ìåæäó ïîäâèäàìè êëåòîê CD4+ Th1-òèïà è CD4+ Th2-òèïà, âåðîÿòíî, èãðàåò âàæíóþ ðîëü â ðàçâèòèè àóòîèììóííûõ ñâîéñòâ β-êëåòîê. Ýêñïðåññèÿ öèòîêèíîâ Th1-òèïà – IL-2 è IFN-γ – êîððåëèðóåò ñî ñòåïåíüþ ðàçâèòèÿ àóòîèììóííîãî ÑÄ, â òî âðåìÿ êàê ýêñïðåññèÿ öèòîêèíîâ Th2-òèïà, â ÷àñòíîñòè IL-4, ñîãëàñóåòñÿ ñ ïðåäîòâðàùåíèåì áîëåçíè. Ïîâûøåíèå ýêñïðåññèè öèòîêèíîâ Th1-òèïà, íî íå Th2-òèïà, íàáëþäàåìîå ó KRV-èíôèöèðîâàííûõ DR-BB-êðûñ, ìîæåò áûòü ðåçóëüòàòîì ñåëåêòèâíîãî óâåëè÷åíèÿ ýêñïðåññèè IL-12, ïðîäóöèðóåìîãî àêòèâèðîâàííûìè ìàêðîôàãàìè. Íåäîñòàòî÷íî ÿñíî, êàê KRV âûçûâàåò äåñòðóêöèþ β-êëåòîê áåç èõ èíôèöèðîâàíèÿ.  ñâÿçè ñ ýòèì áûëà ïðåäëîæåíà ãèïîòåçà ìîëåêóëÿðíîé ìèìèêðèè, à èìåííî: ñóùåñòâîâàíèå îáùèõ ýïèòîïîâ ìåæäó KRV-ñïåöèôè÷íûì ïåïòèäîì è àóòîàíòèãåíîì β-êëåòîê êàê îñíîâàíèÿ äëÿ èíèöèàöèè ñïåöèôè÷íîãî àóòîèììóííîãî ÑÄ [32, 48]. Ïðåäïîëàãàåòñÿ, ÷òî ïðè âîâëå÷åíèè ìîëåêóëÿðíîé ìèìèêðèè â èíèöèàöèþ ñïåöèôè÷íîé àóòîèììóííîñòè β-êëåòîê àíòèãåíñïåöèôè÷íûå ê ýòîìó âèðóñó Ò-êëåòêè áóäóò ïåðåêðåñòíî âçàèìîäåéñòâîâàòü ñ β-êëåòêàìè è àòàêîâàòü èõ, ÷òî ïðèâåäåò ê ðàçâèòèþ èíñóëèòîâ è, ñîîòâåòñòâåííî, ê ÑÄ. Äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ ýòîé ãèïîòåçû áûë èñïîëüçîâàí ðåêîìáèíàíòíûé âèðóñ âàêöèíû (rVV), ýêñïðåññèðóþùèé áåëêè KRV. Äèêèé øòàìì ýòîãî âèðóñà íå èíäóöèðóåò èíñóëèòû èëè ÑÄ ó DR-BB-êðûñ [32], à rVV èñïîëüçîâàëè â äàííîì ñëó÷àå êàê òðàíñïîðòíîå ñðåäñòâî äëÿ ýêñïðåññèè ÷óæåðîäíûõ áåëêîâ, êîòîðûå èíäóöèðóþò ãóìîðàëüíûå è êëåòî÷íûå èììóííûå îòâåòû [72–74]. Áûë ñêîíñòðóèðîâàí rVV, ýêñïðåññèðîâàâøèé KRV-ïåïòèäû – VP1 è VP2 – è íåñòðóêòóðíûé âèðóñíûé áåëîê. Ïîñëå èíôèöèðîâàíèÿ òàêèì âèðóñîì ó êðûñ DR-BB ýêñïðåññèðóþòñÿ âñå âèðóñíûå ïåïòèäû, îáðàçóþòñÿ Ò-êëåòêè, ñïåöèôè÷íûå ê òàêèì ïåïòèäàì, è èíäóöèðóþòñÿ ñîîòâåòñòâóþùèå àíòèòåëà. Îäíàêî íè ó îäíîé èç òàêèõ êðûñ íå ðàçâèâàþòñÿ èíñóëèòû è ÑÄ [75]. Ýòè èññëåäîâàíèÿ ïîçâîëèëè óáåäèòüñÿ â òîì, ÷òî ìîëåêóëÿðíàÿ ìèìèêðèÿ ìåæäó ïåïòèäàìè KRV è ñïåöèôè÷íûìè ê β-êëåòêàì àóòîàíòèãåíàìè ó DR-BB-êðûñ íå ÿâëÿåòñÿ òåì ìåõàíèçìîì, ñ ïîìîùüþ êîòîðîãî KRV èíäóöèðóåò àóòîèììóííûé ÑÄ, ñïåöèôè÷íûé ê β-êëåòêàì. Àëüòåðíàòèâíîé ãèïîòåçîé ÿâëÿåòñÿ ïðåäïîëîæåíèå, ÷òî èíôèöèðîâàíèå KRV êðûñ DR-BB íàðóøàåò òîíêî íàñòðîåííûé èììóííûé áàëàíñ è àêòèâèðóåò àóòîðåàêòèâíûå Ò-êëåòêè, öèòîòîêñè÷íûå ê β-êëåòêàì, ïðèâîäÿ ê âûçûâàåìîìó Ò-êëåòêàìè àóòîèììóííîìó ÑÄ, ñõîäíîìó ñ íàáëþäàåìûì ó DÐ-BB-êðûñ. Äëÿ ïîäòâåðæäåíèÿ ýòîé ãèïîòåçû Ò-êëåòî÷íûå ïîïóëÿöèè CD4+ è CD8+ èññëåäîâàëè â ñïëåíîöèòàõ DR-BB-êðûñ ïîñëå èíôèöèðîâàíèÿ èõ KRV. Îêàçàëîñü, ÷òî êîëè÷åñòâî Ò-êëåòîê CD8+ çíà÷èòåëüíî óâåëè÷èâàåòñÿ, â òî âðåìÿ êàê Ò-êëåòîê CD4+ – ñíèæàåòñÿ, íåñìîòðÿ íà òî, ÷òî êîëè÷åñòâî ýòèõ êëåòîê âîçðàñòàåò íà ïðîòÿæåíèè KRV-èíôåêöèè. Ê òîìó æå ó KRV-èíôèöèðîâàííûõ DR-BB-êðûñ 36 ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1 Ò. Ì. ÊÓ×ÌÅÐÎÂÑÊÀß, À. Â. ÊÀÐÏÎÂ, Ã. Â. ÄÎÍ×ÅÍÊÎ Вирусы Инфекция β-клеток Прямые цитолитические эффекты Системная инфекция Непрямые иммунные эффекты: ♦Экспрессия вирусных антигенов ♦Изменение антигенов β-клеток ♦Экспрессия цитокинов или HLA-антигенов - ♦Активация иммунного ответа ♦Нарушение иммунной толерантности ♦Иммунный ответ перекрестно взаимодействует с аутоантигенами β-клеток (молекулярная мимикрия) Аутоиммунное β-разрушение β-клеток Некроз β-клеток Диабет 1-го типа Ñõåìà ìåõàíèçìà âîâëå÷åíèÿ âèðóñîâ â ïàòîãåíåç äèàáåòà 1-ãî òèïà. Ò-êëåòêè CD8+, â îòëè÷èå îò Ò-êëåòîê CD4+, ïðåèìóùåñòâåííî ïðîëèôåðèðîâàëè. Ïðè îáðàáîòêå èíôèöèðîâàííûõ KRV êðûñ DR-BB ìîíîêëîíàëüíûìè àíòèòåëàìè ÎÕ-8 ó íèõ çíà÷èòåëüíî ñíèæàåòñÿ ðàçâèòèå ÑÄ, ÷òî óêàçûâàåò íà òî, ÷òî Ò-êëåòêè CD8+ âîâëå÷åíû â äåñòðóêöèþ β-êëåòîê. Áûëî óñòàíîâëåíî, ÷òî îáðàáîòêà DÐBB-êðûñ àíòè-NK-êëåòî÷íûìè àíòèòåëàìè íå ïðåäîòâðàùàåò ðàçâèòèå ÑÄ, â òî âðåìÿ êàê ìîíîêëîíàëüíûìè àíòèòåëàìè ÎÕ-8 ïðåäîòâðàùàåò åãî [76]. Ïîýòîìó áîëåå âåðîÿòíî, ÷òî Ò-êëåòêè CD8+ èãðàþò îñíîâíóþ ðîëü â KRV-èíäóöèðîâàííîì ÑÄ. Îäíàêî âîçìîæíîñòü ó÷àñòèÿ â ýòèõ ïðîöåññàõ êëåòîê-êèëëåðîâ íåëüçÿ ïîëíîñòüþ èñêëþ÷èòü, ïîñêîëüêó ìîíîêëîíàëüíûå àíòèòåëà ÎÕ-8 òàêæå ñâÿçûâàþò è êëåòêè-êèëëåðû. Ò-êëåòêè êðûñ CD4+ ìîæíî ðàçäåëèòü íà Th1-ïîäîáíûå T-êëåòêè CD45RC+CD4+ (ýêñïðåññèðóþò IL-1 è IFN-γ è èãðàþò âàæíóþ ðîëü â ïðîâîäèìîì êëåòêîé èììóííîì îòâåòå) è Th2ïîäîáíûå T-êëåòêè CD45RC-CD4+ (ýêñïðåññèðóþò IL-4 è IL-10 è âàæíû äëÿ ãóìîðàëüíîãî èììóííîãî îòâåòà) [21]. Ïîêàçàíî, ÷òî äëÿ ïîääåðæàíèÿ ïåðèôåðè÷åñêîãî ãîìåîñòàçà íåîáõîäèì îïðåäåëåííûé èììóííûé áàëàíñ ìåæäó êëåòêàìè Th1- è Th2-òèïà. Ïðåîáëàäàíèå Th1-êëåòîê íàä Th2-êëåòêàìè ñâÿçàíî ñ ðàçâèòèåì àóòîèììóííîãî ÑÄ 1-ãî òèïà, â òî âðåìÿ êàê ïðåîáëàäàíèå Th2-êëåòîê íàä Th1-êëåòêàìè ñâÿçàíî ñ åãî ïðåäîòâðàùåíèåì. [77–79]. KRV-èíôåêöèÿ DR-BB-êðûñ óâåëè÷èâàåò ýêñïðåññèþ öèòîêèíîâ Th1-òèïà â ñïëåíîöèòàõ è ïàíêðåàòè÷åñêèõ èíôèëüòðàòàõ [48]. Ïîýòîìó âîçìîæíî, ÷òî ïðè KRV-èíôåêöèè ó DR-BB-êðûñ ñîîòíîøåíèå ìåæäó Th1- è Th2-êëåòêàìè èçìåíÿåòñÿ. Âåðîÿòíî, èíôèöèðîâàíèå DR-BB-êðûñ KRV ïðèâîäèò ê ñåëåêòèâíîé àêòèâàöèè Th1-ïîäîáíûõ T-êëåòîê CD45RC+CD4+ è CD8+.  ñâÿçè ñ ýòèì áûëè ïðîâåäåíû èññëåäîâàíèÿ ñ öåëüþ âûÿñíåíèÿ, áóäóò ëè ýòè ñåëåêòèâíî àêòèâèðîâàííûå T-êëåòêè ñòèìóëèðîâàòü èíäóêöèþ àóòîèììóííîãî ÑÄ ó DÐ-BB-æèâîòíûõ. Ó 88% ðåöèïèåíòîâ T-êëåòîê CD45RC+CD4+ è CD8+ ðàçâèâàåòñÿ àóòîèììóííûé ÑÄ. Ýòî ñâèäåòåëüñòâóåò î òîì, ÷òî îíè ÿâëÿþòñÿ îñíîâíûìè ýôôåêòîðíûìè Ò-êëåòêàìè, ñïîñîáíûìè èíäóöèðîâàòü àóòîèììóííûé ÑÄ. Ïðîâåäåííûå èññëåäîâàíèÿ ïîçâîëÿþò ñäåëàòü âûâîä, ÷òî èíôèöèðîâàíèå DR-BBêðûñ KRV âûðàæàåòñÿ â ïðåèìóùåñòâåííîé àêòèâàöèè ýôôåêòîðíûõ Th1-ïîäîáíûõ T-êëåòîê CD45RC+CD4+ è CD8+, à òàêæå â ïîíèæåííîé ðåãóëÿöèè Th2-ïîäîáíûõ T-êëåòîê CD45RCCD4+. Ïðè ýòîì àêòèâèðîâàííûå ýôôåêòîðíûå Ò-êëåòêè ðàçðóøàþò β-êëåòêè. Ïîýòîìó èíôèöèðîâàíèå KRV íàðóøàåò òîíêî íàñòðîåííûé èììóííûé áàëàíñ. Äëÿ óòî÷íåíèÿ ðîëè ýôôåêòîðíûõ Ò-êëåòîê â äåñòðóêöèè è ðàçâèòèè β-êëåòîê â îðãàíèçìå KRV-èíôèöèðîâàííûõ DR-BB- ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1 37 ÎÃËßÄÈ êðûñ íåîáõîäèìû äàëüíåéøèå èññëåäîâàíèÿ. Íà îñíîâàíèè âûøåèçëîæåííîãî ñòàíîâèòñÿ î÷åâèäíûì, ÷òî, íåñìîòðÿ íà ãåíåòè÷åñêóþ ïðåäðàñïîëîæåííîñòü ê ðàçâèòèþ ñàõàðíîãî äèàáåòà 1-ãî òèïà, íåãåíåòè÷åñêèå ôàêòîðû èãðàþò ñóùåñòâåííóþ ðîëü â ýêñïðåññèè ýòîãî çàáîëåâàíèÿ. Âèðóñû, êàê îäèí èç ôàêòîðîâ îêðóæàþùåé ñðåäû, ìîãóò áûòü âîâëå÷åíû â ïàòîãåíåç äèàáåòà 1-ãî òèïà íå ìåíåå ÷åì äâóìÿ ðàçëè÷íûìè ïóòÿìè (ñõåìà): Âî-ïåðâûõ, îíè ìîãóò íåïîñðåäñòâåííî èíôèöèðîâàòü è ðàçðóøàòü β-êëåòêè, à âî-âòîðûõ, – óïðàâëÿòü àóòîèììóííîñòüþ, ðåãóëèðóÿ èõ äåñòðóêöèþ. Òàê, âèðóñ ÝMÊ-D ÿâëÿåòñÿ ïåðâè÷íûì àãåíòîì, ñåëåêòèâíî ïîâðåæäàþùèì β-êëåòêè, à KRV – ôàêòîðîì, óïðàâëÿþùèì àóòîèììóííîñòüþ, ñïåöèôè÷íîé ê β-êëåòêàì, êîòîðàÿ âûçûâàåò ðàçâèòèå ÑÄ 1-ãî òèïà áåç ïðÿìîãî èíôèöèðîâàíèÿ β-êëåòîê.  ýòîì îáçîðå ìû ïîïûòàëèñü íà îñíîâàíèè äàííûõ ëèòåðàòóðû ñóììèðîâàòü ðîëü âèðóñîâ â ïàòîãåíåçå ÑÄ 1-ãî òèïà. Âñå ðàññìîòðåííûå âèðóñû àññîöèèðóþòñÿ ñ ðàçâèòèåì àóòîèììóííîãî äèàáåòà, íî ìåõàíèçìû èõ äåéñòâèÿ ìîãóò áûòü ðàçëè÷íûìè. Âèðóñû ñïîñîáíû íå òîëüêî âûçûâàòü äèàáåò, íî è ïðåäîòâðàùàòü åãî ó æèâîòíûõ, ñêëîííûõ ê àóòîèììóííîìó äèàáåòó. Íåñìîòðÿ íà òî, ÷òî âèðóñû, áåçóñëîâíî, ñïîñîáíû âûçûâàòü äèàáåò ó æèâîòíûõ (ÝÌÊ-D-âèðóñèíäóöèðîâàííûé äèàáåò ó ìûøåé, KRV-âèðóñèíäóöèðîâàííûé äèàáåò ó DR-BB-êðûñ è äð.), íåò ïðÿìûõ äîêàçàòåëüñòâ, ÷òî îíè ÿâëÿþòñÿ íåïîñðåäñòâåííîé ïðè÷èíîé çàáîëåâàíèÿ ó ÷åëîâåêà. Îäíàêî íå èñêëþ÷åíî, ÷òî â áóäóùåì áóäóò îòêðûòû íîâûå ìåõàíèçìû ðàçâèòèÿ âèðóñèíäóöèðîâàííîãî äèàáåòà 1-ãî òèïà ó ÷åëîâåêà. Èññëåäîâàíèÿ ïàöèåíòîâ â ïðåääèàáåòè÷åñêîì ñîñòîÿíèè, à òàêæå ñ ãåíåòè÷åñêîé ïðåäðàñïîëîæåííîñòüþ ê ðàçâèòèþ âèðóñèíäóöèðîâàííîãî äèàáåòà 1-ãî òèïà äàñò âîçìîæíîñòü ëó÷øå ïîíÿòü åãî ýòèîëîãèþ ó ÷åëîâåêà. disposition, being the major component for the development of this type of diabetes, nongenetic factors also play an important role in the disease development. Among these factors viruses are implicated in the pathogenesis of TID. Basing on the literature data we have attempted to elucidate possible role of viruses in TID pathogenesis. Viruses may be involved in the TID pathogenesis in at least two distinct mechanisms. Firstly, viruses may trigger β-cellspecific autoimmunity with or without direct infection of β-cells. Secondly, viruses may directly infect and destroy β-cells resulting in TID. Moreover viruses not only cause diabetes, but also may prevent from the disease in animals susceptible to diabetes. Further studies are necessary to understand the mechanisms of the pathogenesis of human virusinduced TID. K e y w o r d s: type I diabetes, viruses, pancreatic β-cells, pathogenesis. Type 1 diabetes (TID) results from the destruction of pancreatic β-cells. In spite of genetic pre- 1. Atkinson M. A., McLaren N. K. // N. Engl. J. Med. 1994. 331. Ð. 1428–1436. 2. Bach J. F. // J. Autoimmun. 1995. 8. Ð. 439–463. 3. Rossini A. A., Greiner D. L., Friedman H. P., Mordes J. P. // Diabetes Rev. 1993. 1. Ð. 43–75. 4. Tisch R., McDevitt H. // Cell. 1996. 85. Ð. 291– 297. 5. Yoon J. W. Textbook of Diabetes / Eds. J. Pickup, G. Williams. Blackwell Scientific Publications. London. 1997. Ð. 14.1–14.14. 6. Platz P., Jacobsen B. K., Morling M. // Diabetologia. 1981. 21. Ð. 108–115. 7. Horn G., Bugawa T., Long C., Erlich H. // Proc. Natl Acad. Sci USA. 1988. 85. Ð. 6012– 6016. 8. Barnett A. H., Eff C., Leslie R. D., Pyke D. A. // Diabetologia. 1981. 20. Ð. 87–93. 9. Yoon J. W., Kim A. M., Jun H. S. Diabetes in the new millenium. Endocrinology and diabetes / Ed. J. R. Turtle. Research Foundation of the University of Sydney, Sydney. Australia. 1999. P. 105–117. 10. Notkins A. L., Yoon J. W., Onodera T., Jenson A. B. // Perspectives Virol. 1981. 11. Ð. 141–162. 11. Champsaur H. F., Bottazzo G. F., Bertrams J. et al. // J. Pediatrics. 1982. 100. Ð. 15–20. 12. Szopa T. M., Titchener P. A., Portwood N. D., Taylor K. W. // Diabetologia. 1993. 36. Ð. 687– 695. 13. Gladisch R., Hoffmann W., Waldherr R. // Z. kardiol. 1976. 65. Ð. 837–849. 14. Ginsberg-Fellner F., Witt M. E., Yagihaski S. // Diabetologia. 1984. 27. Ð. 87–89. 15. Gamble D. R. // B. M. J. 1980. 2. Ð. 99–101. 16. Helmke K., Otten A., Willems W. // Lancet. 1980. Ð. 211–212. 38 ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1 VIRUSES AS ETIOLOGICAL FACTOR OF TYPE 1 DIABETES. MODELLING ON THE ANIMALS T. M. Kuchmerovska1, A. V. Karpov2, G. V. Donchenko1 1 Institute of Biochemistry, National Academy of Sciences of Ukraine, Kyiv; 2 National University of Food Technologies, Kyiv; e-mail: kuch@biochem.kiev.ua Summary Ò. Ì. ÊÓ×ÌÅÐÎÂÑÊÀß, À. Â. ÊÀÐÏÎÂ, Ã. Â. ÄÎÍ×ÅÍÊÎ 17. Yasumoto N., Hara M., Kitamoto Y. U. et al. // Intern. Med. 1992. 31. Ð. 426–430. 18. Surcel H. M., Ilonen J., Kaar M. L. et al. // Acta Pediatr. Scand. 1988. 77. Ð. 471–474. 19. Jali M. V., Shankar P. S. // J. Assoc. Physicians India. 1990. 38. Ð. 663–664. 20. Staighead J. E., McLane M. F. // Science. 1968. 162. Ð. 913–915. 21. Yoon J. W., McClintock P. R., Onodera T., Notkins A. L. // J. Exp. Med. 1980. 152. Ð. 878– 892. 22. Yoon J. W., Morishima T., McClintock P. R. et al. // J. Virol. 1984. 50. P. 684–690. 23. Onodera T., Jenson A. B., Yoon J. W., Notkins A. L. // Science. 1978. 301. P. 529–531. 24. Suenaga K., Yoon J. W. // Diabetes. 1988. 37. P. 1722–1726. 25. Gaskins H., Prochazka M., Hamguchi K. et al. // Clin. Invest. 1992. 90. P. 2220–2227. 26. Yoon J. W., Onodera T., Notkins A. L. // J. Exp. Med. 1978. 148. P. 1068–1080. 27. Hou J., Sheikh S., Martin D. L., Chatterjee N. K. // J. Autoimmun. 1993. 6. P. 529–542. 28. Yoon J. W., London W. T., Curfman B. L. et al. // Diabetes. 1986. 35. P. 712–716. 29. Barboni E., Manocchio I., Asdrubali G. // Arch. Vet. Ital. 1966. 17. Ð. 362–368. 30. Menser M. A., Forrest J. M., Bransby R. D. // Lancet. 1978. Ð. 57–60. 31. Tajima M., Yazawa T., Hagiwara K. et al. // Zentralbl. Veterinarmed. 1992. 39. Ð. 616–620. 32. Guberski D. L., Thomas V. A., Shek W. R. et al. // Science. 1991. 254. Ð. 1010–1013. 33. Bach J. F. // Endocr. Rev. 1994. 15. Ð. 516–542. 34. Baum H. // Biochim. Biophys. Acta. 1995. 1271. Ð. 111–121. 35. Barnett L. A., Fujinami R. S. // FASEB J. 1992. 6. Ð. 840–844. 36. Gianani R., Servetnick N. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. 93. Ð. 2257–2259. 37. Oldstone M. B. A. // Cell. 1987. 50. Ð. 819– 820. 38. Miller J. F. A. P. // Immunologist. 1993. 1. Ð. 9–13. 39. Sprent J., Webb S. // Curr. Opin. Immunol. 1995. 7. P. 196–205. 40. Lobse A. W., Dinkelmann M., Kimmig M. et al. // J. Autoimmun. 1996. 9. P. 667–675. 41. Wacherpfennig K. W., Strominger J. L. // Cell. 1995. 80. P. 695–705. 42. Oldstone M. B. A., Nerenberg M., Southem P., Lewicki H. // Ibid. 1991. 65. P. 319–331. 43. Ohashi P., Oehen S., Buerki K. et al. // Ibid. 1991. 65. P. 305–317. 44. Oldstone M. B. // FASEB J. 1998. 12. P. 1255– 1265. 45. Dyrberg T., Schwimmbeck P. L., Oldstone M. B. A. // J. Clin. Invest. 1988. 81. P. 928–931. 46. Wilberz S., Partke H. J., Dagnaes-Hansen F., Herberg L. // Diabetologia. 1991. 34. P. 2–5. 47. Yoon J. W., Rodrigues M. M., Currier C., Notkins A. // Nature. 1982. 296. P. 566–569. 48. Chung Y. H., Jun H. C., Hirasawa K. et al. // J. Immunol. 1997. 159. P. 466–471. 49. Chung Y. H., Jun H. C., Son M. et al. // Ibid. 2000. 165. P. 2866–2876. 50. Ross M. E., Onodera T., Brown K. S., Notkins A. L. // Diabetes. 1976. 25. P. 190–197. 51. Bae Y. S., Eun H. M., Yoon J. W. // Virology. 1989. 170. P. 282–287. 52. Bae Y. S., Yoon J. W. // Diabetes. 1993. 42. P. 435–443. 53. Jun H. C., Kang Y., Notkins A. L., Yoon J. W. // J. Virol. 1997. 71. P. 9782–9785. 54. Eun H. M., Bae Y. S., Yoon J. W. // Virology. 1988. 163. P. 369–373. 55. Kaptur P. E., Thomas D. C., Giron D. J. // Diabetes. 1989. 38. P. 1103–1108. 56. Yun H. S., Kang H. S., Kim K. H. et al. // Ibid. 1998. 47. P. 576–582. 57. Onodera T., Yoon J. W., Brown K. S., Notkins A. L. // Nature. 1978. 274. P. 693–696. 58. Kang Y., Yoon J. W. // J. Gen. Virol. 1993. 74. P. 1207–1213. 59. Yoon J. W., McClintock P. R., Bachurski C. J. et al. // Diabetes. 1985. 34. P. 922–925. 60. Baek H. S., Yoon J. W. // J. Virol. 1990. 64. P. 5708–5715. 61. Baek H. S., Yoon J. W. // Diabetes. 1991. 40. P. 1586–1597. 62. Hirasawa K., Jun H. S., Han H. S. et al. // J. Virol. 1999. 73. P. 8541–8548. 63. Hirasawa K., Jun H. S., Maeda K. et al. // Ibid. 1997. 71. P. 4024–4031. 64. Febsel K., Jalowy A., Sun Q. et al. // Diabetes. 1993. 42. P. 496–500. 65. Rabinovitch A. // Ibid. 1994. 43. P. 613–621. 66. Kaneto H., Fujii J., Seo H. G. et al. // Ibid. 1995. 44. P. 733–738. 67. Firestein G. S., Yeo M., Zvaifler N. J. // J. Clin. Invest. 1995. 96. P. 1631–1638. 68. Marliss E. B. // Metab. Clin. Exp. 1983. 32 (Suppl. 1). P. 1–166. 69. Doukas J., Mordes J. P., Swymmer C. et al. // Amer. J. Pathol. 1994. 145. P. 1517–1525. 70. Greiner D. L., Mordes J. P., Handler E. S. et al. // J. Exp. Med. 1987. 166. P. 461–475. 71. Ellerman K. E., Richards C. A., Guberski D. L. et al. // Diabetes. 1996. 45. P. 557–562. 72. Hany M., Oehen S., Schulz M. et al. // Eur. J. Immunol. 1989. 19. P. 417–424. 73. Sutter G., Wyatt L. S., Foley P. L. et al. // Vaccine. 1994. 12. P. 1032–1040. ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1 39 ÎÃËßÄÈ 74. Moss B. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. 93. P. 11341–11348. 75. Ellerman K. E., Wrobleski M., Rabinovitch A., Like A. // Diabetologia. 1993. 36. P. 596–601. 76. Fowell D., McKnight A. J., Powrie F. et al. // Immunol. Rev. 1991. 123. P. 37–64. 77. Rabinovitch A., Suarez-Pinzon W. L., Shi Y., Morgan A. R. et al. // Diabetologia. 1994. 37. P. 733–738. 78. Liblau R. S., Singer S. M., McDevitt H. O. // Immunol. Today. 1995. 16. P. 34–38. 79. Delovitch T., Singh B. // Immunity. 1997. 7. P. 727–738. Ïîëó÷åíî 04.02.2004 40 ISSN 0201 — 8470. Óêð. á³îõ³ì. æóðí., 2005, ò. 77, ¹ 1