КЛЕТОЧНЫЙ СОСТАВ ПЕЧЕНИ И СЕЛЕЗЕНКИ В ФЕТАЛЬНОМ

46
Òåìà âûïóñêà: òðàíñïëàíòàöèÿ ôåòàëüíûõ êëåòîê è òêàíåé
ÎÐÈÃÈÍÀËÜÍÛÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß
Êëåòî÷íûé ñîñòàâ ïå÷åíè è ñåëåçåíêè
â ôåòàëüíîì ïåðèîäå
Ê.Ì. Àáäóëêàäûðîâ, Â.À. Áàëàøîâà
Ðîññèéñêèé ÍÈÈ ãåìàòîëîãèè è òðàíñôóçèîëîãèè, Ñàíêò-Ïåòåðáóðã
Human fetal liver and spleen (Cell composition)
K.M. Abdulkadyrov, V.A. Balashova
Scientific research institute of Hematology and Transfusiology, St.Petersburg, Russia
Èçó÷åí êëåòî÷íûé ñîñòàâ 76 îòïå÷àòêîâ ôåòàëüíîé ïå÷åíè ÷åëîâåêà â ñðîêè îò 6 äî 27 íåäåëü ãåñòàöèè. Íà ïðîòÿæåíèè âñåãî
ïåðèîäà ïå÷åíî÷íîãî êðîâåòâîðåíèÿ ïðåîáëàäàë ýðèòðîïîýç.  òå÷åíèå 6-7 íåäåëü ïåðâè÷íûå ýðèòðîáëàñòû ñîñòàâëÿëè 25% âñåé
ýðèòðîèäíîé ïîïóëÿöèè, à â 22-27 íåäåëü èõ ñîäåðæàíèå ñíèçèëîñü
äî 1,5%. Ñîäåðæàíèå íåéòðîôèëüíûõ ëåéêîöèòîâ êîëåáàëîñü â ïðåäåëàõ 1-1,5%. Íåäèôôåðåíöèðîâàííûå áëàñòíûå êëåòêè ñîñòàâèëè
îò 2,9±0,5 äî 5,1±1,01% îò âñåé êëåòî÷íîé ïîïóëÿöèè. Íàèáîëüøåå
èõ êîëè÷åñòâî áûëî îòìå÷åíî â 6-8 íåäåëü è â 18-21 íåäåëþ.
Êëåòî÷íûé ñîñòàâ ôåòàëüíîé ñåëåçåíêè áûë èçó÷åí ó 10 ïëîäîâ
10-25 íåäåëü ãåñòàöèè. Â ýòîò ïåðèîä ëèìôîöèòû ñîñòàâèëè 85%
îò âñåõ êëåòîê îðãàíà, èç íèõ 2,9±0,4% îöåíåíû êàê ëèìôîáëàñòû
è 0,3±0,1% – êàê íåäèôôåðåíöèðîâàííûå áëàñòû. Èññëåäîâàíèå
êîëîíèåîáðàçóþùåé ñïîñîáíîñòè ãåìîïîýòè÷åñêèõ êëåòîê òàêæå
ïîäòâåðæäàåò, ÷òî ñàìîå âûñîêîå ñîäåðæàíèå ìèåëîèäíûõ ïðåäøåñòâåííèêîâ â ôåòàëüíîé ïå÷åíè è ñåëåçåíêå èìååò ìåñòî â ïåðèîä
9–21 íåäåëè ðàçâèòèÿ ïëîäà, êîãäà, âåðîÿòíî, ìîæíî îæèäàòü íàèáîëüøèé ýôôåêò îò òðàíñïëàíòàöèè ýòîãî îðãàíà.
Êëþ÷åâûå ñëîâà: ôåòàëüíàÿ ïå÷åíü, ôåòàëüíàÿ ñåëåçåíêà,
êëåòî÷íûé ñîñòàâ.
Ââåäåíèå
Êëåòêè ýìáðèîíàëüíûõ è ôåòàëüíûõ îðãàíîâ ÷åëîâåêà,
êàê è êëåòêè ïóïîâèííîé êðîâè, äàâíî ïðèâëåêàþò âíèìàíèå èññëåäîâàòåëåé è ïðàêòèêîâ êàê áîãàòûé èñòî÷íèê ãåìîïîýòè÷åñêèõ ñòâîëîâûõ êëåòîê (ÃÑÊ). Áîëüøîé èíòåðåñ
ïðåäñòàâëÿåò ýìáðèîíàëüíàÿ ïå÷åíü (ÝÏ), óíèêàëüíîñòü êîòîðîé çàêëþ÷àåòñÿ â òîì, ÷òî â ïåðèîä îò 4 äî 16 íåäåëü
ãåñòàöèè â íåé ïðîèñõîäèò àêòèâíîå êðîâåòâîðåíèå, è îíà â
ýòîò ïåðèîä ñîäåðæèò áîëüøîå êîëè÷åñòâî ÃÑÊ è èõ ïîòîìêîâ. Íèçêàÿ èììóíîãåííîñòü ñòâîëîâûõ êëåòîê ÝÏ äåëàåò èõ
èñïîëüçîâàíèå äëÿ íóæä òðàíñïëàíòàöèè åùå áîëåå ïðèâëåêàòåëüíûì [1-6].
Ïåðâûå ãåìîïîýòè÷åñêèå êëåòêè íàáëþäàþòñÿ ó 3-õ-íåäåëüíîãî çàðîäûøà ÷åëîâåêà â ñòåíêå æåëòî÷íîãî ìåøêà.
Íåäèôôåðåíöèðîâàííûå êëåòêè ýìáðèîíà – «ìåçîáëàñòû» –
äèôôåðåíöèðóþòñÿ â ïåðâè÷íûå ïðèìèòèâíûå ýìáðèîíàëüíûå ýðèòðîáëàñòû ñ ìåãàëîáëàñòè÷åñêèìè ÷åðòàìè è â
ïåðâè÷íûå ýíäîòåëèàëüíûå êëåòêè, îáðàçóþùèå ñîñóäèñòóþ
ñåòü æåëòî÷íîãî ìåøêà. Íåñêîëüêî ïîçæå â æåëòî÷íîì ìåøêå
èç «ìåçîáëàñòîâ» âîçíèêàþò äðóãèå áëàñòíûå êëåòêè, äàþùèå íà÷àëî âòîðè÷íûì èëè îêîí÷àòåëüíûì ýðèòðîáëàñòàì è
ýðèòðîöèòàì [7, 8]. Çäåñü æå, íà 3-4 íåäåëå ðàçâèòèÿ, âûÿâëÿþòñÿ ïåðâûå CD34+ êëåòêè-ïðåäøåñòâåííèêè ãåìîïîýçà.
Ïå÷åíü çàêëàäûâàåòñÿ íà 4 íåäåëå ãåñòàöèè. Èç æåëòî÷íîãî ìåøêà â íå¸ ìèãðèðóþò ÃÑÊ, òàê ÷òî ê 4-6 íåäåëå â ýìáðèîíàëüíîé ïå÷åíè íà÷èíàåòñÿ ãåìîïîýç, è îíà ñòàíîâèòñÿ
Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ Òîì III, ¹ 1, 2008
Cell composition has been studied in hepatic reprints of 76 human
fetuses between 6-27 weeks of development. Erythropoiesis
predominates during the whole period of hepatic hemopoiesis. During
6-7 weeks primary erythroblasts make 25% of all erythroid cells, and
by the 22d-27th weeks their content does not even reach 1,5%.
Content of neutrophilic leucocytes is 1 – 1,5%. Nondifferentiated blast
cells make 2,9±0,5 – 5,1 ± 0,1%. Their greatest amount is observed
between 6 – 8 and 18 and more weeks. The cell composition of the
fetal spleen has been studied in 10 fetuses 19–25-week-old.
Lymphoid forms make 85% of all cells of the organ’s hemopoietic tissue,
of them 2,9±0,4% are lymphoblasts, 0,3±0,1% - nondifferentiated
blasts. The investigations studying colonyforming properties of the
hematopoietic cells confirmed that the highest content of myeloid
precursors in the fetal liver and spleen is noted between 9–21 weeks
of age. Therefore, it is possible to expect the greatest effect of these
organ’s transplantation during this time.
Key words: fetal liver, fetal spleen, cell composition.
ãëàâíûì ìåñòîì êðîâåòâîðåíèÿ, â òî âðåìÿ êàê â æåëòî÷íîì
ìåøêå ãåìîïîýç ðåäóöèðóåòñÿ [9-12]. Ýòî ïå÷åíî÷íûé èëè
ãåïàòî-ëèåíàëüíûé ïåðèîä êðîâåòâîðåíèÿ. Ãåìîïîýç â ñåëåçåíêå íà÷èíàåòñÿ íà 8-10 íåäåëå ýìáðèîãåíåçà è ìàêñèìóì å¸ ãåìîïîýòè÷åñêîé àêòèâíîñòè ïðèõîäèòñÿ íà 16-þ
íåäåëþ ðàçâèòèÿ [13, 14]. Ïå÷åíî÷íàÿ òêàíü ïðåäñòàâëåíà
ãåïàòîöèòàìè – ïðîèçâîäíûìè ýíòîäåðìû è êðîâåòâîðíûìè
êëåòêàìè – ïðîèçâîäíûìè ìåçîäåðìû. Ïåðâè÷íûå ýëåìåíòû
êðîâè â ïå÷åíè ïðåäñòàâëÿþò ñîáîþ ïîëèïîòåíòíûå ñòâîëîâûå êëåòêè (ÏÑÊ), êîòîðûå äèôôåðåíöèðóþòñÿ â ïåðâè÷íûå
ýðèòðîáëàñòû è íåäèôôåðåíöèðîâàííûå áëàñòíûå ýëåìåíòû – ïðåäøåñòâåííèêè ëåéêîöèòîâ è íîðìîáëàñòè÷åñêîé
âåòâè ýðèòðîíà [15]. Ïðåîáëàäàíèå ýðèòðîïîýçà â ïåðèîä
ïå÷åíî÷íîãî êðîâåòâîðåíèÿ îòìå÷àþò âñå èññëåäîâàòåëè,
èçó÷àâøèå ãåìîïîýç â ÝÏ [6, 16, 17].  òî æå âðåìÿ, óæå íà
ðàííèõ ñòàäèÿõ ðàçâèòèÿ ýìáðèîíà âûÿâëÿþòñÿ ñêîïëåíèÿ
öèòîõèìè÷åñêè íåäèôôåðåíöèðîâàííûõ áëàñòíûõ êëåòîê,
îêðóæåííûõ ïåðâè÷íûìè ýðèòðîèäíûìè ýëåìåíòàìè è êëåòêàìè íîðìîáëàñòè÷åñêîãî ýðèòðîïîýçà [4, 17-21]. Äîâîëüíî
ðàíî â ÝÏ ïîÿâëÿþòñÿ íåìíîãî÷èñëåííûå ãðàíóëîöèòû,
ìîíîöèòû, ìàêðîôàãè.
Ñîîòíîøåíèå ýðèòðîèäíûõ è ãðàíóëîöèòàðíûõ ýëåìåíòîâ ðàâíî 5:1 ó 5-6-íåäåëüíûõ çàðîäûøåé è 2:1 ó 24-íåäåëüíûõ [22]. Áîëåå çðåëûå äåôèíèòèâíûå ýðèòðîèäíûå
êëåòêè îáíàðóæèâàþòñÿ â ïå÷åíè óæå íà 6-é íåäåëå ãåñòàöèè, à ê 21-é íåäåëå ïðèìèòèâíûå ýðèòðîèäíûå ýëåìåíòû
Òåìà âûïóñêà: òðàíñïëàíòàöèÿ ôåòàëüíûõ êëåòîê è òêàíåé
óæå ïî÷òè ïîëíîñòüþ â íåé îòñóòñòâóþò [21]. Ñîãëàñíî
M. Tavian, Â-ëèìôîöèòîïîýç íà÷èíàåòñÿ â ÝÏ îêîëî 9-é
íåäåëè ãåñòàöèè [8], íî ïî äàííûì äðóãèõ èññëåäîâàòåëåé
èììóíîôåíîòèïè÷åñêèé àíàëèç íå âûÿâèë ôåíîòèïè÷åñêè
è ôóíêöèîíàëüíî çðåëûõ Â- è Ò-ëèìôîöèòîâ â ïå÷åíè
9-10-íåäåëüíûõ ýìáðèîíîâ [23]. Ëèøü ó 13-22-íåäåëüíûõ
ïëîäîâ ÷åëîâåêà â êëåòî÷íîé ñóñïåíçèè ïå÷åíè áûëè îáíàðóæåíû Ò-ëèìôîöèòû [23, 24]. Àâòîðû äåëàþò âûâîä, ÷òî â
ïå÷åíè ýìáðèîíîâ ïåðâûõ òðåõ ìåñÿöåâ æèçíè íå ñîäåðæàòñÿ
êëåòêè, ñïîñîáíûå âûçâàòü ðåàêöèþ «òðàíñïëàíòàò ïðîòèâ
õîçÿèíà» (ÐÒÏÕ) ïðè òðàíñïëàíòàöèè.
Êëèíè÷åñêîå ïðèìåíåíèå êðèîêîíñåðâèðîâàííûõ êëåòîê
÷åëîâå÷åñêîé ÝÏ ÿâëÿåòñÿ àêòóàëüíûì [6]. Äåêîíñåðâèðîâàííàÿ ñóñïåíçèÿ êëåòîê ÝÏ ñîäåðæèò áîëüøîå êîëè÷åñòâî
ãëèêîôîðèí À+-ïîçèòèâíûõ ýðèòðîèäíûõ êëåòîê – ïðåäøåñòâåííèêîâ ðàçëè÷íûõ óðîâíåé êîììèòèðîâàíèÿ è ñîçðåâàíèÿ.
Ñîäåðæàíèå CD45+ êëåòîê â ïå÷åíè ïëîäîâ 6-12 íåäåëü
ãåñòàöèè ñîñòàâëÿåò áîëåå 2% [6, 23].
Èçó÷åíèå ôåíîòèïà è ôóíêöèîíàëüíîé àêòèâíîñòè ÃÑÊ
ýìáðèîíàëüíîé è ôåòàëüíîé ïå÷åíè ïîêàçàëî, ÷òî ýòîò îðãàí
âî âòîðîì òðèìåñòðå ÿâëÿåòñÿ áîãàòûì èñòî÷íèêîì CD34+
êëåòîê [6, 25]. Ñîäåðæàíèå CD34+ è ÀÑ-133+ - ãåìîïîýòè÷åñêèõ êëåòîê – ïðåäøåñòâåííèêîâ ñîñòàâëÿåò, ïî íåêîòîðûì äàííûì, 0,9±0,1 è 0,4±0,1% ñîîòâåòñòâåííî [6]. Ïðè
êóëüòèâèðîâàíèè äåêîíñåðâèðîâàííûõ êëåòîê ÝÏ â êóëüòóðàëüíîé ñðåäå íà îñíîâå ìåòèëöåëëþëîçû â ïðèñóòñòâèè ðîñòîâûõ ôàêòîðîâ ïîëó÷åíî áîëåå 500 êîëîíèé – ÊÎÅ-ÃÝÌÌ,
ÁÎÅ-Ý, ÊÎÅ-ÃÌ – íà 1×105 ìîíîíóêëåàðîâ [6]. Ïîêàçàíî,
÷òî êîëîíèåîáðàçóþùàÿ ñïîñîáíîñòü (ÊÎÑ) êëåòîê ÝÏ
6-12-íåäåëüíûõ ýìáðèîíîâ çíà÷èòåëüíî âûøå, ÷åì òàêîâàÿ ó êëåòîê êîñòíîãî ìîçãà âçðîñëîãî ÷åëîâåêà è ïóïîâèííîé êðîâè [6, 26, 27]. Íà êîëîíèåîáðàçóþùóþ ñïîñîáíîñòü
êëåòîê ÝÏ âëèÿåò âîçðàñò ýìáðèîíîâ è ïëîäîâ. Äåêîíñåðâèðîâàííûå êëåòî÷íûå ñóñïåíçèè ÝÏ 6-9-íåäåëüíûõ ýìáðèîíîâ ñîäåðæàò â 3 ðàçà áîëüøåå êîëè÷åñòâî ÊÎÅ-ÃÝÌÌ,
÷åì îáðàçöû ïå÷åíè 10-12–íåäåëüíûõ çàðîäûøåé [6], òî
åñòü ñ óâåëè÷åíèåì ãåñòàöèîííîãî âîçðàñòà ÊÎÑ êëåòîê
ïå÷åíè ñíèæàåòñÿ.
Ñîãëàñíî êóëüòóðàëüíûì èññëåäîâàíèÿì, ïðîâåäåííûì
â íàøåì èíñòèòóòå, ïèê ïðîëèôåðàòèâíîé àêòèâíîñòè
ñòâîëîâûõ êëåòîê (ÑÊ) ýìáðèîíàëüíîé ïå÷åíè ïðèõîäèòñÿ
íà 9-10-þ íåäåëþ, à âòîðîé ïîäúåì íà 21-þ íåäåëþ [26,
28].
Òàêèì îáðàçîì, êðèîêîíñåðâèðîâàííûå êëåòêè ÝÏ ñîäåðæàò ãåìîïîýòè÷åñêèå ÑÊ, ñïîñîáíûå ê ìóëüòèëèíåéíîé
äèôôåðåíöèðîâêå in vitro. Èç ýòîãî ñëåäóåò, ÷òî ÃÑÊ ýìáðèîíàëüíîé ïå÷åíè ÿâëÿþòñÿ ïåðñïåêòèâíûì èñòî÷íèêîì
äëÿ òðàíñïëàíòàöèè [2, 6, 29, 30].
Ïðèíèìàÿ âî âíèìàíèå ïåðñïåêòèâû èñïîëüçîâàíèÿ êëåòîê ÝÏ äëÿ òðàíñïëàíòàöèè, ìû èçó÷àëè êëåòî÷íûé ñîñòàâ
ôåòàëüíîé ïå÷åíè è ñåëåçåíêè ÷åëîâåêà [31]. Öåëüþ èññëåäîâàíèÿ áûëî âûÿâèòü íàèáîëåå àêòèâíûå ïåðèîäû ãåìîïîýçà â ïå÷åíè è ñåëåçåíêå ýìáðèîíà è ïëîäà â ðàçëè÷íûå
ñðîêè ãåñòàöèè.
Ìàòåðèàë è ìåòîäû
Îðãàíû ïîëó÷àëè îò ýìáðèîíîâ è ïëîäîâ ÷åëîâåêà â âîçðàñòå 6-27 íåäåëü âíóòðèóòðîáíîãî ðàçâèòèÿ. Êëåòî÷íûé
ñîñòàâ îðãàíîâ èçó÷àëè â îòïå÷àòêàõ íà ïðåäìåòíûõ ñòåêëàõ; îêðàøèâàëè ïî Ìàé-Ãðþíâàëüäó. Ãåïàòîãðàììû è ñïëåíîãðàììû ïîäñ÷èòûâàëè â ñâåòîâîì ìèêðîñêîïå íà 1000
êëåòîê, ðåçóëüòàò âûðàæàëè â ïðîöåíòàõ. Öèôðîâûå äàííûå
ïîäâåðãàëè âàðèàöèîííî-ñòàòèñòè÷åñêîé îáðàáîòêå ïî
Ñòüþäåíòó-Ôèøåðó. Èçó÷åíû 76 îòïå÷àòêîâ ýìáðèîíàëüíîé è ôåòàëüíîé ïå÷åíè â ïåðèîä 6-27 íåäåëü ðàçâèòèÿ.
Îáðàçöû ñåëåçåíêè èññëåäîâàíû ó 10 ïëîäîâ â âîçðàñòå
19-25 íåäåëü.
47
Ðåçóëüòàòû è îáñóæäåíèå
Ïðè èçó÷åíèè 76 îòïå÷àòêîâ ïå÷åíè îò 76 ýìáðèîíîâ è
ïëîäîâ áûëè âûäåëåíû ñëåäóþùèå âîçðàñòíûå ãðóïïû: 6-7
íåäåëü (1 ãðóïïà), 8-9 íåäåëü (2 ãðóïïà), 10-11 íåäåëü (3
ãðóïïà), 12-13 íåäåëü (4 ãðóïïà), 17-21 íåäåëÿ (5 ãðóïïà),
22-27 íåäåëü (6 ãðóïïà).
Èç òàáëèöû âèäíî, ÷òî íà âñ¸ì ïðîòÿæåíèè èññëåäóåìûõ
ïåðèîäîâ â ïå÷åíè ïðåîáëàäàåò ýðèòðîïîýç. Îáùåå ñîäåðæàíèå êëåòîê ýðèòðîèäíîãî ðîñòêà ñîñòàâëÿåò áîëåå 80%.
Ïåðâè÷íûå ýðèòðîèäíûå ýëåìåíòû äåìîíñòðèðóþò âñå
ìîðôîëîãè÷åñêèå ñòàäèè ñîçðåâàíèÿ, ïðèñóùèå ìåãàëîáëàñòàì. Ñðåäè íèõ áûëè âûäåëåíû ñëåäóþùèå êëåòêè:
1. Ïåðâè÷íûå ïðîýðèòðîáëàñòû – êðóïíûå áëàñòíûå êëåòêè ñ äèàìåòðîì îò 15 äî 23 ìêì ñ ðàçðåæåííîé ñòðóêòóðîé
ÿäåðíîãî õðîìàòèíà, îäíèì-äâóìÿ êðóïíûìè íóêëåîëàìè, ðåçêî áàçîôèëüíîé öèòîïëàçìîé.
2. Ïåðâè÷íûå áàçîôèëüíûå ýðèòðîáëàñòû – êëåòêè äèàìåòðîì îò 15 äî 25 ìêì, ñ «àæóðíûì» ÿäðîì è áàçîôèëüíîé öèòîïëàçìîé. ßäðûøêè î÷åð÷åíû íå÷åòêî.
3. Ïåðâè÷íûå ïîëèõðîìàòîôèëüíûå ýðèòðîáëàñòû –
êëåòêè äèàìåòðîì îò 15 äî 27 ìêì ñ ïîëèõðîìàòîôèëüíîé
öèòîïëàçìîé. ßäðûøêè íå îïðåäåëÿþòñÿ.
4. Ïåðâè÷íûå îêñèôèëüíûå ýðèòðîáëàñòû – êëåòêè
äèàìåòðîì îò 18 äî 27 ìêì, ñ íåáîëüøèì ïëîòíûì, ÷àñòî
ýêñöåíòðè÷åñêè ðàñïîëîæåííûì ÿäðîì è îêñèôèëüíîé
öèòîïëàçìîé.  îòïå÷àòêàõ âñòðå÷àþòñÿ òàêæå ìåãàëîöèòû – óòðàòèâøèå ÿäðà ïåðâè÷íûå ýðèòðîáëàñòû.
Êîëè÷åñòâî ïåðâè÷íûõ ýðèòðîáëàñòîâ ñ óâåëè÷åíèåì
ñðîêà ðàçâèòèÿ ïëîäà ïîñòåïåííî óìåíüøàåòñÿ. Òàê, åñëè â
6-7 íåäåëü ïåðâè÷íûå ýðèòðîáëàñòû ñîñòàâëÿþò ÷åòâåðòóþ
÷àñòü âñåõ ýðèòðîèäíûõ êëåòîê, òî â ïåðèîä 22-27 íåäåëü
èõ ñîäåðæàíèå íå äîñòèãàåò è 1,5%. Ðàçëè÷èÿ ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíû äëÿ ïåðâè÷íûõ ïðîýðèòðîáëàñòîâ â ãðóïïàõ
1-3 (ð < 0,05); 1-5, 1-6, 2-3, 2-5, 2-6, 3-5, 3-6, 4-5, 4-6
(ð < 0,01). Ñîäåðæàíèå ïåðâè÷íûõ ýðèòðîáëàñòîâ òàêæå äîñòîâåðíî ñíèæàåòñÿ âïëîòü äî 17-21-é íåäåëè ðàçâèòèÿ.
Ñîîòâåòñòâåííî îáùåå ñîäåðæàíèå íîðìîáëàñòè÷åñêèõ ýðèòðîèäíûõ ýëåìåíòîâ ñ âîçðàñòîì ïëîäà óâåëè÷èâàåòñÿ, õîòÿ
èìååò ìåñòî ñíèæåíèå ñîäåðæàíèÿ ýðèòðîáëàñòîâ (äîñòîâåðíû ðàçëè÷èÿ â ãðóïïàõ 2-5, (ð < 0,001) è áàçîôèëüíûõ
íîðìîáëàñòîâ (äîñòîâåðíû ðàçëè÷èÿ â ãðóïïàõ 1-5, (ð < 0,01);
1-6, (ð < 0,001); 2-6, 2-7 (ð < 0,001); 3-5, 3-6, (ð < 0,01); 4-5,
4-6, (ð < 0,05). Â ïåðèîä îò 17 è áîëåå íåäåëü ýðèòðîèäíîå
êðîâåòâîðåíèå â ôåòàëüíîé ïå÷åíè óæå ïî÷òè ïîëíîñòüþ íîðìîáëàñòè÷åñêîå. Êðîìå ýðèòðîèäíûõ ýëåìåíòîâ óæå íà ðàííèõ ñòàäèÿõ ðàçâèòèÿ îòìå÷åíû êëåòêè íåéòðîôèëüíîãî ðÿäà.
Ñîäåðæàíèå íåéòðîôèëîâ â ðàññìàòðèâàåìûõ ãðóïïàõ
êîëåáëåòñÿ â ïðåäåëàõ 1-1,5%. Íàáëþäàåòñÿ íåêîòîðàÿ òåíäåíöèÿ ê óâåëè÷åíèþ ñîäåðæàíèÿ êëåòîê íåéòðîôèëüíîãî ðÿäà
ñ óâåëè÷åíèåì ñðîêà ðàçâèòèÿ ïëîäà. Ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíûå ðàçëè÷èÿ ïîëó÷åíû äëÿ ïðîìèåëîöèòîâ â ãðóïïàõ
1-2 (ð < 0,05) è 2-5 (ð < 0,05), äëÿ ìåòàìèåëîöèòîâ â ãðóïïàõ
1-6 (ð < 0,01) è 5-6 (ð < 0,05), äëÿ ïàëî÷êîÿäåðíûõ íåéòðîôèëîâ â ãðóïïàõ 1-4 (ð < 0,05), 1- 5 (ð < 0,05) è ñåãìåíòîÿäåðíûõ íåéòðîôèëîâ â ãðóïïàõ 2-6 (ð < 0,05) è 4-6 (ð < 0,05).
Ïîäîáíàÿ êàðòèíà íàáëþäàåòñÿ è â îòíîøåíèè ýîçèíîôèëîâ è áàçîôèëîâ, ñîäåðæàíèå êîòîðûõ ïîâûøàåòñÿ ñ óâåëè÷åíèåì âîçðàñòà ïëîäà. Äëÿ ýîçèíîôèëîâ ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíûå ðàçëè÷èÿ ïîëó÷åíû â ãðóïïàõ 1-5 (ð < 0,05), 1-6 (ð <
0,01), 2-6 (ð < 0,01), 3-6 (ð < 0,01), 4-6 (ð < 0,05).
Òàêæå èìååò ìåñòî óâåëè÷åíèå ñîäåðæàíèÿ ìîíîöèòîâ
äëÿ ãðóïï 1-5 (ð < 0,05), 1-6 (ð < 0,01), 2-6 (ð < 0,01), 3-6
(ð < 0,05), 4-6 (ð < 0,01).
Ñîäåðæèìîå ìàêðîôàãîâ è ìåãàêàðèîöèòîâ â ïåðèîä îò
6 äî 27 íåäåëü îñòàåòñÿ ñòàáèëüíûì.
Íàèáîëåå âûðàæåííàÿ äèíàìèêà íàáëþäàåòñÿ â ñîäåðæàíèè ëèìôîöèòîâ, êîòîðîå óâåëè÷èâàåòñÿ îò 0 â ïåðèîä
Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ Òîì III, ¹ 1, 2008
48
Òåìà âûïóñêà: òðàíñïëàíòàöèÿ ôåòàëüíûõ êëåòîê è òêàíåé
6-7 íåäåëü äî 10,0 ±1,5% â ïåðèîä 22-27 íåäåëü. Ðàçëè÷èÿ äëÿ âñåõ ãðóïï, êðîìå 2-4 è 3-4, ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíû (ð < 0,01 è < 0,001). Ïî ìîðôîëîãè÷åñêèì ïðèçíàêàì
ýòî ìàëûå ëèìôîöèòû äèàìåòðîì 6-7ìêì.
Òàêèì îáðàçîì, îêîëî 95% âñåõ ãåìîïîýòè÷åñêèõ êëåòîê â ôåòàëüíîé ïå÷åíè – ýòî äèôôåðåíöèðóþùèåñÿ è çðåëûå ýëåìåíòû, ïîäàâëÿþùóþ ÷àñòü êîòîðûõ ñîñòàâëÿþò
êëåòêè ýðèòðîèäíîãî ðÿäà. Ïðåäñòàâëÿåò èíòåðåñ ãðóïïà
áëàñòíûõ êëåòîê, íàçâàííûõ íàìè íåäèôôåðåíöèðîâàííûìè. Èõ ñîäåðæàíèå êîëåáëåòñÿ îò 2,9±0,5 äî 5,1±1,01%.
Ðàçëè÷èÿ ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíû äëÿ ãðóïï 1-2 è 1-4.
Íàèáîëüøåå êîëè÷åñòâî íåäèôôåðåíöèðîâàííûõ áëàñòíûõ
êëåòîê íàáëþäàåòñÿ â ïåðèîä 6-8 è 17-21 íåäåëü, ÷òî ñîîòâåòñòâóåò äàííûì À.À. Ðàêîâà ñ ñîàâò. [28], èçó÷àâøèõ ÊÎÑ
ãðàíóëîöèòîìîíîöèòàðíûõ ïðåäøåñòâåííèêîâ ôåòàëüíîé
ïå÷åíè ÷åëîâåêà è ïîêàçàâøèõ, ÷òî íà 9-é è 21-é íåäåëå â
ïå÷åíè ïëîäà îòìå÷àåòñÿ íàèáîëåå âûñîêîå ñîäåðæàíèå
ìèåëîèäíûõ ïðåäøåñòâåííèêîâ.
 îïðåäåëåííîé ñòåïåíè ìîæíî ñóäèòü î ïðîëèôåðàòèâíîì ïîòåíöèàëå ýòèõ êëåòîê íà îñíîâàíèè èçó÷åíèÿ ÊÎÑ
ãåìîïîýòè÷åñêèõ êëåòîê ÝÏ. Ïðè ïîìîùè òàêèõ ýêñïåðèìåíòîâ, ïðîâåäåííûõ â íàøåì èíñòèòóòå [26], áûëî óñòàíîâëåíî,
÷òî îòíîñèòåëüíîå ñîäåðæàíèå êîììèòèðîâàííûõ ñòâîëîâûõ
êëåòîê ìèåëîèäíîãî ðÿäà â ýìáðèîíàëüíîé ïå÷åíè â íåñêîëüêî ðàç âûøå, ÷åì â êîñòíîì ìîçãå âçðîñëîãî ÷åëîâåêà. Îòñþäà ìîæíî çàêëþ÷èòü, ÷òî ÝÏ â ïåðèîä äî 27 íåäåëü – îðãàí
î÷åíü àêòèâíîãî êðîâåòâîðåíèÿ.
Íàìè áûë èçó÷åí êëåòî÷íûé ñîñòàâ ôåòàëüíîé ñåëåçåíêè ó 10 ïëîäîâ â âîçðàñòå 19-25 íåäåëü. Íåáîëüøîé
ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ
1. Kelemen E. Recovery from chronic idiopathic bone marrow aplasia of a
young mother after intravenous injections of unprocessed cells from the liver (and
yolk sac) of her 22 mm CR-length embryo. A preliminary report. Scand. J.
Haematol. 1973à; 10 (2): 305-8.
2. Touraine I.L. Transplantation of stem cells from fully mismatched donors.
Bone marrow transplant. 2007; 39 suppl 1: 42-3.
3. Kansal V., Soîd S.K., Barta A.K. et al. Fetal liver transplantation in aplastic
anemia. Acta Haematol. 1979; 62 (3): 128-36.
4. Fukuda T. Fetal hemopoiesis II. Electron microscopic studies on human
hepatic hemopoiesis. Virchows Arch. B. Cell. Pathol. 1974; 16(3): 249-70.
5. Fukuda T. Ultrastructure of fetal hemopoiesis. Acta Haematol. 1978;
41(6): 1204-13.
6. Tarasov A.I., Petrenko A.Yu.., Jones D.R.E., Grischenko V.I. Phenotypic
analysis and colony – forming activity of cryopreserved hemopoietic cells in human
fetal liver. Experimental Oncol. 2002; 24: 180-3.
7. Orkin S.H., Zon L.I. Hematopoiesis and stem cells: plasticity versus
developmental heterogeneity. Nature immunol. 2002; 3(4): 323-8.
8. Tavian M., Cortes F., Charbord P. et al. Emergence of the
haematopoietic system in the human embryo and fetus. Haematologica. 1999;
84 Suppl EHA-4:1: 1-3.
9. ßíîâñêèé Ä.Í. Ðóêîâîäñòâî ïî êëèíè÷åñêîé ãåìàòîëîãèè. Êèåâ, ÓÑÑÐ:
Ãîñìåäèçäàò; 1962.
10. Migliaccio G., Migliaccio A.R., Petti S. et al. Human embryonic
hemopoiesis[ Kinetics of progenitors and precursors underlying the yolk -sac ?
liver transition. J. Clin. Invest. 1986; 78: 51-60.
11. Ïðèíäóë Ã. Ãåìîïîýç â æåëòî÷íîì ìåøêå. Ãåìàòîë. è òðàíñôóçèîë.
1999; 43 (3): 14-5.
12. ×åðòêîâ È.Ë., Äðèçå Í.È., Âîðîáüåâ À.È. è ñîàâò. Êðîâåòâîðåíèå.
 êí.: Ðóêîâîäñòâî ïî ãåìàòîëîãèè. (ðåä. À.È.Âîðîáüåâ). Ì., 2002; 1: 28-43.
13. Kelemen E., Calvo W., Fliedner T.M. Atlas of human hemopoietic
development. Berlin: Springer Verlag; 1979.
14. Ichikawa H. Differentiation of red pulp and evaluation of hemopoietic role
of human prenatal spleen. Arch. Histol. Jap. 1985; 48(2): 183-97.
15. Oguro M., Koizumi F., Sasagawa S. Blood cells in the peripheral blood
and hematopoietic organs of the human fetus during hepatic hematopoiesis. Acta
Haematol. 1978; 41(6): 1231-41.
16. Ãåðàñèìîâà Ë.Ï. Êîëîíèåîáðàçóþùàÿ ñïîñîáíîñòü ðàçëè÷íûõ
êðîâåòâîðíûõ è ëèìôîèäíûõ îðãàíîâ â ïðîöåññå ýìáðèî- è ôåòîãåíåçà
÷åëîâåêà. Ïðîáë. ãåìàòîë. 1980; 5: 45-8.
ìàòåðèàë íå ïîçâîëèë íàì ïðîâåñòè èññëåäîâàíèÿ â ðàçëè÷íûõ âîçðàñòíûõ ãðóïïàõ. Êëåòî÷íûé ñîñòàâ ôåòàëüíîé
ñåëåçåíêè ïëîäîâ â âîçðàñòå îò 19 äî 25 íåäåëü âíóòðèóòðîáíîãî ðàçâèòèÿ óæå äîâîëüíî îäíîðîäåí – 85,0% âñåãî
êëåòî÷íîãî ñîñòàâà ïðèõîäèòñÿ íà ëèìôîèäíûå êëåòêè,
ñðåäè êîòîðûõ 2,9±0,4% ñîñòàâëÿþò ëèìôîáëàñòû,
4,7±0,7% ïðîëèìôîöèòû è 77,4±1,5% – ëèìôîöèòû. Ñîäåðæàíèå ãðàíóëîöèòîâ íåâåëèêî è íå ïðåâûøàåò 4,2%,
èç íèõ 1,7±0,3% è 0,9±0,2% ïðèõîäèòñÿ, ñîîòâåòñòâåííî,
íà äîëþ ýîçèíîôèëîâ è áàçîôèëîâ. Ýðèòðîèäíûå ýëåìåíòû
ñîñòàâëÿþò 9,4%. Ñîäåðæàíèå íåäèôôåðåíöèðîâàííûõ
áëàñòîâ ñîñòàâèëî 0,3% äèàìåòðîì îò 14,3±0,44 äî
15,85±0,2ìêì. Îíè õàðàêòåðèçóþòñÿ âûñîêèì ÿäåðíîöèòîïëàçìàòè÷åñêèì ñîîòíîøåíèåì, íåæíî-çåðíèñòîé
ñòðóêòóðîé ÿäåðíîãî õðîìàòèíà, íàëè÷èåì 1-4 ÿäðûøåê.
Öèòîïëàçìà îò ñâåòëî-ãîëóáîé äî áàçîôèëüíîé, âêëþ÷åíèé
íå ñîäåðæèò.
Èçó÷åíèå ÊÎÑ ìèåëîèäíûõ ïðåäøåñòâåííèêîâ ýìáðèîíàëüíîé ñåëåçåíêè ïîêàçàëî, ÷òî ñîäåðæàíèå ÑÊ â ñåëåçåíêå
ïëîäà 18-21 íåäåëü ðàçâèòèÿ çíà÷èòåëüíî ïðåâûøàåò èõ
ñîäåðæàíèå â êîñòíîì ìîçãå âçðîñëîãî ÷åëîâåêà [26].
Ýòî äàåò îñíîâàíèå ðàññìàòðèâàòü òàêæå è ôåòàëüíóþ ñåëåçåíêó êàê âîçìîæíûé èñòî÷íèê ñòâîëîâûõ ïîëèïîòåíòíûõ
êëåòîê.
Òàêèì îáðàçîì, ðåçóëüòàòû ïðîâåäåííûõ èññëåäîâàíèé
ïîçâîëÿþò ñ÷èòàòü, ÷òî â ôåòàëüíîé ïå÷åíè è ñåëåçåíêå
÷åëîâåêà ñîäåðæàòñÿ ÑÊ êëåòêè, è ýòè îðãàíû ìîãóò ðàññìàòðèâàòüñÿ êàê ïåðñïåêòèâíûå èñòî÷íèêè âûäåëåíèÿ ÃÑÊ
â öåëÿõ òðàíñïëàíòàöèè.
17. Ãëóçìàí Ä.Ô. Äèàãíîñòè÷åñêàÿ öèòîõèìèÿ ãåìîáëàñòîçîâ. Êèåâ:
Íàóêîâà äóìêà; 1978.
18. Êîçèíåö Ã.È., Øèøêaíîâà Ç.Ã., Ñàðû÷åâà Ò.Ã. è ñîàâò. Êëåòêè êðîâè
è êîñòíîãî ìîçãà. Àòëàñ. Ì. 2004.
19. Kelemen E., Petranyi Yu.Ir., Puskas E. Haemopoietic cell clusters too
immature to permit classification in early human embryonic liver. A preliminary
report. Haematologia 1973b; 3-4: 419-20.
20. Kelemen E., Light microscopy of scattered unprocessed hemopoietic
precursor cells in liver smears of a 6,35 mm crown rump length human embryo.
Exp. Hematol. 1974; 2(3): 118-27.
21. Ãëóçìàí Ä.Ô., Áåáåøêî Â.Ã., Íàäãîðíàÿ Â.À. è äð. Ýìáðèîíàëüíîå
êðîâåòâîðåíèå è ãåìîáëàñòîçû ó äåòåé. Êèåâ: Íàóêîâà äóìêà; 1988.
22. Àëåêñååâ È.Â., Çàìàðàåâà È.Â., Âëàäèìèðñêàÿ Å.Á., Êóðìàøåâà Í.À.
Ðàçâèòèå ñèñòåìû êðîâåòâîðåíèÿ ó ïëîäà ÷åëîâåêà. Ãåìàòîë. è òðàíñôóçèîë.
1995; 4(5): 26-9.
23. Ïåòðåíêî Þ.À. Èììóíîðåãóëÿòîðíûå ñâîéñòâà êëåòîê ôåòàëüíîé
ïå÷åíè ÷åëîâåêà. Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ. 2007;
II(3): 57-61.
24. ßðèëèí À.À. Îñíîâû èììóíîëîãèè. Ì.: Ìåäèöèíà; 1999.
25. Golfier F., Barcena A., Cruz J. et al. Mid-trimester fetal livers are a rich
source of CD34+/++ cells for transplantation. Bone Marrow Transplant. 1999;
24: 451-61.
26. Ðàêîâ À.À., Áëèíîâà Ò.Ñ., Áóáíîâ À.Í. Êîììèòèðîâàííûå
ãðàíóëîìîíîöèòàðíûå ïðåäøåñòâåííèêè â ýìáðèîíàëüíûõ îðãàíàõ ÷åëîâåêà.
Öèòîëîãèÿ 1981, 23(4): 427-31
27. Grischenko V.I., Tarasov A.I., Rudenko S.V., Petrenko A.Yu. The sensitivity
of human fetal liver cells of 7-12 weeks of gestation to programmed freesing and
cyclic freeze-thawing. Probl. Cryobil. 2000; 4: 37-44.
28. Ðàêîâ À.À., Áëèíîâà Ò.Ñ., Àôàíàñüåâ Á.Â. è äð. Îñîáåííîñòè
ìèåëîïîýçà â ýìáðèîíàëüíîé ïå÷åíè ÷åëîâåêà. Áþëë. ýêñïåð. áèîë. 1982; 94
(11): 92-4.
29. Touraine J.L., Raudrant D., Laplace S. Transplantation of hemopoietic
cells from the fetal liver to treat patient with congenital diseases postnatally or
prenatally. Transplant Proc. 1997; 29: 712-3.
30. Touraine J.L. Perinatal fetal-cell and gene therapy. Int. J.
Immunopharmacol. 2000; 22: 1033-40.
31. Êàðãèí Â.Ä., Àáäóëêàäûðîâ Ê.Ì. Ïðèìåíåíèå òðàíñïëàíòàöèé
ýìáðèîíàëüíûõ ãåìîïîýòè÷åñêèõ è ëèìôîèäíûõ îðãàíîâ è êëåòîê ïðè
ëå÷åíèè çàáîëåâàíèé ñèñòåìû êðîâè. Ãåìàòîë. è òðàíñôóçèîë. 1983; 7:
16-22.
Ïîñòóïèëà 24.10.2007
Êëåòî÷íàÿ òðàíñïëàíòîëîãèÿ è òêàíåâàÿ èíæåíåðèÿ Òîì III, ¹ 1, 2008