230 ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2011. Ò. 52. ¹ 3 ÔÀÐÌÀÖÅÂÒÈ×ÅÑÊÀß ÕÈÌÈß ÓÄÊ 577.355 ÏÐÈÌÅÍÅÍÈÅ ÌÅÒÎÄÎËÎÃÈÈ ÍÅÑÏÅÖÈÔÈ×ÅÑÊÈÕ ÁÈÎÑÅÍÑÎÐΠ ÈÌÌÓÍÎËÎÃÈÈ ÍÀ ÏÐÈÌÅÐÅ ÈÍÒÅÐÏÐÅÒÀÖÈÈ ÒÈÒÐΠÑÏÅÖÈÔÈ×ÅÑÊÈÕ IgG ×ÅËÎÂÅÊÀ Ì.Þ. Ðîçåíøòåéí2,4 , Å.Ñ. Èõàëàéíåí2,3 , Ñ.Ý. Êîíäàêîâ1,2, Î.Ñ. Ïðîêîïöåâà2,3, À.Ç. Ðîçåíøòåéí4 (1êàôåäðà õèìè÷åñêîé êèíåòèêè õèìè÷åñêîãî ôàêóëüòåòà ÌÃÓ èìåíè Ì.Â. Ëîìîíîñîâà; 2 ÍÎÖ «Õèìè÷åñêàÿ ôèçèêà áèîõèìè÷åñêèõ è áèîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ»; 3 ÎÎÎ «Èììóíîâåò», Ìîñêâà; 4 ImmunoHealth Int., USA) Ðàññìàòðèâàåòñÿ âîçìîæíîñòü ïðèìåíåíèÿ ìåòîäîëîãèè íåñïåöèôè÷åñêèõ áèîñåíñîðîâ ïðè èíòåðïðåòàöèè òèòðîâ ñïåöèôè÷åñêèõ èììóíîãëîáóëèíîâ êëàññà IgG äëÿ êîððåêòíîãî îïðåäåëåíèÿ ãðàíèöû íîðìà – ïàòîëîãèÿ. Ïðåäëîæåíà ìàòåìàòè÷åñêàÿ ìîäåëü ðàñïîçíàâàíèÿ îáðàçà ôàçîâîãî ñîñòîÿíèÿ áèîëîãè÷åñêîãî îáúåêòà íà îñíîâå ðàíæèðîâàííîãî ðÿäà êîíöåíòðàöèé ñïåöèôè÷åñêèõ èììóíîãëîáóëèíîâ êëàññà IgG. Êëþ÷åâûå ñëîâà: èììóíîõèìèÿ, ïèùåâàÿ õèìèÿ, áèîñåíñîðíàÿ ìåòîäîëîãèÿ, äèàãíîñòèêà ïèùåâîé àëëåðãèè è íåïåðåíîñèìîñòè. Èììóíîôåðìåíòíûé àíàëèç – èíñòðóìåíòàëüíûé äèàãíîñòè÷åñêèé ìåòîä, øèðîêî èñïîëüçóåìûé â íàñòîÿùåå âðåìÿ äëÿ îïðåäåëåíèÿ êîíöåíòðàöèè ðàçëè÷íûõ âåùåñòâ [1].  ìåäèöèíå äàííûé ìåòîä â îñíîâíîì ïðèìåíÿåòñÿ äëÿ êà÷åñòâåííîãî è êîëè÷åñòâåííîãî îïðåäåëåíèÿ ñïåöèôè÷åñêèõ áåëêîâ (àíòèòåë), îáðàçóþùèõñÿ ïðè èììóííîì îòâåòå íà òîò èëè èíîé àíòèãåí [2, 3]. Îäíè èç íàèáîëåå âàæíûõ êëàññîâ àíòèòåë – èììóíîãëîáóëèíû êëàññà IgG, ñîñòàâëÿþùèå îêîëî 75–80% îò âñåõ èììóíîãëîáóëèíîâ ñûâîðîòêè è 10–20% îáùåãî áåëêà ñûâîðîòêè, èãðàþò îñíîâîïîëàãàþùóþ ðîëü â îáåñïå÷åíèè äëèòåëüíîãî ãóìîðàëüíîãî èììóíèòåòà (ïåðèîä ïîëóðàñïàäà ñîñòàâëÿåò îêîëî 23–25 ñóò), íàïðèìåð ïðè èíôåêöèîííûõ çàáîëåâàíèÿõ. Ñ÷èòàåòñÿ, ÷òî îñíîâíîé ôóíêöèåé èììóíîãëîáóëèíîâ IgG ÿâëÿåòñÿ îáðàçîâàíèå êîìïëåêñà «àíòèãåí-àíòèòåëî». Îíè ñïîñîáñòâóþò íåéòðàëèçàöèè áàêòåðèàëüíûõ ýêçîòîêñèíîâ, ôàãîöèòîçó, ôèêñàöèè êîìïëåìåíòà, à òàêæå ìîãóò ó÷àñòâîâàòü â àëëåðãè÷åñêèõ ðåàêöèÿõ. Àíòèòåëà ýòîãî êëàññà ïîÿâëÿþòñÿ ÷åðåç íåêîòîðîå âðåìÿ ïîñëå êîíòàêòà ñ àíòèãåíîì è ñ÷èòàþòñÿ îñíîâíûìè àíòèòåëàìè âòîðè÷íîãî èììóííîãî îòâåòà íà áîëüøèíñòâî àíòèãåíîâ ó ÷åëîâåêà è æèâîòíûõ. Äåôèöèò IgG îñëàáëÿåò ñîïðîòèâëÿåìîñòü îðãàíèçìà ê èíôåêöèÿì [3, 4].  òàáëèöå ïðèâåäåíû ðåôåðåíòíûå çíà÷åíèÿ íîðìû êîíöåíòðàöèè IgG äëÿ ðàçíûõ âîçðàñòíûõ êàòåãîðèé. Òàêèì îáðàçîì, èçìåíåíèå êîíöåíòðàöèè âíóòðåííåãî ìåòàáîëèòà (èììóíîãëîáóëèíà IgG) â ãðàíèöàõ óñëîâíîé íîðìû ñ òî÷êè çðåíèÿ ñîâðåìåííîé ìåäèöèíû íå ÿâëÿåòñÿ ñâèäåòåëüñòâîì âîçíèêíîâåíèÿ ïàòîëîãè÷åñêîãî ïðîöåññà. Îäíàêî èìåþòñÿ äàííûå, ïîêàçûâàþùèå ñâÿçü áûñòðîãî èçìåíåíèÿ êîíöåíòðàöèè IgG â ïðåäåëàõ íîðìû ñ ðåçêèì èçìåíåíèåì ôèçèîëîãè÷åñêîãî ñîñòîÿíèÿ ÷åëîâåêà [5]. Öåëü íàøåé ðàáîòû – ñîçäàíèå ìàòåìàòè÷åñêîé ìîäåëè äëÿ áîëåå êîððåêòíîãî îïðåäåëåíèÿ ãðàíèöû íîðìà–ïàòîëîãèÿ íà îñíîâå ïðåäëîæåííîé ðàíåå ìåòîäîëîãèè íåñïåöèôè÷åñêèõ áèîñåíñîðîâ, ïîçâîëÿþùåé ðàññìàòðèâàòü áèîëîãè÷åñêèé îáúåêò êàê äèíàìè÷åñêóþ ñèñòåìó è êàê ñëåäñòâèå ðàçðàáàòûâàòü ãðàíèöû íîðìû ñ ó÷åòîì èíäèâèäóàëüíîãî ñîñòîÿíèÿ Âîçðàñòíûå çíà÷åíèÿ íîðì êîíöåíòðàöèé IgG Âîçðàñò IgG, ã/ë <1 ãîäà 3,5−11,1 1−10 ëåò 7,3−13,5 >10 ëåò 8,0−18,0 ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2011. Ò. 52. ¹ 3 îðãàíèçìà.  íàñòîÿùåå âðåìÿ èìåþòñÿ ìíîãî÷èñëåííûå äàííûå î ïîÿâëåíèè ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë IgG íà òîò èëè èíîé ïðîäóêò ïèòàíèÿ ó ÷åëîâåêà èëè æèâîòíîãî.  ýòîì ñëó÷àå íàëè÷èå èììóííîãî îòâåòà ÷àùå âñåãî ñâÿçàíî ñ íàëè÷èåì ó ÷åëîâåêà ïèùåâîé àëëåðãèè èëè íåïåðåíîñèìîñòè [6].  ñëó÷àå ïîÿâëåíèÿ è âîçðàñòàíèÿ êîíöåíòðàöèè ñïåöèôè÷åñêîãî ê êîíêðåòíîìó ïðîäóêòó IgE áëàãîäàðÿ êîððåëÿöèè ñ êëèíè÷åñêîé êàðòèíîé äèàãíîñòèðóåòñÿ íåìåäëåííàÿ ïèùåâàÿ àëëåðãèÿ (ïèùåâàÿ àëëåðãèÿ I òèïà). Äëÿ ñïåöèôè÷åñêèõ IgG òàêîé ïðÿìîé êîððåëÿöèè äî íàñòîÿùåãî âðåìåíè íå îáíàðóæåíî, ïîýòîìó ñ÷èòàåòñÿ, ÷òî ïîâûøåííàÿ êîíöåíòðàöèÿ ñïåöèôè÷åñêèõ IgG ãîâîðèò î ðàçâèòèè ñêðûòîé ïèùåâîé àëëåðãèè èëè çàìåäëåííîé àëëåðãèè (ïèùåâàÿ àëëåðãèÿ III òèïà) [7]. Ïðîàíàëèçèðóåì ñîñòîÿíèå äàííîãî âîïðîñà ñ òî÷êè çðåíèÿ òåîðèè áèîñåíñèðîâàíèÿ, êîãäà â êà÷åñòâå íåñïåöèôè÷åñêîãî áèîñåíñîðà ðàññìàòðèâàåòñÿ èçìåíåíèå êàêîãî-ëèáî ïàðàìåòðà îðãàíèçìà â îòâåò íà èçìåíåíèå ñòèìóëà, âîçäåéñòâóþùåãî íà îðãàíèçì.  íàñòîÿùåå âðåìÿ ìåòîäû äèàãíîñòèêè ïèùåâîé àëëåðãèè îñíîâàíû íà êîððåëÿöèè ìåæäó êîíöåíòðàöèåé Cn ñïåöèôè÷åñêèõ èììóíîãëîáóëèíîâ êëàññà IgE (äëÿ ÿâíîé) è IgG (äëÿ ñêðûòîé) â ñûâîðîòêå êðîâè è èììóííîé ðåàêöèåé îðãàíèçìà íà ïèùåâîé àíòèãåí. Âåëè÷èíà Cn (1 ≤ n ≤ N), èçìåðÿåìàÿ «in vitro» íà îñíîâå ÈÔÀ* äëÿ n-ãî ïèùåâîãî àíòèãåíà Ðn èç N òåñòèðóåìûõ, îòîæäåñòâëÿåòñÿ ñ àìïëèòóäîé n-ãî «èììóííîãî îòêëèêà» ñèñòåìû íà ïðîíèêíîâåíèå â êðîâîòîê ìàêðîìîëåêóë èññëåäóåìîãî ïðîäóêòà (Ðn) [8, 9]. Òðàäèöèîííûé ïîäõîä ê ðåøåíèþ ïðîáëåìû îïðåäåëåíèÿ êðèòåðèÿ íîðìà–ïàòîëîãèÿ îñíîâàí íà ìîäåëè îáðàáîòêè äàííûõ, èñïîëüçóåìîé â ÈÔÀ äëÿ äèàãíîñòèêè àëëåðãè÷åñêèõ ðåàêöèé íåìåäëåííîãî òèïà (Ò-I) íà îñíîâå îïðåäåëåíèÿ èçìåíåíèÿ êîíöåíòðàöèè ñïåöèôè÷åñêèõ IgÅ.  ðàìêàõ äàííîé ìîäåëè øêàëà òèòðîâ, îïðåäåëÿåìàÿ âûáðàííûìè çíà÷åíèÿìè êàëèáðàòîðîâ, äåëèòñÿ íà ÷åòûðå ðàâíûõ äèàïàçîíà ïî ñòåïåíè âîçðàñòàíèÿ òèòðîâ, à àìïëèòóäû òèòðîâ IgG, ïî àíàëîãó ñ ðåçóëüòàòàìè òèòðîâ IgÅ, ïîëó÷åííûõ ÈÔÀ, ðàñïîëàãàþò â ïðåäåëàõ ñîîòâåòñòâóþùèõ äèàïàçîíîâ. Âåëè÷èíà àìïëèòóäû åäèíè÷íûõ «èììóííûõ îòêëèêîâ» îáùåïðèíÿòî ñ÷èòàåòñÿ ãëàâíûì êðèòåðèåì îïðåäåëåíèÿ ãðàíèöû ðàçäåëà ìåæäó ïðîäóêòàìè ïè- *ÈÔÀ – èììóíîôåðìåíòíûé àíàëèç. 231 òàíèÿ, âûçûâàþùèìè è íå âûçûâàþùèìè àëëåðãè÷åñêóþ ðåàêöèþ (èììóííûé îòâåò) [10].  îòëè÷èå îò èììóíîãëîáóëèíîâ êëàññà IgÅ, ñîñðåäîòî÷åííûõ â òêàíåâûõ ñòðóêòóðàõ è èìåþùèõ ïîñòîÿííûé è èçâåñòíûé äèàïàçîí êîíöåíòðàöèé, èììóíîãëîáóëèíû IgG ëîêàëèçóþòñÿ â êðîâè è èìåþò ïîñòîÿííî ìåíÿþùèéñÿ «ôîíîâûé» óðîâåíü êîíöåíòðàöèé, ñóùåñòâåííî ðàçëè÷íûé êàê äëÿ ðàçíûõ îðãàíèçìîâ, òàê è äëÿ ðàçíûõ ñîñòîÿíèé îäíîãî îðãàíèçìà [11]. Âñëåäñòâèå ýòîãî ñåëåêöèÿ îòêëèêîâ ïî àìïëèòóäàì íà îñíîâå ïðîèçâîëüíî ââåäåííûõ öèôðîâûõ èëè çîíàëüíûõ êðèòåðèåâ ÿâíî íåäîñòàòî÷íà äëÿ êîððåêòíîé äèàãíîñòèêè ñêðûòîé ïèùåâîé àëëåðãèè ïî «èììóííîìó îòâåòó» äàæå â ðàìêàõ îäíîãî òåñòà è ïðèíöèïèàëüíî íå ïîçâîëÿåò ñðàâíèâàòü ýêñïåðèìåíòàëüíûå äàííûå ðàçëè÷íûõ òåñòîâ, íî ïðåäëîæåíà äëÿ èñïîëüçîâàíèÿ â äèàãíîñòèêå [12]. C ôèçè÷åñêîé òî÷êè çðåíèÿ èììóíîëîãè÷åñêèé òåñò íà IgG ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé ñîâîêóïíîñòü ðåçóëüòàòîâ N íåçàâèñèìûõ ÈÔÀ, êàæäûé èç êîòîðûõ îòðàæàåò ðåçóëüòàò âçàèìîäåéñòâèÿ n-ãî ïèùåâîãî àíòèãåíà ñî ñïåöèôè÷åñêèìè àíòèòåëàìè IgG, ñîäåðæàùèìèñÿ â èññëåäóåìîì îáðàçöå ñûâîðîòêè êðîâè, ïðè íåèçìåííûõ äëÿ äàííîãî òåñòà ïàðàìåòðàõ ýêñïåðèìåíòà. Ñëåäîâàòåëüíî, ðåçóëüòàòû òåñòèðîâàíèÿ ìîæíî ïðåäñòàâèòü â âèäå çíà÷åíèé äèñêðåòíîé ôóíêöèè Cn = f (Ð1, Ð 2 … Ðn ... Ð N), ãäå C n – èçìåðÿåìàÿ âåëè÷èíà êîíöåíòðàöèè, Ðn – ïèùåâûå àíòèãåíû, èçìåíÿþùèå ñâîþ ôèçè÷åñêóþ ïðèðîäó ïðè èçìåíåíèè èíäåêñà n.  äàííîé ïîñòàíîâêå ýêñïåðèìåíòà íàáîð ýêñïåðèìåíòàëüíûõ äàííûõ {Ñ1, Ñ2 … ÑN} íå ìîæåò áûòü èíòåðïðåòèðîâàí êàê ñîâîêóïíîñòü íåçàâèñèìûõ ñòîõàñòè÷åñêèõ èçìåíåíèé õàðàêòåðíîãî ôèçè÷åñêîãî ïàðàìåòðà, îòðàæàþùåãî ñîñòîÿíèå îáúåêòà, â äàííîì ñëó÷àå èññëåäóåìîãî îáðàçöà êðîâè. Ýòî ïðèíöèïèàëüíîå ïîëîæåíèå, îòðàæàþùåå ñóòü ôèçè÷åñêîé ìîäåëè ýêñïåðèìåíòà, êàê ïðàâèëî, íå ó÷èòûâàåòñÿ ïðè ñòàòèñòè÷åñêîé îáðàáîòêå äàííûõ ÈÔÀ ïî êîíöåíòðàöèÿì IgG. Ñ ìàòåìàòè÷åñêîé òî÷êè çðåíèÿ êàæäûé ñóììàðíûé ðåçóëüòàò i-ãî òåñòà ÿâëÿåòñÿ âûáîðêîé {Ñ1, Ñ2 … ÑN}i îáúåìîì N èç ãåíåðàëüíîé ñîâîêóïíîñòè Ng, ïðåäñòàâëåííîé â âèäå äèñêðåòíîãî ðÿäà, âàðèàíòû êîòîðîãî Cni (1 ≤ n ≤ N) – âåëè÷èíû êîíöåíòðàöèé (IgG)ni, ýêñïåðè- 232 ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2011. Ò. 52. ¹ 3 Ðèñ 1. Ãðàôè÷åñêîå èçîáðàæåíèå äèñêðåòíîãî ðàíæèðîâàííîãî ðÿäà «èììóííûõ îòêëèêîâ» (N = 111) Ðèñ. 2. Âèä îãèáàþùèõ «èììóííûõ îòâåòîâ» äëÿ ðàçëè÷íûõ ÈÔÀ íà IgG: 1 – îáëàñòü íåëèíåéíûõ «èìóííûõ îòêëèêîâ», 2 – îáëàñòü ìîíîòîííûõ «èìóííûõ îòêëèêîâ» ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2011. Ò. 52. ¹ 3 233 Ðèñ. 3. Ãðàôè÷åñêèé îáðàç åäèíè÷íîãî i-ãî «èììóííîãî îòâåòà»: 1 – îáëàñòü íåëèíåéíûõ «èìóííûõ îòêëèêîâ», 2 – îáëàñòü ìîíîòîííûõ «èìóííûõ îòêëèêîâ» (N = 111) ìåíòàëüíî ïîëó÷àåìûå â i-ì òåñòå äëÿ êàæäîãî n-ãî ïèùåâîãî àíòèãåíà. Ðàíæèðîâàíèå âûáîðêè N èëè óïîðÿäî÷åíèå âàðèàíòîâ {Ñ1, Ñ2 … ÑN}i ïî âåëè÷èíå ïðèâîäèò ê ïðåäñòàâëåíèþ ïîëó÷åííûõ äàííûõ ÈÔÀ â âèäå «èììóííîãî îòâåòà» èññëåäóåìîãî îáðàçöà êðîâè íà N ïèùåâûõ àíòèãåíîâ. Ãðàôè÷åñêîå èçîáðàæåíèå òèïè÷íîãî «èììóííîãî îòâåòà» â âèäå äèñêðåòíîãî âàðèàöèîííîãî ðàíæèðîâàííîãî ðÿäà ñ âàðèàíòàìè Cn, îïðåäåëÿþùèìè «èììóííûå îòêëèêè» îáðàçöà êðîâè íà n-é ïèùåâîé àíòèãåí, ïðåäñòàâëåíî íà ðèñ. 1. Ïîëó÷åííûé ãðàôè÷åñêèé îáðàç äèñêðåòíîãî âàðèàöèîííîãî ðàíæèðîâàííîãî ðÿäà ìîæåò áûòü èíòåðïðåòèðîâàí êàê ñïåöèôè÷íûé «èììóííûé îòâåò» êîíêðåòíîãî îðãàíèçìà íà ñòàòèñòè÷åñêóþ âûáîðêó òåñòèðóåìûõ ïèùåâûõ àíòèãåíîâ îáúåìîì N, ïîëó÷åííóþ èç ãåíåðàëüíîé ñîâîêóïíîñòè Ng ïî îïðåäåëåííûì ñåëåêòèâíûì êðèòåðèÿì, ãëàâíûì èç êîòîðûõ ÿâëÿåòñÿ ñòàòèñòè÷åñêè äîñòîâåðíûé íàáîð ïðîäóêòîâ, íàèáîëåå ÷àñòî óïîòðåáëÿåìûõ â ðàöèîíå èññëåäóåìîé ïîïóëÿöèè. Ïîñêîëüêó äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñêðûòîé ïèùåâîé àëëåðãèè ìåòîäîì ÈÔÀ íåçàâèñèìî îïðåäåëÿåòñÿ êîíöåíòðàöèÿ ñïåöèôè÷åñêèõ IgG íà áîëüøîå êîëè÷åñòâî îòäåëüíûõ ïèùåâûõ àíòèãåíîâ, òî êîððåêòíîå èñïîëüçîâàíèå ìåòîäîâ ìàòåìàòè÷åñêîé ñòàòèñòèêè òðåáóåò àïðèîðíîé èíôîðìàöèè î âèäå ôóíêöèè ïëîòíîñòè ðàñïðåäåëåíèÿ âåðîÿòíîñòè ðåãèñòðèðóåìûõ «èììóííûõ îòêëèêîâ» [13, 14]. Ïîñêîëüêó áèîõèìè÷åñêàÿ ðîëü ðàçíûõ êëàññîâ èììóíîãëîáóëèíîâ [15] ðàçëè÷íà, ìîæíî ïðåäïîëîæèòü, ÷òî èììóíîëîãè÷åñêèé òåñò íà ñïåöèôè÷åñêèå ïèùåâûå IgG, ôîðìàëüíî àíàëîãè÷íûé ïîäîáíîìó òåñòó íà IgÅ, äîëæåí ñóùåñòâåííî îòëè÷àòüñÿ îò ïîñëåäíåãî êàê ïîäõîäîì ê îáðàáîòêå äàííûõ, òàê è ëîãèêîé âûâîäîâ ïî ðåçóëüòàòàì òåñòèðîâàíèÿ. Ñòàòèñòè÷åñêèé àíàëèç ðåçóëüòàòîâ îïðåäåëåíèÿ êîíöåíòðàöèè ñïåöèôè÷åñêèõ IgG ìåòîäîì ÈÔÀ, ïðåäñòàâëåííûõ â âèäå «èììóííûõ îòâåòîâ» èëè ãðàôè÷åñêèõ îáðàçîâ äèñêðåòíûõ âàðèàöèîííûõ ðàíæèðîâàííûõ ðÿäîâ è ñîîòâåòñòâóþùèõ ðàñïðåäåëåíèé ÷àñòîò âàðèàíòîâ «èììóííûõ îòêëèêîâ», ïðîâåäåííûé ïî äàííûì òåñòèðîâàíèÿ áîëåå 10 000 ÷åëîâåê â Åâðîïå è ÑØÀ íà òåñò-ñèñòåìàõ ðàçíûõ ïðîèçâîäèòåëåé, ñîâïàäàþùèõ ïî àíòèãåíàì, ïîçâîëèë âûÿâèòü ñëåäóþùèå îáùèå ñòàòèñòè÷åñêèå çàêîíîìåðíîñòè. Îãèáàþùèå «èììóííûõ îòâåòîâ», ïðåäñòàâëåííûõ â âèäå ãðàôè÷åñêèõ îáðàçîâ äèñêðåòíûõ âàðèàöèîííûõ ðàíæèðîâàííûõ ðÿäîâ, ïîêàçàíû íà ðèñ. 2. Îíè ñîñòîÿò èç äâóõ õàðàêòåðíûõ ó÷àñòêîâ: íåëèíåéíîé ÷àñòè (1) è ó÷àñòêà ìîíîòîííûõ îòêëèêîâ (2). Ïðè ýòîì íåëèíåéíàÿ îáëàñòü (1) èìååò õàðàêòåðíûé ñïåöèôè÷åñêèé è íåïîâòîðèìûé âèä äëÿ êàæäîãî ÈÔÀ íà IgG. Ïîäîáíàÿ ñòðóêòóðà îãèáàþùèõ «èììóííûõ îòâåòîâ» íàáëþäàåòñÿ ïðè ëþáûõ «ôîíîâûõ» êîíöåí- 234 ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2011. Ò. 52. ¹ 3 Ðèñ. 4. Ñïåêòð ÷àñòîò âàðèàíòîâ N «èììóííûõ îòêëèêîâ» äëÿ åäèíè÷íîãî ÈÔÀ: 1 – ñïëîøíàÿ ÷àñòü ñïåêòðà, 2 – äèñêðåòíàÿ îáëàñòü ÷àñòîò âàðèàíòîâ (N = 111) Ðèñ. 5. Âèä «îáîáùåííîãî» ñïåêòðà ÷àñòîò âàðèàíòîâ M «èììóííûõ îòâåòîâ» äëÿ 10 ðàçëè÷íûõ ÈÔÀ íà IgG (M = 10, N = 111). ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2011. Ò. 52. ¹ 3 òðàöèÿõ IgG, íå çàâèñèò îò íàáîðà ïèùåâûõ àíòèãåíîâ è èìååò îáùèé õàðàêòåð äëÿ âñåõ ÈÔÀ íà IgG [16, 17]. Õàðàêòåðíûé ãðàôè÷åñêèé îáðàç i-ãî «èììóííîãî îòâåòà» è ñîîòâåòñòâóþùèé ñïåêòð ÷àñòîò âàðèàíòîâ ïðåäñòàâëåíû íà ðèñ. 3, 4. Îáëàñòü íåëèíåéíûõ «èììóííûõ îòêëèêîâ» íà ðèñ. 3 àäåêâàòíî îòðàæàåò äèñêðåòíóþ îáëàñòü ñïåêòðà ÷àñòîò âàðèàíòîâ ðèñ. 4. Ïîäîáíîå ñîîòâåòñòâèå èìååò ìåñòî äëÿ âñåõ áåç èñêëþ÷åíèÿ ïàð «èììóííûé îòâåò» – ñïåêòð ÷àñòîò âàðèàíòîâ «èììóííûõ îòêëèêîâ», íàáëþäàåìûõ íà ïðàêòèêå. Âèä «îáîáùåííîãî» ñïåêòðà ÷àñòîò âàðèàíòîâ «èììóííûõ îòêëèêîâ» ïî ïðåäñòàâèòåëüíîé âûáîðêå õàðàêòåðíûõ «èììóííûõ îòâåòîâ» ïîêàçàí íà ðèñ. 5. Ñïëîøíàÿ ÷àñòü ïîäîáíîãî «îáîáùåííîãî» ñïåêòðà ÷àñòîò âàðèàíòîâ «èììóííûõ îòêëèêîâ» äîñòàòî÷íî õîðîøî îïèñûâàåòñÿ ëîãàðèôìè÷åñêè-íîðìàëüíîé çàâèñèìîñòüþ ïðè ëþáîì ïðåäñòàâèòåëüíîì íàáîðå ÷èñëà âàðèàíòîâ. Äèñêðåòíàÿ ÷àñòü ïîäîáíîãî ñïåêòðà ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé òàêæå îáîáùåííóþ ñîâîêóïíîñòü åäèíè÷íûõ ÷àñòîò âàðèàíòîâ, ñîîòâåòñòâóþùèõ îáëàñòè íåëèíåéíûõ «èììóííûõ îòêëèêîâ». Íà îñíîâàíèè ïðîâåäåííûõ ñòàòèñòè÷åñêèõ èññëåäîâàíèé íàìè ïðåäëîæåí äèàãíîñòè÷åñêèé êðèòåðèé íîðìà–ïàòîëîãèÿ, ãäå ãðàíèöà ðàçäåëà «èììóííîãî îòâåòà», îïðåäåëÿþùàÿ ïðîäóêòû-àíòàãîíèñòû, ïðîèçâîäèòñÿ íå ïî àáñîëþòíûì çíà÷åíèÿì àìïëèòóä «èììóííûõ îòêëèêîâ», à ïî íà÷àëó ïåðåõîäà êâàçèëèíåéíîãî ó÷àñòêà îãèáàþùåé «èììóííîãî îòâåòà» ê àíîìàëüíîìó ó÷àñòêó ñ ñóùåñòâåííîé íåëèíåéíîñòüþ îãèáàþùåé. Íà ñïåêòðàõ ÷àñòîò âàðèàíòîâ «èììóííûõ îòêëèêîâ» ýòà îáëàñòü ñîâïàäàåò ñ îáëàñòüþ ïåðåõîäà îò ñïëîøíîé ÷àñòè ñïåêòðà ê äèñêðåòíîé. 235 Ïðè ïîäîáíîì ïîäõîäå àáñîëþòíûå çíà÷åíèÿ àìïëèòóä îòêëèêîâ, êàê è íàëè÷èå ìåíÿþùåãîñÿ «ôîíîâîãî óðîâíÿ», íå èãðàþò íèêàêîé ðîëè â èíòåðïðåòàöèè ðåçóëüòàòîâ òåñòèðîâàíèÿ. Ðàññìàòðèâàþòñÿ òîëüêî âèä îãèáàþùèõ ðàíæèðîâàííîãî âàðèàöèîííîãî äèñêðåòíîãî ðÿäà è ñîîòâåòñòâóþùèé ñïåêòð ÷àñòîò âàðèàíòîâ «èììóííûõ îòêëèêîâ». Ãðàôè÷åñêèå îáðàçû «èììóííûõ îòâåòîâ», êàê è õàðàêòåð ñîîòâåòñòâóþùèõ ñïåêòðîâ ÷àñòîò âàðèàíòîâ «èììóííûõ îòêëèêîâ», ðàçëè÷íû, íåïîâòîðèìû è ñòðîãî èíäèâèäóàëüíû äëÿ êàæäîãî ïàöèåíòà, ÷òî ïîçâîëÿåò ðàññìàòðèâàòü èõ â êà÷åñòâå äîñòîâåðíîãî èíñòðóìåíòà êàê èäåíòèôèêàöèè ïðîäóêòîâ-àíòàãîíèñòîâ, òàê è ñòåïåíè ðåàêòèâíîñòè èììóííîé ñèñòåìû ïàöèåíòà. Ïîëó÷åííûé êðèòåðèé áûë èñïîëüçîâàí äëÿ äèàãíîñòèêè ïèùåâîé àëëåðãèè III òèïà ó íåñêîëüêèõ òûñÿ÷ ïàöèåíòîâ â ÑØÀ è ÅÑ. Îí ïîêàçàë õîðîøèå êëèíè÷åñêèå ðåçóëüòàòû äëÿ óñòðàíåíèÿ ðàçëè÷íûõ ñèñòåìíûõ çàáîëåâàíèé, àññîöèèðóåìûõ êëèíè÷åñêè ñ ïèùåâîé íåïåðåíîñèìîñòüþ [18]. Ïðè ýòîì èñïîëüçîâàíèå òðàäèöèîííîãî ëèíåéíîãî êðèòåðèÿ äëÿ äèàãíîñòèêè ïèùåâîé àëëåðãèè íå äàâàëî êëèíè÷åñêîãî ýôôåêòà [19]. Òàêèì îáðàçîì, ïðåäëàãàåìûé ïîäõîä ê îáðàáîòêå è èíòåðïðåòàöèè äàííûõ ðàñïîçíàâàíèÿ îáðàçà ôàçîâîãî ñîñòîÿíèÿ áèîëîãè÷åñêîãî îáúåêòà íà îñíîâå ðàíæèðîâàííîãî ðÿäà êîíöåíòðàöèé ñïåöèôè÷åñêèõ èììóíîãëîáóëèíîâ êëàññà IgG ìîæåò ñëóæèòü îñíîâîé äëÿ áîëåå êîððåêòíîé äèàãíîñòèêè ó ïàöèåíòîâ ñ ðàçëè÷íûìè ñèìïòîìàìè ïèùåâîé àëëåðãèè, ÷åì èñïîëüçóåìûé äî íàñòîÿùåãî âðåìåíè ìåòîä ñ æåñòêî óñòàíîâëåííîé ãðàíèöåé íîðìû, íå ó÷èòûâàþùèé èíäèâèäóàëüíûå îñîáåííîñòè êîíêðåòíîãî îðãàíèçìà. CÏÈÑÎÊ ËÈÒÅÐÀÒÓÐÛ 1. Franek M., Hruska K. Antibody based methods for environmental and food analysis: a review // Vet. Med. (Czech). 2005. 50. P. 1. 2. Hruska K. Research on paratuberculosis: Analysis of publications 1994–2004. // Veterinarni Medicina. 2004. 49. P. 271. 3. Roitt I. Essential Immunology. Wiley-Blackwell, 2006. 4. Marinkovich V. Specidfic IgG antibodies as markers of adverse reactions to foods. Monogr. Allergy. 1996. 32. P. 221. 5. Neerven R.J., Knol E.F., Ejrnaes A.,Wurzen P.A. // Int. Arch. Allergy. Immunol. 2006. 141. P. 119. 6. Atkinson W., SheldonT.A., Shaat N., Whorwell P.J. // Gut. 2004. 10. P. 1459. 7. Eysink P.E.D., de Jonge M.H., Bindels P.J.E. // Clin. Exp. Allergy. 1999. 29. P. 604. 8. Âîåéêîâ Â.Ë. // Óñï. ôèçèîë. íàóê. 1998. 29. ¹ 4. Ñ. 55. 9. Âîåéêîâ Â.Ë., Êîíäàêîâ Ñ.Ý., Ðîçåíòàëü Â.Ì. è äð. Ïàò. ÐÔ ¹ 2152616 Ñ1. 10. Bindslev-Jensen C., Ballmer-Weber B.K., Bengtsson U., Blanco C., Ebner C., Hourihane J., et al. // Allergy. 2004. 59. Ð. 690. 11. Calkhoven P.G., Aalbers M., Koshte V.L., Schilte P.P., Yntema J.L., Grioen R.W. et al. // Clin. Exp. Allergy. 1991. 21. Ð. 99. 12. Âîðîáüåâà Í.Ë., Àãàôîíîâ Â.Å., Âîëêîâ À.Â. Ïàò. ÐÔ ¹ 2185178 C1. 236 ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2011. Ò. 52. ¹ 3 13. Stanton A. Glantz Ph.D. Primer of Biostatistics. McGrawHill, 1990. 14. Áåíäàò Äæ., Ïèðñîë À. Ïðèêëàäíîé àíàëèç ñëó÷àéíûõ äàííûõ. Ì., 1989. 15. Brostoff J., Challacombe S.J. Food Allergy and Intolerance. Saunders, 2002. 16. Ïðîêîïöåâà Î.Ñ., Êîíäàêîâ Ñ.Ý., Ðîçåíøòåéí Ì.À. // Òåç. êîíô. «Ëîìîíîñîâ 2009» , ÌÃÓ, (http://lomonosov-msu.ru/ archive/ Lomonosov_2009/ 28_6.pdf) 17. Ðîçåíøòåéí Ì.À., Ïðîêîïöåâà Î.Ñ., Êîíäàêîâ Ñ.Ý. // Òåç. êîíô. Èíòåðìåäèàòû õèìè÷åñêèõ ðåàêöèé è áèîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ. Ì., 2009. Ñ. 39 18. Rozenshteyn A., Rozenshteyn M., Volkov A. Method of Analysis, Detection and Correction of Food Intolerance in Humans // WO 2009/035529 A1; US Patent Appl. 20100227340. 19. Stapel S.O., Asero R., Ballmer-Weber B.K., Knol E.F., Strobel S., Vieths S., Kleine-Tebbe J. Testing for IgG4 against foods is not recommended as a diagnostic tool: EAACI Task Force Report // Allergy 2008 DOI: 10.1111/j.13989995.2008.01705.x Ïîñòóïèëà â ðåäàêöèþ 20.01.10 APPLICATION OF NONSPECIFIC BIOSENSORS METHODOLOGY FOR RIGHT CHOICE OF DIAGNOSTIC CRITERIA FOR FOOD ALLERGY AND INTOLERANCE ON THE BASIS SPECIFIC HUMAN IGG DETERMINATION M.Yu. Rozenshteyn, E.S. Ihalainen, S.E. Kondakov, O.S. Prokopzeva, A.Z. Rozenshteyn (Division of Kinetics Chemistry) Under consideration is the application of methodology of non-specific biomarkers to the interpretation of the titres of specific immunoglobulins of type IgG for the purpose of accurate determination of a threshold between normal and abnormal values. Proposed is a mathematical model of assessment of a phase status of a biological entity based on the ranking of a series of concentrations of specific immunoglobulins of type IgG. Key words: immunochemistry, biosensors methodology, food biochemistry, food intolerance diagnostics. Ñâåäåíèÿ îá àâòîðàõ: Ðîçåíøòåéí Ìàðèíà Þçåôîâíà – âðà÷-êîíñóëüòàíò êëèíèêè “ImmunoHealth Int.” (ÑØÀ), ñîèñêàòåëü ÍÎÖ «Õèìè÷åñêàÿ ôèçèêà áèîõèìè÷åñêèõ è áèîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ» ÌÃÓ–ÐÀÍ; Èõàëàéíåí Åêàòåðèíà Ñåðãååâíà – èíæåíåð-áèîõèìèê ÎÎÎ “Èììóíîâåò”, ñîèñêàòåëü ÍÎÖ «Õèìè÷åñêàÿ ôèçèêà áèîõèìè÷åñêèõ è áèîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ» ÌÃÓ–ÐÀÍ; Êîíäàêîâ Ñåðãåé Ýìèëüåâè÷ – ñò. íàó÷. ñîòð. êàôåäðû õèìè÷åñêîé êèíåòèêè õèìè÷åñêîãî ôàêóëüòåòà ÌÃÓ èìåíè Ì.Â. Ëîìîíîñîâà, äîêò. ôàðì. íàóê; Ïðîêîïöåâà Îëüãà Ñåðãååâíà – ãëàâ. ñïåöèàëèñò ÎÎÎ “Èììóíîâåò”, äîêòîðàíò ÍÎÖ “Õèìè÷åñêàÿ ôèçèêà áèîõèìè÷åñêèõ è áèîëîãè÷åñêèõ ïðîöåññîâ” ÌÃÓ–ÐÀÍ, êàíä. áèîë. íàóê; Ðîçåíøòåéí Àðêàäèé Çèëüìàíîâè÷ – ãëàâ. ñïåöèàëèñò êëèíèêè “ImmunoHealth Int.” (ÑØÀ), äîêò. ôèç.-ìàòåì. íàóê.