ÓÄÊ 581.19(018):547.963.3 ÈÄÅÍÒÈÔÈÊÀÖÈß ÑÎÐÒΠÑÅËÜÑÊÎÕÎÇßÉÑÒÂÅÍÍÛÕ ÊÓËÜÒÓÐ ÏÎ ÝËÅÊÒÐÎÔÎÐÅÒÈ×ÅÑÊÈÌ ÑÏÅÊÒÐÀÌ ÇÀÏÀÑÍÛÕ ÁÅËÊΠÍ. Ê. Ãóáàðåâà, È. Ï. Ãàâðèëþê, À. Â. Êîíàðåâ Ðàáîòû ïî èñïîëüçîâàíèþ çàïàñíûõ áåëêîâ çåðíà êàê ìàðêåðîâ â èçó÷åíèè ãåíåòè÷åñêèõ ðåñóðñîâ ðàñòåíèé, èäåíòèôèêàöèè ñîðòîâ ïøåíèöû è äðóãèõ çëàêîâ áûëè íà÷àòû âî ÂÈÐ ïîä ðóêîâîäñòâîì Â. Ã. Êîíàðåâà â 1967 ã., êîãäà â èíñòèòóòå áûëà ñîçäàíà ëàáîðàòîðèÿ áåëêà è íóêëåèíîâûõ êèñëîò, ïåðåèìåíîâàííàÿ ïîçæå â îòäåë ìîëåêóëÿðíîé áèîëîãèè. Ïðåèìóùåñòâî áåëêà êàê ãåíåòè÷åñêîãî ìàðêåðà ñâÿçàíî ñ òåì, ÷òî áåëîê ÿâëÿåòñÿ ïåðâè÷íûì è íåïîñðåäñòâåííûì ïðîäóêòîì ãåíåòè÷åñêîé ñèñòåìû. Äëÿ èäåíòèôèêàöèè ñîðòîâ ïøåíèöû, ÿ÷ìåíÿ, îâñà è äðóãèõ çåðíîâûõ êóëüòóð èñïîëüçóþò ýëåêòðîôîðåç â âåðòèêàëüíûõ ïëàñòèíàõ 6,5 % ÏÀÀà â êèñëîé ñðåäå.  ñòàòüå îáñóæäàþòñÿ íåêîòîðûå èòîãè è ïåðñïåêòèâû èñïîëüçîâàíèÿ ýëåêòðîôîðåçà çàïàñíûõ áåëêîâ ñåìÿí çëàêîâ — ïðîëàìèíîâ — â èäåíòèôèêàöèè ñîðòîâ, à òàêæå ïóòè ñòàíäàðòèçàöèè ýòîãî ìåòîäà. Íà ïðèìåðå ïøåíèöû è ÿ÷ìåíÿ ïîêàçàíà ïåðñïåêòèâíîñòü èñïîëüçîâàíèÿ åãî â ñåëåêöèè, ñåìåíîâîäñòâå, ñåìåííîì êîíòðîëå, à òàêæå â ãåííûõ áàíêàõ äëÿ èçó÷åíèÿ, ñèñòåìàòèçàöèè è äîêóìåíòàöèè ãåíîôîíäà êóëüòóðíûõ ðàñòåíèé è èõ äèêèõ ðîäè÷åé, äëÿ êîíòðîëÿ çà ãåíåòè÷åñêîé ñòàáèëüíîñòüþ îáðàçöîâ, âûÿâëåíèÿ äóáëåòîâ èëè ãåíåòè÷åñêè áëèçêèõ îáðàçöîâ. Ê íàñòîÿùåìó âðåìåíè â âèäå áåëêîâûõ ôîðìóë çàðåãèñòðèðîâàíî áîëåå 5000 îáðàçöîâ ïøåíèöû, ÿ÷ìåíÿ, îâñà èç êîëëåêöèè ÂÈÐ; ñîñòàâëåíî 20 êàòàëîãîâ áåëêîâûõ ôîðìóë, â òîì ÷èñëå 7 â ýëåêòðîííîì âèäå. Îòìå÷åíà ðîëü àêàäåìèêà ÐÀÑÕÍ Â. Ã. Êîíàðåâà (1915 – 2006) è ðóêîâîäèìîãî èì êîëëåêòèâà â ðàçðàáîòêå îòå÷åñòâåííûõ è ìåæäóíàðîäíûõ (â ñîòðóäíè÷åñòâå ñ ISTA — International Seed Testing Association) ñòàíäàðòíûõ ëàáîðàòîðíûõ ìåòîäîâ ñåìåííîãî êîíòðîëÿ (èäåíòèôèêàöèè ñîðòîâ), îñíîâàííûõ íà ýëåêòðîôîðåçå çàïàñíûõ áåëêîâ ñåìÿí. Êëþ÷åâûå ñëîâà: çàïàñíûå áåëêè ñåìÿí; ýëåêòðîôîðåç áåëêîâ; ìåæäóíàðîäíûå ñòàíäàðòíûå ëàáîðàòîðíûå ìåòîäû ñåìåííîãî êîíòðîëÿ. È äåíòèôèêàöèÿ ãåíåòè÷åñêèõ ðåñóðñîâ ðàñòåíèé è ñîðòîâ, â ÷àñòíîñòè ïî ñïåêòðàì çàïàñíûõ áåëêîâ ñåìÿí, — íàïðàâëåíèÿ, êîòîðûå Â. Ã. Êîíàðåâ â ïîñëåäíèå äåñÿòèëåòèÿ ñ÷èòàë îñîáåííî íàèáîëåå äëÿ ñåáÿ è ñâîåãî êîëëåêòèâà ïðèîðèòåòíûìè è âàæíûìè, ðåçóëüòàòàìè êîòîðûõ îí âñåãäà ãîðäèëñÿ. Åãî ïîñëåäíèé òðóä (íå ñ÷èòàÿ «Íàó÷íîé áèîãðàôèè ñ âîñïîìèíàíèÿìè î ïðîøëîì», 2004 ã.) — ñîñòàâëåííîå èì ìåòîäè÷åñêîå ðóêîâîäñòâî «Èäåíòèôèêàöèÿ ñîðòîâ è ðåãèñòðàöèÿ ãåíîôîíäà êóëüòóðíûõ ðàñòåíèé ïî áåëêàì ñåìÿí» (2000 ã.) ñòàëî áåç ïðåóâåëè÷åíèÿ íàñòîëüíîé êíèãîé äëÿ ëàáîðàòîðèé ñåìåííîãî êîíòðîëÿ ñèñòåìû Ðîññåëüõîçíàäçîðà ÐÔ, ñåëåêöèîííûõ ó÷ðåæäåíèé, à òàêæå ìíîãèõ äðóãèõ, èñïîëüçóþùèõ â ñâîåé ðàáîòå áåëêè ñåìÿí êàê ìàðêåðû â ðåøåíèè âîïðîñîâ èäåíòèôèêàöèè, ïàñïîðòèçàöèè, ãåíåòè÷åñêîé öåëîñòíîñòè è ïîäëèííîñòè èñõîäíîãî è ñåëåêöèîííîãî ìàòåðèàëà, îõðàíû àâòîðñêèõ ïðàâ íà ñîðòà è äîíîðû è ìíîãèå äðóãèå [1]. Ðàáîòû ïî èñïîëüçîâàíèþ çàïàñíûõ áåëêîâ çåðíà êàê ìàðêåðîâ â èçó÷åíèè ãåíåòè÷åñêèõ ðåñóðñîâ ðàñòåíèé, èäåíòèôèêàöèè ñîðòîâ ïøåíèöû è äðóãèõ çëàêîâ áûëè íà÷àòû â ÂÈÐ ïîä ðóêîâîäñòâîì Â. Ã. Êîíàðåâà â 1967 ã., êîãäà â ÂÈÐ áûëà ñîçäàíà ëàáîðàòîðèÿ áåëêà è íóêëåèíîâûõ êèñëîò, ïåðåèìåíîâàííàÿ ïîçæå â îòäåë ìîëåêóëÿðíîé áèîëîãèè. Ïðåèìóùåñòâî áåëêà êàê ãåíåòè÷åñêîãî ìàðêåðà ñâÿçàíî ñ òåì, ÷òî áåëîê ÿâëÿåòñÿ ïåðâè÷íûì è íåïîñðåäñòâåííûì ïðîäóêòîì ãåíåòèÀãðàðíàÿ Ðîññèÿ. 2015. ¹ 11 ÷åñêîé ñèñòåìû. Áåëêè â íàèìåíüøåé ìåðå ïîäâåðæåíû ôåíîòèïè÷åñêîé èçìåí÷èâîñòè è ñîîòâåòñòâåííî îáëàäàþò õîðîøî âûðàæåííîé áèîëîãè÷åñêîé ñïåöèôè÷íîñòüþ [2 – 5]. Ñðåäè áåëêîâûõ ìàðêåðîâ ó ðàñòåíèé îñîáîå ïîëîæåíèå çàíèìàþò áåëêè ñåìÿí. Ýòè âûñîêîïîëèìîðôíûå áåëêè äàþò âîçìîæíîñòü ñ äîñòàòî÷íîé ïîëíîòîé èäåíòèôèöèðîâàòü ãåíîôîíä ñîðòîâ, ðàçëè÷àòü è ðåãèñòðèðîâàòü èõ áèîòèïû, ãèáðèäíûå ëèíèè, àíàëèçèðîâàòü ñîðòîâûå, ãèáðèäíûå è åñòåñòâåííûå ïîïóëÿöèè. Ðàçðàáîòêà ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèõ ìåòîäîâ ñîðòîâîé èäåíòèôèêàöèè ïî áåëêàì çåðíà íà÷àëàñü ñî çëàêîâ íà ìîíîìåðíûõ (íåàãðåãèðîâàííûõ) ïðîëàìèíàõ — ãëèàäèíå ïøåíèöû è ãîðäåèíå ÿ÷ìåíÿ [3]. Ïåðâûå èòîãè ýòèõ ðàáîò áûëè ïîäêðåïëåíû àâòîðñêèì ñâèäåòåëüñòâîì [6].  íàñòîÿùåå âðåìÿ ðàçëè÷åíèå è èäåíòèôèêàöèþ ñîðòîâ ïøåíèöû, ÿ÷ìåíÿ, îâñà è äðóãèõ çëàêîâûõ êóëüòóð ìåòîäîì ýëåêòðîôîðåòè÷åñêîãî àíàëèçà áåëêîâ ýíäîñïåðìà ñåìÿí — ïðîëàìèíîâ — øèðîêî ïðèìåíÿþò âî ìíîãèõ ñòðàíàõ ìèðà. Ìåæäóíàðîäíàÿ àññîöèàöèÿ ïî ñåìåííîìó êîíòðîëþ International Seed Testing Association (ISTA) âêëþ÷èëà åãî â Ìåæäóíàðîäíûå ïðàâèëà ñåìåííîãî êîíòðîëÿ. Ñîòðóäíè÷åñòâî ÂÈÐ ñ ISTA â îáëàñòè ðàçðàáîòêè ìåòîäîâ ñîðòîâîé èäåíòèôèêàöèè íà÷àëîñü â 1972 – 1973 ãã. Ðàçðàáîòàííàÿ â ÂÈÐ ìîäèôèêàöèÿ ýëåêòðîôîðåçà ïðîëàìèíà â âåðòèêàëüíûõ ïëàñòèíàõ ïîëèàêðèëàìèäíîãî ãåëÿ â êèñëîé ñðåäå [6] ðåêîìåíäîâàíà XIX Êîíãðåññîì ISTA (1983 ã.) êàê ñòàíäàðòíûé àðáèòðàæíûé ìåòîä äëÿ 21 èäåíòèôèêàöèè ñîðòîâ ïøåíèöû è ÿ÷ìåíÿ â ñåìåíîâîäñòâå è ñåìåííîì êîíòðîëå [5]. Áèîõèìè÷åñêîé èäåíòèôèêàöèè ñîðòîâ ïîñâÿùåí ðÿä ìåæäóíàðîäíûõ ñèìïîçèóìîâ, îäèí èç êîòîðûõ áûë ïðîâåäåí â ÂÈÐ â 1987 ã. [7, 8]. Èíñòèòóò ó÷àñòâîâàë è â ðàçðàáîòêå ìåòîäîâ èäåíòèôèêàöèè ïî áåëêîâûì ñïåêòðàì ñåìÿí îâñà, ãîðîõà, êóêóðóçû è äðóãèõ êóëüòóð, âêëþ÷åííûõ ïîçæå â Ìåæäóíàðîäíûå ïðàâèëà ñåìåííîãî êîíòðîëÿ [9].  1989 ã. Ãîñàãðîïðîì ÑÑÑÐ, ÂÀÑÕÍÈË, ÂÈÐ, Ãîñêîìèññèÿ ïî ñîðòîèñïûòàíèþ èçäàëè ðåêîìåíäàöèè ïî èñïîëüçîâàíèþ áåëêîâûõ ìàðêåðîâ [10]. Ïðè ïîäãîòîâêå ðåêîìåíäàöèé ó÷òåí ìíîãîëåòíèé îïûò ðàáîòû áèîõèìè÷åñêîé ãðóïïû ISTA è ÂÈÐ ïî ðàçðàáîòêå ñòàíäàðòíûõ àðáèòðàæíûõ ìåòîäîâ ýëåêòðîôîðåçà áåëêîâ äëÿ Ìåæäóíàðîäíûõ ïðàâèë cåìåííîãî êîíòðîëÿ. Áîëüøîé çàñëóãîé Â. Ã. Êîíàðåâà è ðóêîâîäèìîãî èì îòäåëà ÿâëÿåòñÿ ðàçðàáîòêà ìåòîäà ðåãèñòðàöèè ñîðòîâ â âèäå áåëêîâûõ ôîðìóë. Çàïèñü ñîðòîâ â âèäå áåëêîâûõ ôîðìóë óäîáíà äëÿ õðàíåíèÿ èíôîðìàöèè è îáðàáîòêè åå íà êîìïüþòåðàõ. Äëÿ êîëëåêöèé ðàñòèòåëüíûõ ðåñóðñîâ ÂÈÐ âîçìîæíîñòü ðåãèñòðàöèè â âèäå ôîðìóë ïîçâîëÿåò áûñòðî óñòàíîâèòü îðèãèíàëüíîñòü è íîâèçíó âíîâü ïîñòóïàþùèõ â êîëëåêöèþ îáðàçöîâ, èñêëþ÷èòü äóáëèðîâàíèå, ïðîâåñòè ýêñïåðòèçó ìàòåðèàëîâ, ïîëó÷åííûõ îò ñåëåêöèîíåðîâ. Ìåòîäû èññëåäîâàíèÿ  ÂÈÐ èñïîëüçóþò äâà îñíîâíûõ ñòàíäàðòíûõ ëàáîðàòîðíûõ ìåòîäà äëÿ èäåíòèôèêàöèè ñîðòîâ ïî ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèì ñïåêòðàì çàïàñíûõ áåëêîâ ñåìÿí: 1. Ýëåêòðîôîðåç â ïëàñòèíàõ ïîëèàêðèëàìèäíîãî ãåëÿ (ÏÀÀÃ) â àöåòàòíîì áóôåðå, pH 3,1. 2. SDS-ÏÀÀà ýëåêòðîôîðåç â ïðèñóòñòâèè èëè îòñóòñòâèè ðåäóöèðóþùåãî àãåíòà â òðèñ-áóôåðå, pH 6,8 èëè 8,3. Äëÿ èäåíòèôèêàöèè ñîðòîâ ïøåíèöû, ÿ÷ìåíÿ, îâñà è äðóãèõ çåðíîâûõ êóëüòóð èñïîëüçóþò ýëåêòðîôîðåç â âåðòèêàëüíûõ ïëàñòèíàõ 6,5 % ÏÀÀà â êèñëîé ñðåäå. Ïðîëàìèíû âûäåëÿþò èç îòäåëüíûõ çåðíîâîê. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñîðòîâîé ïðèíàäëåæíîñòè è èäåíòè÷íîñòè îáðàçöà äîñòàòî÷íî äâóõ âûáîðîê ïî 50 çåðåí. Ïîçåðíîâîé àíàëèç ïîçâîëÿåò âûÿâëÿòü äâå êàòåãîðèè ñîðòîâ — ìîíîìîðôíûå (îäèí òèï ñïåêòðà) è ïîëèìîðôíûå (îò äâóõ è áîëåå òèïîâ ñïåêòðà). Ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèé ñïåêòð îòäåëüíîé çåðíîâêè ìàðêèðóåò ñîîòâåòñòâóþùèé åé áèîòèï. Íà êîìïîíåíòíûé ñîñòàâ ïðîëàìèíà íå âëèÿþò íè óñëîâèÿ âûðàùèâàíèÿ, íè ñðîêè õðàíåíèÿ çåðíà. Ó ïîëèìîðôíûõ ñîðòîâ äîìèíèðóþò îáû÷íî 1 – 3 áèîòèïà, íà êîòîðûå ïðèõîäèòñÿ 80 – – 90 % ïîïóëÿöèè ñîðòà. Îíè, êàê ïðàâèëî, è ñëóæàò ãëàâíûì îáúåêòîì âíèìàíèÿ ïðè îöåíêå ñïåöèôè÷íîñòè òàêèõ ñîðòîâ [1, 4, 11]. Ðåçóëüòàòû è îáñóæäåíèå Ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèå ñïåêòðû ïðîëàìèíîâ ïî ñîñòàâó è ïîäâèæíîñòè êîìïîíåíòîâ íåîäèíàêîâû è ñïå22 öèôè÷íû äëÿ áîëüøèíñòâà ñîðòîâ è áèîòèïîâ ïøåíèöû è ÿ÷ìåíÿ. Äëÿ îïèñàíèÿ ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà è îáðàáîòêè èíôîðìàöèè, çàêëþ÷åííîé â ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèõ ñïåêòðàõ ïðîëàìèíà, ðàçðàáîòàí ñïîñîá çàïèñè ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèõ ñïåêòðîâ â âèäå áåëêîâûõ èëè ñîðòîâûõ ôîðìóë ïî ýòàëîííîìó ñïåêòðó, ñîñòàâëåííîìó íà îñíîâàíèè ñðàâíèòåëüíîãî èçó÷åíèÿ ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèõ ñïåêòðîâ ãëèàäèíà áîëüøîãî ÷èñëà ñîðòîâ è áèîòèïîâ ïøåíèöû [12]. Ýòàëîííûé ñïåêòð ñîñòîèò èç ÷åòûðåõ çîí, ñîîòâåòñòâóþùèõ áèîõèìè÷åñêèì ôðàêöèÿì á, â, ã, ù [13] è äîïîëíåí çîíîé áûñòðûõ ïðîëàìèíîâ — ÁÏ, õàðàêòåðíîé äëÿ ïðîëàìèíîâ îâñà è ïðîëàìèíîâ êîðìîâûõ çëàêîâ [14 – 16]. Êàæäàÿ çîíà ñîäåðæèò îïðåäåëåííîå ÷èñëî ïîçèöèé, êîòîðûå ìîãóò áûòü çàíÿòû ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèìè êîìïîíåíòàìè ãëèàäèíà, ãîðäåèíà, àâåíèíà èëè ïðîëàìèíîâ äðóãèõ çëàêîâ. Ðàçðàáîòàíà íîìåíêëàòóðà êîìïîíåíòîâ ýëåêòðîôîðåòè÷åñêîãî ñïåêòðà ïðîëàìèíîâ.  öåëîì ýòàëîííûé ñïåêòð ïðîëàìèíà èìååò ñëåäóþùóþ ñòðóêòóðó: ÁÏ654321á1234567â12345ã12345ù12345678910...  ïðåäåëàõ êàæäîé çîíû îñíîâíûå âîçìîæíûå ïîçèöèè êîìïîíåíòîâ çàíóìåðîâàíû ê ñòàðòó. Íåêîòîðûå ïîçèöèè, íàïðèìåð, ù-4, -6, -8 è -9, ïðåäñòàâëåíû äâóìÿ è áîëåå àëüòåðíàòèâíûìè ñóáêîìïîíåíòàìè. Îíè êîäèðóþòñÿ àëëåëÿìè îäíîãî ãåíà è çàïèñûâàþòñÿ ñîîòâåòñòâåííî ù41, ù42; ù61, ù62; ù81, ù82; ù91, ù92, ù93. Èíäåêñ 1 ó íîìåðà ïîçèöèè óêàçûâàåò íà ñìåùåíèå êîìïîíåíòà â ñòîðîíó áûñòðîãî ñîñåäíåãî êîìïîíåíòà, èíäåêñ 2 — ñðåäíåå ïîëîæåíèå, èíäåêñ 3 — íà ñìåùåíèå â ñòîðîíó áîëåå ìåäëåííîãî êîìïîíåíòà. Èíîãäà âñå ñóáïîçèöèè çàíÿòû. Ýòî îçíà÷àåò, ÷òî îíè êîíòðîëèðóþòñÿ ðàçíûìè ãåíàìè, íàïðèìåð, ãåíàìè ðàçíûõ ãåíîìîâ ó òåòðàïëîèäíûõ è ãåêñàïëîèäíûõ ïøåíèö.  ñîðòîâûõ ôîðìóëàõ ýòî çàïèñûâàþò ñëåäóþùèì îáðàçîì: ù4142; ù6162; ù8182 è ò.ä. Âûÿâëåíî øèðîêîå ðàçíîîáðàçèå òèïîâ ýëåêòðîôîðåòè÷åñêîãî ñïåêòðà ïðîëàìèíà. Îíî ñîçäàåòñÿ çà ñ÷åò îáùåãî ÷èñëà êîìïîíåíòîâ, èõ ðàçëè÷íîãî ñî÷åòàíèÿ êàê â îòäåëüíûõ çîíàõ, òàê è â öåëîì ñïåêòðå, à òàêæå çà ñ÷åò ñòåïåíè èíòåíñèâíîñòè îäèíàêîâûõ ïî ýëåêòðîôîðåòè÷åñêîé ïîäâèæíîñòè êîìïîíåíòîâ.  ñîðòîâûõ ôîðìóëàõ èíòåíñèâíûå êîìïîíåíòû ïå÷àòàþò æèðíûì øðèôòîì, ñëàáûå — ïîä÷åðêèâàþò. Ïî ýòàëîííîìó ñïåêòðó ñïåêòðû ïðîëàìèíà ëþáîãî ñîðòà ïøåíèöû, ÿ÷ìåíÿ è äðóãèõ çëàêîâ ìîæíî çàïèñàòü â âèäå áåëêîâîé ôîðìóëû (ðèñ. 1). Äëÿ èäåíòèôèêàöèè êîìïîíåíòîâ è ñîñòàâëåíèÿ ôîðìóëû àíàëèçèðóåìîãî îáðàçöà öåëåñîîáðàçíî íà êàæäîé ïëàñòèíå ãåëÿ èìåòü ñïåêòð ñîðòà, ôîðìóëà êîòîðîãî èçâåñòíà. Íà ðèñ. 2 ïðåäñòàâëåíû ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèå ñïåêòðû ãëèàäèíà ÷åòûðåõ ñîðòîâ îçèìîé ìÿãêîé ïøåíèöû. Ïðè ñîñòàâëåíèè òàáëèö áåëêîâûõ ôîðìóë äëÿ ýëåêòðîííîãî êàòàëîãà óäîáíåå èñïîëüçîâàòü öèôðîâóþ îöåíêó èíòåíñèâíîñòè êîìïîíåíòîâ â áàëëàõ, íî áåç äåòàëüíîé ãðàäàöèè — íå áîëåå ÷åì ïî ïÿòèáàëëüÀãðàðíàÿ Ðîññèÿ. 2015. ¹ 11 ÁÏ á â 17 15 13 9 7 5 3 1 1 3 5 7 1 3 ã ù 51 3 5 12 4 6 + 8 910 à á â ã ù Ðèñ. 1. Ýòàëîííûé ñïåêòð ïðîëàìèíîâ (à), ñïåêòðû ãëèàäèíà ïøåíèöû ñîðòà Ìèðîíîâñêàÿ 808 (á ), ãîðäåèíà ÿ÷ìåíÿ ñîðòà Òþðèíãèÿ (â ), àâåíèíà îâñà ñîðòà Àðãàìàê (ã ) Ñîðòîâûå ôîðìóëû: Ìèðîíîâñêàÿ 808 — á245671â12324252 ã222334ù242562819193102; Òþðèíãèÿ — á34671â123352ù562728; Àðãàìàê — ÁÏ531á671â13252 ã â á íîé ñèñòåìå, ïðè ýòîì îñíîâíûìè ñòóïåíÿìè ÿâëÿþòñÿ: ñëàáàÿ (2 áàëëà), ñðåäíÿÿ (3 áàëëà), âûñîêàÿ (4 áàëëà) è î÷åíü âûñîêàÿ (5 áàëëîâ). Î÷åíü ñëàáûå êîìïîíåíòû (1 áàëë) ÷àñòî íåñòàáèëüíû è íå âñåãäà ó÷èòûâàþòñÿ. Ðåãèñòðàöèÿ ñîðòîâ â âèäå áåëêîâûõ ôîðìóë óäîáíà äëÿ õðàíåíèÿ è îáðàáîòêè ïîëó÷åííîé èíôîðìàöèè. Îñîáåííî íåîáõîäèìà ðåãèñòðàöèÿ äëÿ ñòàðîäàâíèõ ñîðòîâ è ñîðòîâ íàðîäíîé ñåëåêöèè ñ öåëüþ ñîõðàíåíèÿ ñîðòîâîãî ãåíîôîíäà è äëÿ ãåíîòèïîâ ïøåíèöû è åå äèêèõ ñîðîäè÷åé, íåñóùèõ õîçÿéñòâåííî-öåííûå ïðèçíàêè è ïðåäñòàâëÿþùèõ èíòåðåñ äëÿ ñåëåêöèè [17]. Áàçû èíôîðìàöèè î ãåíîôîíäå ïøåíèöû è äðóãèõ çëàêîâ, îñíîâàííûå íà ñïåêòðàõ ïðîëàìèíà, ñóùåñòâóþò â âèäå êàòàëîãîâ è êîìïüþòåðíûõ áàç äàííûõ. Ñðàâíèòåëüíûé àíàëèç ñîðòîâûõ ôîðìóë êàê ìÿãêèõ, òàê è òâåðäûõ ïøåíèö îòå÷åñòâåííîé è çàðóáåæíîé ñåëåêöèé äàåò âîçìîæíîñòü íàðÿäó ñ ñîðòàìè, èìåþùèìè ñïåöèôè÷åñêèå (óíèêàëüíûå) ñïåêòðû ãëèàäèíà, âûäåëèòü ãðóïïû ñîðòîâ ñ îäèíàêîâûì òèïîì ñïåêòðà ãëèàäèíà. Àíàëèç òàêèõ ãðóïï ïîêàçàë, ÷òî îíè, êàê ïðàâèëî, ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé ãåíåòè÷åñêè áëèçêèå ñîðòà. Ìíîãèå èç íèõ ÿâëÿþòñÿ ñîðòàìè «îäíîé ñåëåêöèè», ò.å. èìåþò îáùåå ïðîèñõîæäåíèå [18]. Òàêèì îáðàçîì, ïî ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèì ñïåêòðàì ïðîëàìèíà è ñîðòîâûì ôîðìóëàì ìîæíî ñóäèòü î ãåíîìíîì ñîñòàâå, ïðîèñõîæäåíèè è ãåíåòè÷åñêîé ñòðóêòóðå ñîðòà, åãî ïðèíàäëåæíîñòè ê òîé èëè èíîé ãðóïïå ñåëåêöèè, êîíòðîëèðîâàòü ïîäëèííîñòü è ÷èñòîòó îò ñîçäàíèÿ äî ïðîèçâîäñòâåííîãî èñïîëüçîâàíèÿ. Òåõíîëîãèÿ ïîçâîëÿåò êîíòðîëèðîâàòü ãåíåòè÷åñêóþ öåëîñòíîñòü è ïîäëèííîñòü ñîðòà ïðè äëèòåëüíîì õðàíåíèè è ìíîãîêðàòíîì ðåïðîäóöèðîâàíèè, âûÿâëÿòü äóáëåòíûé ìàòåðèàë. Ïðè ýòîì íåîáõîäèìî, ÷òîáû ïåðâè÷íûé àíàëèç ñîðòà ïî áåëêîâûì ìàðêåðàì ïðîâîäèëè íà îðèãèíàëüíîì ìàòåðèàëå [19, 20]. Âûÿâëåíèå è èäåíòèôèêàöèÿ äóáëåòîâ — îäíà èç îñòðûõ ïðîáëåì, ñòîÿùèõ ïåðåä ãåííûìè áàíêàìè. Òàê, àíàëèç îáðàçöîâ ÿðîâîé ìÿãêîé ïøåíèöû èç êîëëåêöèè ÂÈÐ âûÿâèë ñðåäè îáðàçöîâ ñ îäèíàêîâûì ñîðòîâûì íàçâàíèåì, íî ñ ðàçíûìè êàòàëîæíûìè íîìåðàìè, èäåíòè÷íûå ïî ñïåêòðàì ãëèàäèíà îáðàçöû, ÷òî ÿâëÿåòñÿ âåñêèì àðãóìåíòîì äëÿ îòíåñåíèÿ ýòèõ îáðàçöîâ ê äóáëåòàì (òàáëèöà). Èäåíòè÷íûå ïî ñïåêòðàì îáðàçöû âûÿâëåíû è ïðè àíàëèçå îçèìîé ìÿãêîé ïøåíèöû èç Àãðàðíàÿ Ðîññèÿ. 2015. ¹ 11 – 1 2 3 4 Ðèñ. 2. Ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèå ñïåêòðû ãëèàäèíà ñîðòîâ îçèìîé ìÿãêîé ïøåíèöû: 1 — Äîíñêàÿ þáèëåéíàÿ; 2 — Ñåâåðîäîíñêàÿ þáèëåéíàÿ; 3 — Óìàíêà; 4 — Ðîäíèê Òàðàñîâñêèé Êèòàÿ [21].  ñëó÷àå ïîäòâåðæäåíèÿ äóáëåòíîé ïðèðîäû òàêèõ îáðàçöîâ è ïî äðóãèì ïðèçíàêàì îíè ìîãóò õðàíèòüñÿ â êîëëåêöèÿõ êàê ðåçåðâíûé ìàòåðèàë. Âûÿâëåíû îáðàçöû ñ îäèíàêîâûì ñîðòîâûì íàçâàíèåì, íî èìåþùèå ðàçëè÷íûå ïî êîìïîíåíòíîìó ñîñòàâó òèïû ñïåêòðîâ ãëèàäèíà, ÷òî ñâèäåòåëüñòâóåò î öåëåñîîáðàçíîñòè èõ õðàíåíèÿ ïîä ðàçíûìè êàòàëîæíûìè íîìåðàìè. Ïðè ðåïðîäóöèðîâàíèè ïîëèìîðôíûõ ñîðòîâ ìîæåò ìåíÿòüñÿ ñîîòíîøåíèå îñíîâíûõ è ìèíîðíûõ áèîòèïîâ. ×àñòî âîçíèêàåò ñèòóàöèÿ, êîãäà ñïåêòðû ðåïðîäóöèðîâàííûõ îáðàçöîâ íå ñîîòâåòñòâóþò îðèãèíàëàì. Ýòè äàííûå ñâèäåòåëüñòâóþò î íåîáõîäèìîñòè êîíòðîëÿ çà ãåíåòè÷åñêèì (ãåíîòèïè÷åñêèì) ñîñòàâîì êîëëåêöèé çëàêîâûõ êóëüòóð, õðàíÿùèõñÿ â ÂÈÐ [22] è äðóãèõ ãåíáàíêàõ. Áîëüøèíñòâî ñîðòîâ ïðè ýëåêòðîôîðåçå â ÏÀÀà â êèñëîé ñðåäå èìåþò ñïåöèôè÷íûå ñïåêòðû ïðîëàìèíîâ.  ïîñëåäíèå ãîäû ñòàëè ïîÿâëÿòüñÿ ñîðòà êàê ïøåíèöû, òàê è ÿ÷ìåíÿ ñ èäåíòè÷íûìè ñïåêòðàìè ïðîëàìèíà.  îñíîâíîì ýòî áëèçêîðîäñòâåííûå ñîðòà (èëè ñîðòà îäíîé ãðóïïû ñåëåêöèè). Äëÿ ðàçëè÷åíèÿ òàêèõ ñîðòîâ â Ïðàâèëàõ ISTA ñ 2014 ã. ïðåäëàãàåòñÿ èñïîëüçîâàòü äðóãîé ìåòîä ýëåêòðîôîðåçà ïðîëàìèíîâ — ýëåêòðîôîðåç â äèññîöèèðóþùåé ñèñòåìå ñ äîäåöèëñóëüôàòîì íàòðèÿ (SDS-ýëåêòðîôîðåç). Äëÿ ðàçëè÷åíèÿ ñîðòîâ è áèîòèïîâ ïøåíèöû ñ èäåíòè÷íûìè ñïåêòðàìè ãëèàäèíà ìîæíî òàêæå èñïîëüçîâàòü âûñîêîàãðåãèðîâàííûé áåëîê — ãëþòåíèí, êîòîðûé, êàê è ãëèàäèí, ÿâëÿåòñÿ çàïàñíûì áåëêîì ýíäîñïåðìà çåðíîâêè ïøåíèöû. Ïî ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèì ñïåêòðàì ãëþòåíèíà â SDS-ýëåêòðîôîðåçå ìîæíî ðàçëè÷àòü ñîðòà è áèîòèïû ïøåíèöû ñ èäåíòè÷íûìè ñïåêòðàìè ãëèàäèíà [23]. Òàêèì îáðàçîì óäàëîñü ðàçëè÷èòü èäåíòè÷íûå ïî ñïåêòðàì ãëèàäèíà áèîòèïû ñòàðîìåñòíûõ ñîðòîâ îçèìîé ïøåíèöû èç êîëëåêöèè ÂÈÐ. SDS-ýëåêòðîôîðåç ïðîâî23 äèëè â ñèñòåìå, ïðåäëîæåííîé Ëàåìëè [24], ñ íåêîòîðûìè ìîäèôèêàöèÿìè [23]. Ñðåäè ñîðòîâ ïèâîâàðåííîãî ÿ÷ìåíÿ ïðè ýëåêòðîôîðåçå â êèñëîì ãåëå âñå ÷àùå âñòðå÷àþòñÿ ñîðòà ñ èäåíòè÷íûìè ñïåêòðàìè ãîðäåèíîâ.  îñíîâíîì ýòî ñîðòà çàïàäíî-åâðîïåéñêîãî ïðîèñõîæäåíèÿ. Òàê, èäåíòè÷íû ïî êîìïîíåíòíîìó ñîñòàâó ãîðäåèíà ñîðòà Ñêàðëåòò è Êñàíàäó, èçâåñòíî, ÷òî Ñêàðëåòò — îäíà èç ðîäèòåëüñêèõ ôîðì Êñàíàäó; ñîðòó Ïàñàäåíà ïî ñïåêòðó ãîðäåèíà èäåíòè÷íû ïîëó÷åííûå ñ åãî ó÷àñòèåì ñîðòà Áåàòðèñ è Serbinetta; ñîðòó Ìàðíè èäåíòè÷åí ñîðò Ãðåéñ, ïîëó÷åííûé ñ ó÷àñòèåì ñîðòà Ìàðíè. Èñïîëüçîâàíèå SDS-ýëåêòðîôîðåçà [7] ïîçâîëèëî âûÿâèòü ðàçëè÷èÿ ìåæäó ýòèìè ñîðòàìè ÿ÷ìåíÿ ïî ñïåêòðàì ãîðäåèíà (ðèñ. 3). Òàêèì îáðàçîì, ìåòîäîì SDS-ýëåêòðîôîðåçà ìîæíî ðàçëè÷àòü ñîðòà çåðíîâûõ êóëüòóð, íå ðàçëè÷àþùèõñÿ ïî ñïåêòðàì ïðîëàìèíà â ñòàíäàðòíîì êèñëîì ãåëå [25].  íàñòîÿùåå âðåìÿ áåëêîâûå ìàðêåðû øèðîêî èñïîëüçóþò â ñîðòîèñïûòàíèè è ñåìåíîâîäñòâå.  ñèñ- òåìå ñîðòîèñïûòàíèÿ ìåòîäû áåëêîâûõ ìàðêåðîâ ïðèìåíÿþò äëÿ îïðåäåëåíèÿ ïðîèñõîæäåíèÿ è îðèãèíàëüíîñòè ñîðòà, ãîìîãåííîñòè è êîíñòàíòíîñòè ïðèíÿòûõ íà èñïûòàíèå è âíîâü ðàéîíèðóåìûõ ñîðòîâ ïøåíèöû, ÿ÷ìåíÿ è äðóãèõ êóëüòóð. Áåëêîâûå ìàðêåðû íàðÿäó ñ òðàäèöèîííîé ñõåìîé (ïîëåâàÿ àïðîáàöèÿ è äð.) èñïîëüçóþò äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñîðòîâîé ÷èñòîòû â ñåìåíîâîäñòâå è ñåìåííîì êîíòðîëå. Ìåòîä ïîçâîëÿåò âåñòè îòáîð ýëèòíûõ ðàñòåíèé è ïîòîìñòâ. Îñîáîå çíà÷åíèå áåëêîâûå ìàðêåðû èìåþò â ïîñëåäóþùèõ çâåíüÿõ ïåðâè÷íîãî ñåìåíîâîäñòâà — â ïèòîìíèêàõ èñïûòàíèÿ ïîòîìñòâ è ðàçìíîæåíèÿ, ãäå îáÿçàòåëåí êîíòðîëü ïîÿâëåíèÿ íåòèïè÷íûõ äëÿ ñîðòà ðàñòåíèé. Êîíòðîëü ïîñðåäñòâîì ýëåêòðîôîðåçà áåëêîâ îòäåëüíûõ ñåìÿí ïîâûøàåò ýôôåêòèâíîñòü ðåøåíèÿ ïðàêòè÷åñêèõ âîïðîñîâ ñåìåíîâîäñòâà è ñåìåííîãî êîíòðîëÿ, ïîçâîëÿåò ñîêðàòèòü ñðîêè ñîçäàíèÿ ýëèòû ñ ñåìè äî ïÿòè ëåò, ÷òî ïîêàçàíî íà ïðèìåðå ïåðâè÷íîãî ñåìåíîâîäñòâà ñîðòà ÿ÷ìåíÿ Êðèíè÷íûé [2, 10, 26]. Áåëêîâûå ôîðìóëû ñïåêòðîâ ãëèàäèíà ÿðîâîé ìÿãêîé ïøåíèöû ¹ êàòàëîãà ÂÈÐ, íàçâàíèå, ïðîèñõîæäåíèå ê-31235, Heines Kolben ê-35754, Heines Kolben ê-43218, 362 B1 E4 ê-44691, 362 B1 E4 ê-40161, Marquis × Svalof II 69 ê-41920, Marquis × Svalof II 69 ê-49383, Èðòûøàíêà 7 ê-52722, Èðòûøàíêà 7 ê-45858, Ãðåêóì 114 ê-47886, Ãðåêóì 114 ê-38414, Cadet ê-41356, Cadet ê-33980, No. 159 ê-37344, No. 159 ê-25871, Huron ê-29443, Huron ê-5936, Huron ê-58941, Maya-Pavon ê-59201, Pavon S ê-54403, Pavon F 76 ê-35284, Florence ê-34056, Quality ê-3704, Florence ê-5026, Marquis ê-29510, Marquis ê-29614, Marquis 24 Ôîðìóëà ãëèàäèíà á â ã ù ×àñòîòà âñòðå÷àåìîñòè, % 2 4 6 2 71 « 5617172 « 56171 « 5 71 « 56171 « 2 4 6171 « 56171 56171 56171 56171 56171 « 5617172 56171 5 7 1 72 2 45 6271 « 561627172 2 4 6171 « 2 4 6 1 71 2 4 6 1 71 « « 56271 2 3 3 42 52 « 2324 252 « 2324252 « 21 22 33 41 52 « 232414252 « 2324252 « 2314252 2314252 2314252 2314252 2314252 « 2324252 2324252 2324 252 2314251 « 231425152 231324252 « 231324252 2314252 « « 2314252 2234 « 21 3 5 « 2134 « 222334 « 2134 « 2134 « 2134 2134 2134 2134 21 3 5 « 21345 22 3 5 212334 222334 « 2122345 2134 « 2134 2134 « « 2134 41516263 819193102 « 41516163728292 « 4142 6171818292 « 23425162 8292 « 3425163728292 « 2 42 6271818292 « 342 63818292 342 63 818292 342 63 818292 342 63 81 92 4243 63819193102 « 2342 63 8292 2 42526163818292 3 6 2 82 92 3425261 8292101 « 4143 62 818292 23426271818292 « 2342 6271819193102 2342 6263 818292 « « 2342 6263 818292 100 « 100 « 100 « 100 « 100 « 100 « 90 10 54 46 100 « 40 40 20 100 100 100 100 100 100 100 100 90 10 Àãðàðíàÿ Ðîññèÿ. 2015. ¹ 11 Âíåäðåíèå ðåçóëüòàòîâ íàó÷íûõ èññëåäîâàíèé â ïðàêòèêó ñîïðÿæåíî ñî ìíîãèìè òðóäíîñòÿìè îðãàíèçàöèîííîãî, ôèíàíñîâîãî, à òàêæå ïîðîé è þðèäè÷åñêîãî õàðàêòåðà. Ìåòîäó ñîðòîâîé èäåíòèôèêàöèè ïðèøëîñü ïðåîäîëåâàòü âñå âûøåíàçâàííûå ïðåïîíû. Íåñìîòðÿ íà åãî âûñîêèå íàäåæíîñòü è ýôôåêòèâíîñòü, ìåòîä äî ñèõ ïîð íå ÿâëÿåòñÿ îáÿçàòåëüíûì (â îòëè÷èå îò ìíîãèõ ñòðàí) äëÿ ïðèìåíåíèÿ â ÐÔ ïðè êîììåð÷åñêîì îáîðîòå ñåìÿí, ïàðòèé çåðíà, à òàêæå â ïðîöåññå ñåìåíîâîäñòâà è ñåìåííîãî êîíòðîëÿ. Íå èñïîëüçóþòñÿ âîçìîæíîñòè ìåòîäà è â ïðîöåññå ýêñïîðòíî-èìïîðòíûõ îïåðàöèé, ÷òî áûëî áû îñîáåííî âàæíî äëÿ ïðåäîõðàíåíèÿ òîâàðíîãî è ñåìåííîãî ðûíêà ñòðàíû îò íåäîáðîêà÷åñòâåííîé ñåìåííîé è òîâàðíîé ïðîäóêöèè. Íî íåñìîòðÿ íà òðóäíîñòè, îòðàäíî îòìåòèòü, ÷òî â ïîñëåäíèå ãîäû âîçðîñ èíòåðåñ ê âíåäðåíèþ ìåòîäà â ðàáîòó êîíòðîëèðóþùèõ îðãàíîâ ÐÔ (Ðîññåëüõîçöåíòðà è Ðîññåëüõîçíàäçîðà). Ýòî âûðàæàåòñÿ, â ïåðâóþ î÷åðåäü, â àêòèâèçàöèè îáó÷åíèÿ (ñòàæèðîâîê) ñïåöèàëèñòîâ íàçâàííûõ ñòðóêòóð â îòäåëå áèîõèìèè è ìîëåêóëÿðíîé áèîëîãèè ÂÈÐ èì. Í. È. Âàâèëîâà, îïðåäåëåííîì â 2001 ã. êàê ìåòîäè÷åñêèé öåíòð ïî «Ðàçðàáîòêå, ñîâåðøåíñòâîâàíèþ è âíåäðåíèþ ìåòîäîâ áåëêîâûõ ìàðêåðîâ â ïðàêòèêó ñåìåííîãî êîíòðîëÿ, ñåìåíîâîäñòâî è ñåëåêöèþ» (Ðåøåíèå Áþðî îòäåëåíèÿ ðàñòåíèåâîäñòâà Ðîññåëüõîçàêàäåìèè îò 28.02.2001). Òîëüêî â 2013 – 2015 ãã. â îòäåëå áèîõèìèè è ìîëåêóëÿðíîé ëàáîðàòîðèè ÂÈÐ ïðîøëè îáó÷åíèå «ñòàíäàðòíûì ìåòîäàì èäåíòèôèêàöèè ñîðòîâ ñ.-õ. êóëüòóð ïî ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèì ñïåêòðàì çàïàñíûõ áåëêîâ» ñïåöèàëèñòû ÔÃÁÓ «Ðîñòîâñêîãî ðåôåðåíòíîãî öåíòðà Ðîññåëüõîçíàäçîðà» (ïøåíèöà, ÿ÷ìåíü, ïîäñîëíå÷íèê), ÔÃÁÓ Òàòàðñêîé ÌÂË Ðîññåëüõîçíàäçîðà (ïøåíèöà, ÿ÷ìåíü, êóêóðóçà), ÔÃÁÓ Êðàñíîäàðñêîé ÌÂË Ðîññåëüõîçíàäçîðà (ÿ÷ìåíü, êóêóðóçà, ïîäñîëíå÷íèê), ÔÃÁÓ Íèæåãîðîäñêîãî ðåôåðåíòíîãî öåíòðà Ðîññåëüõîçíàäçîðà (ïøåíèöà, ÿ÷ìåíü), ÔÃÁÓ Áðÿíñêîé ÌÂË Ðîññåëüõîçíàäçîðà (ÿ÷ìåíü, òðèòèêàëå, îâåñ). Ïîìèìî âûøåíàçâàííûõ ñòðóêòóð â ÂÈÐ ïðîõîäÿò îáó÷åíèå ñòàíäàðòíûì ìåòîäàì ýëåêòðîôîðåçà áåëêîâ äëÿ ñîðòîâîé èäåíòèôèêàöèè ñïåöèàëèñòû ñåëåêöèîííûõ ó÷ðåæäåíèé (ÍÈÈ), àãðîôèðì, ïèâîâàðåííûõ è ñîëîäîâåííûõ çàâîäîâ (êîìïàíèé) è äð. Çàêëþ÷åíèå Òàêèì îáðàçîì, íà îñíîâå çàïàñíûõ áåëêîâ ñåìÿí ðàçðàáîòàíû ïðèíöèïû è òåõíîëîãèÿ ìîëåêóëÿðíîãåíåòè÷åñêîãî ìàðêèðîâàíèÿ ðàñòåíèé äëÿ ðåøåíèÿ àêòóàëüíûõ ïðîáëåì ïðèêëàäíîé áîòàíèêè, ãåíåòèêè è ñåëåêöèè. Áåëêè ñåìÿí êàê ãåíåòè÷åñêèå ìàðêåðû ýôôåêòèâíû â èçó÷åíèè, ñèñòåìàòèçàöèè è äîêóìåíòàöèè ãåíîôîíäà êóëüòóðíûõ ðàñòåíèé è èõ äèêèõ ðîäè÷åé, â êîíòðîëå çà ãåíåòè÷åñêîé ñòàáèëüíîñòüþ îáðàçöîâ, äëÿ âûÿâëåíèÿ äóáëåòîâ èëè ãåíåòè÷åñêè áëèçêèõ îáðàçöîâ; ðåãèñòðàöèÿ êîëëåêöèîííûõ îáðàçöîâ ïî ñïåêòðàì áåëêîâ ñïîñîáñòâóåò ñîõðàíåíèþ ãåíåòè÷åñêîãî Àãðàðíàÿ Ðîññèÿ. 2015. ¹ 11 à á à á à á Ðèñ. 3. Ýëåêòðîôîðåòè÷åñêèå ñïåêòðû ãîðäåèíà ñîðòîâ ÿ÷ìåíÿ â êèñëîì ÏÀÀà (à) è â SDS ÏÀÀà (á ) ðàçíîîáðàçèÿ. Ê íàñòîÿùåìó âðåìåíè â âèäå áåëêîâûõ ôîðìóë çàðåãèñòðèðîâàíî áîëåå 5000 îáðàçöîâ ïøåíèöû, ÿ÷ìåíÿ, îâñà èç êîëëåêöèè ÂÈÐ. Ñîñòàâëåíî 20 êàòàëîãîâ áåëêîâûõ ôîðìóë, â òîì ÷èñëå 7 â ýëåêòðîííîì âèäå. Áåëêîâûå ìàðêåðû çà ïî÷òè 40-ëåòíèé îïûò èõ èñïîëüçîâàíèÿ â ðåøåíèè ïðîáëåì ãåíåòè÷åñêèõ ðåñóðñîâ ðàñòåíèé (ãåííûõ áàíêîâ), à òàêæå â ñåëåêöèè, ñåìåííîì êîíòðîëå è ñåìåíîâîäñòâå äîêàçàëè íàäåæíîñòü è îòíîñèòåëüíóþ ïðîñòîòó ïðèìåíåíèÿ íà ïðàêòèêå. Íåñìîòðÿ íà áóðíî ðàçâèâàþùèåñÿ íîâûå ìîëåêóëÿðíûå ïîäõîäû è òåõíîëîãèè, îíè îñòàþòñÿ íàäåæíûì èíñòðóìåíòîì â ðåøåíèè àêòóàëüíûõ, òåîðåòè÷åñêè è ïðàêòè÷åñêè âàæíûõ ïðîáëåì (â òîì ÷èñëå ñòðàòåãè÷åñêè âàæíûõ äëÿ ñòðàíû) èñõîäíîãî ìàòåðèàëà, ñåëåêöèè, ñåìåíîâîäñòâà è ñåìåííîãî êîíòðîëÿ. Âàæíûì àðãóìåíòîì â ïîëüçó âûñêàçàííîãî óòâåðæäåíèÿ ÿâëÿåòñÿ òîò ôàêò, ÷òî, íåñìîòðÿ íà ñèëüíåéøåå äàâëåíèå ñî ñòîðîíû ðàçðàáîò÷èêîâ òàê íàçûâàåìûõ ìîëåêóëÿðíûõ ìåòîäîâ èäåíòèôèêàöèè ñîðòîâ (îñíîâàííûõ íà àíàëèçå ïîëèìîðôèçìà ÄÍÊ) è ôèðì, ïðîèçâîäèòåëåé äîðîãîñòîÿùåãî îáîðóäîâàíèÿ (â ÷àñòíîñòè àìïëèôèêàòîðîâ), ñîðòîâîé êîìèòåòå ISTA ïðîäîëæàåò ðàññìàòðèâàòü ýëåêòðîôîðåç áåëêîâ êàê îñíîâíîé àðáèòðàæíûé ëàáîðàòîðíûé ìåòîä ñåìåííîãî êîíòðîëÿ. Ðàçðàáîòêà ÄÍÊ-ìåòîäîâ, ñîîòâåòñòâóþùèõ òðåáîâàíèÿì ê ñòàíäàðòíûì (àðáèòðàæíûì) ìåòîäàì ñåìåííîãî êîíòðîëÿ, èíòåíñèâíî âåäåòñÿ âî ìíîãèõ çàðóáåæíûõ è ðîññèéñêèõ ëàáîðàòîðèÿõ.  ñâîþ î÷åðåäü, ISTA (Variety Committee Working Group) â 2008 ã. ïðîâåëà ïåðâûé ñðàâíèòåëüíûé èñïûòàòåëüíûé òåñò íà ïðèãîäíîñòü ÄÍÊ(SSR-)-ìàðêåðîâ â êà÷åñòâå ñòàíäàðòíîé 25 ñèñòåìû äëÿ èäåíòèôèêàöèè ñîðòîâ ïøåíèöû, ðèñà, ñîè, êóêóðóçû. Îòìå÷åíà õîðîøàÿ âîñïðîèçâîäèìîñòü ðåçóëüòàòîâ. Ïðîáëåìû âîçíèêëè ñ ñèñòåìàìè âèçóàëèçàöèè, â ÷àñòíîñòè, ðàñõîæäåíèÿ èìåëè ìåñòî â îöåíêå ðàçìåðîâ àëëåëåé.  ïîñëåäóþùèå ãîäû òåñòèðîâàíèå ÄÍÊ-ìåòîäîâ áûëî ïðîäîëæåíî [27]. ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ 1. Èäåíòèôèêàöèÿ ñîðòîâ è ðåãèñòðàöèÿ ãåíîôîíäà êóëüòóðíûõ ðàñòåíèé ïî áåëêàì ñåìÿí / Ïîä ðåä. Â. Ã. Êîíàðåâà. — ÑÏá.: ÂÈÐ, 2000. Ñ. 3 – 181. 2. Êîíàðåâ Â. Ã. Áåëêè ðàñòåíèé êàê ãåíåòè÷åñêèå ìàðêåðû. — Ì.: Êîëîñ, 1983. Ñ. 5 – 25. 3. Êîíàðåâ Â. Ã. / Òð. ïî ïðèêë. áîò., ãåíåò. è ñåëåê. 1987. Ò. 114. Ñ. 3 – 14. 4. Êîíàðåâ Â. Ã. Ìîðôîãåíåç è ìîëåêóëÿðíî-áèîëîãè÷åñêèé àíàëèç ðàñòåíèé. — ÑÏá.: ÂÈÐ, 2001. Ñ. 172 – 195. 5. Êîíàðåâ À. Â. / Àãðàðíàÿ Ðîññèÿ. 2006. ¹ 6. Ñ. 4 – 22. 6. Êîíàðåâ Â. Ã., Ãàâðèëþê È. Ï., Ãóáàðåâà Í. Ê. Ñïîñîá ñîðòîâîé èäåíòèôèêàöèè çåðíà è ìóêè. À. ñ. ¹ 507271. Çàÿâêà 1 ñåíòÿáðÿ 1972 ã.; îïóáë. 11 íîÿáðÿ 1975 ã. Áþë. ¹ 11. 7. Cook R. J. The standartizations of electrophoresis methods for variety identification / Biochemical Identification of Varieties: Mater. of 3rd Int. Symp. ISTA, USSR. — Leningrad: Izd. VIR, 1988. P. 14 – 27. 8. Konarev V. G., Gavriljuk I. P. (eds.). Biochemical Identification of Varieties: Mater. of 3rd Int. Symp. ISTA., 1987. — Leningrad, 1988. P. 28 – 257. 9. Int. Rules for Seed Testing. Rules 1996. Verification of species and cultivar / Seed Sci. Technol. 1996. Suppl. 24. P. 253 – 270. 10. Ðåêîìåíäàöèè ïî èñïîëüçîâàíèþ áåëêîâûõ ìàðêåðîâ â ñîðòîèñïûòàíèè, ñåìåíîâîäñòâå è ñåìåííîì êîíòðîëå / Ïîä ðåä. Â. Ã. Êîíàðåâà. — Ì. – Ë.: Ãîñàãðîïðîì ÑÑÑÐ, ÂÈÐ, 1989. Ñ. 2 – 18. 11. Ñîçèíîâ À. À. Ïîëèìîðôèçì áåëêîâ è åãî çíà÷åíèå â ãåíåòèêå è ñåëåêöèè. — Ì.: Íàóêà, 1985. Ñ. 202 – 223. 12. Êîíàðåâ Â. Ã., Ãàâðèëþê È. Ï., Ãóáàðåâà Í. Ê. Ñîðòîâàÿ èäåíòèôèêàöèÿ è ðåãèñòðàöèÿ ãåíåòè÷åñêèõ ðåñóðñîâ ïøåíèöû ïî ýëåêòðîôîðåòè÷åñêîìó ñïåêòðó ãëèàäèíà / Ãåíåòè÷åñêèå ðåñóðñû ïøåíèöû. — Ë., 1976. Ñ. 113 – 120. 13. Woychik J. H., Boyndy J. A., Dimler R. J. Starch-gel electrophoresis of wheat gluten proteins with concentrated urea / Arch. Biochem. Biophys. 1961. V. 94. P. 477 – 482. 14. Êîíàðåâ À. Â., Ñåìèõîâ Â. Ô., Ïðèìàê Ñ. Ï., Àðåôüåâà Ë. Ï. Î ñîñòàâå ñïèðòîðàñòâîðèìîé ôðàêöèè áåëêîâ ñåìÿí çëàêîâ / Ñ.-õ. áèîë. 1984. ¹ 7. Ñ. 13 – 17. 15. Ãóáàðåâà Í. Ê., Þìàãóçèíà Õ. À., Ïàâëîâà Í. Å. / Òð. ïî ïðèêë. áîò., ãåíåò. è ñåëåê. 1987. Ò. 114. Ñ. 76 – 81. 16. Çåëåíñêàÿ ß. Ã., Êîíàðåâ À. Â., Ëîñêóòîâ È. Ã. è äð. / Àãðàðíàÿ Ðîññèÿ. 2004. ¹ 6. Ñ. 50 – 58. 17. Êîíàðåâ Â. Ã., Ãóáàðåâà Í. Ê., Ãàâðèëþê È. Ï. / Áþë. ÂÈÐ. 1982. Âûï. 119. Ñ. 60 – 63. 18. Ãóáàðåâà Í. Ê., Ðóäåíêî Ì. È., ×åðíîáóðîâà À. Ä. / Òð. ïî ïðèêë. áîò., ãåíåò. è ñåëåê. 1979. Ò. 63. Âûï. 3. Ñ. 24 – 31. 19. Êîíàðåâ À. Â., Ãóáàðåâà Í. Ê., Êîðíþõèí Ä. Ë., Áåðíåð À. / Àãðàðíàÿ Ðîññèÿ. 2004. ¹ 6. Ñ. 30 – 33. 20. Ãóáàðåâà Í. Ê., Ìàðòûíåíêî Í. Ì., Çóåâ Å. Â., Áðûêîâà À. Â. / Òð. ïî ïðèêë. áîò., ãåíåò. è ñåëåê. 2012. Ò. 170. Ñ. 158 – 162. 21. Ïþêêåíåí Â. Ï., Ãóáàðåâà Í. Ê., Ìèòðîôàíîâà Î. Ï. / Àãðàðíàÿ Ðîññèÿ. 2005. ¹ 2. Ñ. 31 – 35. 22. Àëïàòüåâà Í. Â., Ãóáàðåâà Í. Ê. / Àãðàðíàÿ Ðîññèÿ. 2002. ¹ 3. Ñ. 28 – 30. 23. Àëïàòüåâà Í. Â., Ãóáàðåâà Í. Ê. / Àãðàðíàÿ Ðîññèÿ. 2002. ¹ 3. Ñ. 24 – 27. 24. Laemmli U. K. Cleavage of structural protein during assembly of the head of bacteriophage / Natura. 1970. V. 227. No. 4. P. 680 – 685. 26 25. Ãóáàðåâà Í. Ê., Ãàâðèëþê È. Ï., Ìàðòûíåíêî Í. Ì., Åããè Ý. Ý. Ñîâåðøåíñòâîâàíèå ìåòîäîâ ýëåêòðîôîðåçà áåëêîâ äëÿ ðàçëè÷åíèÿ áëèçêîðîäñòâåííûõ ñîðòîâ çëàêîâ / Òåç. äîêë. Ìåæäóíàð. íàó÷. êîíô. «Ãåíåòè÷åñêèå ðåñóðñû ðàñòåíèé — îñíîâà ïðîäîâîëüñòâåííîé áåçîïàñíîñòè è ïîâûøåíèÿ êà÷åñòâà æèçíè», 6 – 8 îêòÿáðÿ. — ÑÏá., 2014. Ñ. 54. 26. Ïðèìåíåíèå ýëåêòðîôîðåçà áåëêîâ â ïåðâè÷íîì ñåìåíîâîäñòâå çåðíîâûõ êóëüòóð: ìåòîä. óêàçàíèÿ / Ïîä ðåä. Â. Ã. Êîíàðåâà è Â. Ã. Åíèêååâà. — ÑÏá.: ÂÈÐ, 1993. Ñ. 18 – 25. 27. Casarini E., Vicario A. L. / ISTA News Bul. April 2008. No. 135. P. 26 – 27. REFERENCES 1. Konarev V. G. (ed.). Identifikatsiya sortov i registratsiya genofonda kul’turnykh rastenii po belkam semyan [Identification and registration of varieties of the gene pool of cultivated plants for seed protein]. — St. Petersburg: Izd. VIR, 2000. P. 3 – 181 [in Russian]. 2. Konarev V. G. Belki rastenii kak geneticheskie markery [Protein plants as genetic markers]. — Moscow: Kolos, 1983. P. 5 – 25 [in Russian]. 3. Konarev V. G. / Tr. Prikl. Bot. Genet. Selek. 1987. V. 114. P. 3 – – 14 [in Russian]. 4. Konarev V. G. Morfogenez i molekulyarno-biologicheskii analiz rastenii [Morphogenesis and molecular biological analysis of plants]. — St. Petersburg: Izd. VIR, 2001. P. 172 – 195 [in Russian]. 5. Konarev A. V. / Agrar. Ross. 2006. No. 6. P. 4 – 22 [in Russian]. 6. Konarev V. G., Gavrilyuk I. P., Gubareva N. K. Sposob sortovoi identifikatsii zerna i muki [A method of identifying high-quality grain and flour]. USSR Inbvntor’s Certificate No. 507271. Byull. Otkryt. Izobret. No. 11 [in Russian]. 7. Cook R. J. The standartizations of electrophoresis methods for variety identification / Biochemical Identification of Varieties: Mater. of 3rd Int. Symp. ISTA, USSR. — Leningrad: Izd. VIR, 1988. P. 14 – 27. 8. Konarev V. G., Gavriljuk I. P. (eds.). Biochemical Identification of Varieties: Mater. of 3rd Int. Symp. ISTA., 1987. — Leningrad, 1988. P. 28 – 257. 9. Int. Rules for Seed Testing. Rules 1996. Verification of species and cultivar / Seed Sci. Technol. 1996. Suppl. 24. P. 253 – 270. 10. Konarev V. G. (ed.). Rekomendatsii po ispol’zovaniyu belkovykh markerov v sortoispytanii, semenovodstve i semennom kontrole [Recommendations for the use of protein markers in variety testing, seed production and seed control]. — Moscow – Leningrad: Izd. Gosagroprom SSSR, VIR, 1989. P. 2 – 18 [in Russian]. 11. Sozinov A. A. Polimorfizm belkov i ego znachenie v genetike i selektsii [Polymorphism of the protein and its significance in genetics and breeding]. — Moscow: Nauka, 1985. P. 202 – 223 [in Russian]. 12. Konarev V. G., Gavrilyuk I. P., Gubareva N. K. Sortovaya identifikatsiya i registratsiya geneticheskikh resursov pshenitsy po élektroforeticheskomu spektru gliadina / Geneticheskie resursy pshenitsy [Wheat genetic resources]. — Leningrad, 1976. P. 113 – 120 [in Russian]. 13. Woychik J. H., Boyndy J. A., Dimler R. J. Starch-gel electrophoresis of wheat gluten proteins with concentrated urea / Arch. Biochem. Biophys. 1961. V. 94. P. 477 – 482. 14. Konarev A. V., Semikhov V. F., Primak S. P., Aref’eva L. P. O sostave spirtorastvorimoi fraktsii belkov semyan zlakov / Sel’.-Khoz. Biol. 1984. No. 7. P. 13 – 17 [in Russian]. 15. Gubareva N. K., Yumaguzina Kh. A., Pavlova N. E. / Tr. Prikl. Bot. Genet. Selek. 1987. V. 114. P. 76 – 81 [in Russian]. 16. Zelenskaya Ya. G., Konarev A. V., Loskutov I. G., et al. / Agrar. Ross. 2004. No. 6. P. 50 – 58 [in Russian]. 17. Konarev V. G., Gubareva N. K., Gavrilyuk I. P. / Byul. VIR. 1982. Issue 119. P. 60 – 63 [in Russian]. Àãðàðíàÿ Ðîññèÿ. 2015. ¹ 11 18. Gubareva N. K., Rudenko M. I., Chernoburova A. D. / Tr. Prikl. Bot. Genet. Selek. 1979. V. 63. Issue 3. P. 24 – 31 [in Russian]. 19. Konarev A. V., Gubareva N. K., Kornyukhin D. L., Berner A. / Agrar. Ross. 2004. No. 6. P. 30 – 33 [in Russian]. 20. Gubareva N. K., Martynenko N. M., Zuev E. V., Brykova A. V. / Tr. Prikl. Bot. Genet. Selek. 2012. V. 170. P. 158 – 162 [in Russian]. 21. Pyukkenen V. P., Gubareva N. K., Mitrofanova O. P. / Agrar. Ross. 2005. No. 2. P. 31 – 35 [in Russian]. 22. Alpat’eva N. V., Gubareva N. K. / Agrar. Ross. 2002. No. 3. P. 28 – 30 [in Russian]. 23. Alpat’eva N. V., Gubareva N. K. / Agrar. Ross. 2002. No. 3. P. 24 – 27 [in Russian]. 24. Laemmli U. K. Cleavage of structural protein during assembly of the head of bacteriophage / Natura. 1970. V. 227. No. 4. P. 680 – – 685. 25. Gubareva N. K., Gavrilyuk I. P., Martynenko N. M., Eggi É. É. [Sovershenstvovanie metodov élektroforeza belkov dlya razlicheniya blizkorodstvennykh sortov zlakov] / Abstrs. of the Int. Sci. Conf. «Geneticheskie resursy rastenii — osnova prodovol’stvennoi bezopasnosti i povysheniya kachestva zhizni [Plant genetic resources — the basis of food security and quality of life]», October 6 – 8, 2014. — St. Petersburg, 2014. P. 54 [in Russian]. 26. Konarev V. G., Enikeeva V. G. (eds.). Primenenie élektroforeza belkov v pervichnom semenovodstve zernovykh kul’tur: metod. ukazaniya [Application of electrophoresis of proteins in primary seed-growing crops: guidelines]. — St. Petersburg: Izd. VIR, 1993. P. 18 – 25. 27. Casarini E., Vicario A. L. / ISTA News Bul. April 2008. No. 135. P. 26 – 27. Ïîñòóïèëà 15.10.2015 Ãóáàðåâà Í. Ê., êàíä. áèîë. íàóê; Ãàâðèëþê È. Ï., äîêò. áèîë. íàóê, ïðîô.; Êîíàðåâ À. Â., äîêò. áèîë. íàóê, ïðîô. Âñåðîññèéñêèé èíñòèòóò ãåíåòè÷åñêèõ ðåñóðñîâ ðàñòåíèé èì. Í. È. Âàâèëîâà (ÂÈÐ) a.konarev@vir.nw.ru Àãðàðíàÿ Ðîññèÿ. 2015. ¹ 11 27