ФАРМАКОЛОГИЯ СВЕРХМАЛЫХ ДОЗ 49 ÑÂÅÐÕÌÀËÛÅ ÄÎÇÛ ËÅÊÀÐÑÒÂÅÍÍÛÕ ÏÐÅÏÀÐÀÒΠ ÕÈÌÈÎÒÅÐÀÏÈÈ ÝÊÑÏÅÐÈÌÅÍÒÀËÜÍÛÕ ÎÏÓÕÎËÅÉ Í.Ï.Êîíîâàëîâà Èíñòèòóò ïðîáëåì õèìè÷åñêîé ôèçèêè ÐÀÍ, ×åðíîãîëîâêà Ìîñêîâñêîé îáë.  ýêñïåðèìåíòàõ íà æèâîòíûõ ñ òðàíñïëàíòèðóåìûìè îïóõîëÿìè èçó÷àëè ïðîòèâîîïóõîëåâóþ àêòèâíîñòü öèòîñòàòèêà ëîíèäàìèíà â ñâåðõìàëûõ äîçàõ, à òàêæå âëèÿíèå ñâåðõìàëûõ äîç ïðåïàðàòîâ ðàçëè÷íîãî áèîëîãè÷åñêîãî äåéñòâèÿ (õåìîñåíñèáèëèçàòîð, èììóíîìîäóëÿòîð, àíòèîêñèäàíò) íà ýôôåêòèâíîñòü àäðèàìèöèíà è öèñïëàòèíà. Ïîêàçàíà ýôôåêòèâíîñòü òàêîãî ñïîñîáà òåðàïèè. Óñòàíîâëåíî ïîâûøåíèå ÷óâñòâèòåëüíîñòè ê ìèòîìèöèíó Ñ ïîäøòàììà ëåéêåìèè Ð388/pí ñ ôåíîòèïîì ìíîæåñòâåííîé ëåêàðñòâåííîé óñòîé÷èâîñòè ïðè êîìáèíèðîâàííîé òåðàïèè ñ õåìîñåíñèáèëèçàòîðîì èç ãðóïïû íèòðîòðèàçîëîâ â ñâåðõìàëûõ äîçàõ. Êëþ÷åâûå ñëîâà: ýêñïåðèìåíòàëüíûå îïóõîëè, õèìèîòåðàïèÿ, öèòîñòàòèêè, ñâåðõìàëûå äîçû Ñîâðåìåííàÿ êîíöåïöèÿ ïðîòèâîîïóõîëåâîé õèìèîòåðàïèè áàçèðóåòñÿ íà èñïîëüçîâàíèè ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ â äîçàõ, áëèçêèõ ê ÌÏÄ, ÷òî ïðè íèçêîé ñåëåêòèâíîñòè äåéñòâèÿ öèòîñòàòèêîâ âåäåò ê ïîÿâëåíèþ ñåðüåçíûõ ïîáî÷íûõ ýôôåêòîâ, óõóäøàþùèõ êà÷åñòâî æèçíè ïàöèåíòîâ.  ñâÿçè ñ ýòèì ïîèñê ïóòåé è ìåòîäîâ èñïîëüçîâàíèÿ íèçêèõ è ñâåðõíèçêèõ äîç ïðîòèâîîïóõîëåâûõ ïðåïàðàòîâ ïðè ñîõðàíåíèè ñïåöèôè÷åñêîãî ýôôåêòà ÿâëÿåòñÿ âåñüìà àêòóàëüíûì.  ïîñëåäíåå âðåìÿ ïîÿâëÿþòñÿ ïóáëèêàöèè, â êîòîðûõ íà êëèíè÷åñêîì ìàòåðèàëå ïîêàçàíî, ÷òî ýôôåêòèâíîñòü íèçêèõ äîç íåêîòîðûõ öèòîñòàòèêîâ, íàïðèìåð, öèñïëàòèíà, ñðàâíèìà ñ åãî ýôôåêòèâíîñòüþ â âûñîêèõ äîçàõ, áëèçêèõ ê ÌÏÄ [14]. Ýôôåêò ñâåðõíèçêèõ äîç è êîíöåíòðàöèé ôèçèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ ñîåäèíåíèé áûë îáíàðóæåí â ðàçëè÷íûõ áèîëîãè÷åñêèõ ñèñòåìàõ è íà ðàçëè÷íûõ óðîâíÿõ [1,2]. Èìåþòñÿ òàêæå íàáëþäåíèÿ, ñâèäåòåëüñòâóþùèå îá àêòèâíîñòè íåêîòîðûõ ïðîòèâîîïóõîëåâûõ ïðåïàðàòîâ â ñâåðõìàëûõ äîçàõ [5,8]. Öåëüþ íàñòîÿùåé ðàáîòû ÿâèëîñü èçó÷åíèå âëèÿíèÿ ïðîòèâîîïóõîëåâûõ öèòîñòàòèêîâ â ñâåðõìàëûõ äîçàõ íà ðîñò ýêñïåðèìåíòàëüíûõ îïóõîëåé ó æèâîòíûõ, à òàêæå ýôôåêòà ñîâìåñòíîãî ââåäåíèÿ öèòîñòàòèêîâ â ñóáòåðàïåâòè÷åñêèõ äîçàõ ñ ðàçëè÷íûìè ìîäèôèêàòîðàìè áèîëîãè÷åñêèõ ðåàêöèé â ñâåðõìàëûõ äîçàõ. ÌÅÒÎÄÈÊÀ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß Â ðàáîòå èñïîëüçîâàíû ñëåäóþùèå ýêñïåðèìåíòàëüíûå ìîäåëè îïóõîëåé: ëåéêåìèè L1210 è Ð388, ëåéêåìèÿ Ð388/ðí — ïîäøòàìì ñ ôåíîòèïîì è ãåíîòèïîì ìíîæåñòâåííîé ëåêàðñòâåííîé óñòîé÷èâîñòè [4], êàðöèíîìà ëåãêèõ Ëüþèñ, ìåëàíîìà Â-16. Îïóõîëè ïåðåâèâàëè ïî ñòàíäàðòíîé ìåòîäèêå [7].  îïûòàõ èñïîëüçîâàëè ìûøåé BDF1 ìàññîé 20-22 ã. Îöåíèâàëè ñòåïåíü óâåëè÷åíèÿ ñðåäíåé ïðîäîëæèòåëüíîñòè æèçíè ëå÷åíûõ æèâîòíûõ ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëåì, ÷èñëî èçëå÷åííûõ (âûæèâøèõ) æèâîòíûõ, èíäåêñ èíãèáèðîâàíèÿ ìåòàñòàçîâ (ÈÈÌ). Ïîñëåäíèé ðàññ÷èòûâàëè ïî ôîðìóëå: ÈÈÌ= (ÀʽÂÊ)-(ÀνÂÎ) ÀʽÂÊ ½100%, ãäå ÀÊ è ÀÎ — ÷àñòîòà ìåòàñòàçèðîâàíèÿ, ÂÊ è ÂÎ — ñðåäíåå ÷èñëî ìåòàñòàçîâ â êîíòðîëüíîé è îïûòíîé ãðóïïàõ ñîîòâåòñòâåííî.  êàæäîé ãðóïïå áûëî 6-10 æèâîòíûõ, îïûòû ïîâòîðÿëè äâàæäû.  ðàáîòå èñïîëüçîâàëè öèñïëàòèí (“Ebewe”), ìèòîìèöèí C (“Kyova”), àäðèàìèöèí (“PharmItalia”), ëîíèäàìèí, ïðåäîñòàâëåííûé Ðèìñêèì Óíèâåðñèòåòîì “La Sapienza”, ñàíàçîë (ÀÊ-2123, ïðåäîñòàâëåí Óíèâåðñèòåòîì 50 Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2002, Приложение № 4 Êèîòî), ïðåïàðàò Ñ16 (àíòèîêñèäàíò, ñèíòåçèðîâàííûé â ÈÏÕÔ ÐÀÍ). Âñå ïðåïàðàòû ââîäèëè âíóòðèáðþøèííî â âèäå âîäíûõ ðàñòâîðîâ. ÐÅÇÓËÜÒÀÒÛ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß Ïåðâè÷íîé ìèøåíüþ äåéñòâèÿ ëîíèäàìèíà ÿâëÿþòñÿ ìèòîõîíäðèè. Ïðåïàðàò ñåëåêòèâíî èçìåíÿåò ýíåðãåòè÷åñêèé ìåòàáîëèçì îïóõîëåâûõ êëåòîê, èíãèáèðóåò ðåïàðàöèþ ÄÍÊ [13].  íàøèõ îïûòàõ ëîíèäàìèí â äîçàõ 10—15-10—19 ìã/êã ñëàáî, íî ñòàòèñòè÷åñêè çíà÷èìî èíãèáèðîâàë ïðîöåññ ìåòàñòàçèðîâàíèÿ (24-56%). Ýôôåêò ïîâûøàëñÿ ñ óâåëè÷åíèåì äîçû ïðåïàðàòà îò 10—6 äî 50 ìã/êã (69-95% èíãèáèðîâàíèÿ, ðèñ. 1).  öåëîì ìåëàíîìà Â-16 ìåíåå ÷óâñòâèòåëüíà ê ëîíèäàìèíó. Îäíàêî ñëåäóåò îòìåòèòü, ÷òî ïðåïàðàò â äîçå 10—15 ìã/êã èíãèáèðóåò ìåòàñòàòè÷åñêèé ïðîöåññ íà 77%. Òàêèì îáðàçîì, ëîíèäàìèí ïðîÿâëÿåò îïðåäåëåííóþ àíòèìåòàñòè÷åñêóþ àêòèâíîñòü, ïðè÷åì íå òîëüêî â òåðàïåâòè÷åñêèõ, íî è â íèçêèõ è ñâåðõìàëûõ äîçàõ. Ïðåïàðàò ñàíàçîë (3-íèòðîòðèàçîë) èñïîëüçóåòñÿ â êëèíèêå êàê ãèïîêñè÷åñêèé ðàäèîñåíñèáèëèçàòîð [12]. Ðàíåå íàìè ïîêàçàíî, ÷òî ñàíàçîë îáëàäàåò çíà÷èòåëüíîé àíòèìåòàñòè÷åñêîé àêòèâíîñòüþ [10], ÿâëÿåòñÿ ìîùíûì õåìîñåíñèáèëèçàòîðîì [11] è ïðîÿâëÿåò èììóíîìîäóëèðóþùèå ñâîéñòâà [6].  íàñòîÿùåì èññëåäîâàíèè ñòåïåíü ïîäàâëåíèÿ ìåòàñòàòè÷åñêîãî ïðîöåññà ïðè ââåäåíèè ñàíàçîëà â äîçàõ 10—12 è 50 ìã/êã áûëà àíàëîãè÷íîé: ÈÈÌ ñîñòàâèë 93% (ðèñ. 2). Ýêñïåðèìåíòû ñ èñïîëüçîâàíèåì ñàíàçîëà â äîçå 10—10 ìã/êã â êà÷åñòâå õåìîñåíñèáèëèçàòîðà ïðè òåðàïèè ëåéêåìèè Ð388 öèñïëàòèíîì òàêæå ïðîäåìîíñòðèðîâàëè åãî ýôôåêòèâíîñòü: êîìáèíèðîâàííàÿ òåðàïèÿ öèñïëàòèíîì è ñàíàçîëîì ïðèâîäèëà ê áîëåå çíà÷èìîìó óâåëè÷åíèþ ñðåäíåé ïðîäîëæèòåëüíîñòè æèçíè (äî 240%) è äîëè âûæèâøèõ æèâîòíûõ (äî 78%) ïî ñðàâíåíèþ ñ òåðàïèåé îäíèì öèñïëàòèíîì (76 è 62% ñîîòâåòñòâåííî). Õåìîñåíñèáèëèçèðóþùèé ýôôåêò îòìå÷åí ïðè èñïîëüçîâàíèè ñâåðõíèçêèõ äîç ïðåïàðàòà èç êëàññà àíòèîêñèäàíòîâ. Íå îáëàäàÿ ñîîòâåòñòâåííîé ïðîòèâîîïóõîëåâîé àêòèâíîñòüþ â äîçå 10—10 ìã/êã, ïðåïàðàò C16 â òîé æå äîçå ïðè ñîâìåñòíîì ââåäåíèè ñ àäðèàìèöèíîì (4 ìã/êã) îáåñïå÷èâàë óâåëè÷åíèå ñðåäíåé ïðîäîëæèòåëüíîñòè æèçíè ìûøåé ñ ëåéêåìèåé L1210 íà 150% è äîëè âûæèâøèõ æèâîòíûõ äî 60% ïðîòèâ 110 è 18% ñîîòâåòñòâåííî ïðè èçîëèðîâàííîì ïðèìåíåíèè àäðèàìèöèíà. Ðèñ. 1. Çàâèñèìîñòü êîëè÷åñòâà ìåòàñòàçîâ êàðöèíîìû ëåãêèõ Ëüþèñ (1) è ìåëàíîìû B-16 (2) îò äîçû ëîíèäàìèíà. Ïóíêòèðíûå ëèíèè 1 è 2 — ãðàíèöû ñîîòâåòñòâóþùèõ êîíòðîëüíûõ çíà÷åíèé. Âåñüìà èíòåðåñíûìè è âàæíûìè ïðåäñòàâëÿþòñÿ ðåçóëüòàòû, ïîëó÷åííûå â ýêñïåðèìåíòàõ ñ ëåêàðñòâåííî-óñòîé÷èâîé îïóõîëüþ. Èçâåñòíî, ÷òî ìíîæåñòâåííàÿ ëåêàðñòâåííàÿ óñòîé÷èâîñòü ñåðüåçíî îãðàíè÷èâàåò âîçìîæíîñòè õèìèîòåðàïèè îïóõîëåé. Ëåéêåìèÿ Ð388/ðí ïðàêòè÷åñêè íå ÷óâñòâèòåëüíà ê ìèòîìèöèíó Ñ — óâåëè÷åíèå ñðåäíåé ïðîäîëæèòåëüíîñòè æèçíè æèâîòíûõ ñîñòàâëÿåò 50-55%, à ïðè äîáàâëåíèè ñàíàçîëà â ñâåðõìàëûõ äîçàõ ýòîò ïîêàçàòåëü âîçðàñòàåò äî 175% (ðèñ. 3). Ðèñ. 2. Çàâèñèìîñòü àíòèìåòàñòàòè÷åñêîãî ýôôåêòà ñàíàçîëà â îòíîøåíèè ìåëàíîìû Â-16 îò äîçû ïðåïàðàòà. ÈÈÌ — èíäåêñ èíãèáèðîâàíèÿ ìåòàñòàçîâ. ФАРМАКОЛОГИЯ СВЕРХМАЛЫХ ДОЗ 51 ìîëåêóë. Âîçìîæíî, ÷òî ìåòàáîëè÷åñêàÿ êîîïåðàöèÿ ìåæäó êëåòêàìè ÿâëÿåòñÿ îáùåáèîëîãè÷åñêèì ÿâëåíèåì è ýôôåêò óëüòðàíèçêèõ äîç ìîæåò áûòü îáúÿñíåí ñ ýòèõ ïîçèöèé. Ïðåäëàãàåòñÿ êîíöåïöèÿ, áàçèðóþùàÿñÿ íà ïðåäñòàâëåíèè î ñëîæíîé èåðàðõè÷åñêîé ñòðóêòóðå êëåòî÷íîé ðåãóëÿöèè, ïðè êîòîðîé îòâåò íà ñèëüíûå è ñëàáûå âîçäåéñòâèÿ ðåàëèçóåòñÿ ðàçíûìè ìåõàíèçìàìè [3]. Íåîáõîäèìî äàëüíåéøåå èññëåäîâàíèå ýôôåêòà ñâåðõíèçêèõ äîç ôèçèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ ñîåäèíåíèé ñ ïåðñïåêòèâîé èõ ïðàêòè÷åñêîãî èñïîëüçîâàíèÿ â õèìèîòåðàïèè îïóõîëåé. ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ Ðèñ. 3. Âëèÿíèå ñàíàçîëà íà ÷óâñòâèòåëüíîñòü ëåéêåìèè P388/ðí ñ ôåíîòèïîì ìíîæåñòâåííîé ëåêàðñòâåííîé óñòîé÷èâîñòè ê ìèòîìèöèíó C â äîçå 1.5 ìã/êã. ÓÑÏÆ — óâåëè÷åíèå ñðåäíåé ïðîäîëæèòåëüíîñòè æèçíè. Ïóíêòèðíàÿ ëèíèÿ — ìèòîìèöèí C, êðèâàÿ — ìèòîìèöèí C+ñàíàçîë. Òàêèì îáðàçîì, ïðåäñòàâëåííûå äàííûå ñâèäåòåëüñòâóþò î íàëè÷èè àíòèìåòàñòàòè÷åñêîãî è õåìîñåíñèáèëèçèðóþùåãî ýôôåêòà ðàçëè÷íûõ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ â ñâåðõíèçêèõ äîçàõ. Ìåõàíèçìû äåéñòâèÿ óëüòðàíèçêèõ äîç ôèçèîëîãè÷åñêè àêòèâíûõ ñîåäèíåíèé â íàñòîÿùåå âðåìÿ àêòèâíî èçó÷àþòñÿ. Ïîñêîëüêó ïðîöåññ ìåòàñòàçèðîâàíèÿ ÿâëÿåòñÿ èììóíîçàâèñèìûì, ìîæíî ïðåäïîëîæèòü, ÷òî àíòèìåòàñòàòè÷åñêèé ýôôåêò ñàíàçîëà è ëîíèäàìèíà îïîñðåäóåòñÿ âîçäåéñòâèåì íà èììóíîçàâèñèìûå ñòàäèè ìåòàñòàçèðîâàíèÿ. Èçâåñòíî, ÷òî çíà÷èòåëüíûé èììóííûé îòâåò ìîæåò íàáëþäàòüñÿ ïîñëå ìèíèìàëüíîãî âîçäåéñòâèÿ. Èçâåñòåí ôåíîìåí ìåòàáîëèòè÷åñêîé êîîïåðàöèè ìåæäó êëåòêàìè [9]. Êëåòêà ìîæåò äåéñòâîâàòü êàê ðåöèïèåíò ìîëåêóë îò îäíîé êëåòêè è êàê äîíîð ìîëåêóë äëÿ äðóãîé. Ïîäîáíàÿ âòîðè÷íàÿ ìåòàáîëè÷åñêàÿ êîîïåðàöèÿ ìîæåò èíäóöèðîâàòü öåïíóþ ðåàêöèþ ïåðåäà÷è 1. Áóðëàêîâà Å.Á. // Ðîñ. õèì. æóðí. 1999. Ò. 42, ¹ 5. Ñ. 3-11. 2. Áóðëàêîâà Å.Á. // Âåñòí. ÐÀÍ. 1994. Ò. 64, Âûï. 5. Ñ. 425-431. 3. Áóðëàêîâà Å.Á., Êîíðàäîâ À.À., Õóäÿêîâ È.Â. // Èçâ. ÀÍ ÑÑÑÐ, Ñåð. áèîë. 1990. ¹ 2. Ñ. 184-187. 4. Ãîí÷àðîâà Ñ.À., Äåìèäîâà Í.Ñ., Øèðÿåâà Î.À. è äð. // Ýêñïåð. îíêîë. 1987. Ò. 9. Ñ. 42-47. 5. Êðóòîâà Ò.Â., ×åðíèêîâà Ñ.Á., Êîíðàäîâ À.À., Áóðëàêîâà Å.Á. // Èçâ. ÐÀÍ, Ñåð. áèîë. 1992. ¹ 5. Ñ. 511-514. 6. ×åðäûíöåâà Í.Â., Êîêîðåâ Î.Â., Êîíîâàëîâà Í.Ï., Êàãèÿ Â.Ò. // Ýêñïåð. îíêîë. 1997. Ò. 19. Ñ. 333-337. 7. Ýêñïåðèìåíòàëüíàÿ îöåíêà ïðîòèâîîïóõîëåâûõ ïðåïàðàòîâ â ÑÑÑÐ è ÑØÀ / Ïîä ðåä. Ç.Ï.Ñîôüèíîé. Ì., 1979. 8. Bonavida B., Safrit J.,Tsuchitani T., Zighelboim J. // Ultra low doses / Ed. C.Doutremepuich. L., Washington, 1991. P. 27-29. 9. Frankfurt O.S., Seckinger D., Sugarbaker E.V. // Cancer Res. 1991. Vol. 51, N 4. P. 1190-1195. 10. Konovalova N., Volkova L., Tatyanenko L. et al. // Neoplasma. 1997. Vol. 44, N 6. P. 361-365. 11. Konovalova N., Diachkovskaya R., Volkova L. et al. // Radiosensitization Newsletter. 1991. N 10. P. 1-4. 12. Sakano K., Kimura R., Shibianoto Y. et al. // Ibid. 1986. Vol. 5, N 2. P. 1-2. 13. Silvestrini B. // Semin. Oncol. 1991. Vol. 18. N 2, Suppl. 4. P. 2-6. 14. Toge T., Nakazato H., Nishiyamam et al. // Gan To Kagaku Ryoho. 2000. Vol. 27, N 4. P. 549-558.