Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2002, Приложение № 4 58 ÌÎÄÈÔÈÊÀÖÈß ÕÈÌÈÎÒÅÐÀÏÅÂÒÈ×ÅÑÊÎÃÎ ÝÔÔÅÊÒÀ ÀÄÐÈÀÁËÀÑÒÈÍÀ ÌÀËÛÌÈ ÄÎÇÀÌÈ ÑÈÍÒÅÒÈ×ÅÑÊÎÃÎ ÀÍÒÈÎÊÑÈÄÀÍÒÀ Í.Ï.Ïàëüìèíà, Â.Ä.Ãàèíöåâà, Å.Á.Áóðëàêîâà Èíñòèòóò áèîõèìè÷åñêîé ôèçèêè èì. Í.Ì.Ýìàíóýëÿ ÐÀÍ, Ìîñêâà Âïåðâûå óñòàíîâëåíî, ÷òî ñèíòåòè÷åñêèé àíòèîêñèäàíò (êàëèåâàÿ ñîëü ôåíîçàíà) â ñâåðõìàëûõ äîçàõ 10—12-10—17 Ì çíà÷èòåëüíî óâåëè÷èâàåò ñðåäíåå âðåìÿ æèçíè æèâîòíûõ-îïóõîëåíîñèòåëåé ïðè êîìáèíèðîâàííîì ïðèìåíåíèè ñ ïðîòèâîîïóõîëåâûì àíòèáèîòèêîì àäðèàìèöèíîì â òåðàïåâòè÷åñêîé äîçå (8 ìã/êã). Äîïîëíèòåëüíûé ýôôåêò ëå÷åíèÿ ïî ñðàâíåíèþ ñ èñïîëüçîâàíèåì îäíîãî àäðèàìèöèíà çàâèñèò îò äîçû àíòèîêñèäàíòà è äîñòèãàåò ìàêñèìàëüíûõ çíà÷åíèé ïðè êîíöåíòðàöèÿõ ôåíîçàíà 10—17 è 10—15 Ì. Ïðè ýòèõ êîíöåíòðàöèÿõ ôåíîçàíà êàëèÿ îòìå÷åíû íå òîëüêî óâåëè÷åíèå ñðåäíåãî âðåìåíè æèçíè, íî è âûæèâàåìîñòü (10-20%) æèâîòíûõ, ÷åãî íå íàáëþäàëîñü ïðè èñïîëüçîâàíèè îäíîãî àäðèàìèöèíà. Êëþ÷åâûå ñëîâà: ñâåðõìàëûå äîçû, êîìáèíèðîâàííàÿ õèìèîòåðàïèÿ, ñèíòåòè÷åñêèé àíòèîêñèäàíò Ðàíåå íàìè óñòàíîâëåíî, ÷òî ìíîãèå áèîëîãè÷åñêè àêòèâíûå âåùåñòâà ýôôåêòèâíû íå òîëüêî â “ôèçèîëîãè÷åñêèõ” (10—3-10—6 Ì), íî è â óëüòðàíèçêèõ (10—12-10—18Ì) êîíöåíòðàöèÿõ [1,3,4].  ÷àñòíîñòè, ïîêàçàíî, ÷òî ñèíòåòè÷åñêèé àíòèîêñèäàíò (êàëèåâàÿ ñîëü ôåíîçàíà — ÔÊ) ÿâëÿåòñÿ âåñüìà ýôôåêòèâíûì àêòèâàòîðîì ïðîòåèíêèíàçû Ñ, ïðè÷åì ñòåïåíü åãî âîçäåéñòâèÿ îäèíàêîâà ïðè èñïîëüçîâàíèè êàê â äîçå 10—4 Ì, òàê è â äîçå 10—16 Ì [3,4]. Ñóùåñòâóåò ìíåíèå, ÷òî ïðîòåèíêèíàçà Ñ ÿâëÿåòñÿ îäíîé èç ìèøåíåé äåéñòâèÿ ïðîòèâîîïóõîëåâûõ àãåíòîâ [7].  ñâÿçè ñ ýòèì ó íàñ âîçíèêëî ïðåäïîëîæåíèå î âîçìîæíîñòè ìîäèôèêàöèè ýôôåêòà “êëàññè÷åñêèõ” ïðîòèâîîïóõîëåâûõ ñðåäñòâ äîïîëíèòåëüíûì ââåäåíèåì àíòèîêñèäàíòîâ â ñâåðõìàëûõ äîçàõ. âî âñåõ ñëó÷àÿõ ÔÊ â äîçàõ 10—17, 10—15, 10—12, 10—11, 10—10, 10—9 èëè 10—7 Ì ââîäèëè çà 1 ÷ äî ÀÁ. Ìûøàì êîíòðîëüíûõ ãðóïï (òàêæå ïî 10 îñîáåé) ââîäèëè òîëüêî ÀÁ. Âîçäåéñòâèå ïðåïàðàòîâ íà îïóõîëåâûé ïðîöåññ îöåíèâàëè ïî îòíîñèòåëüíîìó óâåëè÷åíèþ ñðåäíåãî âðåìåíè æèçíè (ÑÂÆ) æèâîòíûõ, ðàññ÷èòûâàåìîìó ïî ôîðìóëå: ÌÅÒÎÄÈÊÀ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß ÐÅÇÓËÜÒÀÒÛ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß Â ðàáîòå èñïîëüçîâàíî 480 ìûøåé (C57Bl½DBA2) F1 (ïèòîìíèê “Ñòîëáîâàÿ”). Êëåòêè àñöèòíîé ëåéêåìèè Ð-388 ïåðåâèâàëè âíóòðèáðþøèííî íà 7-å ñóòêè ðîñòà îïóõîëè ïî 106 êëåòîê/ìûøü â îáúåìå 0.2 ìë. Àäðèàáëàñòèí (ÀÁ, 8 ìã/êã [2]) è ÔÊ ââîäèëè âíóòðèáðþøèííî îäíîêðàòíî íà 1, 3 èëè 5-å ñóòêè ïîñëå ïåðåâèâêè îïóõîëè. Ìûøè îïûòíûõ ãðóïï (ïî 10 îñîáåé â êàæäîé) ïîëó÷àëè êîìáèíèðîâàííóþ òåðàïèþ ÀÁ+ÔÊ, ïðè÷åì Äëÿ îöåíêè ýôôåêòèâíîñòè äîïîëíèòåëüíîãî àãåíòà â êîìáèíèðîâàííîì õèìèîòåðàïåâòè÷åñêîì âîçäåéñòâèè íà îðãàíèçì æèâîòíîãî-îïóõîëåíîñèòåëÿ íàèáîëåå àäåêâàòíûé îòâåò ìîæíî ïîëó÷èòü ïðè îäíîêðàòíîì ââåäåíèè êàê “êëàññè÷åñêîãî” ëåêàðñòâåííîãî ñðåäñòâà, òàê è àäúþâàíòà. Èçâåñòíî, ÷òî îäíîêðàòíîå ïðèìåíåíèå ÀÁ âîçìîæíî â èíòåðâàëå äîç 5-12 ìã/êã ìàññû æèâîòíîãî. Ðàíåå íàìè óñòàíîâëåíî, ÷òî íàèáî- ÑÂÆË-ÑÂÆÍ ÑÂÆÍ ½100%, ãäå ÑÂÆË è ÑÂÆÍ — ÑÂÆ ëå÷åíûõ (ïîëó÷àëè ÀÁ èëè ÀÁ+ÔÊ) è íåëå÷åíûõ ìûøåé ñîîòâåòñòâåííî. Ðåçóëüòàòû îáðàáàòûâàëè ñòàòèñòè÷åñêè ñ èñïîëüçîâàíèåì t êðèòåðèÿ Ñòüþäåíòà. ФАРМАКОЛОГИЯ СВЕРХМАЛЫХ ДОЗ 59 ÑÂÆ ìûøåé (C57Bl½DBA2)F1, ïîëó÷àâøèõ ÀÁ â äîçå 8 ìã/êã íà ðàçíûõ ñðîêàõ ïîñëå ïåðåâèâêè îïóõîëè Ð-388 (M±m, n=10) Ñðîêè ââåäåíèÿ, ñóò Ïîêàçàòåëü Êîíòðîëü 1-å 3-è 5-å 13.0±0.2 18.2±0.3 19.0±0.5 17.2±0.3 Увеличение СВЖ, сут — 5.2±0.3 6.0±0.5 4.2±0.3 % к контролю — 40±5 47±6 32±7 СВЖ, сут ëåå àäåêâàòíîé äëÿ òàêèõ ýêñïåðèìåíòîâ ÿâëÿåòñÿ äîçà ÀÁ, ðàâíàÿ 8 ìã/êã [2]. Äëÿ âûáîðà îïòèìàëüíûõ ñðîêîâ ââåäåíèÿ ÀÁ ìû ïðîâåëè ýêñïåðèìåíòû ïî îïðåäåëåíèþ ÑÂÆ îïóõîëåíîñèòåëåé ïîñëå ââåäåíèÿ ÀÁ â ýòîé äîçå íà 1, 3 è 5-å ñóòêè ïîñëå ïåðåâèâêè îïóõîëè (òàáëèöà). ÀÁ óâåëè÷èâàë ÑÂÆ âî âñåõ ñëó÷àÿõ, íî íàèáîëüøèé ýôôåêò îòìå÷åí ïðè ââåäåíèè íà 3-è ñóòêè ïîñëå èíîêóëÿöèè (òàáëèöà).  ñâÿçè ñ ýòèì â äàëüíåéøèõ ýêñïåðèìåíòàõ (îöåíêà ýôôåêòèâíîñòè êîìáèíèðîâàííîé òåðàïèè) ìû ââîäèëè ÀÁ íà 3-è ñóòêè ïîñëå ïåðåâèâêè îïóõîëè. Ïðè èñïîëüçîâàíèè îäíîãî ÀÁ íàáëþäàëè óâåëè÷åíèå ÑÂÆ ïî ñðàâíåíèþ ñ íåëå÷åíûì êîíòðîëåì íà 44±4%; äîáàâëåíèå ê ÀÁ ðàçëè÷íûõ äîç ÔÊ ïðèâîäèëî ê ñóùåñòâåííîé ìîäèôèêàöèè ýôôåêòà ÀÁ, ïðè÷åì äëÿ íåñêîëüêèõ êîíöåíòðàöèé ÔÊ ïîëó÷åí ëó÷øèé ðåçóëüòàò, ÷åì ïðè ââåäåíèè îäíîãî ÀÁ (ðèñóíîê): ïðè êîìáèíèðîâàííîé õèìèîòåðàïèè 10% æèâîòíûõ âûæèâàëî, â òî âðåìÿ êàê ïðè ëå÷åíèè îäíèì ÀÁ ïîãèáàëè âñå æèâîòíûå, êðîìå òîãî, ÑÂÆ ïîãèáøèõ îïóõîëåíîñèòåëåé áûëî áîëüøå òàêîâîãî ïðè ëå÷åíèè îäíèì ÀÁ. Íàïðèìåð, ñîâìåñòíîå ââåäåíèå ÀÁ è ÔÊ â óëüòðàíèçêîé êîíöåíòðàöèè (10—17 Ì) íå òîëüêî äàâàëî 10% âûæèâàåìîñòü æèâîòíûõ, íî è óâåëè÷èâàëî ÑÂÆ îïóõîëåíîñèòåëåé íà 83%. Èíòåðåñíî, ÷òî ïðèìåðíî ðàâíûå ïîêàçàòåëè âûæèâàåìîñòè è ÑÂÆ çàðåãèñòðèðîâàíû ïðè èñïîëüçîâàíèè ÔÊ êàê â êîíöåíòðàöèÿõ 10—7 è 10—9 Ì, òàê è 10—12 è 10—17 Ì (ðèñóíîê). Êîíöåíòðàöèîííûå çàâèñèìîñòè äîçà—ýôôåêò èìåþò îäèí è òîò æå õàðàêòåð: â îáëàñòè ñâåðõìàëûõ (10—12-10—17 Ì) è îòíîñèòåëüíî áîëüøèõ (10—10-10—7 Ì) êîíöåíòðàöèé íàáëþäàåòñÿ ïîëîæèòåëüíûé ýôôåêò ïî îáîèì ïîêàçàòåëÿì, à â ïðîìåæóòêå (10—11 Ì) íàáëþäàåòñÿ íå òîëüêî îòñóòñòâèå óñèëåíèÿ ýôôåêòà ÀÁ, íî è ïîëíàÿ åãî ëèêâèäàöèÿ: è âûæèâàåìîñòü, è ÑÂÆ ðàâíû 0. Ïî ôîðìå è äðóãèì ïðèçíàêàì ýòà äîçîâàÿ çàâèñèìîñòü ïîëíîñòüþ ñîîòâåòñòâóåò êðèâûì, îïèñûâàþùèì äåéñòâèå õèìè÷åñêèõ âåùåñòâ â óëüòðàíèçêèõ êîíöåíòðàöèÿõ [5,6]. Òàêèì îáðàçîì, ïîëó÷åííûå äàííûå ñâèäåòåëüñòâóþò î òîì, ÷òî ÔÊ â ñâåðõìàëûõ äîçàõ ìîäèôèöèðóåò ýôôåêò ïðîòèâîîïóõîëåâûõ àãåíòîâ. Íà íàø âçãëÿä, ïîëó÷åíèå äîïîëíèòåëüíîé (äàæå ìèíèìàëüíîé) âûæèâàåìîñòè è óâåëè÷å- Èçìåíåíèå ñðåäíåãî âðåìåíè æèçíè (à) è âûæèâàåìîñòè (á) æèâîòíûõ-îïóõîëåíîñèòåëåé ïðè ââåäåíèè àäðèàáëàñòèíà íà 3-è ñóòêè ïîñëå ïåðåâèâêè îïóõîëè (1) è ïðè êîìáèíèðîâàííîé òåðàïèè àäðèàáëàñòèíîì è ôåíîçàíîì (2) â çàâèñèìîñòè îò êîíöåíòðàöèè êàëèåâîé ñîëè ôåíîçàíà. 60 Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2002, Приложение № 4 íèå ïðîäîëæèòåëüíîñòè æèçíè íà 20-30% ÿâëÿþòñÿ äîñòàòî÷íûì îñíîâàíèåì, ÷òîáû ðåêîìåíäîâàòü êëèíè÷åñêîå èñïîëüçîâàíèå ýòîãî íåòîêñè÷íîãî àíòèîêñèäàíòà. Ðàáîòà âûïîëíåíà ïðè ôèíàíñîâîé ïîääåðæêå Ïðàâèòåëüñòâà Ìîñêâû (ãðàíò ¹ 225/97-ÎÍÊ2-ÒÅÌÍ). ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ 1. Ïàëüìèíà Í.Ï., Áîãäàíîâà Í.Ã., Ìàëüöåâà Å.Ë., Ïûíçàðü Å.È. // Áèîë. ìåìáðàíû. 1992. Ò. 89, ¹ 2. Ñ. 810-819. 2. Ïàëüìèíà Í.Ï., Ãàèíöåâà Â.Ä., Äæàïàðîâà À.À., Áóðëàêîâà Å.Á. // Áèîõèìèÿ. 1988. Ò. 53, Âûï. 11. Ñ. 1888-1894. 3. Ïàëüìèíà Í.Ï., Ìàëüöåâà Å.Ë., Áóðëàêîâà Å.Á. // Õèì. ôèçèêà. 1995. Ò. 14, ¹ 11. Ñ. 47-60. 4. Ïàëüìèíà Í.Ï., Ìàëüöåâà Å.Ë., Êóðíàêîâà Í.Â., Áóðëàêîâà Å.Á. // Áèîõèìèÿ. 1994. Ò. 59, Âûï. 2. Ñ. 199-212. 5. Burlakova Ye.B., Konradov A.A., Khudyakov I.N. // Nonlinear Biol. 1991. Vol. 1. P. 77-82. 6. Delikonstantinos G., Kopeikina-Tsiboukidon L., Villiton K. // Biochem. Pharmacol. 1987. Vol. 36. P. 1153-1157. 7. O’Brian C.A. // Oncol. Report. 1998. Vol. 5, N 2. P. 305-309.