Задача№1. В приемное отделение больницы поступил подросток, вероятно с алкогольным отравлением. При исследовании кислотно-основного состояния получено: рН крови 7,23, [HCO3 – ] 14 ммоль/л, рСО2 58 мм рт.ст, остаточные анионы 18 ммоль/л. Какой тип нарушения КОС наблюдается? Укажите механизмы компенсации. Этанол в своем метаболизме превращается в ацетил-SКоА, судьба которого двояка: либо сгорает в ЦТК, либо превращается в кетоновые тела. При отравлении этанолом доля ацетильных групп, превращающихся в кетоновые тела, возрастает, возникает кетоацидоз, сопровождающийся одышкой. Если имеется алкогольная кома, то параллельно нарушается деятельность дыхательного центра, снижение вентиляции легких и гипоксия тканей, и к кетоацидозу добавляется лактоацидоз. К тому же из-за эффекта Бора снижается сродство гемоглобина к кислороду. Лабораторно будет обнаружено снижение рН, [НСО3 – ] и, вероятно, рСО2. Наличие и направление сдвига показателей рСО2 и pO2, HbO2 зависит от степени отравления и активности дыхательного центра. Задача2.У больного вследствие заболевания желудочно-кишечного тракта нарушены процессы переваривания и всасывания. Какие изменения концентрации общего белка сыворотки крови и его фракций можно ожидать при обследовании? Как получить белковые фракции (принцип метода)? Охарактеризуйте их. Типы протеинограмм. При забол. ЖКТ – гипопротеинемия, уменьшение фракции альбуминов ( транспортная функция). Разделение крови на фракции осуществляется электрофорезом. Принцип метода: различная подвижность веществ под действием тока, обусловленная их зарядом, электр.полем. Типы протеинограмм (9) : острые воспаления, хронические воспаления, злокач. опухоли, гепатиты, некроз печени, мех. желтухи, альфа-бета-гамма-плазмоцитомы, нарушение почечного фильтра. Типы протеинограмм В клинической практике для сыворотки выделяют 10 типов электрофореграмм (протеинограмм), соответствующих различным патологическим состояниям: Тип Альбумины Фракции глобулинов протеинограммы α1 α2 β γ Острые воспаления Хронические воспаления ↓↓ ↓ ↑ — ↑ ↑↑ — — Примеры заболеваний ↑ Начальные стадии пневмоний, острые полиартриты, экссудативный туберкулез легких, острые инфекционные заболевания, сепсис, инфаркт миокарда ↑↑ Поздние стадии пневмоний, хронический туберкулез легких, хронический эндокардит, холецистит, цистит и пиелит Нарушения почечного фильтра ↓↓ — ↑ ↑ ↓ Генуинный, липоидный или амилоидный нефроз, нефрит, нефросклероз, токсикоз беременности, терминальные стадии туберкулеза легких, кахексии Злокачествен- ↓↓ ↑↑ ↑↑ ↑↑↑ ↑↑ Метастатические новообразования с ные опухоли Гепатиты Некроз печени различной локализацией первичной опухоли ↓ ↓↓ — — — ↓ ↑ ↑ ↑↑ Последствия токсического повреждения печени, гепатиты, гемолитические процессы, лейкемии, злокачественные новообразования кроветворного и лимфатического аппарата, некоторые формы полиартрита, дерматозы ↑↑ Цирроз печени, тяжелые формы индуративного туберкулеза легких, некоторые формы хронического полиартрита и коллагенозов Механические желтухи ↓ — ↑ ↑ ↑ Обтурационная желтуха, желтухи, вызванные развитием рака желчевыводящих путей и головки поджелудочной железы α2-глобулиновые плазмоцитомы ↓ ↓ ↑↑ ↓ ↓ α2-Плазмоцитомы β-глобулиновые плазмоцитомы ↓ ↓ ↓ ↑↑ ↓ β1-Плазмоцитомы, β1-плазмоклеточная лейкемия и макроглобулинемия Вальденштрема γ-глобулиновые плазмоцитомы ↓ ↓ ↓ ↓ ↑↑ γ-Плазмоцитомы, макроглобулинемия и некоторые ретикулезы Задача 3. При лечении противомалярийными препаратами у части больных в течение нескольких дней после начала лечения развивались патологические симптомы: моча становилась коричневой, появлялась желтуха, снижалось содержание гемоглобина в крови. Иногда развивался массированный гемолиз, приводящий к смерти. Предложите причину осложнений. Каков механизм развития симптомов? Какие еще препараты могут вызвать такие осложнения? Противомалярийные препараты вызвали гемолиз , что в свою очередь вызвало ускорение образования билирубина в крови ( гемолитическая желтуха ) в данном случае гипербилирубинемия- развивается за счет фракции непрямого билирубина. Гепатоциты усиленно переводят его в связанную форму, секретируют его в желчь, в результате в кале увеличивается содержание стеркобилина, усиливая его окрашивание. В моче возрастает содержание уробилина ( коричневая моча ) . К тому же противомалярийные препараты могут содержать сульфаниламид, которые вызывает гемолитическую желтуху. Механизм развития гемолитической желтухи заключается в том, что происходит слишком быстрое разрушение эритроцитов. Вследствие этого большое количество билирубина выходит в кровь, и печень не успевает его преобразовывать. Важным моментом является то, что в этом случае происходит преимущественный рост непрямой фракции билирубина. Задача 4. У грудного ребенка часто появляются судороги, при обследовании отмечено увеличение размеров печени. В крови повышена концентрация лактата и пирувата, гипогликемия. При введении адреналина содержание глюкозы в крови не возрастает, но увеличивается концентрация молочной кислоты. Объясните состояние. О каком нарушении углеводного обмена можно думать? Отсутствие повышения уровня глюкозы при введении адреналина позволяет предполагать очень низкую ил нулевую активность фермента глюкозо-6- фосфатазы печени, обеспечивающей высвобождение глюкозы в кровь после мобилизации гликогена. Нарушение активности этого фермента характерно для I типа гликогеиоза – болезни Гирке. Причиной судорог у ребенка является гипогликемия. Накопление молочной и пировиноградной кислот объясняется усилением процессов превращения «избыточной» глюкозы в печени Задача 5. При обследовании ребенка отмечено замедление роста, сильное истощение, малокровие, пониженный иммунитет, жировая дистрофия печени. Что можно думать о причинах этих отклонений? Как количественно определить белок сыворотки крови? Норма концентрации общего белка в сыворотке крови человека. В питании значительной части жителей Африки, Юго-Западной Азии и ряда других стран преобладает растительная пища и недостаточно содержание белка, что приводит к резкому снижению синтеза различных белков во всех тканях и органах – коллагена, протеогликанов, гемоглобина, липопротеинов, альбуминов крови и других. Особенно чувствительны к дефициту белка дети, у них развивается квашиоркор – болезнь белково-витаминной недостаточности Определение белка сыворотки крови. Принцип метода Белки реагируют в щелочной среде с сульфатом меди с образованием комплексных соединений, окрашенных в фиолетовый цвет. По интенсивности окрашивания, которое пропорционально количеству белка, определяют содержание его в сыворотке крови. Подготовка пациента Для определения общего белка крови по биуретовой реакции кровь желательно брать утром натощак. Норма общего белка взрослого человека находится в пределах 65-85 г/л. Задача 6. Родители жалуются на то, что у их маленького ребенка выделяемая моча через некоторое время принимает черный цвет. Каков биохимический механизм изменения цвета? Какое это заболевание? Укажите дефектный фермент и катализируемую им реакцию. Какие последствия могут быть, почему? Изменение окраски мочи может происходить по многим причинам. Потемнение цвета мочи возникает из-за обезвоживания, появления в ней фракции прямого билирубина, при малярии и алкаптонурии. Так как никаких жалоб, наводящих на мысль о малярии и желтухе нет, то остаются обезвоживание и алкаптонурия. Но при обезвоживании цвет мочи насыщенно-желтый или темножелтый, а при алкаптонурии – темно-бурый. Таким образом, предполагается диагноз алкаптонурия, возникающая при дефекте гомогентизатоксидазы и сопровождающаяся появлением в моче пигмента алкаптона. Задача 7. Больного беспокоят боли в области желудка, отрыжка с неприятным запахом «тухлых яиц», бурление в кишечнике. Каково происхождение симптомов? Какие последствия могут быть? Роль пепсина в пищеварении, специфичность. Реакции синтеза соляной кислоты в желудке, ее роль. Методы определения кислотности желудочного coка. Низкая кислотность желудочного сока, снижение активности пепсина способствуют развитию микрофлоры, развиваются процессы гниения в верхних отделах ЖКТ, которые и сопровождаются образованием сероводорода. Для нормализации переваривания можно рекомендовать соляную кислоту с пепсином или желудочный сок. Синтез соляной к-ты: Задача 8. Мальчик, 9 лет был госпитализирован в гастроотделение с острой болью в животе. Данные лабораторных анализов показали глюкоза – 16,4 ммоль/л, натрий – 153,6 ммоль/л, калий – 3,17 ммоль/л, отмечена глюкозурия, кетоновых тел в моче нет. При осмотре выявлено рыхлое телосложение, редкий волос, истонченная кожа. Родители жалуются на частые простуды ребенка. Оцените ситуацию и объясните симптомы. На основании концентрации ионов натрия и калия можно сразу предположить, что имеется патология гормонов, влияющих на эти ионы, т. е. альдостерона или кортизола. Другие гормоны не влияют на данные электролиты. Повышение глюкозы в крови оставляет выбор только за кортизолом. Таким образом правильный ответ – гиперкортицизм или синдром Кушинга. Сдвиги концентрации электролитов объясняются реабсорбцией ионов Na+ в обмен на ионы K + , гипергликемия – усилением глюконеогенеза. Повышение активности костного изофермента щелочной фосфатазы сигнализирует о состоянии костной ткани, в данном случае идет её активная резорбция за счет катаболического действия кортизола на белки костей Задача 9. У ребенка содержание в крови фенилаланина 5 мкмоль/л (при норме 0,2 мкмоль/л), с мочой выделяется большое количество этой аминокислоты. Какие процессы обмена нарушены? Укажите дефектный фермент и катализируемую им реакцию. Какие последствия могут быть, почему? Какое лечение можно предложить? Сильное повышение концентрации фенилаланина в крови и его выделение с мочой сигнализирует о невозможности превратить его в тирозин в результате дефекта фермента фенилаланин-4-монооксигеназы. Фенилаланин метаболизирует по пути прямого катаболизма с образованием фенилпировиноградной кислоты, фенилмолочной кислоты, фенилацетата. У ребенка резко замедляется умственное развитие, поэтому болезнь называется фенилпировиноградная олигофрения или фенилкетонурия. В питании должен быть ограничен фенилаланин. Задача 10.У больной с мочой за сутки выделяется 8,5 ммоль мочевой кислоты, ее концентрация в крови 0,73 ммоль/л. Врач назначил лечебный препарат аллопуринол. Что еще врач должен рекомендовать? Каковы последствия гиперурикемии? Принцип действия аллопуринола. Принцип метода количественного определения мочевой кислоты в моче. Концентрация мочевой кислоты в крови и моче в норме. Нормальные величины : сыворотка крови 0,16-0,45 ммоль/л, моча 1,46-4,43 ммоль/л. Аллопуринол, по структуре схожий с гипоксантином. Ксантиноксидаза окисляет аллопуринол в аллоксантин, а последний остается прочно связанным с ферментом и подавляет его активность. Происходит, образно говоря, самоубийственный катализ. Как следствие, ксантин не превращается в мочевую кислоту, и поскольку гипоксантин и ксантин лучше растворимы в воде, то они более легко выводятся из организма с мочой. Так же врач должен назначить диету. Последствия гиперурикемии: 1. Появление тофусов – отложение кристаллов мочевой кислоты в мелких суставах ног и рук,в сухожилиях, хрящах, коже. 2. Нефропатии с поражением почечных канальцев и мочекаменная болезнь. 3. Подагра. Задача 11.Укажите различия в содержании в крови гормонов: инсулина, глюкагона, кортизола у двух студентов, один из которых третьи сутки голодает, чтобы похудеть, другой после 20 мин пробежки поужинал и отдыхает? Какие показатели крови изменятся? Как определить содержание общего белка сыворотки крови? Как и почему этот показатель изменяется при длительном голодании? 1 студент: инсулин понижен, глюкагон повышен, кортизол повышен; 2 студент: инсулин повышен, глюкагон понижен, кортизол понижен. Снижение рСО2 и концентрации НСО3, увеличение НbО2. Содержание общего белка определяют с помощью биуретовой реакции, при этом интенсивность окрашивания пропорциональна содержанию белка. При длительном голодании наблюдается снижение синтеза белка: недостаточное поступление белка в организм с пищей Задача 12.Опишите отличия в обмене углеводов у двух студентов, один из которых поужинал и отдыхает, другой не ужинал и совершает 20-минутную пробежку. Каковы сдвиги содержания гормонов крови? Изменится ли уровень глюкозы и молочной кислоты у этих студентов? Принцип определения глюкозы в крови и моче. Нормальная концентрация глюкозы в крови и моче. У первого студента гипергликемия, под влиянием инсулина происходит синтез гликогена и жиров в печени, жиров в адипоцитах. У второго студента из-за того, что он не ужинал, исходно отмечается повышенная активность глюкагона для поддержания глюкозы в крови за счет глюконеогенеза и гликогенолиза. Во время нагрузки секретируется адреналин, стимулирующий гликогенолиз в печени, и также в мышцах. Норма глюкозы в моче : 0,06-0,9ммоль/г Норма в крови : 3,9-5,9 ммоль/г Задача 13.Укажите различия в обмене углеводов у двух студентов, один из которых голодает третьи сутки, чтобы похудеть. Другой поужинал и отдыхает. Каковы сдвиги содержания гормонов крови? Как определить уровень глюкозы в крови? Изменится ли данный показатель у этих студентов? Нормальная концентрация глюкозы в крови и моче. Так как первый студент голодает уже третьи сутки, то запасы гликогена в печени отсутствуют, и поддержание уровня глюкозы крови достигается за счет глюконеогенеза из аминокислот и лактата. Ведущие гормоны – глюкагон и кортизол, стимулирующий катаболизм мышечных белков и поставки аминокислот в печень. У второго студента гипергликемия, под влиянием инсулина происходит синтез гликогена и жиров в печени, жиров в адипоцитах. Задача 14.У больного обнаружен светлый кал, с серым оттенком, большое количество жира в кале. Назовите возможные причины нарушений. Какова роль желчи в пищеварении? Отсутствие стеркобилина в кале. при механической желтухе, нарушается отток желчи при непроходимости желчных протоков. сниж. желчеобразование нарушается всасывание липидов, содер. жира в кале увел.- развив. стеаторея. Под влиянием желчи усиливается действие всех ферментов, расщепляющих белки, жиры и углеводы. Особенно резко (в 15— 20 раз) повышается активность липазы. Желчь эмульгирует жиры до мельчайших капелек, в результате липаза более интенсивно расцепляет их на глицерин и жирные кислоты. Задача 15.Употребление в пищу кондитерских изделий, конфет вызывает у ребенка рвоту, понос, метеоризм. Он плохо переносит сладкий чай, тогда как молоко не вызывает отрицательных реакций. Выскажите предположение о причинах заболевания. Как его проверить? Могут ли молочные продукты вызвать подобные симптомы? Кондитерские изделия и конфеты содержат крахмал, сахарозу, лактозу. Переваривание крахмала осуществляется амилазой, затем, на стадии мальтозы – сахаразо-изомальтазным комплексом (мальтазой), расщепление лактозы – - гликозидазным комплексом (лактазой). Признаков непереносимости молока у ребенка нет, следовательно, угнетение лактазы отсутствует. Непереносимость сахарозы (отрицательная реакция на сладкий чай) указывает на дефект сахаразы. Непереносимость мальтозы необходимо исключить пробой с этим углеводом. Проверить предположение можно при помощи проб с нагрузкой определенными углеводами. 1)Проба с нагрузкой фруктозой вызывает гипогликемическую реакцию, очень характерную для наследственной непереносимости фруктозы. Для доказательности она не должна проводиться у ребенка, получающего фруктозу, но спустя 2-3 недели после ее исключения из питания. Принимая во внимание риск гипогликемии, условия ее проведения должны быть тщательно определены. Внутривенное введение фруктозы в дозе 0,25-0,30 г/кг в течение 2-3 минут вызывает быстрое снижение глюкозы и фосфора крови с одновременным увеличением содержания в крови фруктозы, магния и молочной кислоты. 2) При дефекте сахаразо-изомальтазного комплекса после нагрузки сахарозой отмечается незначительная гипергликемия Такие симптомы при употреблении молочных продуктов будут наблюдаться в случае дефицита лактазы (ß-гликозидазного комплекса) Задача 16.Опишите процессы обмена липидов у двух студентов: один поужинал и лежит на диване, другой совершает 40-минутную пробежку. Каковы сдвиги содержания гормонов крови? Какие показатели крови могут подтвердить Ваши предположения? Изменится ли уровень триацилглицеролов крови? У первого студента после еды повышается концентрация инсулина, который в печени и жировой ткани стимулирует окисление глюкозы до ацетилSКоА и синтез жирных кислот и ТАГ. В жировой ткани инсулин препятствует действию липолитических гормонов, подавляет активность ТАГлипазы. У второго студента наблюдается повышение уровня адреналина и, возможно, глюкагона, которые стимулируют липолиз в жировой ткани. В крови концентрация ТАГ возрастает у первого студента, концентрация жирных кислот растет только у второго Задача 17.Родители обеспокоены излишним весом ребенка. Не посоветовавшись с врачом, они резко ограничили количество углеводов в пище ребенка, увеличили содержание белка и не изменили количество жира. Через несколько недель у ребенка ухудшилось самочувствие, появилась рвота. С нарушением каких обменных процессов это связано? Какие биохимические анализы подтвердят это нарушение? Как их провести? Это связано с белковым обменом. При избыточной белковой пище наступают процессы гниения в кишечнике с образованием продуктов разложения аминокислот – токсинов (кадаверин, индол, фенол, сероводород) и нейромедиаторов (серотонин, гистамин). Недостаточное потребление углеводов может восполняться путем глюконеогенеза. При увеличении потребления белка повышается уровень мочевины в крови. Определение сод-я мочевины в крови и моче: мочевина в кислой среде при нагревании с диацетилмонооксимом в присутствии тиосемикарбазида и солей железа образует комплекс красного или розово-красного цвета. Интенс прямо пропорц-на сод-ю мочевины. Норма: в крови дети – 1,8-6,4 ммоль/л; взрсл – 2,5-8,3; моча – 330-580 ммоль/сут. Задача 18.У грудного ребенка отмечено помутнение хрусталика. В крови и моче повышено содержание галактозы, отмечается гипогликемия. О каком заболевании следует думать? Укажите причину развития болезни. Приведите химизм нарушенных реакций. Как кормить ребенка? Повышение содержания галактозы в крови и моче при соответствующих симптомах позволяет думать о наследственной болезни галактоземии. В основе её лежит нарушение активности ферментов, превращающих галактозу, входящую в состав молочного сахара, в глюкозу. При этом возникает гипогликемия и недостаточность глюкозы для питания головного мозга, что приводит к нарушению функции мозга, в энергетическом метаболизме которых глюкоза играет решающую роль. Накопление спирта галактитола, продукта восстановления галактозы, в хрусталике вызывает его помутнение и катаракту. Из рациона ребенка должно быть исключено молоко, требуется использовать молочные смеси, не содержащие лактозу и галактозу. Патогенез. Избыток галактозы превращается в спирт галактитол (дульцитол), накапливающийся в хрусталике и осмотически привлекающий сюда воду. Изменятся солевой состав и белки хрусталика, что приводит к катаракте в молодом возрасте. Катаракта возможна даже у плодов матерей с галактоземией, употреблявших молоко во время беременности. При дефекте галактозо-1-фосфат-уридил-трансферазы АТФ постоянно расходуется на фосфорилирование галактозы и дефицит энергии "токсически" действует на нейроны, гепатоциты, нефроциты, угнетает активность многих ферментов. Как результат возможны задержка психо-моторного развития, умственная отсталость, некроз гепатоцитов и цирроз печени. В почках и кишечнике избыток галактозы и ее метаболитов ингибирует транспорт аминокислот. Задача 19.У больного желтушность кожи и склер. Содержание общего билирубина в сыворотке крови повышено (за счет прямого «связанного»), кал слабо окрашен, в моче обнаруживается билирубин. О каком типе желтухи следует думать? Почему? Как провести определение указанных показателей? Избирательное накопление в крови фракции прямого билирубина, образующейся в печени, говорит о снижении её выведения с желчью, но её синтез не страдает. Слабая окраска кала и снижение стеркобилина подтверждают ухудшение у пациента процесса желчевыделения. Из крови в мочу выводится только водорастворимая, прямая, форма. Таким образом, у больного имеется механическая желтуха Несвязанный билирубин вступает в реакцию только после добавления акселератора(кофеин), который высвобождает билирубин из комплекса с белками и тем самым ускоряет реакцию азосочетания.далее определение колориметрически.норма(общий) дети 3.4-17.1 мкмоль/л, взр 8.520.5 (прямой) дети -, взр 2.2-5.1 мкмоль/л Задача 20.У больного содержание мочевины в крови 2 ммоль/л, за сутки с мочой выведено 140 ммоль. Каковы возможные причины этих нарушений? Какие еще показатели крови и мочи могут измениться? Количественное определение мочевины в сыворотке крови и мочи. Норма содержания мочевины в сыворотке крови и моче. Нормальные концентрации мочевины в крови 2,5—8,3 ммоль/л, в моче – 330—580 ммоль/сут. Ясно, что и в крови и в моче низкое содержание мочевины. Так как мочевина в кровь поступает из печени заключаем, что синтез её в печени понижен. Причинами этого могут быть две ситуации: нарушение работы ферментов орнитинового цикла (вирусные инфекции, генетические нарушения), отсутствие субстрата для синтеза, т. е. нет «лишнего» азота при преобладании анаболизма белков и нуклеиновых кислот (рост организма, выздоровление). Задача 21.Молодой мужчина обратился к врачу с жалобами на внезапно возникшие нестерпимые ночные боли в суставах стоп, особенно в больших пальцах ног, днем боли не такие интенсивные. При осмотре суставов выявлена их припухлость, покраснение, ограничение подвижности. Предложите причину заболевания. Какие лабораторные анализы могут Вам помочь? Дайте рекомендации по лечению. Внезапное возникновение болей в периферических мелких суставах является симптомом подагры, связанной с накоплением солей мочевой кислоты – уратов натрия в крови и отложением его кристаллов в суставах. Молекулярной причиной болезни является снижение реутилизации, т. е. повторного использования пуриновых оснований в клетках. Лабораторно: обычно повышена концентрация мочевой кислоты в крови, хотя в межприступный период этого может и не быть. При лечении обязательно соблюдение беспуриновой диеты и использование препарата аллопуринола, блокирующего реакцию синтеза мочевой кислоты. Задача 22.В приемное отделение больницы поступил больной с жалобами на острые боли в области сердца. Врач заподозрил инфаркт миокарда. Какие биохимические показатели должны интересовать врача? Как провести анализ активности аминотрансфераз в сыворотке крови? При каких еще заболеваниях исследуют активность аминотрансфераз? Аминотрансферазы – внутриклеточные ферменты. В клетках миокарда особенно активна аспартатаминотрансфераза, а в печени – аланинаминотрансфераза. При повреждении клеточных мембран ферменты выходят из клеток и их активность в крови возрастает. При заболевании сердца (инфаркт миокарда), особенно в ранние сроки, в крови возрастает активность аспартатаминотрансферазы При добавлении 2,4-динитрофенилгидразина (2,4-ДНФГ) образуется гидразон пировинокрадной кты, дающий в щелочной среде бурое окрашивание. 0,25мл(субстратный р-р АлАТ или АсАТ) + 0.05мл сыворотки крови… инкубируют 30мин…+0.25мл(2,4-ДНФГ)… инкубируют…+2.5мл(NaОН)…инкубируют…колориметрируют Активность,ммоль/л*ч = (Еоп/Ест)*Сст*2 Коэф. Ритиса = Активн.АсАт/ Активн. АлАТ Норма: АлАТ 0.10-0.68 ммоль/л*ч Норма Коэф. Ритиса 1.33 +/- 0.40 АсАТ 0.10-0.45 ммоль/л*ч В миокарде высока активность АсАТ , чем АлАТ. При их повышении в особенности АсАТ в остром периоде инфаркта миокарда явл в 95% случаях достоверным тестом. Также активность аминотрансфераз исследуется при поражениях печени. Только активность выражена больше АлАТ ( инфекц. гепатит, цирроз печени). Коэф. Ритиса значитально увеличивается при инфаркте, а при гепатитах снижается. Задача 23.У ребенка патология почек (нефрит). Как изменится содержание белка в сыворотке крови, соотношение белковых фракций? Определение общего белка? Как разделить белковые фракции? Охарактеризуйте их. Какие патологические компоненты будут обнаруживаться в моче? Определение содержания С-реактивного белка в сыворотке крови. При нефрите нарушается почечный фильтр кол-во белка в крови повысится. Кол-во альбуминов снижается, увеличивается кал-во α2,β, кол-во γ глобулинов снижено. Определение общего белка в сыворотке крови: пептидная связь в щелочной среде образует с медью комплексное соединение(биуретовая реакция) интенсивность окраски пропорциональна содержанию белка. Нормы: дети 1-3 года 54-85 г/л старше 65-85 г/л(определяется рефрактометрическим методом). Для разделения белков применяют электрофорез, т к белковые молекулы заряжены отрицательно при рН 6,8 и перемещаются в эл.поле по направлению к аноду. Наиболее быстро перемещаются альбумины, затем по порядку α1α2βγ глобулины. Задача 25.У ребенка желтушность кожи, склеры светлые. Содержание билирубина в сыворотке крови повышено (за счет непрямого «свободного»), кал интенсивно окрашен, в моче 8 повышено содержание стеркобилиногена, билирубина нет. О каком типе желтухи следует думать? Почему? Как провести определение указанных показателей? Данные обследования позволяют предполагать у ребенка гемолитическую желтуху вследствие усиленного разрушения (гемолиза) эритроцитов, вызванного какими-то факторами (токсикоз, пищевое отравление, несовместимость резус-фактора новорожденного и матери, и др.). Потому что показатели: 1. Повышение концентрации непрямого билирубина в крови. 2. Гепатоциты усиленно переводят его в связанную форму, секретируют его в желчь, в результате в кале увеличивается содержание стеркобилина, усиливая его окрашивание. 3. Моче повышенно содержание стеркобилина, а билирубина нет. Анализ: 1. Определение концентрации общего билирубина и его фракций в сыворотке крови. Сульфониловая кислота с азотистым натрием дает диазофенилсульфоновую кислоту, которая с билирубином образует окрашенные азопигменты . связанный билирубин реагирует быстро, поэтому о его концентрации судят по первоночальной интенсивности окраски. Несвязанный реагирует только после добавления акселератора ( кофеин ). Он освобождает билирубин из комплекса с белками и тем самым ускоряет реакцию азотсочетания. Проведение- 3 реагента ( сульфониловая кислота, NaNo2, кофеиновый реагент), NaCl, сыворотка крови, стандарт. Перемещать, 10 минут оставить. + буферный раствор. Измерить оптическую плотность. Нормы – дети – общий 3,4-17,1 прямой - . взрослые- общий 8,5 – 20,5 прямой – 2,2 – 5,1 . 2. определение желчных пигментов в моче. 1) проба с молибдатом аммония. Принцип – желчные пигменты билирубина и биливердина легко окисляться молибдатом аммония в присутсвии серной кислоты с образованием билицианина ( синее окрашивание) все смешивается на предметном стекле. 2) проба Розина – под действием йода билирубин мочи окисляется в биливердин ( зеленый ) 2 пробирки . 1 – норм моча, 2 – патология. + йод , смотрим где зеленый. 3) проба Гмелина – под действием азотной кислоты ( с примесью азотистой ) билирубин окисляется в билевердин ( зеленый ) , билицианин ( сине – фиолетовое ) холетелин ( желтый ) проводится в пробирках. 4) проба Розенбаха ( аналогия пробе Гмелина ) фильтруют мочу. На фильтре частично остаются желчные пигменты , а далее проба Гмелина на фильтре. Задача 26.У больного затруднено дыхание, оно поверхностно, рН крови 7,31, показатель [HCO3 – ] равен 19 ммоль/л, рСО2 65 мм рт.ст, остаточные анионы 14 ммоль/л. Какой вид нарушения кислотно-основного состояния имеется у больного? Объясните сдвиги показателей КОС. Укажите механизмы компенсации. Нормальное значение рН крови 7,400,04. Снижение величины рН до 7,31 свидетельствует об ацидозе. Высокое парциальное давление СО2 позволяет считать, что это респираторный ацидоз, причиной которого является нарушение дыхательной функции и задержка СО2 в организме, приводящая к увеличению концентрации угольной кислоты. Кислотность мочи будет повышена (снижение pH) из-за компенсаторного увеличения ацидогенеза и аммониегенеза в почках. Задача 27.В приемное отделение доставлена девочка в бессознательном состоянии. Лабораторный анализ крови показал натрий – 131,6 ммоль/л, калий – 6,2 ммоль/л, глюкоза 25,4 ммоль/л, в моче обнаружена высокая концентрация кетоновых тел. Объясните результаты и сделайте заключение. Как провести определение кетоновых тел в моче? Показатели лабораторного обследования свидетельствуют о резкой недостаточности инсулина, в результате которой отмечаются сильнейшая гипергликемия и кетоацидоз, что указывает на кетоацидотическую кому при инсулинзависимом сахарном диабете (ИЗСД). Отсутствуют эффекты инсулина, направленные на использование глюкозы в тканях и на ограничение окисления липидов. Дисбаланс электролитов крови: снижение концентрации ионов натрия и повышение калия происходит из-за их перераспределения между внутрии внеклеточными пространствами при отсутствии инсулина Опред кет тел в моче. Проба Легаля: ацетон и ацетоуксусная кислота в щелочной среде с нитропруссидом натрия образ комплексы оранжево-красного цвета, переходящие приподкислении р-ра в вишнево-красн. Проба Либена: ацетон в щелочной среде в присутствии р-ра Люголя образует желтый осадок йодоформа, облад-го специф запахом. Задача 28.У пациента, которому длительное время с лечебной целью вводят кортикостероиды, обнаружена гипергликемия, полиурия, глюкозурия, отсутствует кетонемия и кетонурия. В моче повышено содержание мочевины и других азотистых продуктов. Объясните механизмы развития патологических симптомов у пациента. Можно ли диагностировать у больного сахарный диабет? Стероидные гормоны (глюкокортикоиды) усиливают распад белка в ряде тканей, стимулируют образование глюкозы (глюконеогенез) из аминокислот, накопление конечных азотистых продуктов, которые выводятся с мочой. Поэтому у пациента наблюдаются гипергликемия, глюкозурия и азотурия. В связи с тем, что не нарушена утилизация глюкозы, у него не усилено окисление жирных кислот, не наблюдается появления кетоновых тел. Нарушения обмена могут быть диагностированы как «стероидный диабет». Задача 29.Больной жалуется на неутолимую жажду, употребление большого объема жидкости, значительное количество мочи (6–8 литров в сутки). При обследовании установлено концентрация глюкозы в крови 5,2 ммоль/л, кетоновых тел нет. Моча бесцветная, плотность 1,002, глюкозы нет. Назовите возможные причины полиурии. Как провести определение концентрации глюкозы в крови и моче? Жажда, полиурия, полидипсия могут быть при сахарном и при несахарном диабете. Причиной их при сахарном диабете является инсулярная недостаточность, которая приводит к гипергликемии и глюкозурии. Поэтому у больного плотность мочи будет высокая, несмотря на её большое количество. При несахарном мочеизнурении нарушение функции антидиуретического гормона сопровождается отсутствием гипергликемии, глюкозурии, большим количеством мочи очень низкой плотности. Определение глюкозы в моче: тест полоски глюкофан. Принцип основан на ферментной глюкозооксидазной реакции.Зона индикации пропитана расстворами ферментов глюкооксидазы, пероксидазы и красителем тетраметилбензидом. Глюкоза при помощи фермента глюкозооксидазы окисляется кислородом воздуха до глюконовой кислоты с образованием перекиси водорода. Перекись в присутствии фермента пероксидазы окисляет краситель, и происходит переход окраски из желтого в зеленый. Определение кетоновых тел: тест-полоски кетофан. Тест основан на реакции Легаля. Желтая зона индикации на полосках содержит щелочной буфер в смеси с нитропурссидом натрия, дающий с ацетоном и ацетоуксисной кислотой красное, вишневое или фиолетовое окраивание. Проба более чувствительна к ацетоуксусной кислоте, чем к ацитону. Полиурия может быть вызвана поликистозом почек, гидронефрозом, хронической почечной недостаточностью, синдромом Бартера, хроническим пиелонефритом. Повышенное количество мочи в сочетании с большой концентрацией в сыворотке или плазме крови кальция может указать на наличие таких заболеваний, как миеломная болезнь и саркоидоз. Задача 30.Согласно рекомендациям врача пациент ограничил употребление мяса, рыбы и значительно увеличил содержание овощей и фруктов. Как изменится рН мочи? Изменится ли содержание в моче мочевины? Как провести определение этих показателей? В результате перехода на вегетарианскую диету рН крови приобретет тенденцию к повышению, рН мочи может повышаться до 6,5 и выше. Связано это со снижением поступления аминокислот, которые хотя и амфотерные соединения, но свойства кислот проявляют более выражено. Также происходит снижение потребления фосфорной кислоты, в изобилии имеющейся в мясных продуктах. Наряду с этим, возрастает поступление фруктовых кислот (лимонной, яблочной, янтарной и прочих), присутствующих в крови в виде буферных анионов. Содержание мочевины в крови уменьшится по причине пониженного потребления белков и отсутствия лишнего азота в организме. Величина рН мочи изменится в щелочную сторону за счет избытка органических анионов. Определяем содержание мочевины в моче с помощью следующей реакции: мочевина взаимодействует с диацетилмонооксимом в кислой среде и в присутствии тиосемикарбазида и солей железа и образует с этими соединениями комплексные соединения красного цвета. Норма в моче: 330-590 ммоль/cут. Данная диета необходима при заболеваниях почек( нарушение выделительной функции и в р-те сердечной недостаточности), при повышенном катаболизме белка( лихорадки,голодание), при диете с высоким содержанием белка. Задача 31.У одного пациента содержание глюкозы в крови 4,3 ммоль/л, в суточной моче 1,3 ммоль/л. У другого концентрация глюкозы 10,5 ммоль/л, в суточной моче 1,5 ммоль/л. Имеются ли у пациентов отклонения от нормальных величин? Какие могут быть причины гипергликемии и глюкозурии? Методы выявления глюкозурии. У первого пациента в крови-норма, в моче-глюкозурия. У второго-гиперклигемия и глюкозурия( нормы в крови-3,3-5,5 ммоль/сут, в моче-0,06-0,83 ммоль/cут) Гипергликемия -признак сахарного диабета, повреждений паренхимы печени,заболевний ЦНС, гиперфункциях щитовидной железы и коры надпочечников, панкреатита, инфекционных заболеваний. Глюкозурия- на фоне гипергликемии( концентрация глюкозы в ультрафильтрате превышает способность почек к ее реабсорбции)сахарный диабет,т иреотоксикоз; нарушения канальцевой реабсорции (нефроз,нефрит, нефротический синдром; при физиологических условияхсладости,стресс,лекарства (кофеин, кортикостероидные гормоны). Глюкозурию выявляют с помощью тест-полосок «глюкофан», которые пропитаны красителем и растворами ферментов глюкооксидазой и пероксидазой. Глюкоза окисляется с помощью фермента,образутся перекись,которая окисляется пероксидазой и окисляет краситель-окраска из желтой в зеленую. Задача 32.В лабораторию доставлена моча нескольких пациентов: А – моча насыщенно желтого цвета, плотность 1,018; Б – соломенно-желтая, плотность 1,052; В – бесцветная, плотность 1,001, Г – цвет «мясных помоев», плотность 1,017. Каковы причины имеющихся отклонений? Имеется ли в норме зависимость между интенсивностью окраски и плотностью мочи? Какие другие компоненты мочи следует определить для подтверждения имеющихся отклонений? Моча больного А: имеет нормальную плотность, но ярко-желтый цвет свидетельствует о приеме лекарственных средств Моча больного Б: имеет нормальный цвет, но резко повышена плотность (норма 1,010-1,025). Это может свидетельствовать о наличии белка в моче или обезвоживании организма. Дополнительно определить белок Моча больного В: бесцветная моча признак нарушения концентрационной функции почек, приема мочегонных средств или обильного питья, плотность мочи резко снижена, что свидетельствует о обильном диурезе, и тоже что и бесцветная моча. Определить глюкозу и кетоновые тела для исключения или подтверждения сахарного диабета. Моча больного Г: цвет мясных помоев означает примесь изменённой крови в моче (повреждение паренхимы почек или «мочевых каналов»(мочевой пузырь, уретра, мочеточники). Дополнительно определить кровь. Чем ниже плотность мочи, тем менее интенсивна ее окраска. Задача 33.Больной жалуется на неутолимую жажду, употребление большого количества жидкости, значительный объем мочи (6-8 л в сутки). При обследовании найдено глюкозы в крови 5,2 ммоль/л, моча бесцветная, плотность 1,002, глюкозы и кетоновых тел в моче нет. Назовите возможную причину полиурии. Как проведено определение глюкозы и кетоновых тел в моче? Как определена плотность мочи? Причина полиурии: несахарный диабет. Определение глюкозы в моче: тест полоски глюкофан. Принцип основан на ферментной глюкозооксидазной реакции.Зона индикации пропитана расстворами ферментов глюкооксидазы, пероксидазы и красителем тетраметилбензидом. Глюкоза при помощи фермента глюкозооксидазы окисляется кислородом воздуха до глюконовой кислоты с образованием перекиси водорода. Перекись в присутствии фермента пероксидазы окисляет краситель, и происходит переход окраски из желтого в зеленый. Определение кетоновых тел: тест-полоски кетофан. Тест основан на реакции Легаля. Желтая зона индикации на полосках содержит щелочной буфер в смеси с нитропурссидом натрия, дающий с ацетоном и ацетоуксисной кислотой красное, вишневое или фиолетовое окраивание. Проба более чувствительна к ацетоуксусной кислоте, чем к ацитону. Полиурия может быть вызвана поликистозом почек, гидронефрозом, хронической почечной недостаточностью, синдромом Бартера, хроническим пиелонефритом. Повышенное количество мочи в сочетании с большой концентрацией в сыворотке или плазме крови кальция может указать на наличие таких заболеваний, как миеломная болезнь и саркоидоз.
