Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего профессионального образования «СИБИРСКИЙ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ» Институт фундаментальной биологии и биотехнологии Кафедра биофизики Специальный физический практикум Под руководством: О.С. Сутормин Красноярск, 2013 мониторинг токсичности различных сред анализ различных метаболитов определение активности ферментов другое Проблема: Ферменты бактериальной биолюминесцентной системы нестабильны Цель: исследовать эффекты вязких растворителей на третичную и вторичную структуры люциферазы Задачи: Освоить методы флуоресцентной спектроскопии белковых макромолекул Определить методами флуоресцентной спектроскопии конформационные изменения модельного белка в вязких средах L + вязкие агенты Люминесцентный спектрометр Концентрация глицерина и сахарозы 25% Интенсивность, отн. ед 40 35 30 25 буфер 20 глицерин 15 10 сахароза 5 0 250 270 290 310 Длина волны, нм 330 Спектры поглощения люциферазы в разных средах Интенсивность, отн.ед 12 10 8 6 4 2 0 300 320 340 360 380 400 420 440 Длина волны, нм Спектры испускания люциферазы в разных средах Сахароза и глицерин являются эффективными протекторами биферментной бактериальной биолюминесцентной системы Сахароза является более сильным вязким протектором по сравнению с глицерином При добавлении исследованных вязких эффекторов не происходит значительных конформационных изменений исследуемых ферментов