40 ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ЦИТОКИНОВ АЛЬФА-ФНО, ИЛ
реклама
ÇÄÐÀÂÎÎÕÐÀÍÅÍÈÅ 10/2014 40 Ïðîáëåìû ýïèäåìèîëîãèè, ìèêðîáèîëîãèè è èíôåêöèîííûõ áîëåçíåé Î. Î. ßÍÎÂÈ×, Ë. Ï. ÒÈÒÎÂ, Â. Â. ÙÅÐÁÀ ÏÎËÈÌÎÐÔÈÇÌ ÃÅÍΠÖÈÒÎÊÈÍΠÀËÜÔÀ-ÔÍÎ, ÈË-1ÐÀ È ÈÍÔ-ÃÀÌÌÀ Ó ÏÀÖÈÅÍÒÎÂ Ñ ÈÍÔÅÊÖÈÎÍÍÛÌ ÌÎÍÎÍÓÊËÅÎÇÎÌ ÐÍÏÖ ýïèäåìèîëîãèè è ìèêðîáèîëîãèè Ìèíçäðàâà Ðåñïóáëèêè Áåëàðóñü, Ãîðîäñêàÿ êëèíè÷åñêàÿ èíôåêöèîííàÿ áîëüíèöà Ìèíñêà Öåëü ðàáîòû. Èçó÷èòü ÷àñòîòó ïîëèìîðôèçìà ãåíîâ öèòîêèíîâ ó ïàöèåíòîâ ñ èíôåêöèîííûì ìîíîíóêëåîçîì. Ìàòåðèàë è ìåòîäû. Îáñëåäîâàíî 17 ïàöèåíòîâ ñ èíôåêöèîííûì ìîíîíóêëþçîì â âîçðàñòå 23,9±1,5 ãîäà (14 ìóæ÷èí è 3 æåíùèíû). Êîíòðîëüíóþ ãðóïïó ñîñòàâèëè 28 ïðàêòè÷åñêè çäîðîâûõ ÷åëîâåê â âîçðàñòå 33,7±2,5 ãîäà (13 ìóæ÷èí è 15 æåíùèí). Ãåíîìíóþ ÄÍÊ âûäåëÿëè ñ ïîìîùüþ íàáîðà «ÄÍÊ-ñîðá» (Ðîññèÿ). Ïîëèìîðôèçì ãåíîâ öèòîêèíîâ a-ÔÍÎ â ïîçèöèè 308 è ÈÍÔ-g â ïîçèöèè +874 îïðåäåëÿëè àëëåëü-ñïåöèôè÷åñêîé ÏÖÐ, äëÿ ÈË-1 ÐÀ òàíäåìíûå ïîâòîðû ðàçìåðîì 86 ï. î. Ðåçóëüòàòû. Ïîêàçàíî, ÷òî íàëè÷èå àëëåëÿ À â ïîçèöèè 308 ãåíà a-ÔÍÎ äîñòîâåðíî ñíèæåíî ó ïàöèåíòîâ ñ èíôåêöèîííûì ìîíîíóêëåîçîì ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëåì. Âûÿâëåíî, ÷òî ñî÷åòàíèå ãåíîòèïîâ ÀÀ ÈÍÔ-g+874/GG ÔÍÎ-a308 äîñòîâåðíî âûøå ó ïàöèåíòîâ ñ èíôåêöèîííûì ìîíîíóêëåîçîì ïî ñðàâíåíèþ ñ ëèöàìè êîíòðîëüíîé ãðóïïû. Çàêëþ÷åíèå. Ïîëó÷åííûå ðåçóëüòàòû ïîêàçàëè, ÷òî ïîëèìîðôèçì ãåíîâ õîçÿèíà ìîæåò îêàçûâàòü âëèÿíèå íà ÷óâñòâèòåëüíîñòü ê çàáîëåâàíèþ. Äàëüíåéøèå èññëåäîâàíèÿ ïî îïðåäåëåíèþ êîìáèíàöèé ãåíîòèïîâ ïîçâîëÿò âûÿâèòü ëèö ñ âûñîêèì ðèñêîì ðàçâèòèÿ òÿæåëîé è ïðîäîëæèòåëüíîé áîëåçíè ïîñëå èíôèöèðîâàíèÿ, ÷òî áóäåò ñïîñîáñòâîâàòü ïðîâåäåíèþ èíäèâèäóàëüíûõ ïðîôèëàêòè÷åñêèõ ìåð. Êëþ÷åâûå ñëîâà: âèðóñ ÝïøòåéíàÁàðð, èíôåêöèîííûé ìîíîíóêëåîç, öèòîêèíû, ïîëèìîðôèçì ãåíîâ. Ðàñïðîñòðàíåíèå ãåðïåñâèðóñíûõ èíôåêöèé ÿâëÿåòñÿ îäíîé èç àêòóàëüíûõ ïðîáëåì â ìåäèöèíå è ñâÿçàíî êàê ñ øèðîêîé öèðêóëÿöèåé ýòèõ âîçáóäèòåëåé ñðåäè íàñåëåíèÿ, òàê è ñ âûñîêîé âîñïðèèì÷èâîñòüþ ÷åëîâåêà. Âèðóñ ÝïøòåéíàÁàðð (ÂÝÁ) ïðèíàäëåæèò ê ñåìåéñòâó ãåðïåñâèðóñîâ è ÿâëÿåòñÿ ëèìôîòðîïíûì, âûçûâàþùèì èíôåêöèè èììóííîé ñèñòåìû. ÂÝÁ èíôèöèðîâàíî áîëåå 95% íàñåëåíèÿ çåìíîãî øàðà. Êëèíè÷åñêèå ïðîÿâëåíèÿ âèðóñà ÝïøòåéíàÁàðð øèðîêî âàðüèðóþò: îò áåññèìïòîìíîé ôîðìû äî îñòðîé èíôåêöèè ñ òÿæåëûìè îñëîæíåíèÿìè [1, 2]. Îäíèì èç ïðîÿâëåíèé èíôåêöèîííîãî ïðîöåññà, âûçâàííîãî ÂÝÁ, ÿâëÿåòñÿ èíôåêöèîííûé ìîíîíóêëåîç (ÈÌ), õàðàêòåðèçóþùèéñÿ ëèõîðàäêîé, èíòîêñèêàöèåé, ãåíåðàëèçîâàííîé ëèìôàäåíîïàòèåé, óâåëè÷åíèåì ïå÷åíè è ñåëåçåíêè è ñâîåîáðàçíûìè èçìåíåíèÿìè ñîñòàâà ýëåìåíòîâ êðîâè (ïîÿâëåíèå àòèïè÷íûõ ìîíîíóêëåàðîâ). Ïîëîâèíà íàñåëåíèÿ ïîäâåðæåíà ïåðâè÷íîé èíôåêöèè â ðàííåì âîçðàñòå, âòîðàÿ âîëíà çàáîëåâàåìîñòè ïðèõîäèòñÿ íà ïîäðîñòêîâûé ïåðèîä [3]. Çàáîëåâàåìîñòü ÈÌ â ìèðå ñîñòàâëÿåò 60100 ñëó÷àåâ íà 100 000 íàñåëåíèÿ [4].  Ðîññèè åæåãîäíî ðåãèñòðèðóþò 4080 ñëó÷àåâ èíôåêöèîííîãî ìîíîíóêëåîçà íà 100 000 íàñåëåíèÿ [5]. Ãëàâíûé ïóòü ïðîíèêíîâåíèÿ èíôåêöèè ñîñòîèò âî âçàèìîäåéñòâèè áåëêà ÂÝÁ gp350 ñî ñïåöèôè÷åñêèì ðåöåïòîðîì CD21 (ðåöåïòîð äëÿ Ñ3b-êîìïîíåíòà êîìïëåìåíòà) íà ïîâåðõíîñòè Â-ëèìôîöèòîâ. Ðîëü êîðåöåïòîðà âûïîëíÿþò ìîëåêóëû êëàññà II HLA [6]. Åùå îäíèì ðåöåïòîðîì äëÿ áåëêà gp350 ÂÝÁ ÿâëÿåòñÿ CD35 (ðåöåïòîð êîìïëåìåíòà òèïà 1) [7]. Îäíèì èç âàæíûõ àíòèãåíîâ, ýêñïðåññèðóåìûõ ÂÝÁ, ÿâëÿåòñÿ ëàòåíòíûé ìåìáðàííûé ïðîòåèí (LMP-1), îòâå÷àþùèé çà òðàíñôîðìàöèþ Â-ëèìôîöèòîâ [8], à ìèøåíüþ, àêòèâèðóåìîé âèðóñíûì áåëêîì, ðåöåïòîð ýïèäåðìàëüíîãî ôàêòîðà ðîñòà (EGFR) [6, 9]. ×àñòî ÂÝÁ ïîæèçíåííî ïðèñóòñòâóåò â îðãàíèçìå ÷åëîâåêà, ïðîÿâëÿÿ âûñîêóþ àäàïòàöèþ ê åãî èììóííîé ñèñòåìå. Åãî ñóùåñòâîâàíèå çàâèñèò îò âðîæäåííîé è ñïåöèôè÷åñêîé èììóííîé çàùèòû õîçÿèíà. ÂÝÁ ñïîñîáåí ñàìîñòîÿòåëüíî ðåàëèçîâûâàòü ìåõàíèçìû èììóíîñóïðåññèè, íå ïîçâîëÿþùèå èììóííîé ñèñòåìå âçÿòü ïîä êîíòðîëü èíôåêöèîííûé ïðîöåññ. Íàïðèìåð, áåëîê ÂÝÁ BCRF-1 èìååò 70% ãîìîëîãèè ñ ÈË-10 è ñïîñîáñòâóåò ïîäàâëåíèþ ñèíòåçà ÈÍÔ-g ïåðèôåðè÷åñêèìè ìîíîíóêëåàðàìè [6, 9, 10]. Äðóãîé áåëîê BARF-1 îêàçûâàåò èíãèáèðóþùåå äåéñòâèå íà ñåêðåöèþ ÈÍÔ-a ìîíîíóêëåàðíûìè êëåòêàìè [11]. Ðåïðîäóêöèÿ ÂÝÁ íàõîäèòñÿ ïîä êîíòðîëåì Ò-ñèñòåìû èììóíèòåòà. Îñíîâíûì ìåõàíèçìîì çàùèòû ñ÷èòàþò ðàííèé îòâåò CD8+ öèòîòîêñè÷åñêèõ Ò-ëèìôîöèòîâ, êîòîðûå ëèçèðóþò âèðóñîñîäåðæàùèå êëåòêè è ïðîäóöèðóþò ðÿä öèòîêèíîâ [12]. Ãåí a-ÔÍÎ êàðòèðîâàí íà õðîìîñîìå 6p21.3 â ðåãèîíå ãëàâíîãî êîìïëåêñà ãèñòîñîâìåñòèìîñòè. Êëåòêàìè ïðîäóöåíòàìè a-ÔÍÎ ÿâëÿþòñÿ ìíîãèå êëåòêè, â òîì ÷èñëå ìàêðîôàãè, íåéòðîôèëû è àêòèâèðîâàííûå Ò-ëèìôîöèòû.  1992 ã. A. G. Wilson è ñîàâò. èäåíòèôèöèðîâàëè òðàíçèöèþ GA â ïîëîæåíèè 308 ïðîìîòîðà ýòîãî ãåíà [13]. Óñòàíîâëåíî, ÷òî àëëåëü 308A àññîöèèðóåòñÿ ñ áîëåå âûñîêîé èíòåíñèâíîñòüþ ïðîäóêöèè öèòîêèíà. Ãåí, êîäèðóþùèé àíòàãîíèñò ðåöåïòîðà èíòåðëåéêèí-1 (ÈË-1ÐÀ), ðàñïîëîæåí â õðîìîñîìå 2 è ñîäåðæèò ïîëèìîðôíûé ó÷àñòîê âî 2-ì èíòðîíå, âêëþ÷àþùåì ðàçëè÷íîå ÷èñëî òàíäåìíûõ ïîâòîðîâ ðàçìåðîì 86 ï. î. [14]. Îïèñàíî íàëè÷èå 5 àëëåëåé, èç íèõ àëëåëü 2 àññîöèèðóåòñÿ ñ ðàçëè÷íûìè âîñïàëèòåëüíûìè çàáîëåâàíèÿìè [15, 16]. ÈË-1 ÐÀ ïðîäóöèðóåòñÿ ìàêðîôàãàìè, ìîíîöèòàìè è äðóãèìè êëåòêàìè. Åãî èíãèáèðóþùèé ýôôåêò îáóñëîâëåí ñïîñîáíîñòüþ ñâÿçûâàòü ðåöåïòîðû ÈË-1, òîðìîçÿ ñîåäèíåíèå è ïîñëåäóþùóþ ñèãíàëüíóþ òðàíñäóêöèþ îáåèõ ôîðì ÈË-1. Ãåí ÈÍÔ-g ðàñïîëîæåí íà 12 õðîìîñîìå (12q24.1). Óñòàíîâëåíî, ÷òî òî÷êà ìóòàöèè +874 (èíòðîí 1) ðàñïîëîæåíà â ðåãèîíå ñâÿçûâàíèÿ ÿäåðíîãî òðàíñêðèïöèîííîãî ôàêòîðà NFkB è çàìåíà â äàííîé ïîçèöèè ìîæåò ñêàçûâàòüñÿ íà òðàíñêðèïöèè ãåíà ÈÍÔ-g è, ñîîòâåòñòâåííî, íà óðîâíå ïðîäóêöèè ýòîãî ðåãóëÿòîðíîãî áåëêà [17]. Ïîêàçàíî, ÷òî íàëè÷èå àëëåëè +874Ò â ãåíå ÈÍÔ-g ñîïðîâîæäàåòñÿ âûñîêîé åãî ÇÄÐÀÂÎÎÕÐÀÍÅÍÈÅ 10/2014 41 Ïðîáëåìû ýïèäåìèîëîãèè, ìèêðîáèîëîãèè è èíôåêöèîííûõ áîëåçíåé ïðîäóêöèåé, òîãäà êàê íàëè÷èå ó èíäèâèäóóìà àëëåëè +874À íèçêîé [18]. Öåëü ðàáîòû èçó÷èòü ÷àñòîòó ïîëèìîðôèçìà ãåíîâ öèòîêèíîâ a-ÔÍÎ, ÈË-1, ÈÍÔ-g ó ïàöèåíòîâ ñ ÈÌ. Ìàòåðèàë è ìåòîäû Îáñëåäîâàíû 17 ïàöèåíòîâ ñ ÈÌ â âîçðàñòå 23,9±1,5 ãîäà (14 ìóæ÷èí è 3 æåíùèíû), ïðîõîäèâøèõ ëå÷åíèå â Ãîðîäñêîé êëèíè÷åñêîé èíôåêöèîííîé áîëüíèöå Ìèíñêà. Êîíòðîëüíóþ ãðóïïó ñîñòàâèëè 28 ïðàêòè÷åñêè çäîðîâûõ ÷åëîâåê (13 ìóæ÷èí è 15 æåíùèí, ñðåäíèé âîçðàñò 33,7±2,5 ãîäà). Ãåíîìíóþ ÄÍÊ âûäåëÿëè ñ ïîìîùüþ íàáîðà «ÄÍÊ-ñîðá» (Ðîññèÿ). Äëÿ îöåíêè ïîëèìîðôèçìà ãåíà ÈÍÔ-g â ïîçèöèè +874 ïðèìåíÿëè àëëåëü-ñïåöèôè÷åñêóþ ÏÖÐ.  êà÷åñòâå ïðàéìåðîâ èñïîëüçîâàëè ñëåäóþùèå ïîñëåäîâàòåëüíîñòè îëèãîíóêëåîòèäîâ: F1 5'-ttcttacaacacaaaatcaaatca-3'; F2 5'- ttcttacaacacaaaatcaaatct-3'; R 5'-tcaacaaagct-gatactcca-3'. Ïîëèìîðôèçì ãåíà ÈË-1 ÐÀ ïðåäñòàâëÿåò ñîáîé íàëè÷èå â ãåíå òàíäåìíûõ ïîâòîðîâ ðàçìåðîì 86 ï. î. Äëÿ ïðîâåäåíèÿ ñòàòèñòè÷åñêîé îöåíêè ïîëó÷åííûõ äàííûõ ïðîâîäèëè îáúåäèíåíèå àëëåëåé ñ áîëåå ÷åì äâóìÿ ïîâòîðàìè â ãðóïïó L, ñ äâóìÿ ïîâòîðàìè â ãðóïïó 2*. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ÷èñëà ïîâòîðîâ â ãåíå ÈË-1 ÐÀ èñïîëüçîâàëè ñëåäóþùèå ïðàéìåðû: F 5'-ctcagcaacactcctat-3'; R 5'-tcctggtctgcaggtaa-3'. Äëÿ âûÿâëåíèÿ ïîëèìîðôèçìà ãåíà a-ÔÍÎ â ïîçèöèè 308 èñïîëüçîâàëè àëëåëü-ñïåöèôè÷åñêóþ ÏÖÐ. Ïðàéìåðû äëÿ íàêîïëåíèÿ ôðàãìåíòà ãåíà a-ÔÍÎ áûëè ñëåäóþùèå: F1 52-ataggttttgaggggcatcg-32; F2 52-ataggttttgaggggcatca-32; R 52-aagaatcattcaaccagcgg-32. Àíàëèç ïðîäóêòîâ àìïëèôèêàöèè îñóùåñòâëÿëè ìåòîäîì ýëåêòðîôîðåçà â 1,5% àãàðîçíîì ãåëå ñ ïîñëåäóþùèì îêðàøèâàíèåì ýòèäèåì áðîìèñòûì è äåòåêöèåé â óëüòðàôèîëåòîâîì òðàíñèëëþìèíàòîðå (312 íì). Äëÿ ñòàòèñòè÷åñêîãî àíàëèçà ïîëó÷åííûõ ðåçóëüòàòîâ èñïîëüçîâàëè êîìïüþòåðíóþ ïðîãðàììó STATISTICA 8. Äàííûå ïðåäñòàâëåíû â âèäå äîëè îò îáùåãî ÷èñëà. Äëÿ ñðàâíåíèÿ äîëåé ïðèìåíÿëñÿ ìåòîä õè-êâàäðàò, ðàçíèöà ñ÷èòàëàñü äîñòîâåðíîé ïðè P<0,05. Àíàëèç âñòðå÷àåìîñòè ãåíîòèïîâ ãåíà ÈË-1 ÐÀ ïîêàçàë, ÷òî â êîíòðîëüíîé ãðóïïå è ó ïàöèåíòîâ ñ ÈÌ ÷àùå âûÿâëÿëñÿ ãåíîòèï L/L (72% è 60% ñîîòâåòñòâåííî). ×àñòîòà âñòðå÷àåìîñòè àëëåëÿ 2* ó ëèö êîíòðîëüíîé ãðóïïû ñîñòàâëÿëà 16%, ó ïàöèåíòîâ ñ ÈÌ 23,7%, äîñòîâåðíûå ðàçëè÷èÿ â ðàñïðîñòðàíåííîñòè àëëåëåé ãåíà ÈË-1 ÐÀ íå îáíàðóæåíû. Ñðàâíèòåëüíûé àíàëèç ðàñïðåäåëåíèÿ ãåíîòèïîâ â îòíîøåíèè ïîëèìîðôèçìà ÈÔ-g (+874) ó çäîðîâûõ ëèö è ïàöèåíòîâ ñ ÈÌ âûÿâèë, ÷òî â îáåèõ ãðóïïàõ ïðåîáëàäàë ãåòåðîçèãîòíûé ãåíîòèï ÀÒ (47,4% è 52,9% ñîîòâåòñòâåííî). Ó ïàöèåíòîâ ñ ÈÌ ÷àùå, ÷åì â êîíòðîëå âñòðå÷àëèñü ãîìîçèãîòû ñ ãåíîòèïîì ÀÀ (41,2%), ãîìîçèãîòà ÒÒ âûÿâëåíà òîëüêî ó 1 ïàöèåíòà. Àíàëèç ãåíåòè÷åñêèõ ÷àñòîò àëëåëåé â ïîçèöèè +874 ãåíà ÈÍÔ-g ó ïàöèåíòîâ ñ ÈÌ è â êîíòðîëå ïîêàçàë ñíèæåíèå ÷èñëà ëèö ñ àëëåëåì Ò. Ïðè àíàëèçå ñî÷åòàííûõ âçàèìîäåéñòâèé ðàçëè÷íûõ ãåíîòèïîâ âûÿâëåíî, ÷òî ó ïàöèåíòîâ ñ ÈÌ ñî÷åòàíèÿ ãåíîòèïîâ ÀÀ ÈÔ-g +874/GG a-ÔÍÎ 308 âñòðå÷àëèñü äîñòîâåðíî ÷àùå (37,5%), ÷åì ó ëèö êîíòðîëüíîé ãðóïïû (4,3%, P<0,05).  íàñòîÿùåå âðåìÿ ñóùåñòâóåò ìíîæåñòâî äîêàçàòåëüñòâ ñâÿçè èììóíîãåíåòè÷åñêîãî ñòàòóñà õîçÿèíà ñ âîñïðèèì÷èâîñòüþ èëè òÿæåñòüþ òå÷åíèÿ ìíîãèõ çàáîëåâàíèé. ÈÌ ðàçâèâàåòñÿ â âèäå îñòðîé èíôåêöèè, ïðè ýòîì ïîäîáíî äðóãèì ãåðïåñâèðóñàì ÂÝÁ ìîæåò ñîõðàíÿòüñÿ â «äðåìëþùåì» ñîñòîÿíèè â ëèìôîöèòàõ, ÷àñòîòà è ñèëà ðåöèäèâîâ çàáîëåâàíèÿ óêàçûâàþò íà îòêëîíåíèÿ â ñèñòåìå âçàèìîäåéñòâèÿ «âèðóñõîçÿèí», îáóñëîâëåííûå èíäèâèäóàëüíûìè âðîæäåííûìè îñîáåííîñòÿìè çàùèòíûõ ðåàêöèé õîçÿèíà. Èíôèöèðîâàííûå ÂÝÁ êëåòêè ìèíäàëèí óñèëåííî ïðîäóöèðóþò ïðîâîñïàëèòåëüíûå öèòîêèíû: a-ÔÍÎ, ÈË-1, ÈË-6.  îñòðóþ ôàçó èíôåêöèè â êðîâè ïàöèåí- D Ðåçóëüòàòû è îáñóæäåíèå Èññëåäîâàíà ÷àñòîòà ïîëèìîðôèçìà â ãåíàõ ñëåäóþùèõ öèòîêèíîâ: ÈÍÔ-g â ïîçèöèè +874, ÈË-1 ÐÀ (òàíäåìíûå ïîâòîðû), a-ÔÍÎ â ïîçèöèè 308 (òàáëèöà). Ðåçóëüòàòû èññëåäîâàíèÿ ïîëèìîðôíîãî ëîêóñà 308 ãåíà a-ÔÍÎ ïîêàçàëè, ÷òî ó ïàöèåíòîâ ñ ÈÌ ÷àñòîòà ãåòåðîçèãîò AG äîñòîâåðíî ñíèæåíà ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîëåì (12,5% ïðîòèâ 43,5%, P<0,05). Ñîîòâåòñòâåííî íàáëþäàåòñÿ äîñòîâåðíîå ñíèæåíèå ÷àñòîòû àëëåëÿ À è òåíäåíöèÿ ê óâåëè÷åíèþ ÷àñòîòû àëëåëÿ G ó ïàöèåíòîâ ñ ÈÌ. ± J * ** * / // / 3 Q Q ÇÄÐÀÂÎÎÕÐÀÍÅÍÈÅ 10/2014 42 Ïðîáëåìû ýïèäåìèîëîãèè, ìèêðîáèîëîãèè è èíôåêöèîííûõ áîëåçíåé öåïòîðû öèòîêèíîâ ÈË-1-a è ÈË-1-b, íî íå àêòèâèðóþùèé &' ñèãíàëüíóþ òðàíñäóêöèþ. Óñòà íîâëåíî, ÷òî â îòâåò íà äåéñòâèå ÂÝÁ óðîâåíü ÈË-1 ÐÀ â íåéòðîôèëàõ ïðåâûøàåò âî ìíîãî ðàç &' óðîâåíü ÈË-1-a è ÈË-1-b, òàêèì îáðàçîì, ÂÝÁ èíãèáèðóåò äåéñòâèå ÈË-1 íà êëåòêè [27]. M. Hurme è ñîàâò. ïîêàçàëè, ÷òî â êîíòðîëüíîé ãðóïïå ÷àñòî &'7 òà àëëåëåé 2*ÈË-1ÐÀ/2*ÈË-1 (-511) âûøå, ÷åì ó ïàöèåíòîâ ñ ÈÌ, â êðîâè êîòîðûõ âûÿâëåíû àíòèòåëà ê ÂÝÁ [28]. Àâòîðû ïðåäïîëàãàþò, ÷òî îòñóòñòâèå D ýòèõ àëëåëåé îáåñïå÷èâàåò çà J ùèòó îò ÂÝÁ. ßâëÿÿñü îñíîâíûì öèòîêèÄåéñòâèå ÂÝÁ íà êëåòêè èììóííîé ñèñòåìû íîì, ñåêðåòèðóåìûì CD4+ òîâ ñ ÈÌ âîçðàñòàåò óðîâåíü ÈË-1 è ÈÍÔ-g (ðèñóíîê) Òh-1-êëåòêàìè, ÈÔ-g óñèëèâàåò òðàíñêðèïöèþ ðÿäà ãå[19, 20]. Çàðàæåíèå ÂÝÁ ñîïðîâîæäàåòñÿ ïîëèêëîíîâ, ÷üè ïðîäóêòû ó÷àñòâóþò â ïðåçåíòàöèè àíòèãåíà íàëüíîé àêòèâàöèåé Â-ëèìôîöèòîâ. Îñíîâíûì ìåõà- è äåãðàäàöèè âèðóñíîé ÐÍÊ, ïðîëèôåðàöèè è äèôíèçìîì èììóííîé çàùèòû ÿâëÿþòñÿ ÂÝÁ-ñïåöèôè- ôåðåíöèðîâêå ëèìôîöèòîâ. Âûÿâëåíà äîñòîâåðíàÿ ÷åñêèå CD8+ öèòîòîêñè÷åñêèå Ò-ëèìôîöèòû, êîòîðûå ñâÿçü ìåæäó ãåíîòèïîì ÀÀ +874 è ðèñêîì àêòèâàöèè âûäåëÿþò ïðîâîñïàëèòåëüíûå öèòîêèíû (a-ÔÍÎ, ÂÝÁ ó ïàöèåíòîâ ïîñëå òðàíñïëàíòàöèè ñòâîëîâûõ ÈÍÔ-g), ÷òî ïðèâîäèò ê àêòèâàöèè ìàêðîôàãîâ. Ñâÿ- êëåòîê [29]. çûâàÿñü ñ ïîâåðõíîñòüþ íåéòðîôèëîâ, ÂÝÁ èíäóöèÏðîâåäåííîå èññëåäîâàíèå ïîêàçàëî, ÷òî êîëè÷åðóåò â íèõ ñèíòåç ÈË-1 ÐÀ, èíãèáèðóþùåãî ÈË-1-çàñòâî àëëåëÿ À â ïîçèöèè 308 ãåíà a-ÔÍÎ äîñòîâåðâèñèìûå ìåõàíèçìû êëåòî÷íîãî èììóíèòåòà. Ìîíî- íî ñíèæåíî ó ïàöèåíòîâ ñ ÈÌ ïî ñðàâíåíèþ ñ êîíòðîöèòû ïðè ÈÌ òàêæå âîâëåêàþòñÿ â èíôåêöèîííûé ïðî- ëåì. Òàêæå âûÿâëåíî, ÷òî ñî÷åòàíèå ãåíîòèïîâ ÀÀ öåññ, î÷åâèäíî ïîýòîìó îäíèì èç âèäîâ àòèïè÷íûõ ÈÍÔ-g +874/GG a-ÔÍÎ 308 äîñòîâåðíî âûøå ó ïàìîíîíóêëåàðîâ ÿâëÿþòñÿ âèäîèçìåíåííûå ìîíîöèòû öèåíòîâ ñ ÈÌ ïî ñðàâíåíèþ ñ ëèöàìè êîíòðîëüíîé [21]. Èíôèöèðîâàíèå ìîíîöèòîâ ÂÝÁ èíãèáèðóåò èõ ãðóïïû. Ïî äàííûì ëèòåðàòóðû, àëëåëü À ãåíà g-ÈÍÔ äèôôåðåíöèðîâêó â äåíäðèòíûå êëåòêè. Ó÷àñòèå â ïîçèöèè +874 ñâÿçàí ñî ñíèæåíèåì óðîâíÿ öèòîêèìîíîöèòîâ â èììóííîì îòâåòå ïðè ÈÌ òàêæå âûðàæà- íà, òàêæå êàê è ó íîñèòåëåé àëëåëÿ G ãåíà a-ÔÍÎ â åòñÿ â ïîâûøåíèè óðîâíÿ ôåðìåíòà àäåíîçèíäåàìè- ïîçèöèè 308 íàáëþäàåòñÿ ñíèæåíèå ïðîäóêöèè íàçû â ïëàçìå ïàöèåíòîâ ñ èíôåêöèîííûì ìîíîíóêa-ÔÍÎ [30]. Ïîëó÷åííûå äàííûå ïîäòâåðæäàþò, ÷òî ëåîçîì [22]. ëþäè ñ óêàçàííûì ñî÷åòàíèåì ãåíîòèïîâ îáëàäàþò Ôóíêöèîíàëüíûå ïîëèìîðôèçìû â ãåíàõ öèòîêèñëàáûì èììóííûì îòâåòîì è áîëåå ïîäâåðæåíû äåéíîâ ìîãóò ñóùåñòâåííî âëèÿòü íà èõ ïðîäóêöèþ è, ñòâèþ ÂÝÁ. ñëåäîâàòåëüíî, íà òÿæåñòü è õðîíèçàöèþ çàáîëåâàÃëàâíàÿ ôóíêöèÿ èììóííîé ñèñòåìû õîçÿèíà íèÿ ïðè èíôèöèðîâàíèè ÂÝÁ. Ñóùåñòâóåò ìíîãî èñçàêëþ÷àåòñÿ â êîíòðîëå ðåïðîäóêöèè âèðóñà âïëîòü ñëåäîâàíèé ðîëè ïîëèìîðôèçìà ãåíîâ ÈÔ-g, a-ÔÍÎ, äî åãî ïîëíîé ýëèìèíàöèè èç îðãàíèçìà. Ïîëó÷åíÈË-1 ÐÀ ïðè ðàçëè÷íûõ çàáîëåâàíèÿõ. Îäíàêî ñâå- íûå ðåçóëüòàòû ïîêàçàëè, ÷òî ïîëèìîðôèçì åãî ãåäåíèé î ðîëè ïîëèìîðôèçìà ãåíîâ öèòîêèíîâ ó ïàöèíîâ ìîæåò îêàçûâàòü âëèÿíèå íà ÷óâñòâèòåëüíîñòü ê åíòîâ ñ ÈÌ ìàëî. çàáîëåâàíèþ. Ëþäè ñ âðîæäåííûì îñëàáëåííûì èìÃëàâíûì ìåäèàòîðîì âîñïàëåíèÿ ÿâëÿåòñÿ a-ÔÍÎ, ìóííûì îòâåòîì, âåðîÿòíî, ÿâëÿþòñÿ áîëåå ÷óâñòâèîí ñòèìóëèðóåò èììóííóþ ñèñòåìó âî ìíîãèõ åå òåëüíûìè ê äåéñòâèþ âîçáóäèòåëÿ. Äàëüíåéøèå èñçâåíüÿõ, èçìåíÿåò ýêñïðåññèþ ìíîãèõ öèòîêèíîâ è ðîñëåäîâàíèÿ ïî îïðåäåëåíèþ êîìáèíàöèé ãåíîòèïîâ ñòîâûõ ôàêòîðîâ. Îòìå÷åíî ïîâûøåíèå ïðîäóêöèè ïîçâîëÿò âûÿâèòü ëèö ñ âûñîêèì ðèñêîì ðàçâèòèÿ òÿa-ÔÍÎ Â-ëèìôîöèòàìè â îòâåò íà äåéñòâèå ÂÝÁ [23, æåëîé è ïðîäîëæèòåëüíîé áîëåçíè ïîñëå èíôèöèðî24]. Ñ äðóãîé ñòîðîíû, ïðè ñòèìóëÿöèè ìîíîöèòîâ ëèïî- âàíèÿ, ÷òî ñäåëàåò âîçìîæíûì ïðîâåäåíèå èíäèâèïîëèñàõàðèäàìè ÂÝÁ èíãèáèðóåò íà òðàíñêðèïöèîííîì äóàëüíîé ïðîôèëàêòèêè. óðîâíå ñèíòåç a-ÔÍÎ íà 7090% [25]. Èññëåäîâàíèÿ, ïðîâåäåííûå M. S. Wu è ñîàâò., ïîêàçàëè íàëè÷èå ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ äîñòîâåðíîé ñâÿçè àëëåëÿ À â ïîçèöèè 308 a-ÔÍÎ 1. Ìàëàøåíêîâà È. Ê., Äèäêîâñêèé Í. À., Ñàðñàíèÿ Æ. Ø. ñ ÂÝÁ-àññîöèèðîâàííîé êàðöèíîìîé æåëóäêà [26]. è äð. // Ëå÷. âðà÷. 2003. ¹ 9. Ñ. 3238. ÈË-1 ÐÀ âàæíûé ðåãóëÿòîð âîñïàëåíèÿ, åñòå2. Òèòîâ Ë. Ï., Ñàìîéëîâè÷ Å. Î., Âîëüô Õ. È., Êî÷àíîâñêèé Á. // Âîïð. âèðóñ. 1999. Ò. 44, ¹ 1. Ñ. 2124. ñòâåííûé êîíêóðåíòíûé èíãèáèòîð, ñâÿçûâàþùèé ðå- &'&' ÇÄÐÀÂÎÎÕÐÀÍÅÍÈÅ 10/2014 Ïðîáëåìû ýïèäåìèîëîãèè, ìèêðîáèîëîãèè è èíôåêöèîííûõ áîëåçíåé 3. Äàâèäîâè÷ Ã. Ì. , Êàðïîâ È. À. ÝïøòåéíàÁàðð âèðóñíàÿ èíôåêöèÿ: Ó÷åá.-ìåòîäè÷. ïîñîáèå. Ìèíñê, 2008. 4. Morris M. C., Edmunds W. J. // J. Infect. 2002. Vol. 45, ¹ 2. P. 107109. 5. Èâàíîâà Â. Â., Øèëäîâà È. Â., Ñèìîâàíüÿí Ý. Í. è äð. // Ðîñ. âåñòí. ïåðèíàòîëîãèè è ïåäèàòðèè. 2006. ¹ 6. Ñ. 4451. 6. Cohen J. I. // N. Engl. J. Med. 2000. Vol. 343, ¹ 7. P. 481492. 7. Ogembo J. G., Kannan L., Ghiran I., et al. // Cell Rep. 2013. Vol. 3, ¹ 2. P. 371385. 8. Kaye K. M., Izumi K. M., Mosialos G., Kieff E. // J. Virol. 1995. Vol. 69, ¹ 2. P. 675683. 9. Kawaguchi H., Miyashita T., Herbst H. // J. Clin. Invest. 1993. Vol. 92. P. 14441450. 10. Kawa K. // Inf. J. Hematol. 2000. Vol. 71. P. 108 117. 11. Cohen J. I., Lekstrom K. // J. Virol. 1999. Vol. 73, ¹ 9. P. 76277632. 12. Crawford D. H. // Philos. Trans. R. Soc. Lond. B. Biol. sci. 2001. Vol. 356, ¹ 1408. P. 461473. 13. Wilson A. G., Di Giovine F. S., Blakemore A. I. F., Duff G. W. // Human. Mol. Genet. 1992. ¹ 1. P. 353. 14. Tarlow J. K., Blakemore A. F., Lennard A., et al. // Hum. Genet. 1993. Vol. 9. P. 403404. 15. Mansfield J. C., Holden H., Tarlow J. K., et al. // Gastroenterology. 1994. Vol. 106. P. 637642. 16. Tarlow J. K., Blakemore A. F., Cork M. J., et al. // Lymphokine. Cytokine. Research. 1993. Vol. 12. P. 181. 17. Rossouw M., Nel H. J., Cooke G. S., et al. // Lancet. 2003. Vol. 361. P. 18711872. 18. Pravica V., Perrey C., Stevens A., Lee J. H. // Hum. Immunol. 2000. Vol. 61, ¹ 9. P. 863866. 19. Foss H. D., Herbst H., Hummel M., et al. // Blood. 1994. Vol. 83, ¹ 3. P. 707712. 20. Øàðêîâà Â. À., Ãîðäååö À. Â., Ñàâèíà Î. Ã. // Ñîâð. íàóêîåìêèå òåõíîëîãèè. 2008. ¹ 3. Ñ. 94. 21. Óðàçîâà Î. È., Ïîìîãàåâà Ô. Ï., Íîâèöêèé Â. Â. è äð. // Èíôåêöèîííûå áîëåçíè. 2004. Ò. 2, ¹ 4. Ñ. 1721. 22. ßíîâè÷ Î. Î., Òèòîâ Ë. Ï., Ùåðáà Â. Â. // Çäðàâîîõðàíåíèå. 2012. ¹ 12. Ñ. 1719. 23. Spender L. C., Cornish G. H., Rowland B., et al. // J. Virol. 2001. Vol. 75. P. 35373546. 24. Roncella S., Baldi L., Cutrona G., et al. // Clin. Immunol. Immunopathol. 1995. Vol. 77. P. 162171. 43 25. Gosselin J., Menezes J., DAddario M., et al. // Eur. J. Immunol. 1991. Vol. 21. P. 203208. 26. Wu M. S., Huang S. P., Chang Y. T., et al. // J. Infect. Dis. 2002. Vol. 185, ¹ 1. P. 106109. 27. Roberge C. J., Poubelle P. E., Beaulieu A. D., et al. // J. Immunol. 1996. Vol. 156. P. 48844891. 28. Hurme M., Helminen M. // Scand. J. Immunol. 1998. Vol. 48, ¹ 3. P. 219222. 29. Bugunia-Kubic K., Mlynarczewska A., Jaskula E., Lange A. // Br. J. Haematol. 2005. Vol. 132. P. 326332. 30. Sallakci N., Coskun M., Berber Z., Gurkan F., et al. // Tuberculosis. 2007. Vol. 87. P. 225230. Ïîñòóïèëà 08.07.14. POLYMORPHISM OF TNF-ALPHA, IL-1RA, AND INF-GAMMA CYTOKINE GENES IN PATIENTS WITH INFECTIOUS MONONUCLEOSIS O. O. Yanovich, L. P. Titov, V. V. Shcherba Objective. Studying of the polymorphic cytokine genes incidence in patients with infectious mononucleosis was the purpose of the work. Materials and methods. Seventeen patients with infectious mononucleosis aged 23.9±1.5 yrs (14 men and 3 women) were examined. The control group was formed of 28 practically healthy persons aged 33.7±2.5 yrs (13 men and 15 women). The genome DNAs were identified using a DNAsopV set (Russia). Polymorphic genes of the TNF-a cytokines in position 308 and of the INF-g cytokines in +874 were identified using the allele specific PCR, and the IL-1RA tandem 86 b.p. patterns were determined. Results. It has been shown that allele A presence in genes of the TNF-a cytokines in position 308 is reliably lower in patients with infectious mononucleosis than in the control persons. It has been found that combination of the genotypes AA of INF-g +874/GG TNF-a 308 occur more often in patients with infectious mononucleosis than in the control persons. Conclusion. The results obtained show that the host genes polymorphism can impact on the susceptibility to the disease. Further studies of genotypes combinations determination will make possible identification of persons at a high risk for a severe and long-time disease development in the infected persons. It will help to prevent the disease development individually. Key words: EpsteinBarr virus, infectious mononucleosis, cytokines, genes polymorphism. Àäðåñ äëÿ êîððåñïîíäåíöèè: ßíîâè÷ Îëüãà Îëåãîâíà. Ðåñïóáëèêàíñêèé íàó÷íî-ïðàêòè÷åñêèé öåíòð ýïèäåìèîëîãèè è ìèêðîáèîëîãèè. 220114, ã. Ìèíñê, óë. Ôèëèìîíîâà, 23; ñë. òåë. (8-017) 267-95-33.
