Набор реагентов для иммуноферментного определения антигена лямблий (Lamblia intestinalis) в фекалиях человека (ИммуноФА-Лямблия-Аг) Номер по каталогу ИФ-20-08 Набор ИммуноФА-Лямблия-Аг предназначен для качественного определения наличия специфического антигена лямблий (Lamblia intestinalis) в фекалиях человека методом ИФА при диагностике лямблиоза и мониторинге его лечения. Набор также может быть использован при проведении массовых эпидемиологических обследований. Лямблиоз является одним из самых часто встречающихся в мире кишечных протозоозов. Пораженность взрослого населения составляет в среднем 4-7% и достигает 15% среди детей. Возбудитель лямблиоза – паразитическое простейшее Lamblia intestinalis - обитает в организме человека в просвете тонкой кишки. Диагноз «лямблиоз» устанавливается на основании выявления вегетативных форм (трофозоитов) или цист паразита при 3-х кратном паразитологическом исследовании проб фекалий. При этом выявляется лишь 76-90% инвазий, что можно объяснить большими перерывами в выделении цист (от нескольких дней до 2 недель) и небольшим их количеством. Острый период лямблиоза характеризуется диареей, тошнотой, анорексией, болями в верхней и средней эпигастральной области, вздутием кишечника и длится от нескольких недель до трех месяцев. Хроническая инвазия встречается у пациентов с нарушением резистентности слизистой кишечника. Лямблиоз также может протекать бессимптомно. Специфический антиген лямблий представляет собой поверхностный гликопротеин стенки цист лямблий и его выявление является прямым свидетельством лямблиозной инвазии, даже при отсутствии цист и/или трофозоитов в пробах фекалий. Чувствительность определения составляет 97%, специфичность – 99%. Порог определения - около 4 нг/мл антигена в приготовленном образце. Перекрестная реакция с антигенами Entamoeba coli, Entamoeba histolytica, Ascaris lumbricoides, Blastocystis hominis, Hymenolepis nana, Strongyloides stercoralis, Enterobius vermicularis, Endolimax nana отсутствует. Принцип - двухстадийный «сэндвич» ИФА S Е Е Е Е Иммобилизован Анализируемый Иммобилизованные Конъюгат мононые монокло- образец иммунокомплексы клональных нальные антиантител с тела пероксидазой Иммобилизованные комплексы с мечеными антителами P Субстратная реакция СХЕМА ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗА 1. Внесение в лунки планшета по 0,05 мл блокирующего буфера 2. Внесение по 0,05 мл отрицательной и положительной контрольных проб и исследуемых образцов фекалий и инкубация (1 час, +(20-25)0С) 3. Промывка лунок планшета 4. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл конъюгата и инкубация (30 мин, +(20-25)0С) 5. Промывка лунок планшета 6. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл субстратного раствора и инкубация (10 мин, +(20-25)0С) 7. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл стоп-реагента 8. Измерение оптической плотности (λ=450 нм), интерпретация результатов ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА Чувствительность: 97%. Специфичность: 99%; не обнаружено перекрестной реакции с антигенами Entamoeba coli, Е.histolytica, Ascaris lumbricoides, Blastocystis hominis, Hymenolepis nana, Strongyloides stercoralis, Enterobius vermicularis и Endolimax nana. Предел определения: около 4 нг/мл антигена в приготовленном образце. Длина волны измерения: 450 нм. Субстрат: 3,3`,5,5`-тетраметилбензидин (ТМБ). Условия инкубации (время, tоС) : - инкубация 1 час при +(20-25)оС); - инкубация 30 мин при +(20-25)оС; - инкубация с ТМБ 10 мин при +(20-25)оС). Время проведения анализа: 1 час 50 минут. Количество анализируемой образца: 50 мкл. Количество анализов: набор рассчитан на проведение анализа 94 неизвестных образцов и 2 контрольных проб (всего 96 определений). Планшеты: стрипованные, разделяющиеся на отдельные лунки. Срок годности набора: 12 месяцев.