Набор реагентов для иммуноферментного определения антител класса G к цитомегаловирусу в сыворотке крови (ИммуноФА-IgG-ЦМВ) Номер по каталогу ИФ-20-01 ТУ 9398-034-41566050-2009 Регистрационное удостоверение № ФСР 2010/06883 Набор реагентов ИммуноФА-IgG-ЦМВ предназначен для качественного определения антител класса G к цитомегаловирусу человека в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа на стрипованных полистироловых планшетах. Цитомегаловирус (ЦМВ) человека принадлежит к семейству герпес-вирусов. В большинстве случаев первичная инфекция протекает практически бессимптомно, при этом ЦМВ, долго оставаясь в организме в латентном состоянии, при определенных условиях может переходить в активное состояние, что приводит к серьезным последствиям. Наиболее распространенные осложнения, вызываемые повторным развитием инфекции: 1) инфекция во время беременности, которая может вызывать врожденные нарушения у новорожденных; 2) инфекция вследствие переливания крови, что может приводить к ЦМВ–мононуклеозу; 3) инфекция при подавлении иммунитета (пересадка органов и тканей), которая может сопровождаться отторжением пересаженного органа. Антитела класса G обнаруживаются у 50 –70 % взрослого населения. Клинический диагноз цитомегаловирусной инфекции требует подтверждения специальными лабораторными тестами. Определение IgG-антител к ЦМВ с использованием набора ИммуноФА-IgGЦМВ может быть рекомендовано в качестве скринингового исследования беременных, реципиентов трансплантантов и пациентов с ослабленным иммунитетом с целью выявления ранее перенесенной ЦМВ-инфекции. Принцип метода – непрямой двухстадийный ИФА S Е Е Е Е Е Е P Иммобилизованный антиген Анализируемый образец Иммобилизованные иммунокомплексы Конъюгат вторичных антител с пероксидазой Иммобилизованные иммунокомплексы с мечеными антителами Субстратная реакция СХЕМА ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗА 1. Внесение в лунки планшета: по 0,1 мл положительного, отрицательного и порогового контрольных образцов, разведенных в 101 раз образцов исследуемых сывороток крови и инкубация (30 мин, +37оС). 2. Промывка лунок планшета. 3. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл конъюгата и инкубация (30 мин, +37оС). 4. Промывка лунок планшета. 5. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл субстратного раствора и инкубация (15 мин, +37оС). 6. Внесение в лунки планшета по 0,1 мл стоп-реагента. 7. Измерение оптической плотности (λ=450 нм), интерпретация результатов. ОСНОВНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА Чувствительность набора относительно ОСО 42-28-360-01 (утверждена ГИСК им. Л.А. Тарасевича) составляет 100%. Специфичность набора относительно ОСО 42-28-360-01 (утверждена ГИСК им. Л.А. Тарасевича) составляет 100%. Результаты ИФА учитываются при следующих условиях: Значение ОПК+(ср) - не ниже 1,0. Значение ОПК-(ср) - не выше 0,15. Значение ОПКпор(ср) - не выше 0,2. В противном случае исследование необходимо повторить. Интерпретация результатов Результат анализа исследуемых образцов следует считать: положительным при ОП выше 1,1х ОПпор(исследуемый образец содержит IgG к ЦМВ), отрицательным при ОП ниже 0,9х ОПпор (исследуемый образец не содержит IgG к ЦМВ). Результаты при ОП в диапазоне 0,9хОПпор – 1,1хОПпор являются сомнительными, рекомендуется исследовать образцы сыворотки крови повторно. Также рекомендуется повторное исследование вновь полученных сывороток. Длина волны измерения: 450 нм. Субстрат: 3,3`,5,5`-тетраметилбензидин (ТМБ). Условия инкубации (время, tоС) : - 1-ая инкубация 30 мин при +37оС; - 2-ая инкубация 30 мин при +37оС; - инкубация с ТМБ 15 мин при +37оС. Время проведения анализа: 1 час 30 минут. Объем пробы: 100 мкл. Количество анализируемой сыворотки: 10 мкл (для анализа сыворотка разводится в 101 раз и анализируется 100 мкл разведенной сыворотки). Количество анализов: набор рассчитан на проведение 96 анализов, включая контрольные образцы. Планшеты: стрипованные, разделяющиеся на отдельные лунки. Срок годности набора: 12 месяцев. Все реагенты набора представлены в жидком виде.