С.Сейфуллиннің 120 жылдығына арналған «Сейфуллин оқулары-10: Мемлекеттің индустриалдыинновациялық саясатын құрудағы бәсекеге қабілетті кадрларды дайындау келешегі мен ғылымның рөлі» атты халықаралық ғылыми-теориялық конференциясының материалдары//Материалы международной научно-теоретической конференции «Сейфуллинские чтения-10: «Новые перспективы подготовки конкурентоспособных кадров и роль науки в формировании индустриально-инновационной политики страны», посвященной 120-летию со дня рождения С. Сейфуллина. – 2014. – Т.1., ч.1. – С.72-74 ХАРАКТЕРИСТИКА ШТАММОВ ГРИБА SEPTORIA NODORUM ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В СЕЛЕКЦИИ ЯРОВОЙ МЯГКОЙ ПШЕНИЦЫ В УСЛОВИЯХ IN VITRO Райзер О.Б. Септориоз яровой пшеницы наряду с такими заболеваниями как ржавчина, корневые гнили составляет группу наиболее экономически значимых болезней зерновых культур. Высокая экологическая пластичность данного заболевания, позволяет ему быть представленным в фитопатогенных комплексах основных зерносеющих регионах нашей страны. Современная интегрированная защита зерновых от болезней включает применение комплекса разных фитосанитарных мероприятий: возделывание устойчивых сортов, агротехнологические методы, протравливание семян, опрыскивание посевов фунгицидами, использование биопрепаратов и индукторов устойчивости. Однако септориоз — очень коварное заболевание, и многие из перечисленных приемов для борьбы с ним оказываются малоэффективными. Одной из важнейших задач при разработке интегрированной защиты растений является разработка биотехнологических методов ускорения селекции и повышения её эффективности. В этом отношении наиболее перспективной является клеточная селекция, позволяющая быстро получать септориозоустойчивые линии на селективных средах, содержащих токсины или культуральные фильтраты гриба. Из культуры клеток можно регенерировать целые растения, обладающие устойчивостью к септориозу и их можно использовать в качестве исходного материала в процессе селекции для выведения новых сортов. Одной из важнейших задач при разработке защиты растений является разработка биотехнологических методов ускорения их селекции и повышения её эффективности. В этом отношении наиболее перспективной является клеточная селекция, позволяющая быстро получать септориозоустойчивые линии на селективных средах, содержащих токсины или культуральные фильтраты гриба. Из культуры клеток можно регенерировать целые растения, обладающие устойчивостью к септориозу и их можно использовать в качестве исходного материала в процессе селекции для выведения новых сортов. В качестве исходного материала использовали штаммы фитопатогенного гриба Septoria nodorum любезно предоставленные для исследований М. Койшибаевым (Институт защиты растений). Культивирование штаммов гриба Septoria nodorum проводили на средах следующего состава: голодный агар, содержащий 15 г/л агара; картофельнодекстрозный агар, а также мальт-дрожжевой агар, содержащий 4 г/л дрожжевого экстракта, 4 г/л мальт-экстракта, 4 г/л сахарозы, 15 г/л агара. Колонии штаммов S. nodorum до оценки их культурально-морфологических признаков выращивали при постоянном УФ свете. Получение культуральных фильтратов проводили при инокуляции жидкой питательной среды вегетативным мицелием, культивирование проводили в покое при температуре 25°С – в течение 21 дня. Затем отфильтровывали культуральную жидкость через несколько видов фильтров – капроновый, нейлоновый с диаметром пор 200 мкм, бумажный, автоклавировали при 120°С в течение 30 минут. Для проведения клеточной селекции на устойчивость к возбудителям болезней пшеницы, одним из первых этапов является выбор штаммов фитопатогенов. Необходимо, чтобы это были типичные для изучаемого вида гриба штаммы, чтобы они были высокопатогенными, токсигенными. С этой целью первым этапом исследований было изучение морфологических и культуральных свойств фитопатогенного гриба Septoria nodorum. Для переизоляции штаммов проводили их пересев, в результате чего были получены чистые культуры грибов. Отличия по культуральным и морфологическим признакам изучаемых штаммов S. nodorum, проводили на 20-й день, отмечая особенности формирования колоний, окраску воздушного мицелия, характер концентрических веерообразных выростов мицелия. Для S. nodorum характерен более рыхлый, шерстистый, быстрорастущий, от беловатого до розового цвета воздушный мицелий, в центре более уплотненный, иногда выпуклый. Субстратный мицелий светлокоричневый, по краям - беловатый, розовый до красно-карминового цвета. Рост интенсивный, диаметр через 12-15 суток достигал 50-70 мм. Таким образом, сформирована рабочая коллекция с целью использования культур грибов в клеточной селекции пшеницы на устойчивость к септориозу. В настоящее время коллекционные штаммы пересеяны на свежую питательную среду и заложены на хранение в холодильник при температуре + 4ºС. Следующим этапом работы являлось изучение культуральных фильтратов штаммов гриба S. nodorum. Для этого штаммы культивировали в течение 21 дня на жидких средах, предложенных Б.Хасановым и Е. Постниковой. Инокуляцию среды проводили вегетативным мицелием. В результате были получены колонии, различные по форме, окраске воздушного мицелия, цвету культуральной жидкости, с различным уровнем кислотности. По окончанию культивирования проводили описание культуральноморфологических признаков гриба на жидкой среде, затем фильтрование культуральной жидкости через систему фильтров, автоклавирование в течение 20 минут при 120ºС и, измеряли уровень рН (таблица 1). В отношении уровня рН следует отметить, что до инокуляции среда имела рН 3-4, по окончании культивирования произошло смещение уровня в сторону слабокислой или нейтральной реакции среды. Таблица 1 – Культурально-морфологические признаки гриба S. nodorum на жидкой среде Описание колонии рН Штамм Sn 1/05 Мицелиальная пленка расположена островками, 5-6 воздушный мицелий коричневого цвета, войлочный, средняя толщина пленки 0,2 см. Культуральный фильтрат темно-коричневого цвета, мутный Sn 7/05 Колония слабо развита, мицелиальная пленка в виде 6-7 островков, мицелий светло-коричневого цвета, бархатистый, толщина пленки – 0,3 см. Культуральный фильтрат темно-коричневого цвета, мутный, на дне – осадок. Sn 8/05 Колония хорошо развита, мицелиальная пленка 6-7 блинообразной формы, толщиной 0,5 см, воздушный мицелий серо-коричневого цвета, войлочный. Культуральный фильтрат темно-зеленого цвета, мутный. Sn 24/05 Колония интенсивно развита, блинообразной формы, 6-7 толщиной около 1,0-1,2 см, воздушный мицелий интенсивно развит, войлочный, коричнево-зеленого цвета. Культуральный фильтрат мутный, темно-коричневого цвета, на дне – белый осадок. После автоклавирования культуральные фильтраты изменяли свой цвет на более темные оттенки, уровень рН не менялся. Полученные таким образом культуральные фильтраты будут использованы в исследованиях в клеточной селекции in vitro. Для получения устойчивых линий яровой мягкой пшеницы к возбудителю септориоза. Научные руководители: О.Н. Хапилина, в.н.с., к.б.н. (РГП «Национальный центр биотехнологии», г. Астана), В.С. Горбуля, к.с.-х.н. (АО «Казахский агротехнический университет им.С.Сейфуллина»)