Иммуногенетические особенности клинического течения хронического … 309 Е. Л. Назарова, И. А. Докшина, В. И. Шардаков, В. Т. Демьянова, Е. Н. Зотина Иммуногенетические особенности клинического течения хронического лимфолейкоза ФГБУН «Кировский НИИ гематологии и переливания крови ФМБА России» С реди заболеваний системы крови хронический лимфолейкоз (ХЛЛ) по своей частоте превалирует у лиц пожилого возраста. Эта патология является также наиболее распространенной в странах Европы и Северной Америки, где на долю ХЛЛ приходится около 30% от всех гемобластозов. В настоящее время важное этиопатогенетическое значение при ХЛЛ придается нарушению баланса между апоптозом и пролиферацией лимфоидных клеток, где значимую роль играют генетические факторы, опосредующие соотношение и активность этих процессов, а также определяющие скорость развития и прогрессирования заболевания. К сожалению, с молекулярно-генетических позиций ХЛЛ изучен недостаточно полно. Так, подавляющее число работ по исследованию роли различных генов- кандидатов в формировании подверженности хроническому лимфолейкозу – проведено за рубежом, тогда как в Российской Федерации основное внимание в решении этой проблемы уделено лишь генам системы детоксикации ксенобиотиков. Роль иных генетических вариантов, а также изменений профиля экспрессии генов иммунного ответа в формировании и клиническом течении ХЛЛ среди населения России изучена крайне слабо. Не установлены четкие клиникогенетические параллели с учетом клинического течения ХЛЛ, а оно весьма вариабельно: от «тлеющего» до прогрессирующего характера течения заболевания. Целью настоящего исследования являлась оценка мутационного статуса генов иммунного ответа в качестве прогностического критерия при доброкачественном и прогрессирующем течении ХЛЛ. Проведен ретро- и проспективный анализ клинических данных у 30 больных ХЛЛ – жителей Кировской области, иден- 310 Вопросы онкогематологии тифицирующих себя как русские. В исследование вошли пациенты, у которых диагноз заболевания установлен на основании классических критериев в период с 2001 по 2013 гг. Среди них наблюдалось 17 мужчин и 13 женщин (соотношение 1,3:1). Геномное тестирование 19 полиморфных участков 14 генов иммунного ответа (IL1β, IL2, IL4, IL6, IL10, IL17A, TNF, TLR2, TLR3, TLR6, TLR9, CD14, FCGR2A) проводили методом полимеразной цепной реакции с аллель-специфичными праймерами и электрофоретической детекцией продуктов реакции в агарозном геле. Распределение генотипов по исследуемым полиморфным локусам проверяли на соответствие равновесию Харди-Вайнберга с помощью точного теста Фишера. Для расчета результатов использовали пакет программ Statistica V.12 и MS Office Excel 2003. Cтатистически значимыми считали различия при p<0,05. Анализ межгенных взаимодействий выполнялся с помощью непараметрической программы GMDR (Generalized Multifactor – Dimensionality Reduction) [Lou X.Y. et al., 2007; http://www.healthsystem. virginia.edu/internet/addiction-genomics/Software/]. Характеристика обследованных больных представлена в таблице. Таблица – Характеристика лимфолейкозом Показатель групп больных Доброкачественная форма (n=17) хроническим Прогрессирующая форма (n=13) Пол: - мужской 10 (58,8%) 7 (53,9%) - женский 7 (41,2%) 6 (46,1%) - соотношение 1,4:1 1,2:1 Возраст на момент постановки 56 (54-64) 58 (58-73) диагноза (лет), Ме (25-75‰) Стадия ХЛЛ на момент постановки диагноза (по Binet J. L. et al., 1981): -А 2 (11,8%) 0 (0%) -В 15 (88,2%) 11 (84,6) -С 0 (0%) 2 (15,4) Число пациентов, нуждающихся в лечении на момент поста11 (64,7%) 10 (76,9%) новки диагноза Период от момента постановки диагноза до начала терапии 19 (8-34) 12 (4-12) (мес.), Ме (25-75‰) Общая выживаемость (число 17 (100%) 8 (61,5%)* больных) Бессобытийная выживаемость 25 (23-36) 36 (14-60) (мес.), Ме (25-75‰) Примечание. Ме – медиана показателя; 25-75‰ – верхний и нижний квартили; * – достоверность различий показателя в группах больных ХЛЛ. Иммуногенетические особенности клинического течения хронического … 311 Не было выявлено гендерных, возрастных отличий показателей в изучаемых группах, а также сроков начала лечения и бессобытийной выживаемости. В 15,4% случаев прогрессирующее течение заболевания устанавливалось у пациентов в момент постановки диагноза уже на стадии С, что не наблюдалось при доброкачественном течении процесса. Найдены отличия в общей выживаемости между I и II группами пациентов (100% vs. 61,5%, χ2=7,85, р=0,0051): за период наблюдения умерли 5 больных с прогрессирующим ХЛЛ вследствие перехода заболевания в терминальную фазу. Учитывая роль генетической компоненты в развитии и течении ХЛЛ, нами была изучена частота распространения аллелей и генотипов генов иммунного ответа при доброкачественном и прогрессирующем течении ХЛЛ. Установлено, что при доброкачественном течении ХЛЛ: - достоверно чаще выявлялся мутантный аллель А гена TNF (G-308A) (28,1% vs. 7,7%; χ2=3,90; р=0,05; OR=4,70 (95%CI: 0,9224,10)), - мутантный аллель С гена TLR9 (T-1237C) (25,0% vs. 3,8%; 2 χ =4,90; р=0,03; OR=8,33 (95%CI: 0,97-71,76)), - мутантный аллель А гена TLR2 (Arg753Gln) (50,0% vs. 15,4%; χ2=3,80; р=0,05; OR=5,50 (95%CI: 0,91-33,18)), - реже – аллель «дикого типа» С гена IL6 (C-174G) (12,5% vs. 46,2%; χ2=4,07; р=0,04; OR=6,00 (95%CI: 0,95-37,77)). При анализе межгенных взаимодействий выявленных генов-кандидатов предрасположенности к развитию прогрессирующего течения ХЛЛ были найдены статистически достоверные сочетания гаплотипов в двух- и трехлокусной моделях. Так, при наличии генотипа ТТ гена TLR9 (T-1237C) в сочетании с генотипом GG гена TLR2 (Arg753Gln) риск развития прогрессирующей формы заболевания возрастал в 23,8 раза (χ2=6,23; р=0,01; OR=23,83 (95%CI: 1,50-377,42)), а при сочетании вышеуказанных гаплотипов с генотипом GG гена TNF (G-308A) – в 36 раз ((χ2=6,70; р=0,01; OR=36,00 (95%CI: 1,43-905,40)). Таким образом, с доброкачественным характером течения ХЛЛ и, следовательно, выживаемостью пациентов уже в момент постановки диагноза коррелируют присутствие мутантных аллелей генов TNF, TLR9 и TLR2, а также низкая частота выявления аллеля «дикого типа» гена IL6. Кроме того, наличие комбинации нормальных гомозигот генов TNF, TLR9 и TLR2 увеличивает вероятность развития прогрессирующей формы заболевания, что может способствовать оптимизации выбора терапии.