Методика забора, условия хранения и транспортирования клинического материала для лабораторной диагностики заболеваний, вызванных вирусами гриппа/ОРВИ Вирусологическая лаборатория ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Хабаровском крае» Л.В. Савосина, Л.А. Лебедева Мазки из полости носа • • Мазки отбирают сухими стерильными зондами с ватными тампонами. Предварительно при необходимости больной должен высморкаться, чтобы очистить нос от слизи! Зонд (это может быть обычная ватная палочка с пластиковым стержнем (не деревянным!) или полистироловый с вискозным тампоном сваб) вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2-3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую раковину, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. После забора материала рабочую часть зонда с тампоном помещают в пробирку с транспортной средой. Конец зонда с тампоном (1 см) отламывают или отрезают с помощью ножниц с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть пробирку. Пробирку с раствором с рабочей частью зонда закрывают, маркируют «нос» («Н»). Мазки из ротоглотки • • Мазки берут сухим стерильным зондом из полистирола с вискозным тампоном, вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки, аккуратно прижимая язык пациента шпателем. Перед этим необходимо прополоскать полость рта водой. После забора материала рабочую часть зонда с тампоном помещают в пробирку с транспортной средой. Конец зонда с тампоном (1 см) отламывают (отрезают с помощью ножниц) , придерживая крышкой пробирки с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть пробирку. Пробирку с раствором с рабочей частью зонда закрывают, маркируют «зев» («З»). Транспортная среда • • • В качестве транспортной среды для проведения ОТ-ПЦР могут использоваться: среда 199 (на растворе Хенкса) или ей подобные с добавлением раствора БСА, HEPES-буфера и гентамицина. Такая среда готовится в вирусологической лаборатории ФБУЗ «ЦГиЭ в Хабаровском крае», предоставляется для забора материала всем желающим, и является предпочтительным вариантом для последующей изоляции вирусов гриппа на культуре клеток MDCK; специальная коммерческая среда, например, производства ООО «ИнтерЛабСервис» «Транспортная среда для хранения и транспортировки респираторных мазков»; физиологический раствор. Транспортная среда разливается по 1-1,5мл в микропробирки типа «эппендорф», либо в любые другие одноразовые пластиковые пробирки с герметично закрывающимися крышками и хранится до использования при температуре от +2 до +80С. Зонды для взятия мазков • • В качестве зондов для взятия мазков из носа могут быть использованы чистые ватные палочки (ушные) с пластиковым стержнем (не деревянным!). Стерильные ватные палочки предпочтительны, если клинический материал в последующем будет использован для вирусологических исследований на культуре клеток и предоставляются вирусологической лабораторией. Для мазков из ротоглотки целесообразно использовать одноразовые индивидуально упакованные полистироловые зонды с вискозными тампонами (свабы), благодаря их длине и гибкости. Другие виды материала Также методом ОТ-ПЦР на грипп/ОРВИ может быть исследована мокрота, БАЛ или промывные воды бронхов, мазок или содержимое интубационной трубки, секционный материал Условия хранения и транспортировка клинического материала • • Условия хранения При температуре от +2 до +80С материал хранится в течение 2-3х суток. При более длительном хранении, в случае невозможности доставки в лабораторию, необходимо заморозить образцы и хранить при Т= -200С. При доставке в лабораторию необходимо соблюсти все мероприятия, не допускающие их оттаивания. В условиях ЛУ не допускается оттаивание замороженных образцов! Транспортировка осуществляется в специальном термоконтейнере с охлаждающими элементами или в термосе со льдом, т.е. с соблюдением «холодовой цепи». НАПРАВЛЕНИЕ ЗАПОЛНЯЕТСЯ ПО СЛЕДУЮЩЕЙ ФОРМЕ: • • • • • • • • • • • Город, район, учреждение, направляющие материал_________________ Ф.И.О. больного_______________________________________________ Возраст_______________________________________________________ Адрес________________________________________________________ Дата заболевания______________________________________________ Диагноз______________________________________________________ Указать тяжелые сопутствующие заболевания: сердечно-сосудистые, легочные, ожирение, сахарный диабет, ВИЧ и др.; а также беременность (срок)__________________________ На что исследовать_____________________________________________ Вид материала_________________________________________________ Дата забора материала__________________________________________ Подпись ответственного за забор материала лица ___________________ NB! Если больной прибыл из-за границы, необходимо указать это на бланке направления! Материал доставлять в вирусологическую лабораторию ФБУЗ«Центр гигиены и эпидемиологии в Хабаровском крае» Адрес: улица Карла-Маркса 109«б»; тел. 27-47-72 • Методика составлена с использованием МУ 1.3.256909 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности» и МР «Выделение вирусов гриппа в клеточных культурах и куриных эмбрионах и их идентификация», ФГБУ НИИ Гриппа МЗ РФ, С-Пб., 2006 СПАСИБО ЗА ВНИМАНИЕ!