(812) 412-8380 www.olvex-d.ru С-РЕАКТИВНЫЙ БЕЛОК (ЛАТЕКС-ТЕСТ) Кат. №: 051.011 – 2 мл СРБ латекс-суспензии НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов «СРБ-ОЛЬВЕКС» предназначен для качественного и полуколичественного определения содержания С-реактивного белка (СРБ) в сыворотке крови методом латекс-агглютинации в клинической лабораторной диагностике. СРБ, как белок острой фазы, не является специфичным для какого-либо определенного заболевания, но характерен для острого воспалительного процесса и может служить признаком его активности. Обычно, в случае острых воспалительных процессов, возникающих вследствие инфекции, инфаркта миокарда или хирургического вмешательства, уровень СРБ может увеличиваться существенно выше нормы в десятки раз. Количество исследований определяется расходом Реагента 1 на один тест. Допускается пропорциональное изменение объёмов реагентов и сыворотки, но не менее чем по 10 мкл. Согласно стандартной процедуре анализа при расходе 20 мкл Реагента 1 на один тест набор рассчитан на проведение 100 тестов. ПРИНЦИП МЕТОДА СРБ латекс-реагент представляет собой суспензию латексных частиц, на поверхности которых иммобилизованы антитела против СРБ человека. При смешивании данного реагента с сывороткой крови человека, содержащей СРБ в концентрации, превышающей 6,0 мг/л, в результате реакции между антителами к СРБ и антигеном (СРБ) развивается агглютинация латексных частиц. Агглютинация определяется визуально, что свидетельствует о положительной реакции пробы. Для полуколичественного определения СРБ анализируются последовательные разведения исследуемого образца. Об уровне СРБ судят по последнему разведению (титру), при котором была выявлена визуально определяемая агглютинация. СОСТАВ НАБОРА Реагент 1 (СРБ-латекс суспензия). Реагент 2 (буфер-разбавитель). Реагент 3 (положительный контроль). Реагент 4 (отрицательный контроль). Реагент 5 (слабоположительный контроль). Тест-пластина (слайд). АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Чувствительность определения 6,0 мг/л. Оценка результатов анализа производится в течение времени со 2-ой по 3-ю минуту после смешивания анализируемого образца и реагентов. Нормальные значения: взрослые – до 6,0 мг/л; дети – до 10 мг/л; новорожденные – до 15 мг/л. Рекомендуется в каждой лаборатории определить диапазон нормальных значений для обследуемого контингента. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ Сыворотка крови человека. Срок хранения при комнатной температуре (+18-25 °С) – не более 3-х суток с момента забора; при +2-8 °С – не более 6-ти суток; при -20 °С – не более 3-х месяцев. Использование гемолитических или липемичных образцов сыворотки, а также плазмы крови недопустимо. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА Перед постановкой теста реагенты и анализируемые образцы сыворотки крови необходимо довести до комнатной температуры (+18-25 °С). Проведение анализа при температуре ниже +18 °С недопустимо, так как это может привести к ложноположительным результатам. Реагент 1 перед использованием следует перемешать до образования гомогенной суспензии осторожным встряхиванием. 1. КАЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ Раскапать по 20 мкл в лунки тест-пластины исследуемые образцы и реагенты, используя каждый раз одноразовые наконечники пипеток, следующим образом: - в лунки №№ 1–10 – исследуемые образцы сыворотки - в лунку (+) – Реагент 3 (положительный контроль) - в лунку (–) – Реагент 4 (отрицательный контроль) - в лунку (+/−) – Реагент 5 (слабоположительный контроль) Рядом с первой каплей во все лунки внести по 20 мкл реагента 1 (латекс суспензия). Смешать содержимое двух капель в лунке до гомогенного состояния, охватывая всю поверхность лунки. Для каждой лунки использовать одноразовый шпатель. Вращать тест-пластину вручную или на механической мешалке со скоростью 80-100 об/мин в течение 2-х минут. Развитие процесса агглютинации необходимо наблюдать в промежутке со 2-ой по 3-ю минуту от момента начала вращения тест-пластины. Затягивание процесса считывания результата может привести к регистрации ложной агглютинации, возникающей в процессе подсыхания реакционной смеси. 2. ПОЛУКОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ Приготовить разведения исследуемых проб с помощью буфера-разбавителя (Реагент 2) в соответствии с таблицей №1 разведения исследуемого образца сыворотки крови. Таблица №1 ИССЛЕДУЕМЫЙ ОБРАЗЕЦ СЫВОРОТКИ КРОВИ, МЛ БУФЕРРАЗБАВИТЕЛЬ, МЛ КОЭФФИЦИЕНТ РАЗВЕДЕНИЯ 0.1 0.1 2 0.1 0.3 4 0.1 0.7 8 и т. д. ! !