С-РЕАКТИВНЫЙ БЕЛОК (СРБ) слайд Агглютинация ЛАТЕКС

С-РЕАКТИВНЫЙ БЕЛОК (СРБ) слайд
Агглютинация
ЛАТЕКС
КОД 31011
КОД 31012
50 опр.
150 опр.
Хранить при 2-8 C
Реагенты для определения СРБ. Использовать только
для работы «in vitro» в клинических лабораториях
ПРИНЦИП МЕТОДА
Сывороточный
С-реактивный
белок
(СРБ)
в
концентрации 6 мг/л и выше вызывает видимую
агглютинацию на слайде в суспензии латексных частиц
покрытых антителами против С-реактивного белка
человека1,2.
1.
2.
3.
НАБОРЫ
4.
А Реагент
С+ Положительный контроль
С- Отрицательный контроль
Слайды
Одноразовые мешалки
КОД 31011
1 х 3 мл
1 х 1 мл
1 х 1 мл
3
1х 50
КОД 31011
1 х 8 мл
1 х 1 мл
1 х 1 мл
6
1 х 150
СОСТАВ
А. Реагент. Суспензия латексных частиц покрытых
антителами против СРБ человека, азид натрия 0,95 г/л.
С+ Положительный контроль. Сыворотка человека,
содержащая СРБ выше 6 мг/л
СОтрицательный
контроль.
Сыворотка,
содержащая СРБ менее 6 мг/л.
Компоненты человеческого происхождения
были
проверены на отсутствие антител к HIV и HCV, а
также и к Hbs – антигену. Однако следует проявлять
осторожность
при работе с реагентами, как
потенциальным источником инфекций.
Слайды (прим. 1)
Одноразовые мешалки.
ХРАНЕНИЕ
Хранить компоненты при 2-8ºС, исключая карточки и
мешалки, которые могут храниться при комнатной
температуре.
Реагенты и Контроли стабильны до срока годности,
указанного на этикетке флаконов, при хранении плотно
закрытыми и избежании загрязнения во время
использования.
Показатели загрязнения:
− Реагент: Видимая агглютинация во флаконе
− Контроли: Присутствие взвешенных частиц.
−
ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ
Механический смеситель, до 100 об/мин
ОБРАЗЦЫ
Сыворотка, собранная по стандартной процедуре.
Стабильность составляет 48 часов при 2-8° C.
ПРОЦЕДУРА
5.
Нагреть реагенты и образцы до комнатной
температуры (примечание 2).
Поместить 50 мкл образца и 1 каплю каждого
Контроля в лунки на слайде.
Осторожно перемешать флакон с латексом (А).
Держа флакон вертикально осторожно добавить 1
каплю реагента А в каждую лунку рядом с
образцом.
Перемешать
одноразовой
мешалкой
и
распределить по всей поверхности, ограниченной
кольцом. Использовать новую мешалку для
каждого образца.
Поставить слайды в ротатор на 100 об/мин на 2
минуты.
ЧТЕНИЕ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ
Проверить визуально слайды после смешивания
(удаления из ротатора) в течение одной минуты на
наличие или отсутствие агглютинации. (примечание 3).
Положительные результаты: Присутствие видимой
агглютинации выявляется при содержании СРБ ≥6 мг/л.
Сыворотку, показавшую положительный
результат, можно оттитровать. Для этого сделать
двухкратные разведения с 9 г/л физиологическим
раствором. Самое большое разведение сыворотки,
показавшее положительный результат, является
титром сыворотки, в которой приблизительный
уровень СРБ можно рассчитать, умножив титр
сыворотки на предел чувствительности (6 мг/л).
Отрицательные результаты: Отсутствие видимой
агглютинации, выявляется при содержании СРБ в
сыворотке ниже 6 мг/л.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Положительный С+ и отрицательный С- контроли,
поставляемые в наборе, должны тестироваться
совместно с образцами пациентов для верификации
процедуры.
Положительный контроль С+ показывает ясно
видимую агглютинацию латексных частиц.
Отрицательный контроль С- не вызывает агглютинации
латексных частиц.
Каждая
лаборатория
должна
устанавливать
собственные схемы внутреннего контроля качества и
вносить коррективы в случае, если контроль качества
не укладывается в допустимые пределы.
МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
− Предел определения: 6 мг/л СРБ, при
использовании
внутреннего
стандарта,
прослеженного по Стандартному референсному
−
−
материалу BCR 470 (Институт референсных
материалов и измерений , IRMM). Величина cutoff может варьировать до 25% в зависимости от
неконтролируемых вариаций измерительной
процедуры и опыта оператора в учете
результатов.
Эффект высокой дозы (эффект зоны): Ложно
отрицательные результаты отсутствуют, по
меньшей мере до значений концентрации 205
мг/л СРБ.
Ложные результаты: Результаты, полученные с
не
показывают
данными
реагентами
значительных различий при сравнении с
референсными
реагентами.
Детали
эксперимента предоставляются по запросу.
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
С-реактивный белок (СРБ) синтезируется в печени и
является одним из наиболее чувствительных белков
острой фазы при повреждении тканей или воспалении.
СРБ активирует классический путь активации
комплемента, как ответ на воспалительную реакцию.
Уровни СРБ в плазме могут значительно повышаться
при инфаркте миокарда, стрессе, травмах, инфекциях,
воспалении, хирургических вмешательствах или в
случае неопластической пролиферации. Повышение
уровня СРБ возникает в промежутке от 24 до 48 часов,
уровень СРБ может увеличиваться в 2000 раз по
сравнению с нормой.
Подъем уровня СРБ
теоретически ожидается при любом заболевании,
связанном с повреждением тканей и является
неспецифическим.
Клинический диагноз не должен основываться только
на данных единичного теста, а должен включать в себя
как клинические, так и лабораторные данные.
1.
2.
3.
1.
2.
3.
4.
5.
ПРИМЕЧАНИЕ
Слайды, которые могут использоваться повторно,
должны быть тщательно промыты проточной и
дистиллированной водой, свободной от всех
детергентов.
Чувствительность теста может уменьшиться при
снижении температуры.
Задержка в чтении результатов может привести к
ложноположительным результатам.
БИБЛИОГРАФИЯ
Singer J M, Plotz CM, Pader E, ElsterSK. The latexfixation test. III. Agglutination test for C-reactive
protein and comparison with the capillary precipitin
method. Am J Clin Pathol 1957; 28:611
Hokama Y, Nakamura RM. C-reactive protein: current
status and future perspectives. J Clin Anal 1987; 1: 1527
Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory
tests, 3th ed. AACC Press, 1997
Friedman and Young. Effects of disease on clinical
laboratory tests, 3th ed. AACC Press, 1997
Immunology and serology in Laboratory Medicine, 2nd
edition. Turgeon ML. Mosby, 1996