Дихання бактерій. Виділення чистих культур анаеробів. Дихання бактерій Дихання, або біологічне окислення, засноване на окисно-відновних реакціях, що протікають з утворенням АТФ – універсального акумулятора хімічної енергії. По відношенню до молекулярного кисню бактерії можна розділити на: облігатні аероби мікроаерофіли облігатні анаероби факультативні анаероби. Аеробні бактерії використовують для біохімічних реакцій вільний кисень. Облігатні аероби - мікроорганізми, що здійснюють аеробний тип дихання за наявності в атмосфері не менше 20 % кисню. Мікроаерофіли - кисень їм необхідний в значно меншій кількості (актиноміцети, бруцели, лептоспіри). Аеробні бактерії Капнеїчними називають такі мікроорганізми, які потребують, крім кисню, ще й до 10 % вуглекислого газу. Типовими представниками є збудники бруцельозу бичачого типу. Анаероби - отримують енергію в результаті окислення, при якому як акцептори Н2-електронів виступають неорганічні сполуки. 2 типи анаеробного дихання: Облігатні анаероби ростуть на середовищах без кисню, який для них токсичний; використовують сульфатний тип дихання – внаслідок окислення сполук утворюється сульфат, що відновлюється до сірководню (клостридії ботулізму, газової гангрени, правця). Факультативні анаероби можуть рости як при наявності, так і при відсутності кисню; використовують нітратний тип анаеробного дихання відновлення нітрату до молекулярного азоту і аміаку. Морфологія СІ. tetani — тоненька паличка, довжиною від 0,3—0,8х3 - 12 мкм. Рухлива (перитрих). Капсул не синтезує, утворює спори. В молодих культурах завжди грампозитивні спори Морфологія СІ. botulinum - поліморфна паличка довжиною 0,30,8х4-9 мкм. Перитрих. Капсул не утворює. Спори овальні, розміщені термінально або субтермінально. Грампозитивний у молодих культурах. Спори овальні, розміщені термінально або субтермінально. Морфологія Cl. septicum Cl. septicum — поліморфна паличка довжиною 0,8-2х 2-10 мкм. Збудник рухливий у молодій культурі, перитрих. Утворює овальні субтермінально або центральне розміщені спори. Грампозитивний лише у препаратах з молодих культур. Cl. perfringens — поліморфна паличка довжиною 4— 8 мкм діаметром 0,6—1,5 мкм. Кокоподібні та ниткоподібні форми. Утворює капсулу. Утворює овальні субтермінально розміщені спори. В препаратах з молодої культури — грампозитивний, з старої грамнегативний. Clostridium perfringens Clostridium perfringens Clostridium perfringens Колонії Clostridium perfringens Ріст Clostridium perfringens у стовпчику агару Ріст у молоці Clostridium tetani Грампозитивні палички із термінально розташованими спорами Збудники газової гангрени C.perfringens С. septicum C.novyi C.histolyticum СІ. novyi — довжиною 4—8 мкм, діаметром 1—1,5 мкм поліморфна паличка. Капсул не синтезує. Утворює спори круглої чи овальної форми, розміщені субтермінально. Перитрих, рухлива у молодих культурах. Грампозитивна у молодих та грамнегативна у старих культурах. Загальні поживні середовища для культивування анаеробних мікроорганізмів: Середовище Вільсона - Блера або залізосульфітний агар Середовище Кітта - Тароцці Методи культивування анаеробних організмів: GasPak - система Метод Фортнера Метод Цейсслера Метод Вейон-Виньяла Метод Перетца Gaspak — система хімічним шляхом забезпечує постійність газової суміші прийнятної для росту більшості анаеробних мікроорганізмів. У герметичному контейнері, в результаті реакції води з пігулками боргидріда натрію і бікарбонату натрію утворюється водень і діоксид вуглецю. Водень потім реагує з киснем газової суміші на паладієвому каталізаторі з утворенням води, вже повторно вступаючою в реакцію гідролізу боргидріда. Метод Перетца - в розплавлений і охолоджений цукровий агар вносять культуру бактерій і заливають під скло, поміщене на пробкових паличках (або фрагментах сірників) в чашку Петрі. Метод найменш надійний зі всіх, але досить простий у використанні. Методи культивування анаеробів Анаеростат Ексікатор