УДК 66-93 (075.8) ФЕРМЕНТЕРЫ И ИХ РОЛЬ В БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИХ ПРОЦЕССАХ Петрашова Я.C., группа БИО-301 Научный руководитель: Мищенко Е.В., к.т.н., доцент В современном мире множество продуктов и веществ производится из других составов с помощью микроорганизмов. Конечно же, это происходит не само собой, а в специальных, микробиологических лабораториях. Процесс, который осуществляют в этом случае микроорганизмы, называется ферментацией, а прибор, в котором они находятся в это время, называется ферментер или биореактор. Ферментеры снабжены паровой рубашкой, мешалками, стерилизующими воздушными фильтрами, отбойниками, обеспечивающими необходимые температурный, газовый режим, гидродинамическую обстановку в биореакторе (то есть процессы массо- и теплообмена) [1] (рис. 1). Рис. 1. Общая схема ферментера Типовые ферментеры представляют собой вертикальные ёмкости различной вместимости (малые от 1 до 10 л, многотоннажные более 1000 л) с минимальным числом штуцеров и передающих устройств. В микробиологических производствах в зависимости от особенностей процесса применяют разнообразные ферментеры, так, например, аппараты для аэробной поверхностной ферментации широко применяются для производства органических кислот [2]. Поверхностная жидкофазная ферментация протекает в так называемых бродильных вентилируемых камерах, в которых на стеллажах размещены плоские металлические кюветы. В кюветы наливают жидкую питательную среду (высота слоя составляет 80-150 мм), затем с потоком подаваемого воздуха среду инокулируют спорами продуцента. В камере стабилизируется влажность, температура и скорость подачи воздуха. После завершения процесса культуральная жидкость сливается из кювет через вмонтированные в днище штуцеры и поступает на обработку. При твердофазной ферментации процесс также протекает в вентилируемых камерах, но вместо кювет на стеллажах размещают лотки, в которые насыпают сыпучую твердую среду слоем 10-15 мм. Для лучшей аэрации среды подаваемый в камеру воздух проходит через перфорированное днище лотков. Аппараты для аэробной глубинной ферментации наиболее сложны как конструкционно, так и с точки зрения их эксплуатации. Главная задача обеспечение высокой интенсивности массо- и энергообмена клеток со средой. По структуре потоков ферментеры могут быть аппаратами полного перемешивания или полного вытеснения. Конструктивные различия ферментеров определяются в основном способами подвода энергии и аэрации среды: 1. ферментеры с подводом энергии к газовой фазе; 2. ферментеры с подводом энергии к жидкой фазе; 3. ферментеры с комбинированным подводом энергии. В аппаратах первого типа аэрация и перемешивание культуральной жидкости осуществляются сжатым воздухом, который подается в ферментер под определенным давлением. К таким ферментерам относят: • барботажные ферментеры, подача воздуха в которых осуществляется через барботажные устройства, расположенные в нижней части аппарата; • аппараты с диффузором (эрлифтные аэраторы), имеющие внутренний цилиндр-диффузор, который обеспечивает перемешивание поступающих по распределительным трубам в нижнюю часть аппарата субстрата и воздуха; • трубчатые ферментеры (газлифтные), состоящие из реактора кожухотрубчатого типа, через который жидкость потоком воздуха перемещается в верхнюю часть аппарата и, попадая в сепаратор, возвращается в реактор, где снова увлекается воздухом, подвергаясь, таким образом, циркуляции; • ферментеры с форсуночным воздухораспределением, оборудованные форсунками для подачи воздуха, расположенными в нижней части аппарата, и находящимся над ними диффузором, который обеспечивает внутреннюю циркуляцию жидкости; • ферментеры колонного типа, представляющие собой цилиндрическую колонну, разделенную горизонтальными перегородками (тарелками) на секции; воздух барботируется через слой жидкости каждой тарелки, а перемещение жидкости через кольцевую щель обеспечивает противоточное движение жидкой и газовой фаз. К ферментерам с подводом энергии к жидкой фазе относят: • аппараты с самовсасывающей турбиной, имеющие цилиндрический диффузор и мешалку с полыми лопастями и валом, при вращении которой за счет создаваемого разрежения происходит самовсасывание воздуха, благодаря чему происходит подъем жидкости в кольцевом зазоре между диффузором и стенками ап- парата с последующим ее возвращением в диффузор; • ферментеры с турбоэжекторными перемешивающими устройствами аппараты, разделенные вертикальными перегородками на секции, в каждой из которой имеется самовсасывающая мешалка турбинного типа (эжектор) и диффузор, для перемещения жидкости из секции в секцию в перегородках сделаны окна. В ферментерах с комбинированным подводом энергии осуществлен подвод энергии к газовой фазе для аэрации и к жидкой фазе для перемешивания. Ферментер представляет собой цилиндрический сосуд, снабженный механической мешалкой и барботером, который устанавливается, как правило, под нижним ярусом мешалки. Такие биореакторы классифицируют по способу перемешивания, в соответствии с которым используются аппараты с механическим, пневматическим и циркуляционным перемешиванием. Аппараты с механическим перемешиванием имеют механическую мешалку, состоящую из центрального вала и лопастей различной формы. Аэрация может осуществляться путем барботажа. Разбрызгиванию воздуха в виде мелких пузырьков способствует механический вибратор, установленный рядом с барботером. В аппаратах с пневматическим перемешиванием перемешивание и аэрация усиливаются с помощью вращающихся дисков с отверстиями, установленных вблизи барботера, или с помощью придонных пропеллеров. Классический эрлифтный аппарат дополнен диффузором, нижний обрез которого находится над барботером. Возможны варианты подачи воздуха как во внутренний, так и во внешний по отношению к диффузору объем среды. Аппараты с циркуляционным перемешиванием содержат устройства (насосы, эжекторы), создающие направленный ток жидкости по замкнутому контуру. Насос для циркуляции культуральной жидкости может соседствовать с барботером (сочетание пневматического и циркуляционного перемешивания). Существуют разные варианты такого типа аппаратов: аппараты типа «падающей струи», типа «погруженной струи», перемешивание с помощью эжектора. Аппараты циркуляционного типа часто заполняют твердыми частицами [3]. В биореакторах имеются пробоотборники для отбора проб культуральной жидкости в процессе биосинтеза. Могут быть и другие конструктивные особенности, учитывающие специфику биотехнологического процесса. Работа отдельных узлов контролируется измерительными приборами, фиксирующими как параметры технологического процесса, так и отдельные физико-химические показатели культивирования (температуру стерилизации и культивирования, скорость вращения мешалки, давление, расход воздуха или газов на аэрацию, пенообразование, рН, рО2, рСО2 среды) [4]. Главное требование к аппаратам сохранение стерильности, поэтому они должны быть герметичными, все линии трубопроводов должны быть доступны для обработки горячим паром. Основное предназначение этих приборов обеспечение нормального функционирования и жизнедеятельности всех микроорганизмов, находящихся внутри него. А это значит, обеспечение их воздухом и питанием, а также отвод метаболитов. Как уже было сказано, все эти процессы осуществляется путем постоянного и равномерного перемешивания [5]. Ферментеры применяются в различных областях микробиологической и биотехнологической промышленности. Например, для создания лекарств, вакцин, продуктов пищевой промышленности, а также различных других химических соединений, использующихся практически во всех сферах современной жизни [6]. Конечно же, качество проводимой культивации зависит не только от типа устройства, но и от фирмы-производителя. Существует несколько лидеров по производству ферментеров как на отечественном, так и на зарубежном рынке. Однако общепризнанным передовиком в ферментации в микробиологии считается продукция, завезенная из Германии – биореакторы и ферментеры Sartorius (рис. 2). Рис. 2. Ферментер BIOSTAT фирмы Sartorius Разработчики аппаратуры в нашей стране и за рубежом постоянно совершенствуют конструкции биореакторов. Так, например, фирма New Brunswick Scientific Co., Inc. (США) предложила следующие типы ферментеров: Био-Фло III, Микрос I, оснащенные микропроцессором и имеющие возможность работать с ПК [7]. Стадия ферментации центральная среди этапов биопроизводства, поэтому использование ферментеров является основой большинства микробиологических и биотехнологических процессов. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Егорова, Н.С. Биотехнология: учебное пособие для вузов / Н.С.Егорова, В.Д.Самуилова. – М.: Высшая школа, 1987 – 208 с. 2. www.bio-rus.ru. 3. dic.academic.ru. 4. Основы фармацевтической биотехнологии: Учебное пособие / Т.П.Прищеп, В.С.Чучалин, К.Л.Зайков, Л.К.Михалева. – Ростов-на-Дону.: Феникс; Томск: Издательство НТЛ, 2006. 256 с. 5. Биотехнология: учебное пособие для студентов вузов / Ю.О.Сазыкин [и др.] / под ред. А.В.Катлинского. – 3-е изд., стер. – М.: Издательский центр "Академия", 2008. 256 с. 6. www.mediana-eco.ru. 7. www.oborudka.ru.