Министерство образования и науки Республики Казахстан Казахский национальный университет имени аль-Фараби

Министерство образования и науки Республики Казахстан
Казахский национальный университет имени аль-Фараби
на тему «ВЛИЯНИЕ РАЗНЫХ РЕЖИМОВ
СТЕРИЛИЗАЦИИ НА ГИБЕЛЬ МИКРООРГАНИЗМОВ»
Выполнили: Байдильдинова Гаухар
Молдагалиева Айгерим ПБТ105Р
Алматы, 2012
Цель работы: изучение эффективности режимов
стерилизации физическими и химическими методами
 1. Теоретическая часть. Определение терминов





««асептические условия», «стерилизация»,
«пастеризация».
2. Описание алгоритмов постановки опыта.
3. Характеристика объектов исследования.
4. Полученные результаты
5. Вывод
6. Используемая литература













Объекты исследования:
E.coli
B.subtilis
Дрожжи
Микромицеты
Режимы стерилизации
Температура (пастеризация, кипячение,
автоклавирование)
NaCl
УФЛ
Уксусная кислота
Среды
Прокариоты на МПА
Эукариоты на Сабуро
Теоретическая часть
 Под асептическими условиями понимают мероприятия,
режимы препятствующие попаданию
контаминантов(микроорганизмы- загрязнители).
 Под стерилизацией понимают полное освобождение любого
материального потока, а также оборудования и
коммуникации от жизнеспособных микроорганизмов, их
спор.
 Пастеризация — это нагревание материала при
температуре ниже 100 °С в течение 20 — 40 мин. При
пастеризации погибают не все микроорганизмы, так
некоторые термоустойчивые бактерии, а также споры
остаются живыми. Поэтому пастеризованные продукты
следует немедленно охлаждать до 4 - 8 оС и хранить в холоде,
чтобы задержать прорастание спор и развитие
сохранившихся клеток.
Процессы,
уничтожающие
постороннюю
микрофлору
Химические
вещества (кислоты,
щелочи,
хлорсодержащие
вещества)
Асептические
условия
Процессы,
удаляющие
микроорганизмы из
материального
потока
Фильтрование
Физические
факторы
Энергии облучения –
инфракрасные лучи,
УФ-лучи,
радиоактивное
излучение, ультразвук
Теплостерилизация,
пастеризация,
фламби-ование,
кипячение
Герметизация
Описание алгоритмов постановки
опыта
 Термообработка – пастеризация, 15 мин; кипячение 15 мин;
автоклавирование при 1,5 атм (127) 15 мин.
 Облучение УФ – лучами 15 мин и 30 мин.
 Воздействие уксусной кислоты 0,01 мл, 0,02 мл,
0,03 мл и, 0,04 мл.
 Воздействие поваренной соли 2,5 %, 5% и 10 %.
объекты
Т
УФЛ
Ко
грамотрицательные
бактерии
грамположительные
бактерии
эукариотные
микроорганизмы
П
Ко
752
12
2
0
Bacillus subtilis
912
372
16
0
дрожжи
332
86
11
0
590
202
0
57
10
2
0
22
15
0
объекты
NaCl
752
2
0
2248 1121
0
УК
Ко
эукариотные
микроорганизмы
А
Escherichia coli
микромицеты
грамотрицательные
бактерии
грамположительные
бактерии
К
15
30
мин мин
2,50%
5% 10% Ко
0,01 0,02 0,03 0,04
Escherichia coli
752
9
3
0
752
9
3
1
0
Bacillus subtilis
912
441
0
0
2024
704
762
0
6
дрожжи
797
528
225
0
1194
186
93
0
0
9
3
0
0
22
7
3
0
0
микромицеты
объекты
Т
П
К
УФЛ
15
мин
А
30
мин
грамотрицательные
бактерии
Escherichia coli
98,4
99,7
100
99,7
100
грамположительные
бактерии
Bacillus subtilis
59,2
99,3
100
50,1
100
эукариотные
микроорганизмы
дрожжи
74,1
96,7
100
65,8
100
микромицеты
82,5
96,5
100
31,8
100
объекты
NaCl
2,5%
УК
5%
10%
0,01
0,02
0,03
0,04
грамотрицательные
бактерии
Escherichia coli
98,8
99,6
100
98,8
99,6
99,9
100
грамположительные
бактерии
Bacillus subtilis
51,6
100
100
65,2
62,3
100
99,7
эукариотные
микроорганизмы
дрожжи
33,8
71,7
100
84,4
50
100
100
микромицеты
66,7
100
100
68,2
86,4
100
100
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
Диаграмма 1. Сравнительная диаграмма эффективности различных методов стерилизации.
Escherichia coli
Bacillus Subtilis
дрожжи
микромицеты
Характеристика объектов
исследования
 Escherichia coli (кишечные палочки) -
грамотрицательные палочковидные
бактерии, принадлежат к семейству
Enterobacteriaceae, род Escherichia.
 В организме человека E.coli подавляет рост
патогенных бактерий и синтезирует
некоторые витамины.
 Бактерии хорошо растут на простых
питательных средах: мясопептонном бульоне
(МПБ), мясопептонном агаре (МПА).
 Е. coli не устойчивы к высокой температуре.
Бактерии группы кишечных палочек
обезвреживаются обычными методами
пастеризации (65 - 75° С). При 60° С
кишечная палочка погибает через 15 минут.
1% раствор фенола вызывает гибель микроба
через 5-15 минут, сулема в разведении 1:1000 через 2 мин., устойчивы к действию многих
анилиновых красителей.
E. coli – электронный микроскоп
 Bacillus subtilis —
Клетки Bacillus subtilis (споры
окрашены в синий цвет)
грамположительная,
спорообразующая аэробная
почвенная бактерия.
 Растёт на МПА, МПБ, а также
на средах, содержащих
растительные остатки,
простых синтетических
питательных средах для
гетеротрофов.
 Дрожжи — внетаксономическая
Дрожжи под микроскопом.
группа одноклеточных грибов,
утративших мицелиальное строение
в связи с переходом к обитанию в
жидких и полужидких, богатых
органическими веществами
субстратах.
 Некоторые виды дрожжей с давних
пор используются человеком при
приготовлении хлеба, пива, вина,
кваса и др.
 Полезные физиологические свойства
дрожжей позволяют использовать их
в биотехнологии. В настоящее время
их применяют в производстве
ксилита, ферментов, пищевых
добавок, для очистки от нефтяных
загрязнений.
 Микроскопические грибы –
микромицеты – составная
часть практически любой
экосистемы.
 Грибки могут расти на
самых разных поверхностях
- животного или
растительного
происхождения, на живом и
мертвом материале.
 Плесень - единственный из
простейших организмов,
способный размножаться
половым путем. Колония
плесени делится на
разнополых особей.
Микромицеты.
Вывод
 Температура.
 Эффективный способ
стерилизации.
 Основано на необратимой
коагуляции протоплазмы,
пирогенетическом ее
разрушении и на
повреждении ферментных
систем микробной
клетки.
 Кипячение. Этим способом
стерилизуют резиновые
предметы, инструментарий,
стеклянную посуду. Применять
кипячение для стерилизации
инъекционных растворов не
рекомендуется, так как по
эффективности оно
значительно уступает
стерилизации паром.
 Автоклавирование.
 Наиболее надежный способ
стерилизации. Производится
при 119-121° в течение 5-30 мин.
 Стерилизуют посуду, бумажные
и стеклянные фильтры,
инструменты, водные растворы
устойчивых к воздействию
высокой температуры
лекарственных веществ,
перевязочный материал.
кипячение
автоклав
 Преимущества термических методов стерилизации:
 Надёжность
 Отсутствие необходимости удаления стерилянтов с
предметов медицинского назначения
 Удобство работы персонала
 Стерилизация проводится в упаковках, что позволяет
сохранить стерильность некоторый период времени
Двойная стерильная упаковка имплантанта
УФЛ
 Поглощение УФ лучей
сопровождается образованием
димеров тимина в молекуле ДНК
– ее гибель. На бактерицидном
действии УФЛ основано
использование их для
обеззараживания продуктов
питания, лабораторных
питательных сред, для
стерилизации воздуха приточновытяжной вентиляции,
оборудования в биксах, также для
стерилизации дистиллированной
воды.
 УФ излучение применяют для
обработки биологических
препаратов – вакцин и сывороток.
 Источники УФ-излучения —
ртутные кварцевые лампы.
Бактерицидная лампа
 NaCl
 Если в среде осмотическое давление очень высокое, то
нарушаются внутриклеточные регуляторные механизмы и может
наступить плазмолиз как результат выхода из клетки воды.
 Неспособность основной массы микроорганизмов расти на
средах с высокими концентрациями солей широко используют в
пищевой промышленности при консервировании продуктов.
плазмолиз
Уксусная кислота
 При низких значениях рН
растворимость углекислоты,
являющейся основным или даже
единственным источником
углерода для автотрофных
прокариот, понижается, а
растворимость некоторых ионов
(Cu2+, Mo2+, Mg2+, Al3+) возрастает и
достигает уровней, токсичных для
многих прокариот.
 Отрицательное влияние
кислотности среды на
большинство микроорганизмов
используют при консервировании
пищевых продуктов. Так,
приготовление маринадов идет с
использованием уксусной кислоты,
квашение плодов и овощей –
молочной.
маринады
Используемая литература
 М. Х. Шигаева, В. Л. Цзю «Общая микробиология»,





Алматы «Қазақ университеті» 2008 год.
http://www.textra-vita.com/technology/konserv6.php
http://avinpharma.ru/aptechnoeizgotovlenie/fizicheskie-metody-sterilizacii.html
http://pulmonolog.com/content/escherichia-coli
http://micromir.59311s007.edusite.ru/p8aa1.html
http://ru.wikipedia.org/wiki/Saccharomyces_cerevisia
e