BioWhittaker Training Courses Краткая история метода

реклама
Краткая история метода определения
эндотоксинов
Часть 1
BioWhittaker Training Courses
История
В течение 2,500 лет жар считали и наказанием и
благословением
Гиппократ считал, что жар способствовал
выведению излишней жидкости из организма (в
те времена это считалось причиной болезней)
Около 500 лет до н.э. Parmenides 500 B.C.
Сказал: “Если бы я знал способ вызвать жар, я
бы смог вылечить все болезни”
BioWhittaker Training Courses
2
Исследования причин жара
Ранние исследования причин жара происходили
на основе наблюдения случаев жара вследствие
потребления испорченных продуктов
В 1809 и 1822
Ouch
Gaspard ввел собаке
протухший продукт,
вызвавший повышение
температуры и болезнь
BioWhittaker Training Courses
3
Исследования причин жара
В 1823 Francois Magendie заметил, что
загрянения припортовых районов могут быть
причиной распространения тифа, холеры,
дизентерии и др.
Magendie заметил, что протухшая рыбная вода в
особенности способна вызвать жар
?
=
BioWhittaker Training Courses
4
Лечение Pyresis
Жар по-гречески
Pyros а лихорадка Pyreto
В начале 19 века французские фармацевты
Pelletier и Caventue смогли выделить хинин из
коры хинного дерева
Обнаружены жаропонижающие свойства хинина
BioWhittaker Training Courses
5
Определение механизма
возникновения жара
 В понимании механизма возникновения жара и в
частности роли бактерий сыграли роль несколько
факторов:




Гигиена и санитарный контроль инфекционных болезней
Исследования бактериальных токсинов
Возникновение такого явления как жар после инъекций
Разработка терапевтического лечения жара
 Определена связь инъекционных препаратов и
возникновением жара
BioWhittaker Training Courses
6
Открытие эндотоксина
Датский исследователь профессор Panum
определил, что вещество, вызывающее жар
имеет следующие свойства:




Термоустойчивость
Растворимость в воде
Нерастворимость в спирте
Отличается от живых бактерий
Все эти качества присущи веществу, которое
сегодня известно как эндотоксин
BioWhittaker Training Courses
7
Эндотоксин
Два европейских ученых независимо друг от
друга изучали бактериальные токсины
В 1892 Pfeiffer открыл, что в Vibrio Cholerae два
вида токсинов:


Термонестабильный экзотоксин
Термоустойчивое вещество, образующееся в
результате распада клеточной стенки
Pfeiffer назвал второе вещество эндотоксином,
что было некорректно, т.к. эндотоксин
формирует внешнюю клеточную стенку
бактерии
BioWhittaker Training Courses
8
Эндотоксин
Ученый из Болонского университета Centanni
выделил термоустойчивый токсин из Salmonella
Typhi
Centanni назвал это вещество “Pyrotoxina” и смог
выделить стерильный белый порошок путем
спиртового фракционирования из ряда бактерий,
включая E.Coli. Это и оказалось эндотоксином
К сожалению, большинство его работ были
востребованы намного позже
BioWhittaker Training Courses
9
Инъекционная лихорадка
 В начале 20 века в результате появления
парентеральных препаратов, например глюкозы,
привело к появлению такого явления как инъекционный
жар
 В 1912 Hort и Penfold опубликовали результаты
исследований «микроорганизмы и их влияние на
возникновение жара», из которых следовало, что
токсичность ассоциируется только с грамотрицательными бактериями
 Они открыли первый метод определения пирогенной
реакции – предшественника тестирования пирогенности
на кроликах по USP в 1942
BioWhittaker Training Courses
10
Инъекционная лихорадка
Работа Hort и Penfold была недооценена до
1923, когда Francis Siebert из США исследовал
причины пригенности дистиллированой воды
Она доказала, что бактериальное загрязнение
действительно являлось причиной
возникновения жара
Стало ясно что в грам-отрицательных бактериях
содержатся высокомолекулярные
эндотоксинные комплексы, которые вызывают
токсичную, пирогенную и иммунологическую
реакцию
BioWhittaker Training Courses
11
Фармацевтическое
производство
L. Rademacher подтвердил правильность
выводов Siebarts и доказал необходимость
предотвращения бактериального загрязнения на
каждом этапе фармацевтического производства
Он доказал, что стерильность не является
гарантией апирогенности
Однако, потребовалось 20 лет для того, чтобы
NIH и 14 фармпроизводителей ввели
тестирование пирогенности, в результате чего
появился тест пирогенности на кроликах.
BioWhittaker Training Courses
12
Современные исследования
После определения природы эндотоксинов
ученые занялись исследованиями молекулы
эндотоксина
Первыми молекулу эндотоксина выделили
Westphal и Luderitz (Max Planck Institute) –
безпротеиновый липополисахарид
Данный препарат для кроликов
оказался пирогенным
в нанограммных
дозах
BioWhittaker Training Courses
13
Скачать