58_development

реклама
Биология развития
Н. Володина
26.03.2011
Миллиарды клеток организми
происходят от одной
яйцеклетки
Существует план развития и все
клетки связаны функционально
• Дифференциация клеток
обуславливается контролем
экспрессии генов
– Клетка состоит из белков,
продуцируемых ее
экспрессируемыми генами
– Какие гены экспрессируются,
такая будет и клетка
• Генетические дефекты
производят дефекты развития
– Мутации единичных генов
– Хромосомные изменения
– Влияние окружающей среды
Развитие
Картина эмбриогенеза у
человека
– Если мы пересадим часть эмбриона
в другой участок, из нее все равно
разовьется то что должно было
развиться первоначально
– После того как клетки встали на
определенный путь развития, они
разовьются в определенную ткань
даже если их изолировать и
выращивать в культуре
• Клетка может перенять
программирование другого участка,
если ее пересадить в другой
эмбрион
– Подобные карты были
сконструированы из результатов
трансплантационных экспериментов
Карты
будущих
тканей
Смешивание эмбрионов
• Плурипотентные клетки
приобретают свое назначение
из их окружения
• Трансгенные животные созданы
путем переноса плурипотентных
клеток из одного эмбриона в другой
• Клетки забраны из одного
эмбриона перед тем как их
назначение определено
окончательно
• Полученное животное имеет
клетки 2х генотипов – обычно
такие эксперименты делали на
амфибиях
• Развивающаяся клетка
производит потомство,
которое может дать клон
клеток в одном месте, или
послать клетки в другие
районы
– Когда клетки каким-то образом
помечены (например,
микроинъекцией краски), то и ее
судьба может быть прослежена
• Результат будет зависеть от
окружающих клеток и от их
собственного
программирования
• Взаимодействие этих сигналов
дает результат развития
• Когда эмбриональная среда уже не
имеет никакого эффекта, клетка
называется детерминированной
Линии клеток
•
Мозаичное и регулятивное
развитие
В раннем эмбрионе, потеря
клетки может быть
компенсирована так как
окружающие клетки могут
быть индуцированы занять ее
место
• Их предназаначение определяется
окружающими клетками
• Но в более позднем эмбрионе,
клетки уже детерминированы и
потеря одной клетки не может
быть компенсирована
окружающими
• Ткани начинают развиваться
независимо друг от друга как бы
создавая мозаику
Определение генов, важных
для развития человека
• Мутагенез
экспериментальных
животных
• Полученные нарушения
развития
зарегестрированы
• Определены
соответствующие гены
• Найдены гомологи у
человека. Как?
Гены, важные для
развития
консервативны в
эволюции
• Сохранение функций у
разных организмов
• Например ген дрозофилы
paired имеет гомолог в людях
и мышах: PAX 6
• Мутации в PAX6 были
исследованы на предмет
участия в развитии именно
из-за гомологии к гену,
важному для развития
эмбриона дрозофилы
• Белок PAX6 оказался
транскрипционным фактором
содержащим домен
Гомеобокс
• Мутации этого гена приводят
к неразвитию радужки в
случае неполной экспресии
гена
PAX 6
• Экспрессия PAX6
контролирует развитие
Если ген не экспрессируется
совсем, то глаза не
развиваются
• PAX6 домены
контролируются
дифференциальной
экспрессией гомеобоксов
– Связывание ДНК
происходит в N- и С-конце
белка
– Альтернативный сплайсинг
контролирует какой домен
функционирует
• Этот ген более похож на
PAX6 чем paired
Другой пример
эволюционного
консерватизма: eyeless
– Мутация eyeless приводит к
безглазым дрозофилам
– Эктопическая экспрессия
eyeless на антеннах приводит к
глазам на антеннах
• Когда мышинный ген Pax6 был
экспрессирован у дрозофил это
приводило к развитию глаз в
месте экспрессии
• Это означает что функция гена
была сохранена во все время
эволюции
3 процесса эмбрионального
развития
• Спецификация осей, определяющих
следующие направления
• Дорсально-вентральное
• Передне-заднее
• Левостороннее-правостороннее
• Формирование типов
Например формирование сомитов
Гены Hox определяют какой сомит
станет кем – например грудной клеткой
• Органогенез
Медицинская генетика
развития
• Занимается идентификацией генов, отвечающих за
различные уродства
– Гены, которые могут быть медиаторами
• TGF beta, Hedgehog, Wingless, FGF and их рецепторы
– Транскрипционные факторы
• Hox, HMG and T-box семейсво генов
Белки внеклеточного матрикса и их рецепторы
• Например ламинин и интегрины
• Эти гены генерируют сигналы и то что отвечает на
сигналы
Межклеточный сигналинг
– Экзокринный, эндокринный, паракринный и
аутокринный
• Экзокринный выпускает вещества в окружающую среду
по протокам
• Эндокринный выпускает вешества прямо в кровь или в
лимфу
• Клетки в непосредственной близости друг от друга влияют
на их форму
– Паракринный
» На небольшое расстояние
» Передается на непосредственное расстояние
– Юкстакринный
» Через контакт между клетками
» Например между нейронами
• Аутокринный – самому себе
Межклеточная передача
сигналов (один из путей)
• Гормон
присоединяется к
рецептору
• Рецептор передает
сигнал в ядро
• Активация
транскрипционных
факторов
• Старт транскрипции
•
•
Дефекты происходят в самом
гормоне или в его рецепторе
4 семейства
–
–
–
–
FGFR
Hedgehog
Wingless (Wnt)
TGF-beta
1. Fibroblast growth factor
Рецептор-тирозин киназа
–
–
•
•
•
•
Связывание с гормоном димеризует
рецептор
Димер становится активным в
цитоплазме
4 типа
В зависимости от типа клетки
Могут связываться с другими
факторами роста
Чувствительны к повреждению
Гормоны
• Ахондроплазия
F
G
F
R
3
M
u
t
a
t
i
o
n
– Аутосомно доминантная мутация FGFR3
• Обычно действует как тормоз на развитие хондроцитов
• Делает трансмембранный домен липким
• Он димеризуется и постоянная активация приводит к замедлению роста
– Т. о. мутации в трансмембранном домене или вокруг него
• Гипохондроплазия
– Поврежден киназный домен
• Танатофорическая дисплазия
– Thanato – не сопоставима с жизнью
– Thanatophoric = летальная
– М. б. Гомозиготной ахондроплазией
• Преждевременной слияние
черепных швов
• Генетическое заболевание
– Рост костей может быть
эндохондриальным или
мембранным
– FGFR3 G1138A мутация
приводит к ахондроплазии из-за
остановки роста хондроцитов
– FGFR1 and FGFR 2 мутации
действуют на мембранный рост –
кости черепа
• Pfeiffer, Apert, Crouzon, BeareStevenson, Jackson Weiss
синдромы
– Аутосомно доминантные
Это создает проблемы для
развивающегося мозга
– Также нарушения развития
конечностей
Краниосиностозис
Sonic Hedgehog – паракринный
гормон
– Помогает определить
• Дорсо-вентральную полярность
нервной трубки
• Антерио-постериальную
(передне-заднюю) полярность
конечностей
• Правостороннюю и
левостороннюю полярность тела
• Развитие кишечника
• Развитие зубов
• Мутации вызывают
голопрозенцефалию – отсутсвие
медианных структур мозга,
несовместимо с жизнью
– также Indian hedgehog
• Дифференциация эндодермы
• Рост костей
– и Desert hedgehog
• Дифференциация нервной
системы
• Возможно сперматогенез
Hedgehog
Рецептор Hedgehog
• Patched
• Мутации приводят
к потере сигнала
роста
Синдром Горлина
Синдром базальных клеток
Цисты
Карцинома базальных клеток
• Аутосомно доминантный
• Мутации в PATCHED
– Высокая пенетрантность
– Вариабельная экспрессивность
– Доминантно негативная мутация
• PTC – трансмембранный рецептор
– Негативно регулирует рост
– Дефективный белок связывается и
инактивирует нормальный
– Мутация в половых клетках
приводит к дефектам развития
– Соматическая мутация приводит к
раку – см. картинку
Wnt
• Гомолог:
– Гена дрозофилы wingless
– Мышиного гена int
• Гликопротеиновый гормон
– Гиперэкспрессия этого гена стимулирует клеточное
деление, приводя у мышей к раку груди
• Определяет дорсально-вентральную ось
• Участвует в органогенезе
• Рецептор - “Frizzled”
– 7 трансмембранных доменов
TGF-beta
• Transforming Growth Factor beta – сигнальная
молекула
– Может трансформировать клетки в культуре в
раковые клетки
• Супергенное семейство
– Родственные гены
•
•
•
•
TGF-beta
Bone morphogenic protein (BMP)
Активин
Vg1
Мутации в семействе
BMP
• Cartilage derived
morphogenic protein
(CDMP1)
– Различные мутации
приводят к
различному исходу
– Брахидактилия
• R301ter
• Аутосомно
доминантная
• Короткие пальцы
• Акромезомелическая дисплазия
– Короткие пальцы и конечности
– 22 bp дупликация
– Аутосомно рецессивная
• Хондродисплазия Греба
– C400Y
– Аутосомно рецессивная
Другие
мутации
CDMP1
• Белок не экспортируется
• Влияет на другие белки
– Сильно укороченные длинные кости конечностей и
пальцы
– В Бразилии встречается с частотой l 1/50
Транскрипционные
– Похожие функции
– 3 основных семейства, важных
факторы
для развития
• Семейства родственных генов
• Белки, содержащие домен
Homeobox
• Белки, содержащие домен HMG
• Белки, содержащие домен T-Box
– Homeobox: hox, pax, emx and smx
гены
– Hox гены
• Ответственны за сегментацию у
дрозофилы
• Hox genes у млекопитающих
похожи
• Семейство генов возникло в
результате дупликации
единичного гена
• Homeobox белки
содержат мотив
homeobox
Район белка называется
гомеодомен
• 60 аминокислот
• Связывается с ДНК
• HOX гены экспрессируется
последовательно в
пространстве и времени
– Они отвечают за
образование
определенных
антериальнопостериальных структур
Человеческие
hox гены
Геномная организация
человеческих HOX генов
Паттернинг
у дрозофилы
• Эффект
гомеотических
генов
• Гомеозис – это
трансформация
одной части тела в
другую
– Ноги на антеннах
– Двойной грудной
регион
Может быть вдоль
любой оси
ТФ содержащие домен HMG
• SOX гены
• Транскрипционные факторы
(ТФ)
• SOX9
– Экспрессируется на высоком
уровне у особей мужского пола
непосредственно перед
дифференциацией гонад
– Мутации вызывают
• Изменение пола у XY
• Дефекты скелета
• SOX 10
Нарушение иннервации кишечника
– Заболевание Hirschsprung
Белки, содержащие домен
T-бокс
TBX гены
•
• Определяют развитие конечностей
• Мутации вызывают дефекты конечностей с вариабельной
экспрессивностью
– TBX 5
• Синдром Holt-Oram
- Дефекты пальцев
– Сердечные дефекты
– TBX 3
• Ulnar-mammary синдром
• Дефекты развития костей
и гениталий
• Недоразвитые
молочные железы
Общие идеи – Транскрипционные
факторы
• Независимое действие
Эффект мутации зависит от позиции гена в сигнальном каскаде
• Координированный контроль
– У 1 фактора может быть много целей
– Может контролировать экспрессию других транск. факторов
Временный и пространственный контроль в
развивающемся эмбрионе
– Часто связан с порядком генов на хромосоме
• Присутствие транскрипционного фактора определяет
ответ на сигнал
• Мутации в различных местах сигнального пути могут
иметь схожий эффект
Диагноз
Австралийская база данных
http://www.possum.net.au/
Также см. след. слайд
Aarskog Syndrome Parents Support Group
http://laran.waisman.wisc.edu/fv/www/lib_aars.htm
3001
Aicardi Syndrome Foundation
http://www.aicardi.com
3018
Alagille Syndrome Alliance
http://www.alagille.org
3019
Alport Syndrome Home Page
http://www.cc.utah.edu/~cla6202/ASHP.htm
4509
Alstrom syndrome: International Alstroms Syndrome
Newsletter
http://www.jax.org/alstrom
3020
American Cleft Palate-Craniofacial Association (ACPA)
http://www.cleftline.org
Angelman Syndrome Foundation, Inc
http://www.angelman.org
3462
Alkaptonuria and Ochronosis Notebook
http://www.goodnet.com/~ee72478/enable/AKU.htm
5998
Ataxia-Telangiectasia Children's Project
http://www.atcp.org
3033
Bardert-Biedl, Laurence-Moon
http://www.isgrd.umds.ac.uk/laurence/laurence2.htm
3276, 3113
Batten Disease Support & Research Assn
http://bdsra.org
3333
Beckwith-Wiedemann Support Network
http://www.beckwith-wiedemann.org
3036
Blepharophimosis,Ptosis,Epicanthus Inversus Family
Network
http://www.familyvillage.wisc.edu/lib_blep.htm
3230
Blue Rubbler Bleb Nevus Syndrome Suppport Group
http://www.swmed.edu/home_pages/brbns
4229
CardioFacioCutaneous Syndrome Foundation
http://www.cfcfoundation.com
3627
CDG Syndrome Society
http://www.emu.lu.se/cdg/indexeng.shtml
5223
Charcot-Marie-Tooth Association
http://www.charcot-marie-tooth.org
4384
CHARGE Syndrome Fdn
http://www.chargesyndrome.org
3480
Chromosome 8 Home Page (Wells Labs)
http://wimp.nsm.uh.edu/eight.html
3416, 3184
Chromosome 9p- Network
http://www.9pminus.org
3081
Chromosome 11q: European Chromosome 11Q
Network
http://home.wxs.nl/~avbetuw/home.htm
3087
Chromosome 18 Home Page
http://www.childrenshospital.org/chromosome18/index.html
3094, 3702, 3095,3096,
3699
Chromosome 22 Central
http://www.nt.net/~a815/chr22.htm
3132, 3186, 5359, 3703,
3267
Coffin-Lowry Syndrome Foundation
http://clsfoundation.tripod.com/
3150
Coffin-Siris Syndrome Support Group
http://members.aol.com/CoffinSiri/index.html
3151
Cornelia de Lange Syndrome Foundation
http://cdlsoutreach.org
3183
Cri-du-Chat Syndrome Support Group
http://www/cridchat.u-net.com
3073
Еще немного о дисморфологии
• Уродства могут возникать случайно или
как часть наследственного синдрома
– E.g. Cleft lip
– Лечение и.т.д. могут быть различны
• Синдром – это набор признаков и
симптомов заболевания
Определение пола
• SRY ген (ТФ) на Y хромосоме – мужской
фенотип
• DAX 1 ген на X хромосоме – женский
фенотип
• Отсутствие рецептора андрогенных
гормонов – псевдо-женский фенотип.
Скачать