Simmons Agar Base / Citrate Agar Основа агара Симмонса / Цитратный агар M411 / M099 Эти среды используют для дифференциации энтеробактерий. Состав**: Ингредиенты Магния сульфат Аммония дигидрофосфат Натрия аммонийного фосфат Калия гидрофосфат Натрия цитрат Натрия хлорид Бромтимоловый синий Агар-агар Конечное значение рН (при 25ºС) М411 грамм/литр М099 грамм/литр 0,20 0,20 0,80 – – 5,00 0,08 15,00 0,20 1,00 – 1,00 2,00 5,00 0,08 15,00 7,0 ± 0,2 6,8 ± 0,2 ** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам Приготовление: Размешать 21,3 г порошка М411 в 900 мл дистиллированной воды или 24,28 г порошка М099 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Добавить 100 мл 0,2%-ного раствора цитрата натрия в среду М411. Тщательно перемешать и разлить в пробирки или флаконы. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121ºС) в течение 15 мин. Принцип и оценка результата: Эти среды используют для дифференциации энтеробактерий по способности использовать цитрат в качестве единственного источника углерода. Первоначально цитратная среда была разработана Козером (1), она содержала соль аммония в качестве единственного источника азота и цитрат в качестве единственного источника углерода, что позволяло дифференцировать Escherichia coli и Enterobacter aerogenes. Затем Симмонс (2) модифицировал среду, введя в ее состав агар-агар и бромтимоловый синий (3). Эта среда рекомендована АРНА (4). Среда содержит гидрофосфат аммония в качестве единственного источника азота и цитрат натрия в качестве единственного источника углерода. Бромтимоловый синий – индикатор рН. Микроорганизмы в ходе размножения на среде продуцируют щелочные продукты, которые способствуют изменению цвета индикатора с зеленого на синий. Контроль качества: Внешний вид порошка: Гомогенный сыпучий желтый порошок. Плотность готовой среды: Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю. Цвет и прозрачность готовой среды: Среда имеет травянисто-зеленую окраску, слегка опалесцирует, когда в пробирках формируется скошенный гель. Кислотность среды: При 25ºС водный раствор М411 (2,13% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2, а раствор М099 (2,43% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2. Культуральные свойства: Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37ºС. Штаммы микроорганизмов (АТСС) Рост Цвет среды Цитрат (утилизация) Enterobacter aerogenes (13048) Salmonella enteritidis (13076) Salmonella typhimurium (14028) Salmonella typhi (6539) Escherichia coli (25922) Shigella dysenteriae (13313) Хороший или обильный Хороший или обильный Хороший или обильный Средний или хороший Отсутствует Отсутствует Синий Синий Синий Зеленый Зеленый Зеленый + + + – – – Ссылки: Условия и сроки хранения: Порошок хранить при температуре ниже +25ºС. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8ºС.