ОБЛАСТНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ «Новосибирский центр крови» УТВЕРЖДАЮ: Главный врач ОГУЗ «НЦК» Хальзов К.В. ____________________ «_2__» марта2009 г. Главным врачам муниципальных учреждений здравоохранения г. Новосибирска, областных лечебнопрофилактических учреждений, центральных районных больниц, гг. Бердска и Оби, Искитима ИНФОРМАЦИОННОЕ ПИСЬМО «Алгоритм определения групповой принадлежности по системе АВО с использованием моноклональных антител (цоликлонов)». Заведующая ОМО ОГУЗ «НЦК» Гребенюк А.А «02» марта 2009 г. СОГЛАСОВАНО: Заместитель главного врача ОГУЗ ГНОКБ по орг.-методической работе Комиссарова Т.В. Алгоритм определения групповой принадлежности по системе АВО с использованием моноклональных антител (цоликлонов). 1. Промаркировать пластину (ФИО исследуемого лица, специфичность реагентов анти-А, анти-В, анти-АВ) 2. Нанести на плоскость по одной большой капле (0,1мл) цоликлона анти-А, анти-В, анти-АВ 3. Рядом с каждым реагентом нанести по одной маленькой (0,01-0,05мл) капле исследуемой крови 4. Смешать отдельными чистыми стеклянными палочками каждую каплю исследуемой крови с соответствующим реагентом 5. Мягко покачать пластину в течение 2,5 минут 6. Наличие агглютинации свидетельствует о положительном результате (+), а ее отсутствие - об отрицательном (-) 7. Сделать заключение о группе крови (таблица №1) Таблица №1 анти-А Реагенты анти-В анти-АВ Группа крови + + + + + + + О (I) А (II) В (III) АВ (IV) 8. При получении положительного результата одновременно со всеми цоликлонами (антиА, анти-В, анти-АВ), для исключения неспецифической реакции провести исследование с 0,9% NaCl. 8.1 . Нанести на плоскость одну большую каплю (0,1мл) 0,9% NaCl 8.2. Рядом нанести одну маленькую (0,01-0,05мл) каплю исследуемой крови 8.3. Смешать чистой стеклянной палочкой каплю исследуемой крови с 0,9% NaCl 8.4. Мягко покачать пластину в течение 2,5 минут 8.5. Оценить результат (таблица №2) Таблица №2 Реакция с 0,9% NaCl + Группа крови АВ (IV) Неспецифическая агглютинация группа крови не определяется. 8.6. При выявлении неспецифической реакции провести исследования (п.п. 1 – 7) с трижды отмытыми эритроцитами 9. При выявлении группы А (II) или АВ (IV), для уточнения варианта антигена А и выявления подгруппы А2(II) или А2В (IV), провести исследование с цоликлоном Анти – А1 или лектином Анти – А1 9.1. Нанести на плоскость по одной большой капле (0,1мл) цоликлона анти-А1, или лектина Анти – А1 9.2.. Рядом с каждым реагентом нанести по одной маленькой (0,01-0,05мл) капле исследуемой крови 9.3. Смешать отдельными чистыми стеклянными палочками каждую каплю исследуемой крови с соответствующим реагентом 9.4. Мягко покачать пластину в течение 2,5 минут 9.5. Оценить результат исследования (таблица №3) Исходная группа А (II) Реакция с цоликлоном или лектином анти-А1 + - АВ (IV) + _ Таблица № 3 Группа крови А (II) А2 (II) (подгруппа) АВ (IV) А2В (IV) (подгруппа)