Применение аутологичных мононуклеаров периферической

Применение аутологичных мононуклеаров периферической крови
в лечении язвенных поражений роговицы
Елегечева О.Н., Кривошеина О.И., Запускалов И.В.
Using autologous mononuclears of peripheral blood in the treatment
of corneal injuries
Yelegecheva O.N., Krivosheina O.I., Zapuskalov I.V.
Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
 Елегечева О.Н., Кривошеина О.И., Запускалов И.В.
УДК 617.713-002.44:611.018.5
Бактериальные язвы роговицы относятся к числу
тяжелых заболеваний глаз, трудно поддающихся лечению и приводящих к снижению или потере зрения.
Наиболее частыми возбудителями бактериальных
язв роговицы (более 80% всех случаев) являются
Staphylococcae epidermidis, Staph. aureus, Pseudomonas
aeruginosa. Наиболее агрессивный возбудитель — синегнойная палочка, вызывающая бурное течение язвы с последующей перфорацией роговицы и развитием эндофтальмита (Шаимова В.А., 2000; Шаимова В.А., 1999).
В последние годы выявились отрицательные тенденции в группе экзогенных факторов риска: контактные линзы (с ними связывают от 27 до 33% всех бактериальных кератитов), травма роговицы (23,7%),
нарушение слезной пленки (20%).
В изменении характера возбудителей бактериальных язв роговицы также можно выделить следующие
тенденции: рост числа антибиотико-резистентных
возбудителей, рост более чем в 2 раза удельного веса
грамотрицательных возбудителей, в том числе синегнойной палочки (Даутова З.А., 2000).
Трудности лечения язв роговицы в значительной
степени обусловлены и тем, что в 44,8—52,7% случаев не удается выделить возбудителя, и лечение проводится эмпирически, с учетом клинической картины
заболевания. Неудовлетворенность результатами традиционной терапии, высокая частота развития осложнений обусловливают разработку новых методов лечения язв роговицы.
Целью настоящей работы явилось изучение эффективности применения аутологичных мононукле-
аров периферической крови у больных с язвенным
поражением роговицы.
Клинические исследования проведены в группе из
56 больных (60 глаз) с язвой роговицы различной степени тяжести. При этом тяжелый патологический
процесс наблюдался у 67% больных, средней степени
тяжести — у 33%. На момент обращения в стационар
острота зрения в большинстве случаев (59%) составляла ниже 0,1, в 41% — 0,1—0,2. Сроки обращаемости
составляли от 1 до 3—4 дней.
Бактериологическое исследование отделяемого
язвенного дефекта выявило рост микрофлоры в 78,9%
случаев. Патогенная микрофлора обнаруживалась в
63,4% и была представлена Pseud. aeruginosa —
42,1%, Staph. aureus — 21,1%. Условно-патогенная
микрофлора выявлялась в 15,5%, среди которой преобладали Staph. epidermidis — 5,2%, E. coli — 10,5%.
Всем пациентам данной группы наряду с традиционным лечением выполнялись инстилляции аутологичных мононуклеаров периферической крови с частотой 6—8 раз в день. Кровь, взятую из локтевой
вены пациента в количестве 4,0—5,0 мл, помещали в
стерильную пробирку, содержащую 1,0 мл раствора
гепарина. Мононуклеары выделяли методом фракционирования в градиенте плотности (1,067—1,077 г/мл)
на разделяющем растворе фиколл-верографина (Гольдберг Е.Д. и соавт., 1992). Взятая кровь в 2 раза разбавлялась физиологическим раствором и наслаивалась на 3 мл смеси фиколл-верографина. Пробы центрифугировали в течение 15 мин при 800g
(2000 об./мин). Далее интерфазный слой, содержа-
Бюллетень сибирской медицины, 2006. Приложение 2
91
Елегечева О.Н., Кривошеина О.И., Запускалов И.В.
щий мононуклеары и располагающийся между
плазмой и градиентом, забирался пастеровской пипеткой. Добавлялся 1 мл физиологического раствора, и полученная суспензия вновь центрифугировалась в течение 7 мин при 400g (1500 об./мин) для
отмывания полученных мононуклеаров. Чистота
мононуклеаров, полученных на градиенте фиколлверографина, составляла 96%, жизнеспособность
клеточного материала в тесте с трипановым синим
находилась в пределах 95—97%.
Контрольная группа была представлена 40 пациентами (42 глаза), получавшими аналогичное лечение
без применения инстилляций аутологичных мононуклеаров крови.
Пациенты обеих групп сопоставимы по полу, возрасту и тяжести поражения роговицы.
Сравнительный анализ результатов лечения язв
роговицы позволил выявить значительную эффективность применения инстилляций аутологичных мононуклеаров крови. Так, например, срок очищения язвенного дефекта от некротических масс сократился в 2
раза по сравнению с контрольной группой. Рассасывание перифокального отека и инфильтрации стромы
роговицы ускорилось на 25—30%. Как следствие, в
более ранние сроки, чем в контрольной группе, насту-
92
пала полная эпителизация роговицы. Число осложнений (формирование десцеметоцеле, перфорация роговицы, развитие эндофтальмита) уменьшилось в исследуемой группе в 3 раза.
Применение инстилляций аутологичных мононуклеаров периферической крови в комплексном лечении больных с язвенными поражениями роговицы
положительно отразилось и на состоянии зрительных
функций. У 46% пациентов основной группы отмечено повышение остроты зрения до 0,5—0,6, в то время
как в контрольной группе подобный показатель достигнут лишь в 27% случаев.
Важное в медико-социальном аспекте значение
имеет также факт сокращения длительности пребывания пациентов основной группы в стационаре в среднем на (6,0  0,2) койко-дня.
Таким образом, результаты клинических исследований свидетельствуют о высокой эффективности
применения аутологичных мононуклеаров периферической крови в комплексном лечении язвенных поражений роговицы.
Работа выполнена при поддержке гранта Президента РФ для молодых российских ученых за 2006—
2007 гг. № МД-6837.2006.7.
Бюллетень сибирской медицины, 2006. Приложение 2