Правила взятия, условия хранения и доставки материала для проведения исследований в лаборатории ГБУЗ СК «КСПК«Сангвис»г.Пятигорск Для проведения серологических, биохимических, иммунологических и клинических анализов берется венозная кровь. Взятие венозной крови осуществляется — медицинской сестрой. 1. Подготовка обследуемых. Взятие крови, как правило, осуществляется натощак, в утренние часы. В экстренных случаях взятие крови может проводиться в любое время суток. Существуют общие факторы, влияющие на результат гематологических исследований: физическое напряжение (бег, быстрая ходьба, подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение, рентгеновское облучение, положение обследуемого, прием пищи накануне исследования и др. Для исключения этих факторов, следует соблюдать следующие условия подготовки пациентов: • Взятие крови (венозной и капиллярной) осуществляется после 15-минутного отдыха обследуемого; • Курение и прием алкоголя непосредственно перед исследованием исключаются; • Взятие крови осуществляется натощак в утренние часы (8-10 ч), пациент во время взятия сидит у тяжелых больных взятие крови может производиться лежа. 2. Взятие венозной крови. При взятии крови следует строго соблюдать правила санитарно-эпидемического режима - асептики и антисептики в соответствии с «Инструкцией по мерам профилактики распространения инфекционных заболеваний при работе в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений», утвержденной МЗ СССР 17.01.1991 г. и действующей до настоящего времени. Взятие крови необходимо проводить в одноразовых резиновых перчатках; в тех случаях, когда это невозможно, перед каждым взятием перчатки следует обрабатывать 70% спиртом. Все оборудование для взятия крови, включая одноразовые системы, шприцы, иглы, бинты, ватные и марлевые тампоны, пластыри должно быть стерильным. - Дезинфекция и стерилизация оборудования проводится в соответствии с ОСТом 42-21-2-85 «Стерилизация и дезинфекция изделий медицинского оборудования» и приказом МЗ СССР «О мерах по снижению заболеваемости вирусным гепатитом в стране» (1989 г.) и «Инструкцией по противоэпидемическому режиму в лабораториях диагностики СПИД» 42-28/39-90 от 05.06.1990 г. З.Условия получения венозной крови. Венозную кровь, как правило, забирают их локтевой вены. В случае необходимости ее можно получить из любой вены (запястья, тыла ладони, над большим пальцем, подключичной и др.). У новорожденных и грудных детей кровь обычно берется из лобной, височной или яремной вены. При взятии крови из вены необходимо избегать: мест шрамов, гематом; вен, используемых для переливания растворов; ножных вен (у больных диабетом, при нарушении периферического кровотока, ангиопатиях). Оборудование. Для венепункции можно использовать: • Одноразовые пластиковые системы (контейнеры), состоящие из контейнера с навинчивающейся на него одноразовой иглой и пробирки с плотно прилегающей пробкой и вакуумом внутри; • Одноразовые шприцы с достаточным объемом и подходящим диаметром иглы; • Иглы с внутренним диаметром 0,55-0,65 мм. Дополнительное оборудование: Манжета или жгут для пережатия руки; спирт 70%; ватные или марлевые тампоны; бинт; пластырь. Методика получения венозной крови. Обследуемый либо сидит, либо лежит. Его положение должно быть удобным, рука свободно вытянута вперед и прочно лежит на подушке. Вены пережимаются манжетой на время не более 30 секунд. Место пережатия должно быть выше места прокола на 8-10 см. После наложения манжеты кисть руки пациента должна быть сжата «в кулак», после этого проводится обработка тампоном со спиртом места прокола. После высыхания кожи (несколько секунд) левой рукой оператора обхватывают руку пациента, большим пальцем придерживается вена (кожа должна быть натянута против касания), а правой рукой в вену вводится игла вакуумной пробирки или шприца. Игла острием направлена вниз, заточенная сторона - вверх. Кровь должна свободно поступать в пробирку. Пережатие освобождается после правильной установки иглы. После получения необходимого количества крови (5мл), тампоном со спиртом накрывается место взятия, игла осторожно удаляется. Руку не следует сгибать в течение 15-20 с. После этого накладывается стерильная повязка или пластырь. Тотчас после взятия крови необходимо закрыть пробирку и тщательно перемешать её содержимое, переворачивая ее. Не взбалтывать! Перемешивание крови позволяет избежать образования сгустков, наличие которых искажает результат исследования. Примечание. Если после пункции кровь не появилась, проводится повторная пункция. При «плохих» венах рекомендуется многократное сжимание и разжимание кулака обследуемого, согревание места взятия, легкое похлопывание, опускание руки вниз. При «катающихся» венах необходимо придерживать вену большим пальцем руки, при тонких - использовать более тонкие иглы. У больных с цианозом следует использовать иглы большого диаметра (вязкость крови выше), у больных гемофилией или с антикоагулянтной терапией желательно делать только одну венепункцию тонкой иглой, после взятия обязательна давящая повязка. При внутривенных переливаниях крови или лекарственных веществ взятие крови осуществляется как можно дальше от места переливания. У больных после кровопотери или больных анемией количество забираемой крови для исследования должно быть по возможности минимальным. 4.Условия транспортировки венозной крови. Правильно собранная венозная кровь должна быть своевременно доставлена в лабораторию. Время доставки не должно превышать 60 мин после взятия крови. В некоторых случаях доставка может быть осуществлена позже, если это не повлияет на результаты исследований. Во время транспортировки пробирки и контейнеры с кровью должны быть соответствующим образом защищены от вредного влияния окружающей среды и погодных условий. При транспортировке биологического материала должны строго соблюдаться правила техники безопасности, асептики и антисептики. Пробирки должны быть промаркированы, упакованы и плотно закрыты. Упаковка должна быть удобной для транспортировки. Сроки хранения зависят от исследуемого показателя, температуры хранения и антикоагулянта, с помощью которого осуществлялся забор кровиг 5.Взятие крови для анализа. Перед получением образца крови медицинскому работнику необходимо знать следующее: 1. после приема пищи концентрация некоторых биологических веществ, например, гормонов, может быть повышенной; 2. содержание в крови ряда веществ подвержено влиянию циркадных (суточных) колебаний; 3. значительное количество лекарственных средств способно влиять на определяемые вещества, повышая или понижая уровень их содержания в крови; 4. в зависимости от положения тела пациента, а также сразу после физической нагрузки, возможно изменение уровней содержания биологически активных веществ (иногда более чем на 10%). Кровь, предназначенную для исследования, следует забирать в однотипные центрифужные пробирки которые должен подготавливать (мыть, сушить, добавлять коагулянт или ингибитор ферментов) специальный сотрудник. Кровь, не содержащую добавок, отстаивают, а с добавками -центрифугируют. Полученную сыворотку или плазму разливают в такое количество мелких пластмассовых или стеклянных пробирок (хотя стекло не всегда выдерживает низкую температуру), которое равно или превышает число возможных типов тестирования. Периферическую венозную кровь пациентов желательно брать утром натощак в одно и то же время в условиях физиологического покоя, что особенно важно при исследовании веществ, секреция и метаболизм которых протекает в течение суток неодинаково. Во время процедуры взятия крови следует избегать гемолиза, который возможен при длительном венозном застое, энергичной аспирации крови шприцем, попадании в просвет иглы воды и детергентов, воздействии на кровь высокой или низкой температур. 6. Получение сывороток или плазмы крови. Цельная кровь используется, в основном, в биохимических (определение содержания глюкозы, показателей кислотноосновного состояния, определение концентрации электролитов в эритроцитоз) и гематологических исследованиях (обнаружение LE-клеток, определение гематокрита, проведени-клинического анализа крови). Для методов ИФА получают сыворотку или плазму. 7. Обработка крови для лабораторных исследований. Полученная и доставленная в лабораторию кровь должна быть с^ обработана или подвергнута исследованию. Длительное стояние сыворотки эритроцитами может привести к сдвигам концентраций составляющих, поэтов время стояния сыворотки над сгустком должно быть ограничено. Кроме того, время биологического полураспада некоторых исследуемых веществ настолько мало, что продолжительное стояние сыворотки при комнатной температуре может искажать результаты исследования. В начале обработки чистой сухой стеклянной палочкой сгусток крови осторожно отделяется от стенок пробирки, пробирка взвешивается и подготавливается к центрифугированию. Лабораторные образцы для исследований в большинстве случаев рекомендуется центрифугировать при температуре +4°С, со скоростью вращения 500-1000g (1500-3000 об/мин) не более 15-20 мин. Более высокая скорость вращения, как правило, приводит к гемолизу. Полученную сыворотку (плазму) необходимо быстро отделить от форменных элементов крови и плотно закрыть пробирки крышкой. Если получена липемическая или гемолизированная сыворотка, образец, как правило, не используется. При работе с кровью общим правилом должно быть немедленное отделение плазмы или сыворотки от форменных элементов, так как некоторые вещества могут поглощаться и инактивироваться эритроцитами и лейкоцитами. 8. Хранение крови (плазмы, сыворотки) При анализе большинства биологических материалов допустимым считается хранение образцов в течение не более 6-8 ч при комнатной температуре. Некоторые из них разрешается хранить в течение 1 недели при температуре +4°С. При необходимости хранение сыворотки (плазмы) более суток. Образец рекомендуется заморозить при температуре -20°С. Это позволит производить исследования даже спустя несколько месяцев. Многие вещества биологического происхождения при низких температурах более стабильны, потому обычно их хранят в замороженном состоянии. Образцы крови следует хранить в хорошо закрытых пробирках, так как потеря влаги в образце при замораживании может привести к концентрированию исследуемого вещества и получению ошибочного результата. При медленном замораживании в образце образуются кристаллики льда, которые разрушают белковые молекулы. Поэтому для достижения оптимальной стабильности исследуемого материала необходимо использовать быстрое замораживание. Взятие капиллярной крови. Для лабораторного исследования капиллярной крови, взятие производят путем прокола скарификатором мягких тканей (ладонной поверхности пальцев, мочки уха, пятки). При взятии крови следует строго соблюдать правила санитарноэпидемического режима - асептики и антисептики в соответствии с «Инструкцией по мерам профилактики распространения инфекционных заболеваний при работе в клинико-диагностических лабораториях лечебнопрофилактических учреждений», утвержденной МЗ СССР 17.01.1991 г. и действующей до настоящего времени. Взятие крови необходимо проводить в одноразовых резиновых перчатках; в тех случаях, когда это невозможно, перед каждым взятием перчатки следует обрабатывать 70% спиртом. Все оборудование для взятия крови, включая одноразовые системы, шприцы, иглы, бинты, ватные и марлевые тампоны, пластыри должно быть стерильным. Дезинфекция и стерилизация оборудования проводится в соответствии с ОСТом 42-21-2-85 «Стерилизация и дезинфекция изделий медицинского оборудования» и приказом МЗ СССР «О мерах по снижению заболеваемости вирусным гепатитом в стране» (1989 г.) и «Инструкцией по противоэпидемическому режиму в лабораториях диагностики СПИД» 42-28/39-90 от 05.06.1990 г. Условия получения капиллярной крови. Капиллярная кровь происходит из артериол, венул и капилляров и содержит артериальную, венозную кровь и межклеточную жидкость. Артериальная часть в капиллярной крови преобладает. Капиллярную кровь у взрослых получают, как правило, их ладонной поверхности рук, мочки уха, у детей - из боковой поверхности пятки или подошвенной поверхности большого пальца ноги, или мочки уха путем прокола скарификатором. Глубина прокола 2-3 мм. Кожа в месте прокола должна быть сухой, розовой и теплой. Холодная кожа должна быть осторожно согрета легким массажем и теплой водой. Отечные области не используются для взятия крови. Оборудование: Одноразовые ланцеты или специальные мглы для взятия капиллярной крови; пробирки со специальным силиконовым покрытием или антикоагулянтом; предметные стекла, пипетки; капилляры; ватные или марлевые тампоны; спирт 70%. Методика получения капиллярной крови. Обследуемый либо сидит, либо лежит. Его положение должно быть удобным, рука или другое место взятия должно быть обработано. Вначале тампоном со спиртом тщательно протирается поверхность кожи для того, чтобы удалить грязь и частицы, которые могут быть сосчитаны как фрагменты клеток крови. После высыхания кожи (несколько секунд) и восстановления кровообращения кожа прокалывается ланцетом или специальной иглой для взятия крови. Первая капля крови удаляется сухой стерильной ватой, так как содержит кусочки поврежденной ткани. Вторая капля используется для исследования. Пункция должно быть такой, чтобы формировалась свободно натекающая капля. Кровь не должна выдавливаться. Во время взятия строго соблюдаются правила асептики. Примечание. Глубина прокола должна быть достаточной (2-3 мм). Более глубокая пункция болезненна, поверхностная может оказаться недостаточной и приведет к повторной пункции. Сильное сжатие пунктируемой поверхности кожи может привести к неправильным результатам исследования. Чрезмерное согревание пунктируемого места может привести к завышенным результатам, особенно в сравнении с данными, полученными при исследовании венозной крови. Свежая капиллярная кровь должна использоваться в течении 2-3 мин. • В первую очередь берут пробу для СОЭ- индивидуальные стерильные капилляры Панченко промывают 5% стерильным раствором цитрата натрия и набирают кровь до метки «О» (100 делений). Выдувают в пробирку с реактивом для СОЭ (соотношение крови и цитрата 1:4 по объему). Встряхивают. Записывают время взятия крови. • Для определения концентрации гемоглобина- в сухую пробирку набирают 0,02 мл крови и выдувают в пробирку с трансформирующим раствором (5 мл), пипетку несколько раз ополаскивают этим раствором. • Для подсчета числа эритроцитов- берут кровь 0,02 мл и выдувают в пробирку с 0,9% раствором NaCl, пипетку ополаскивают в этом же растворе. • Для исследования лейкоцитарной формулы, морфологии эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов готовят мазки крови- после прокола кожи пальца место прокола вытирают сухим ватным тампоном и выдавливают каплю крови на сухое обезжиренное индивидуальное предметное стекло. затем быстро готовят тонкие мазки с помощью шлифовального стекла краем которого быстрым движением продвигают по предметному стекл) каплю крови. • Для подсчета числа лейкоцитов- берут кровь 0,02 мл и выдувают i пробирку с раствором уксусной кислоты (разведения крови в' 20 раз). Кров] для подсчета числа лейкоцитов следует брать в последнюю очередь, т.к уксусная к-та гемолизирует эритроциты. После получения необходимого количества крови, необходим' протереть поверхность кожи тампоном, смоченным спиртом, оставив затег чистый тампон на пальце (или другой поврежденной поверхности) на 1 -2 минут! до полной остановки кровотечения. После забора крови: • Обрабатывается поверхность стола и перчатки. • Копья-скарификаторы, отработанные ватные тампоны, предметные стек! или лунки сбрасываются в отдельную емкость с дез.раствором (6е перекись водорода). Далее утилизируется, как индивидуальный разовы вспомогательный материал. Организации контролирующие деятельность ГУМП СК «Сангвис» Министерство здравоохранения Ставропольского края: г.Ставрополь, ул.Маршала Жукова дом №42/311 Министр Мажаров Виктор Николаевич- тел. 8(8652)26-70-15 1 зам.министра Попов Андрей Павлович- тел. 8(8652)26-67-13 Горячая линия министерства-8(8652)26-78-74 Росздравнадзор по Ставропольскому краю: г.Ставрополь, ул.Голенева 67-Б Руководитель Антоненко Анатолий Дмитриевич-тел. 8(8652)29-60-27 Управление Федеральной антимонопольной службы по Ставропольскому краю г.Ставрополь, ул.Ленина, дом № 384 Руководитель Никитин Сергей Иванович- тел. 8(8652)35-51-19 Прокуратура г.Пятигорска г.Пятигорск, ул.Октябрьская дом №44 Прокурор Кардашин Юрий Александрович-тел.33-00-19 Управление Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека г.Ставрополь, ул.Фадеева дом №4 Руководитель Ермаков Александр Викторович-тел. 8(8652)29-86-39 Межрегиональное Управление № 101 ФМБА России Г.Лермонтов, ул.Ленина дом №26 Руководитель Попов Константин Михайлович-тел. 8(962)497-7700