гематологические показатели окуня, обитающего в озере

УДК 595.111(06)
ХАРАКТЕРИСТИКА КРОВИ ОКУНЯ ОЗЕРА ВИШТЫНЕЦКОГО
В ВЕСЕННИЙ И ЛЕТНИЙ ПЕРИОДЫ
Е.В. Сементина, Г.Г. Серпунин
Впервые установлен гематологический статус окуня оз. Виштынецкого по показателям
красной и белой крови в весенний и летний периоды года. Анализ показателей крови окуня, выловленного в различных районах озера, свидетельствует о сходстве физиологического состояния
окуня, а значит, и сходстве экологических условий в этих районах и их благополучном экологическом состоянии.
антропогенная нагрузка, Виштынецкое озеро, окунь, гематологические параметры, лейкоцитарная формула, гематологический статус, физиологическое состояние, экологические условия
ВВЕДЕНИЕ
Виштынецкое озеро – древнейший и уникальный для Калининградской
области водоем [1]. По составу ихтиофауны оно наиболее ценное из всех внутренних пресных трансграничных водоемов Калининградской области РФ и Литовской Республики [2]. В последние годы на Виштынецкое озеро возрастает антропогенная нагрузка в связи со значительным увеличением количества посещающих его людей [1]. Ухудшение экологических показателей водной среды,
вследствие мощных антропогенных воздействий на водоемы, приводит к сокращению численности ценных промысловых видов рыб [3]. В связи с этим, актуальной в настоящее время задачей является сохранение биологического разнообразия оз. Виштынецкого, которое имеет особый природоохранный статус и является памятником природы регионального значения [1], путем контроля за его
экологическим состоянием. Исследование крови рыб позволяет получить ценную
информацию об условиях среды их обитания и характере течения патологических
процессов, индуцируемых токсикантами.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА
Исследования параметров крови рыб, обитающих в оз. Виштынецком,
проводились впервые. Объектом исследований служил окунь, так как он широко
распространен по всему озеру, включая глубоководную зону [1], что дает возможность исследовать состояние водоема в разных районах и на различных глубинах.
Сбор материала для исследований проводили на Виштынецком озере
19 мая и 2 августа 2008 года. Ловили окуня ставными сетями в трех квадратах –
38, 11 и 90 соответственно.
Кровь отбирали шприцем из хвостового гемального канала. Гематологические параметры определяли по общепринятым методикам: концентрацию гемоглобина гемиглобинцианидным методом на спектромоме, эритроцитов - пробирочным методом, лейкоцитов - косвенным методом, общий белок в сыворотке
крови – рефрактометрически [4]. Подсчет лейкоцитарной формулы производили
на сухих мазках, окрашенных по Паппенгейму, с использованием микроскопа
«Микмед» и иммерсионного объектива. На каждом мазке идентифицировали 200
лейкоцитов с учетом стадий их цитогенеза по классификации Н.Т. Ивановой 5.
Статистическую обработку выполняли, используя программный пакет «Microsoft
Excel». Достоверность различий устанавливали, используя критерий Стьюдента.
РЕЗУЛЬТАТЫ
Во время лова окуня весной температура воды в озере в квадрате 38 составляла 10,1°C, а концентрация кислорода в воде – 13,32 мг/л, в квадрате 11
температура равнялась 11,7°C, концентрация кислорода – 12,33 мг/л. Во время
летних исследований температура воды в квадрате 90 была 19,2°C, концентрация
кислорода в воде составляла 7,62 мг/л.
Рыбы, выловленные 19 мая 2008 года в квадрате 38 на глубине 25 м, имели
возраст 3-5 лет, а выловленные в 11-м квадрате на глубине 15 м — 2-4 года. Во
время летних исследований в квадрате 90 на глубине 20 м был пойман окунь в
возрасте 4-5 лет.
Исследования, проведенные в мае в квадратах 38 и 11, а также в августе
2008 года в квадрате 90, показали, что морфологические характеристики зрелых
эритроцитов у всех исследованных рыб не имели отклонений от нормы. Лейкоцитарная формула крови исследованных окуней, выловленных в 38-м, 11-м и
90-м квадратах, была представлена лимфоцитами (большими и малыми), нейтрофильными миелоцитами и метамиелоцитами, палочко- и сегментоядерными
нейтрофилами, моноцитами и эозинофилами (таблица). В целом белая кровь окуня имела ярко выраженный лимфоидный характер. Подавляющее большинство
клеток зернистого ряда было представлено нейтрофилами.
Из концентрационных показателей крови окуня оз. Виштынецкого, выловленного на двух станциях в весенний период, достоверные различия (р<0,01) коснулись лишь концентрации эритроцитов, которая оказалась больше у рыб в возрасте 3-5 четырех лет, выловленных в квадрате 38, в сравнении с рыбами
2-4летнего возраста (квадрат 11) (56,55±0,11 против 42,21±3,74 г · л-1).
Установлено уменьшение с возрастом доли нейтрофильных миелоцитов
(при сравнении рыб двух и трех лет) и больших лимфоцитов (при сравнении рыб
в возрасте двух, трех и четырех лет) (рис. 1). По остальным параметрам достоверных различий между окунями со станций 38 и 11 выявлено не было.
Известно, что окунь не совершает длительных миграций и даже заметных
кочевок. Он мелкими группами держится на постоянных местах [2]. Эти данные и
установленные нами показатели крови позволили предположить, что окунь, несмотря на разницу в глубине и месте обитания, находился в сходных экологических условиях.
Таблица 1. Характеристика крови окуня оз. Виштынецкого
Параметры
квадрат 38
Hb, г · л-1
Эр, Т· л-1
СГЭ, пг
Л, Г· л-1
ОБС, г·л-1
M±m
49,8±2,85
1,710±0,110 2
29,72±2,55
113,57±10,56
29,38±4,62
Мн
ММн
Пн
Сн
ОЧН
Э
Мо
Блф
МЛф
ОЧЛф
4,57±0,65
4,14±0,87
1,64±0,81
1,93±0,521
12,29±1,92
1,57±0,43
3,21±0,59
19,79±1,19
63,14±3,08
82,93±13,12
ИСЛ
Масса, г
n
0,11±0,04
210,00±0,05 1
15
81,3
52,7
0,14±0,05
70,00±0,02 1
17
85,7
67,8
квадрат 90
лето
M±m
Cv
50,26±3,37
20,1
1,890±0,180 2 29,3
28,61±3,26
34,2
180,75±20,40 33,9
41,60±0,16
25,2
4,95±0,73
5,05±0,89
1,45±0,17
0,75±0,09 1
12,25±1,15
1,40±0,37
1,30±0,25
10,25±0,78
74,85±1,02
85,10±1,53
44,3
53,1
34,3
35,1
28,2
78,6
57,9
22,9
4,1
5,4
0,16±0,02
305,09±0,02 1
14
35,8
32,2
различия достоверны при р< 0,05 и р< 0,01 соответственно
30
25
20
Блф, %
1, 2 –
Место и время вылова
квадрат 11
весна
Cv
M±m
Cv
14,0
43,16±7,17
44,0
16,4
1,260±0,160 2, 2 34,0
21,0
42,05±12,55
79,0
22,8
146,56±31,00
56,0
38,5
37,63±2,88
20,3
Лейкоцитарная формула, %
34,8
3,88±1,10
75,2
51,5
4,81±1,05
58,0
121,4
1,88±0,39
54,8
66,0
1,88±0,36 1
50,9
38,2
12,44±2,10
44,7
67,3
1,81±0,48
70,6
44,8
1,94±0,55
74,8
14,7
18,94±2,10
29,3
11,9
64,88±3,09
12,6
44,5
83,81±11,47
41,5
15
10
5
0
двухлетки
трехлетки
четырехлетки
19.05.2008г
Рис.1. Достоверные различия процента больших лимфоцитов
в крови окуней
В лейкоцитарной формуле исследованных в весенний период рыб среди
нейтрофилов преобладали юные формы (нейтрофильные миелоциты и метамиелоциты). Основная функция этих клеток – защита организма от инфекции и от
токсических воздействий. Однако доля этих клеток не превышала значения, установленные для окуня р. Дон Н.Т. Ивановой 5. Общее число лимфоцитов, основная функция которых реализация иммунологических реакций, также не превышало их доли в крови окуней, исследованных Н.Т.Ивановой 5. Установленные
нами показатели белой крови окуня свидетельствуют о благополучном физиологическом состоянии особей в квадратах 38 и 11 оз. Виштынецкого и, следовательно, о благоприятных экологических условиях в этих районах озера.
Анализ лейкоцитарной формулы окуней, исследованных в летний период,
также позволил выявить все основные типы клеток, характерные для данного вида. При исследовании периферической крови четырехлетних и пятилетних окуней были также выявлены возрастные различия (рис. 2). Зафиксировано уменьшение с возрастом концентрации эритроцитов и общего числа нейтрофилов, а
также увеличение концентрации лейкоцитов за счет малых лимфоцитов и общего числа лимфоцитов. Достоверных различий между процентным содержанием
других типов клеток крови у четырехлетних и пятилетних рыб в летний период
не наблюдалось, что указывает на стабильное структурно-функциональное состояние органов лейкопоэза.
120
100
80
60
40
20
0
четырехлетки
пятилетки
02.08.2008г
Концетрация эритроцитов, млн/мкл
ОЧН, %
ОЧЛ, %
Малые лимфоциты, %
Рис. 2. Достоверные различия показателей крови у окуней
из 90-го квадрата
При изучении сезонных изменений параметров окуня, исследованного весной (квадрат 11) и летом (квадрат 90), достоверные различия были обнаружены в
концентрации эритроцитов и проценте сегментоядерных нейтрофилов, а также
в индивидуальной массе рыбы. В летний период первый показатель крови и масса тела у исследованных рыб оказались существенно выше, а последний —
существенно ниже, чем в весенний. Таким образом, от весны к лету у окуня из
концентрационных показателей достоверно увеличилась только концентрация
эритроцитов, а в лейкоцитарной формуле достоверно уменьшилась лишь доля
сегментоядерных нейтрофилов. По остальным параметрам достоверных различий
не было обнаружено.
ВЫВОДЫ
1. Впервые установлен гематологический статус окуня оз. Виштынецкого
по концентрации гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов, общего белка в сыворотке крови, среднему содержанию гемоглобина в эритроците, отношению эритроцитов к лейкоцитам, лейкоцитарной формуле крови.
2. Отсутствие достоверных различий в лейкоцитарной формуле окуня, выловленного 19 мая 2008 года в северо-западном и центральном районах оз.
Виштынецкого, свидетельствует о сходстве физиологического состояния окуня, а
значит, и сходстве экологических условий в этих районах.
3. Уровень показателей красной и белой крови окуня, выловленного в различных районах оз. Виштынецкого весной и летом 2008 года, свидетельствует о
благоприятных экологических условиях в этих районах озера.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Озеро Виштынецкое / VISTYCIO EZERAS / отв. ред. К.В. Тылик, С.В.
Шибаев. – Калининград: Изд-во ИП Мишуткина И.В., 2008. – 144 с.
2. Тылик К.В. Рыбы трансграничных водоемов России и Литвы. RUSIJOS IR
LIETUVOS VANDENS TELKINIU ZUVYS /К.В. Тылик. – Калининград: Изд-во
ИП Мишуткина И.В., 2007. – 120 с.
3. Лапухин Ю.А. Сравнительная оценка функционального состояния молоди гибрида стерлядь × белуга / Ю.А. Лапухин, С.В. Пономарев, М.Н. Сорокина //
Вестник АГТУ, № 3(44), 2008. - С. 14-17.
4. Серпунин Г.Г. Методы гематологических исследований рыб / Г.Г. Серпунин, Л.В. Савина. - Калининград, 2005. - 53 с.
5. Иванова Н.Т. Атлас клеток крови рыб /Н.Т. Иванова. - М.: Легкая и пищевая промышленность, 1983. - 184 с.
HEMATOLOGIC PARAMETERS OF THE LAKE PERCH OF VISHTYNETS
LAKE DURING THE SPRING AND SUMMER PERIODS
E.V. Sementina, G.G. Serpunin
Parameters of blood of the perch caught in different areas of Vyshtynets lake, that testifies the
safe physiological state and favorable ecological conditions in the lake.