разработка и применение генетических методов в области
реклама
РАЗРАБОТКА И ПРИМЕНЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ В ОБЛАСТИ ДИАГНОСТИКИ КОКСИЕЛЛЕЗА Лазарева Е.Н.1, Федорова М.В.2, Карань Л.С.2, Колясникова Н.М.2, Ниталиева С.Ж.3, Малеев В.В2, Галимзянов Х.М.1, Буркин А.В.3,Хок М.М.3, Бабаева М.А.3 1 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Астраханская государственная медицинская академия, Астрахань, Россия 2 3 ФГУН ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва, Россия Областная инфекционная клиническая больница, г. Астрахань, Россия Ку-лихорадка — острая инфекция из группы риккетсиозов, характеризующаяся поражением ретикулоэндотелиальной системы, интоксикацией, лихорадкой. Возбудитель заболевания - риккетсия Coxiella burnetii рода Coxiella трибы Rickettsieae семейства Rickettsiaceae. Лихорадка Ку относится к зоонозам с природной очаговостью. Резервуарами возбудителя в природе являются мелкие млекопитающие (преимущественно грызуны), птицы, а также иксодовые, аргасовые, гамазовые и краснотелковые клещи. Существование стойких природных очагов инфекции способствует заражению различных видов домашних животных и формированию вторичных антропургических очагов. Основными источниками инфекции в антропургических очагах сельской местности являются мелкий и крупный рогатый скот, а в городах – собаки и кошки. Заболевание регистрируют повсеместно, особенно в районах с развитым животноводством. Территориями, эндемичными по Ку-лихорадке, являются западная часть США, Австралия, Африка, Великобритания, страны Средиземноморского бассейна. В РФ заболеваемость Ку-лихорадкой составляет в среднем 0,02 на 100 тыс. населения, очаги коксиеллеза зарегистрированы в Западно-Сибирском и Поволжском регионах, в Центрально-Черноземном регионе и на Северном Кавказе. В настоящее время наибольший показатель заболеваемости регистрируется в Астраханской области. Неравномерность территориального распределения заболеваемости скорее всего связана с недостаточной эффективностью выявления этой инфекционной патологии. Диагностика Ку-лихорадки затруднена из-за отсутствия патогномоничной симптоматики и практически невозможна без лабораторного обследования больного в реакции со специфическим диагностикумами. Наиболее часто заболевание проходит под диагнозом ОРВИ, реже – лихорадка неясной этиологии, бронхит, пневмония, гепатит [1]. Целью данной работы было изучение возможности использования для лабораторного подтверждения коксиеллеза метода выявления ДНК Coxiella burnetti, основанного на ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. Материал. Исследовали 70 проб крови больных с подозрением на инфицированность C.burnetti, поступивших в Астраханскую областную инфекционную больницу в 2010 г Результаты. Диагноз Ку-лихорадка подтвержден методом ПЦР с гибридизационно- флуоресцентной детекцией в режиме реального времени у 54 пациентов, при этом сроки забора крови для проведения ПЦР варьировали от 1 до 15 дней от момента заболевания. Преимущественно заболевали мужчины (83%) в возрасте от 15 до 74 лет. Среди них 47% составили пациенты в возрасте 20-30 лет, в эпиданамнезе которых указан выезд на природу, употребление сырой некипяченой воды и мясных продуктов после недостаточной термической обработки. В числе иных возможных источников заражения отмечены употребление в пищу сырого коровьего и козьего молока, работа в степи и на фермах с домашними животными. Возраст заболевших женщин колебался от 30 до 60 лет; к моменту начала заболевания большинство пациенток пребывали за городом и в качестве возможной причин заболевания называют употребление сырого молока. Начала заболевания характеризовалось острым началом с подъемы температуры тела до 38-39С у 48% больных, а 28% - выше 39С. И только в 24% случаев в первые сутки заболевания отмечался субфебрилитет. У 78% наблюдаемых больных преимущественно на третьи сутки лихорадки отмечался озноб. Продолжительность лихорадочного периода варьировала от 4 до 29 дней, в среднем составляла 7-8 дней. Многие отечественные клиницисты такие симптомы как слабость, головная боль связывают с проявлениями риккетсиозной интоксикацией. Однако нами было отмечено, что у наблюдаемых больных в 97% случаев слабость сохранялась и в период регрессии клинической симптоматики, а в 87% - до момента выписки из стационара. Головная боль носила преимущественно разлитой характер с умеренной интенсивностью и регистрировалась при подъеме температуры тела. На 3-4 сутки заболевания у 42% пациентов наблюдалась миалгия конечностей, интенсивность которой была связана с лихорадкой. Помимо этого 30% больных предъявляли жалобы на боли в суставах стоп и кистей. Продолжительность этих симптомов составляла в среднем трое суток и с нормализацией температуры они регрессировали. С момента поступления в среднем до 10 дня болезни у 28% больных регистрировали увеличение печени, в этой группе больных 87% составляли мужчины. В 95% случаев гепатомегалия сопровождалась желтушностью кожных покровов с отсутствием зуда. Практически у всех наблюдаемых больных регистрировалась тромбоцитопения. Уровень тромбоцитов в крови колебался в диапазоне от 53х109 до 293х109 и в среднем составлял 114х109 / л. Заключение Результаты проведенных исследований показывают, что предложенный метод ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени может быть использован для ранней диагностики данного инфекционного заболевания, не обладающего специфичными клиническими симптомами. 1. Природная очаговость болезней: исследования института Гамалеи. Москва. Русаки. 2003.
