А. Г. АВАГИМОВ, М. А. БОНДАРЕНКО, И. А. СЛАВИНСКИЙ trmj0hnm`k|m`“ `jŠhbmnqŠ| meiŠpnthk|m{u keijn0hŠnb oph bnqo`khŠek|m{u g`ankeb`mh“u o`pndnmŠ` УДК 616. 314. 17:616. 155. 34 — 076 j=-!= C=2%%,“*%L =…=2%,,, *=-!= “2%=2%%,, toj , ooq j3K=…“*%% %“3=!“2"……%% ,,…“*%% 3…,"!“,22= 8 Заболевания пародонта являются одними из самых распространенных патологий в стоматологии. По данным ВОЗ, основанным на обследовании населения 53 стран, заболеваемость у лиц в возрасте 35−44 лет составляет 65–98%. Основные принципы диагностики и лечения пародонтита логически связаны с его этиологическими и патогенетическими аспектами. Воспалительный процесс в пародонте возникает в ответ на воздействие повреждающих агентов, ведущие из которых − патогенные микроорганизмы [1]. В этот процесс вовлекается иммунная система, в том числе нейтрофильные лейкоциты, которые обладают большим деструктивным потенциалом и могут стать причиной повреждения тканей пародонта вследствие экзоцитоза радикалов кислорода и ферментов при остром воспалении или обострении хронического [2]. Нейтрофилы вовлекаются в воспалительный процесс, они фагоцитируют микроорганизмы, разрушают иммунные комплексы и продукты тканевого распада. Стимулированные нейтрофильные лейкоциты служат источником медиаторов, которые влияют на активность других патогенетических звеньев воспаления [3], зачастую усугубляя его течение. Известно, что функциональные возможности нейтрофилов зависят от состояния их антибактериальных систем [7, 8, 9]. При этом вопросы, связанные с количественной оценкой проявлений реактивности нейтрофилов при заболеваниях пародонта, остаются малоизученными. Применение телевизионного компьютерного анализа изображения, расширяющего возможности светового микроскопа, позволяет получить принципиально новые данные о клетках крови [4] и надежно регистрировать даже незначительные различия в структуре их цитоплазмы [5, 6]. Исследование роли нейтрофильных лейкоцитов в патогенезе пародонтита позволяет найти подходы к разработке критериев этиопатогенетической терапии, способствующих повышению эффективности комплексного лечения [1]. l=2!,=/ , 2%/ Нами проведено цитохимическое исследование состояния нейтрофильных лейкоцитов у здоровых людей и у пациентов с патологией пародонта различной степени тяжести; возраст пациентов 30–49 лет. Объект исследования − периферическая кровь, полученная у 30 здоровых и 60 больных с патологией пародонта различной степени тяжести. Кровь брали из пальца руки. Мазки крови для цитохимического исследования готовили по общепринятой методике. После инкубации живых клеток in vitro готовили микролейкоконцентраты на предметных стеклах. Определяли уровень активации нейтрофилов по результатам НСТ-теста и проводили тестирование их фагоцитарной функции. pƒ3%2=2/ ,““%"=…, В проведенном исследовании установлено, что при воспалительных заболеваниях пародонта в популяции нейтрофильных лейкоцитов происходят выраженные структурно-метаболические и функциональные изменения. Эти изменения имеют различную степень выраженности в зависимости от характера патологического процесса и от состояния больного. С помощью НСТ-теста выявлено существенное увеличение содержания в периферической крови больных активированных нейтрофильных лейкоцитов (рис. 1). У больных хроническим катаральным гингивитом по сравнению с показателями здоровых людей содержание в крови активированных нейтрофилов при обострении воспалительного процесса увеличено в 3,5 раза, а во время ремиссии − в 1,7 раза, что можно рассматривать как явную тенденцию к нормализации. При пародонтите взрослых в стадии обострения этот показатель увеличен в 5,2 раза, а у больных ранним быстро прогрессирующим пародонтитом − в 7,1 раза. Во время ремиссии процент активированных нейтрофилов хотя и снижается, но остается повышенным соответственно в 2,5 и 3,7 раза, что нельзя считать признаком нормализации функционального состояния нейтрофилов больных пародонтитом. Активация нейтрофилов предшествует фагоцитозу. Обычно она происходит вследствие контакта стимулирующих факторов с поверхностью фагоцита. Активация сопровождается респираторным взрывом, который вызывает резкую перестройку метаболизма активированных нейтрофилов. Результаты нашего исследования говорят о том, что избыточная активация нейтрофилов в периферической крови не сопровождается интенсификацией их фагоцитарной функции. Инкубация нейтрофилов крови больных in vitro с лабораторным штаммом золотистого стафилококка позволила выявить у пациентов угнетение фагоцитарной функции, зависимое по интенсивности от характера заболевания (рис. 2). У больных хроническим катаральным гингивитом в стадии обострения уменьшено содержание в крови активных фагоцитов, снижены поглотительная способность и бактерицидная функция. С выздоровлением или наступлением ремиссии происходит нормализация показателей. У пациентов, страдающих пародонтитом, обнаружено глубокое угнетение всех звеньев фагоцитарной Рис. 1. Активация нейтрофилов периферической крови здоровых людей, больных гингивитом и пародонтитом (процент активированных клеток): А — хронический катаральный гингивит, Б — пародонтит взрослых, В — ранний быстро прогрессирующий пародонтит Рис. 2. Фагоцитарная функция нейтрофилов крови здоровых людей, больных гингивитом и пародонтитом: А − процент активных фагоцитов, Б − поглотительная способность (фагоцитарное число), В − процент киллинга захваченных бактерий, ХКГ — хронический катаральный гингивит, ПВ − пародонтит взрослых, РБПП − ранний быстро прогрессирующий пародонтит. У больных: — обострение — ремиссия 9 функции нейтрофилов, причем более выраженное у больных ранним быстро прогрессирующим пародонтитом, чем у пациентов с пародонтитом взрослых. У больных меньшее, чем у здоровых людей, количество клеток принимает участие в фагоцитозе бактерий. Способность сохранивших фагоцитарную активность нейтрофилов поглощать микроорганизмы снижена. Функция киллинга поглощенных микробов угнетена. Наступление ремиссии не приводит к нормализации показателей фагоцитоза. b/"%/ Цитохимическое исследование функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов при воспалительных заболеваниях пародонта различной степени тяжести выявило, что у больных хроническим катаральным гингивитом в стадии обострения уменьшено содержание в крови активных фагоцитов, снижены их поглотительная способность и бактерицидная функция. С выздоровлением или наступлением ремиссии у этих больных происходит нормализация показателей. У пациентов, страдающих пародонтитом, обнаружено глубокое угнетение всех звеньев фагоцитарной функции нейтрофилов, причем более выраженное у больных ранним быстро прогрессирующим пародонтитом, чем у пациентов с пародонтитом взрослых. У больных воспалительными заболеваниями пародонта в фагоцитозе бактерий принимает участие меньшее количество клеток, чем у здоровых людей. Способность сохранивших фагоцитарную активность нейтрофилов поглощать микроорганизмы снижена. Функция киллинга поглощенных микробов угнетена. Поступила 20.03.2008 ЛИТЕРАТУРА УДК 616.314.18.002:612.014.4:615.015.32 1. Безрукова И. В., Грудянов А. И., Ерохин А. И. Клиниколабораторная оценка эффективности лечения пациентов с быстро прогрессирующим пародонтитом // Пародонтология. 2003. № 1 (26). С. 3–7. 2. Бондаренко А. Н., Аксенова Т. В., Петров Ю. Д., Сладкая Л. И. Обоснование необходимости комплексной иммунореабилитации больных с воспалительной патологией пульпы и периодонта // 10 Аллергология и клиническая иммунология. Краснодар, 1994. № 2. С. 109—111. 3. Иванов В. С., Балашов А. Н. Отдаленные результаты лечения верхушечных периодонтитов // Актуальные вопросы эндодонтии. М.,1990. С. 40—42. 4. Левин Г. Г., Козинец Г. И. Новые возможности оптической микроскопии при исследовании клеток системы крови // Клин. лаб. диагностика. 1997. № 10. С. 14—16. 5. Славинский А. А., Никитина Г. В. Компьютерный анализ изображения нейтрофильных лейкоцитов: миелопероксидаза // Клин. лаб. диагностика. 2000. № 1. С. 21—24. 6. Славинский А. А. Цитоплазматическая зернистость нейтрофильных лейкоцитов (обзор литературы) // Клин. лаб. диагностика. 2002. № 3. С. 39—43. 7. Bainton D. F. Distinct granule populations in human neutrophils and lysosomal organelles identified by immuno-electron microscopy // J. Immunol Methods. 1999. V. 232. № 1—2. P. 153—168. 8. Meers P., Mealy T., Tauber A. I. Annexin I interactions with human neutrophil specific granules: fusogenicitgty and coaggregation with plasma membrane vesicles // Biochim. Biophys. Acta. 1993. V. 1147. № 2. P. 177—184. 9. Sengelov H., Nielsen M. H., Borregaard N. Separation of human neutrophil plasma membrane from intracellular vesicles containing alkaline phosphatase and NADPH oxidase activity by free flow electrophoresis // J. Biol. Chem. 1992. V. 267. № 21. P. 14912—14917. A. G. AVAGIMOV, M. A. BONDARENKO, I. A. SLAVINSKY THE FUNCTIONAL ACTIVITY OF NEUTROPHILIC LEUKOCYTES AT PERIODONTAL INFLAMMATORY DISEASES The cytochemical research of functional activity of neutrophilic leukocytes at periodontal inflammatory diseases has revealed that in reply to inflammatory process in periodontal tissues in population of neutrophilic leukocytes structurally-metabolic and functional changes are expressed, and it has various degree of intensity depending on character of pathological process and from a condition of the patient. Т. В. АКСЕНОВА jnlokejqm`“ Šep`oh“ deqŠprjŠhbm{u tnpl upnmh)eqjhu bepurxe)m{u oephndnmŠhŠnb j=-!= “2%=2%%,, toj , ooq j3K=…“*%% %“3=!“2"……%% ,,…“*%% 3…,"!“,22= Хроническое воспаление периодонта является широко распространенным видом стоматологической патологии, наиболее часто приводящим к потере функциональной пригодности зубов. Широкое внедрение в практику современных инструментальных и медикаментозных средств обработки каналов, новейших методик их обтурации создает иллюзию того, что лечение хронического верхушечного периодонтита в подавляющем большинстве случаев «обречено на успех». Благодаря этому стоматологи зачастую не прослеживают динамику восстановления периодонта, считая его само собой разумеющимся процессом. В то же время практика показывает: полное восстановление околоверхушечных тканей определяется в 45—65% случаев за период до 2 лет (Максимовский Ю. М., 2001). Поэтому абсолютно оправданной является рекомендация начинать ортопедическое лечение с использованием под опору зубов, леченных по поводу хронического верхушечного периодонтита, после восстановления функционального состояния зуба — не ранее чем через