КлиникоXморфологическая характеристика роговицы кроликов после поверхностной кератопластики с применением биоматериала

ОФТАЛЬМОЛОГИЯ
КлиникоXморфологическая
характеристика роговицы кроликов
после поверхностной кератопластики
с применением биоматериала
«аллоплант»
ÓÄÊ 619:617.713 – 002: 636.1(06)
И.Ю. Морозов, Л.Ф. Сотникова, ФГОУ ВПО «Московская государственная
академия ветеринарной медицины и биотехнологии им. К.И. Скрябина»
Êëþ÷åâûå ñëîâà: àëëîïëàíò, êðîëèê, ðåãåíåðàöèÿ, ðîãîâèöà
Ñîêðàùåíèÿ: ÌÒ — ìàññà òåëà
Введение
Эпителий роговицы относится к группе хорошо регене
рирующих тканей. Небольшие повреждения быстро зажи
вают без какоголибо заметного дефекта за счет активности
эпителиальных клеток по краю повреждения. Эпителий
закрывает неровности, дефекты роговицы, утолщаясь при
потере поверхностных слоев, истончаясь при их восстанов
лении.
В заживлении эпителиального дефекта можно выделить
следующие два этапа: скольжение эпителия по обнаженной
поверхности стромы с целью быстрейшего закрытия дефекта
(миграция); размножение сохранившихся клеток митоти
ческим путем.
Эпителий играет важную роль в регенерации собственно
го вещества роговицы. Удаление эпителия нарушает физио
логический барьер роговицы, приводит к уменьшению выра
ботки макроэргических соединений, гликозамингликанов,
мукополисахаридов, необходимых для биосинтеза собствен
ного вещества. Восстановление эпителия имеет большое зна
чение для дальнейших репарационных процессов в собствен
ном веществе роговицы.
à
á
Цель исследования
Изучить процесс репаративной регенерации роговичной
ткани у кроликов при различных способах фиксации биома
териала «аллоплант», чтобы обосновать необходимость вы
полнения ургентной кератопластики при механических
травмах.
Материалы и методы
Материалами для исследования послужили гистологи
ческие срезы глаз кроликов породы шиншилла. Эксперимен
тальных животных выводили из опыта путем декапитации,
глаза отправляли для морфологических исследований через
3 мес после операции.
Îïåðàöèþ âûïîëíÿëè ïîä îáùåé àíåñòåçèåé (âíóòðèâåííî çîëåòèë 50 + êñèëàçèí) ïðè äîïîëíèòåëüíîì ìåñòíîì îáåçáîëèâàíèè (èíñòèëëÿöèè Alcaine).
 êà÷åñòâå äîíîðñêîé ðîãîâèöû èñïîëüçîâàëè àëëîïëàíò (200 ìêì), ïðîèçâîäÿùèéñÿ âî Âñåðîññèéñêîì öåíòðå
ãëàçíîé è ïëàñòè÷åñêîé õèðóðãèè. Àëëîïëàíò ïåðåä ïåðåñàäêîé îáðàáàòûâàëè ñîãëàñíî èíñòðóêöèè.
Îïåðàöèÿ ïðîõîäèëà â äâà ýòàïà:
âûêðàèâàëè ëîæå â ðîãîâèöå ðåöèïèåíòà; ðîãîâèöó íàäñåêàëè íà 1/3 òîëùèíû, ðàññëàèâàëè íîæîì è óäàëÿëè ïîâåðõíîñòíûå ñëîè òîëùèíîé â 1/3 îò âñåé òîëùè ðîãîâèöû;
àëëîïëàíò óêëàäûâàëè â ñôîðìèðîâàííîå ëîæå ðåöèïèåíòà è ôèêñèðîâàëè óçëîâûìè øâàìè (íåéëîí 8/0) ïî
äâóì ñõåìàì: â ïåðâîì ñëó÷àå ðàçìåð àëëîïëàíòà ñîîò-
â
Ðèñ. 1. Ðåãåíåðàöèÿ ðîãîâèöû (ñõåìà 1):
à — â êîíöå 1-ãî ìåñÿöà, îòåê ðîãîâèöû;
á — â êîíöå 2-ãî ìåñÿöà, ïðîëèôåðàöèÿ ñîñóäîâ;
â — â êîíöå 3-ãî ìåñÿöà, ðîãîâèöà ãëàäêàÿ, áëåñòÿùàÿ, îòåêà íåò. Ýïèòåëèé èìååò íîðìàëüíóþ ñòðóêòóðó, áàçàëüíûå êëåòêè óïëîùåíû
РВЖ. МДЖ №12011
21
ОФТАЛЬМОЛОГИЯ
Ðèñ. 2. Ãèñòîïðåïàðàòû (ñõåìà 1). Îêðàñêà ãåìàòîêñèëèíîè è ýîçèíîì, îê. u7, îá. u20. Âîññòàíîâëåíèå ñòðóêòóðû è òîëùèíû ðîãîâèöû
çà ñ÷åò àëëîìàòåðèàëà. Ïðîëèôåðàöèÿ ýïèòåëèÿ
âåòñòâîâàë ðàçìåðó èññåêàåìîãî ó÷àñòêà ðîãîâèöû (2 êðîëèêà). Âî âòîðîì ñëó÷àå àëëîïëàíò óêëàäûâàëè ïîâåðõ èññå÷åííîãî ó÷àñòêà ðîãîâèöû (2 êðîëèêà).
Энуклеированные глаза фиксировали в 10%м нейтраль
ном формалине. Центральную колодку заливали в парафин.
Серийные срезы окрашивали гематоксилином и эозином и
исследовали на «ФотомикроскопеIII» («Оптон», Герма
ния). Изображение регистрировали на цифровую фотовиде
окамеру «ДиаМорф». Морфологическое исследование вы
полнено на базе ГУ НИИ глазных болезней РАМН в лабора
тории патогистологии глаза.
à
Результаты и обсуждение
В результате проведенного эксперимента нами установ
лено, что в первом случае (схема 1), когда аллоплант соответ
ствовал размеру иссекаемого участка роговицы, через 3 мес
после кератопластики полностью восстановились слойность
и толщина роговицы (рис. 1). Алломатериал равномерно по
крылся многослойным плоским эпителием, репаративная
регенерация протекала без участия грануляционной ткани, в
конце 2го месяца наблюдали васкуляризацию (рис. 2).
Во втором случае (схема 2) через 3 мес исследований
полностью восстановилась структура эпителия (рис. 3...5).
á
â
Ðèñ. 3. Ðåãåíåðàöèÿ ðîãîâèöû (ñõåìà 2):
à — â êîíöå 1-ãî ìåñÿöà, íåáîëüøîé îòåê ðîãîâèöû;
á — â êîíöå 2-ãî ìåñÿöà, îòòîðæåíèå àëëîïëàíòà ñ ïîâåðõíîñòè ðîãîâèöû;
â — â êîíöå 3-ãî ìåñÿöà, ðîãîâèöà ãëàäêàÿ, áëåñòÿùàÿ, îòåêà íåò
Ðèñ. 4. Ãèñòîïðåïàðàòû (ñõåìà 2). Îêðàñêà ãåìàòîêñèëèíîè è ýîçèíîì, îê. u7, îá. u20. Ïðîëèôåðàöèÿ ýïèòåëèàëüíîãî ïëàñòà â ñðàâíåíèè ñ èíòàêòíîé çîíîé. Óâåëè÷åíà ñëîéíîñòü ýïèòåëèÿ, íàáëþäàåòñÿ ïîâûøåííîå ñêîïëåíèå áàçàëüíûõ (êàìáèàëüíûõ) êëåòîê
22
ОНКОЛОГИЯ
ции клеточного состава эпителия роговицы был задокумен
тирован в ряде исследований [1, 2].
Выводы
Ðèñ. 5. Ãèñòîïðåïàðàò (ñõåìà 2). Îêðàñêà ãåìàòîêñèëèíîì è
ýîçèíîì, îê. u7, îá. u20. Ãðàíèöà ïåðåõîäà íîðìàëüíîãî ýïèòåëèÿ
â ãèïåðòðîôèðîâàííûé
Однако эпителий в зоне раны был несколько толще, чем эпи
телий интактной зоны, что связано с пролиферацией эпители
ального пласта. Кроме того, немного увеличилось количество
клеток стромы. Регенерация протекала без васкуляризации.
В дальнейшем происходила реконструкция как стромы,
так и эпителиального пласта. Указанный механизм регуля
Сравнительный анализ механизма заживления после ке
ратопластики при различных способах фиксации аллоплан
та показал, что репаративная регенерация протекает без уча
стия грануляционной ткани. В первом случае, когда размер
аллопланта соответствовал размеру иссекаемого участка ро
говицы, толщина роговицы восстановилась за счет алломате
риала. В процессе заживления, как показывают гистосрезы,
наблюдали васкуляризацию. Во втором случае, когда аллоп
лант укладывали поверх иссеченного участка роговицы, он
послужил активатором гипертрофических и гиперпласти
ческих процессов в эпителии, восстановив прежнюю толщи
ну роговой оболочки. Таким образом, можно заключить, что
при 2м способе фиксации восстановилась структура эпите
лия, присущая неповрежденной роговице.
ÁÈÁËÈÎÃÐÀÔÈß
1. Refsum S.B. et al. Circadian variation in cell proliferationand maturation. A
hypothesis for the growth regulation of the rat corneal epithelium // Cell. Pathol.
Incl. Mol., 1994; 60 (4): 225—230.
2. Wilson S.E. et al. The Fas-Fas ligand system other modulators of apoptosis in
the cornea // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci., 1996; 37 (8): 1582—1592.
SUMMARY
I.Yu. Morozov, L.F. Sotnikova. Clinical and morphological characteristic of regeneration of a cornea at a superficial
keratoplasty with biomaterial alloplant in rabbits. This article describes ways of a through reconstructive keratoplasty in
rabbits with application of «Alloplant».
Предварительные результаты
изучения эффективности гемцитабина
(гемзара) при диссеминированном
раке молочной железы у животных
ÓÄÊ 619-616-006:615
М.Н. Якунина, ветеринарная клиника «Биоконтроль»,
РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН
Êëþ÷åâûå ñëîâà: ãåìöèòàáèí, ïðîäîëæèòåëüíîñòü
æèçíè, ðàê ìîëî÷íîé æåëåçû, õèìèîòåðàïèÿ
Ñîêðàùåíèÿ: ÌÒ — ìàññà òåëà, ÎÏ — îïóõîëåâûé
ïëåâðèò, ÎÝ — îáúåêòèâíûé ýôôåêò, ÏÐ — ïîëíàÿ ðåãðåññèÿ, Ïðîã — ïðîãðåññèðîâàíèå, ÐÌÆ — ðàê ìîëî÷íîé æåëåçû, ÑÏÆ — ñðåäíÿÿ ïðîäîëæèòåëüíîñòü æèçíè,
ÑÒ — ñòàáèëèçàöèÿ, ÕÒ — õèìèîòåðàïèÿ, ×Ð — ÷àñòè÷íàÿ ðåãðåññèÿ
Введение
Лечение местнораспространенного и диссеминирован
ного РМЖ до недавнего времени было неразрешимой зада
чей для ветеринарного специалиста. Введение в ветеринар
ную онкологическую практику таксанов обусловило увели
чение продолжительности жизни пациентов. Например,
применение таксотера в комбинации с доксорубицином при
РВЖ. МДЖ №12011
лечении РМЖ IV стадии у собак продлило жизнь пациентов
в 2 раза. У кошек таксотер в монорежиме пролонгировал
жизнь животных в 3...4 раза [2]. Кроме того, таксотер показал
эффективность в лечении РМЖ IV стадии у кошек, ослож
ненном ОП [3]. Однако, несмотря на противоопухолевый
эффект ХТ с таксанами, продолжительность жизни пациен
тов ограничена продолжительностью ремиссии, а повторное
применение тех же схем часто не приводит к объективному
эффекту.
В медицинской практике лечение диссеминированного
РМЖ основано на применении антрациклинов и таксанов в
качестве ХТ первой линии [1]. Гемцитабин также показал
высокую активность в лечении распространенного РМЖ.
Добавление гемцитабина к паклитакселу (ХТ первой и/или
второй линии) достоверно удлиняет время до прогрессиро
вания заболевания и продолжительность жизни людей [4]. У
пациентов с диссеминированным РМЖ, ранее прошедших
курс ХТ с включением антрациклинов и таксанов, назначе
ние комбинированной ХТ с гемцитабином дает объективный
23