ÝÍÇÎÎÒÈÈ дегидом на фосфатном буфере рН 6,8–7,0 с последующим обезвоживанием в возрастающей концентрации спиртов 50°, 70°, 96°, 100° и пропиленоксида. Препараты для сканирующей электронной микроскопии напыляли золотом и просматривали на электронном микроскопе Hitachi 800. В сканирующем электронном микроскопе на фрагментах комбикормов наблюдали адгезию единичных клеток M. avium, а так же образование колоний, на поверхностях которых выявлялся массивный слоистый покров. На препаратах из зерен сои также было выявлено формирование колоний, закрытых покровами. В отдельных участках просматривались концевые отделы клеток. На фрагментах скорлупы яйца с внутренней и наружной стороны выявлены удлиненные клетки, некоторые из которых находились на стадии деления. В участках скопления клеток выявлен межклеточный матрикс. Процесс колонизации сопровождался образованием покровов на поверхности клеток. На препаратах, приготовленных из кожи кур, также выявлена адгезия единичных клеток M. avium и образование колоний, закрытых с поверхности покровами. Наши исследования показали, что взаимодействие микобактерий с исследуемыми тест-объектами начинаются с процесса адгезии клеток к субстрату, о чем свидетельствовало наличие делящихся клеток. Процесс адгезии идет по типу лиганд-рецепторного взаимодействия. Во взаимодействии микобактерий с субстратом участвуют ли- гандные молекулы (адгезины), находящиеся на поверхности бактерий, которые взаимодействуют с комплементарными молекулами (рецепторами) на поверхности клеток биологического субстрата. По данным литературы адгезины у микобактерий имеют сложную пептидогликолипидную природу. В процессе адгезии клеток идет формирование межклеточного матрикса и покровов на поверхностях клеток, что приводит к увеличению биомассы бактерий на тест-объектах. Исследования, проведенные с использованием методов сканирующей электронной микроскопии показали, что в процессах адгезии и колонизации особая роль принадлежит экзопродуктам клеток микобактерий. Покровы на поверхности колоний являются также формой защиты бактерий от воздействия абиотических и биотических факторов окружающей среды. В заключение следует отметить, что патогенные микобактерий способны не только выживать, но и размножаться на объектах окружающей среды. Важным экологическим фактором в развитии, адгезии и колонизации патогенных микобактерий являются такие необходимые условия как наличие питательного субстрата, оптимальной влажности и температуры. Полученные данные свидетельствуют о том, что выживание, размножение и образование колоний патогенных микобактерий на поверхностях объектов окружающей среды представляют серьезную санитарно-эпидемиологическую опасность как возможный резервуар туберкулезной инфекции для животных и человека. УДК 636.03:579.842.23 Н.Д. Архипова (Всероссийский НИИ ветеринарной санитарии, гигиены и экологии) ВЛИЯНИЕ ДИМЕТИЛСУЛЬФОКСИДА НА ПОПУЛЯЦИЮ КЛЕТОК МИКОБАКТЕРИЙ Широкое распространение туберкулезной инфекции среди животных и человека ставит проблему изыскания эффективных препаратов для дезинфекции животноводческих помещений и других объектов окружающей среды. Исследования строения, роста и изменчивости популяций бактерий при их естественном развитии и воздействии на них биотических и абиотических факторов являются одним из малоизученных разделов экологии бактерий. Ветеринарная патология. № 3. 2003 Целью данного исследования было изучение действия препарата ди-метилсульфоксида (ДМСО), применяемого в медицинской практике под названием «димексид». В качестве тест-объекта в опытах использовали сапрофитный штамм микобактерий В-5. Для изучения морфологии клеток в колониях применяли мембранные фильтры «Владипор», помещенные на слой питательной среды в чашки Пет89 ÝÍÇÎÎÒÈÈ ри. После инкубации культуры при 37° С в течение 2–3 суток фильтры с выросшей культурой помещали в чистые чашки Петри. На поверхность колоний наносили 1– 5% раствор ДМСО на 1–2 ч. По истечению указанного времени колонии фиксировали парами глутарового альдегида, обезвоживали в парах пропиленоксида и изучали в световом и сканирующем электронном микроскопах. Исследования показали, что клетки микобактерий контрольных препаратов имеют хорошо развитый межклеточный матрикс, колонии бактерий закрыты с поверхности плотным покровом. После обработки колоний ДМСО выявлено нарушение межклеточных связей в колониях, частичное или полное разрушение внешних покровов, а также дефектность клеточных стенок с явлениями гетероморфизма и L-трансформации. Полученные данные свидетельствуют о том, что диметилсульфоксид активно растворяет продуцируемые клетками липиды, вызывая разрушение межклеточного матрикса, покровов и клеточной стенки, что значительно снижает колониеобразующую активность популяции микобактерий, предотвращая развитие инфекционного очага. Проведенные исследования показывают возможность использования ДМСО как компонента при разработке дезинфекционных препаратов при туберкулезной инфекции. УДК 619:579.842.14:543.545 P.M. Ахмадеев, Л.И. Зайнуллин, A.M. Алимов (Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт) ИЗУЧЕНИЕ ПОЛИПЕПТИДНЫХ ПРОФИЛЕЙ РАЗЛИЧНЫХ ШТАММОВ САЛЬМОНЕЛЛ В эпизоотических очагах выделяются разные виды и серотипы сальмонелл, дифференциация которых является трудоемкой. В этом аспекте значительный интерес представляет изучение полипептидного состава возбудителей сальмонеллеза, так как антигенные свойства во многом обусловлены белками микробов. Полипептидный состав изучали при разгонке лизированных микробных клеток с использованием ДСН в градиенте концентрации ПААГ (10–20%) по Laemmli U.K. (1970). Гели окрашивали Кумасси R-250 и импрегнацией серебром по Marshall Т (1984). Денситометрирование электрофореграмм проводили на сканере Sharp 330Yx, с дальнейшим определением молекулярных масс и процентного содержания белковых фракций по программе «ImageMaster ID prime». В результате проведенных исследований получены сравнительные характеристики электрофоретических профилей патогенных (S. cholerae suis 370, S. typhimurium 371, S. enteritidis 418, S. dublin) и вакцинных (S. cholerae suis TC-177, S. typhimurium3) штаммов. У сальмонелл обнаруживались от 31 до 41 фракций полипептидов с молекулярной массой от 2 до 227 кДа. Полипептиды изучаемых штаммов сальмо90 нелл характеризовались различной относительной подвижностью (Rf), которые можно подразделить на три группы: малоподвижные (Rf от 0 до 0,2), среднеподвижные (Rf от 0,2 до 0,8) и легкоподвижные (Rf от 0,8 до 1,0). Наибольшее количество фракций (от 19 до 23) приходилось на группу со средней подвижностью. Сравнительный анализ качественного и количественного состава полипептидов позволил установить определенные сходства и различия в зависимости от штаммовой принадлежности микроорганизмов. Так, у S. cholerae suis шт. 370 выявлялось до 34 фракций, у штаммов S. typhimurium шт. 371 и у S. dublin — 34 и 36 фракций соответственно. Электрофоретические профили шт. 370 (вирулентный) и шт. ТС-177 (вакцинный) характеризовались наличием 12 общих мажорных фракций с молекулярными массами от 6 до 72 кДа. В то же время обнаружены и некоторые отличия между ними в качественном и количественном содержании отдельных полипептидов. У вирулентного штамма S. cholerae suis 370 концентрация полипептидов с молекулярными массами 50 и 149 кДа составляла 5,3% и 5,8% соответственно, тогда как у вакцинного ТС-177 эти полипептиды обнаружены в незначительном количестве (1,3% и 0,2%). Ветеринарная патология. № 3. 2003