1 ÓÄÊ 577.352.26 <452> Èññëåäîâàíèå ñîðáöèè ENTH-äîìåíà áåëêà ýïñèíà íà ïîâåðõíîñòè ìåìáðàí ðàçëè÷íîé òîïîëîãèè 1,2 Å.Ñ. Ïàðüåâà 1 lennenn@gmail.com Èíñòèòóò ôèçè÷åñêîé õèìèè è ýëåêòðîõèìèè èì. À.Í. Ôðóìêèíà ÐÀÍ, 2 Ìîñêîâñêèé ôèçèêî-òåõè÷åñêèé èíñòèòóò (ãîñóäàðñòâåííûé óíèâåðñèòåò) Ôîðìèðîâàíèå òðàíñïîðòíûõ âåçèêóë (ìåìáðàííûõ ïóçûðüêîâ) â êëåòêå â ïðîöåññå ýíäîöèòîçà òðåáóåò ñëàæåííîé ðàáîòû áîëüøîãî êîëè÷åñòâà ñïåöèàëèçèðîâàííûõ áåëêîâ. Îäíèì èç òàêèõ áåëêîâ ÿâëÿåòñÿ ýïñèí. Ïðåäïîëàãàþò, ÷òî ëîêàëüíîå óâåëè÷åíèå êîíöåíòðàöèè èìåííî ýòîãî áåëêà ïðèâîäèò ê îáðàçîâàíèþ èíâàãèíàöèè ìåìáðàíû, èç êîòîðîé äàëåå ðàçâèâàåòñÿ òðàíñïîðòíàÿ âåçèêóëà. ENTH-äîìåí áåëêà ýïñèíà îòâå÷àåò çà âçàèìîäåéñòâèå áåëêà ñ ìåìáðàíîé. Äîìåí ñîñòîèò èç 8 àëüôà-ñïèðàëåé, îäíàêî â ðåçóëüòàòå åãî ñïåöèôè÷åñêîãî âçàèìîäåéñòâèÿ ñ ôîñôàòèäèëèíîçèòîëîì [4, 5] áèôîñôàòîì ôîðìèðóåòñÿ äîïîëíèòåëüíàÿ ñïèðàëü. Ýòà ñïèðàëü îáëàäàåò àìôèôèëüíûìè ñâîéñòâàìè îäíà ñòîðîíà åå ãèäðîôèëüíà, äðóãàÿ ãèäðîôîáíà. Ïîêàçàíî, ÷òî ïðè ñîðáöèè íà ìåìáðàíó äîìåí ðàçìåùàåò ñïèðàëü íà ãðàíèöå ðàçäåëà ãèäðîôèëüíîé è ãèäðîôîáíîé îáëàñòè ëèïèäíîãî áèñëîÿ. Ñ÷èòàþò, ÷òî òàêîå ïîëîæåíèå ñïèðàëè ïðèâîäèò ê ñåðü¼çíîìó èçìåíåíèþ ñïîíòàííîé êðèâèçíû ìåìáðàíû, ÷òî â ñâîþ î÷åðåäü îáëåã÷àåò ôîðìèðîâàíèå èíâàãèíàöèè.  äàííîé ðàáîòå ïðîâåäåíî èññëåäîâàíèå ñîðáöèè ENTH-äîìåíà íà ïîâåðõíîñòè ìåìáðàíû ðàçëè÷íîé òîïîëîãèè ïëîñêèé ëèïèäíûé áèñëîé (ÁËÌ) è öèëèíäðè÷åñêàÿ ìåìáðàííàÿ íàíîòðóáêà (ÍÒ) è ðàçëè÷íîãî ëèïèäíîãî ñîñòàâà. Ñîðáöèþ íà ïîâåðõíîñòè ÁËÌ ðåãèñòðèðîâàëè ìåòîäàìè êîìïåíñàöèè âíóòðèìåìáðàííîãî ïîëÿ, à íà ïîâåðõíîñòè ÍÒ ïî èçìåíåíèþ åå ãåîìåòðè÷åñêèõ õàðàêòåðèñòèê. Áûëî ïîêàçàíî, ÷òî ENTH ñîðáèðóåòñÿ íà ïîâåðõíîñòè îòðèöàòåëüíî çàðÿæåííûõ ìåìáðàí, ïðè÷åì ïîâåðõíîñòíàÿ êîíöåíòðàöèÿ äîìåíà çàâèñèò îò êðèâèçíû ìåìáðàíû. Ñîðáöèÿ äîìåíà íà ïîâåðõíîñòè ÁËÌ íå çàâèñåëà îò åãî êîíôîðìàöèîííîãî ñîñòîÿíèÿ, â òî âðåìÿ êàê ïðè ñîðáöèè íà ïîâåðõíîñòè ÍÒ êîíôîðìàöèîííîå ñîñòîÿíèå áåëêà èãðàåò îïðåäåëÿþùóþ ðîëü. Ïðè íàëè÷èè àìôèôèëüíîé ñïèðàëè äîìåí íà ïîâåðõíîñòè ÍÒ, ñêîðåå âñåãî, êëàñòåðèçóåòñÿ, ôîðìèðóÿ íîâóþ æèäêóþ ôàçó, ÷üè ìåõàíè÷åñêèå ïàðàìåòðû ñóùåñòâåííî îòëè÷àþòñÿ îò ïàðàìåòðîâ îêðóæàþùåé ìåìáðàíû. 2  äàííîé ðàáîòå ìû äåìîíñòðèðóåì, ÷òî ëèïèä-áåëêîâûé ñèíåðãèçì ìîæåò èãðàòü êëþ÷åâóþ ðîëü â ïîääåðæàíèå îïðåäåëåííîé êîíôèãóðàöèè êëåòî÷íîé ìåìáðàíû. Ëèòåðàòóðà 1. Èçìåðåíèå ðàçíîñòè ïîâåðõíîñòíûõ ïîòåíöèàëîâ áèñëîéíûõ ëèïèäíûõ ìåìáðàí ïî âòîðîé ãàðìîíèêå åìêîñòíîãî òîêà // Áèîôèçèêà. 1980. Ò. 25. Ñ. 170172. Ñîêîëîâ Â.Ñ., Êóçüìèí Ñ.Ã. 2. Ford Marijn G.J., Mills Ian G., Peter Brian J. 3. Kweon Dae-Hyuk, Shin Yeon-Kyun, Shin Jae Yoon. 4. Nossal R., Zimmerberg J. 5. 6. coated pits driven by epsin // Nature. 2002. Curvature of clathrin- Membrane Topology of Helix 0 of the Epsin N-terminal Homology Domain // Mol. Cells. V. 21, N 3. Endocytosis: Curvature To The ENTH Dispatch Degree // Current Biology. 2002. V. 12. Epsin: Inducing membrane curvature // The International Journal of Biochemistry & Cell Biology. 2007, V. 39, N 10. P. 17651770. Horvath Caroline A.J., Vanden Broeck Davy, Boulet Gaelle A.V. [ ]. Role of the ENTH Domain in phosphatidylinositol4,5-Bisphosphate Binding and Endocytosis // Science. 2001. V. 291. P. 1047. Toshiki Itoh et al.