Компонентная диагностика новая эра в клинической аллергологии МОЛЕКУЛЯРНАЯ ДИАГНОСТИКА

Компонентная диагностика
новая эра в клинической
аллергологии
Dr. Fooke Laboratorien GmbH
МОЛЕКУЛЯРНАЯ ДИА ГНО С ТИКА
А ЛЛЕРГИИ от ДОКТ ОР Ф О ОКЕ
Ключевые строки
Мы предлагаем
Немецкая компания Dr. Fooke Laboratorien GmbH специализирующая на выпуске наборов
реагентов для лабораторной диагностики, предлагает новый инструмент в диагностике
аллергических реакций, молекулярную диагностику аллергии – компонентную аллергодиагностику, которая будет представлять огромный интерес для врачей аллергологовиммунологов, педиатров, врачей других специальностей, а также аспирантов, ординаторов и студентов медицинских вузов.
На сегодняшний день компании Доктор Фооке удалось клонировать и очистить большинство часто встречающихся наиболее частых в природе молекул аллергенов и наладить
серийное производство высоко очищенных нативных и рекомбинантных аллергенов для
массового применения в клинической практике in vitro аллергодиагностики. Полный, обновлённый перечень доступных аллергокомпанентов смотрите на сайте компании www.
fooke.ru
Аллергокомпоненты находятся в жидкой биотинилированной форме, готовы к использованию и предназначены для применения в реверсивном аллергосорбентном тесте
«capture» REAST и/или в экспресс-тесте ALFA, не требующего лабораторного оборудования. Сроки годности аллергенов 24 месяца, после вскрытия аллергены годны к использованию в течение всего срока годности.
Вся предлагаемая Dr. Fooke Laboratorien GmbH – Доктор Фооке продукция разработана
в соответствии со стандартами ВОЗ, имеет знак качества Евросоюза – CE mark, зарегистрирована в Министерстве Здравоохранения Российской Федерации и разрешена к
широкому применению. Регистрационное удостоверение ФСЗ 2007/00940 от 05.05.2015.
Настоящая брошюра предназначена тем врачам, кто готов в некоторых вопросах изменить взгляды на обследование и лечение пациентов и привести их в соответствие с таковыми в мировой медицине.
Молекулярная диагностика аллергии получает всё более широкое распространение в
повседневной клинической практике, и на сегодняшний день для проведения тестов на
специфический иммуноглобулин Е (sIgE) в условиях in vitro коммерчески доступны более
130 молекул аллергенов.
Поначалу может показаться, что молекулярная диагностика аллергии представляет трудность, но по мере обретения опыта получить информацию становится всё проще, причём для аллерголога она обладает большой ценностью. Это особенно справедливо, если
речь идёт о пищевой и респираторной аллергии, аллергии на яд перепончатокрылых и
латекс, а так же о подборе аллерген-специфической иммунотерапии АСИТ, выявлении
перекрёстной реактивности и оценке выраженности реакций, ассоциированных с различными аллергенами.
Молекулярная диагностика аллергии уменьшает потребность в провокационных тестах
и позволяет дать более чёткие рекомендации касательно устранения контакта с аллергенами и может рассматриваться в качестве стандарта клинической практики в случае
поливалентной сенсибилизации, размытой клинической симптоматики и/или нечёткого
паттерна сенсибилизации.
Одним из главных преимуществ молекулярной диагностики аллергии является возможность дифференцировать истинную сенсибилизацию от сенсибилизации вследствие перекрёстной реактивности. Эти данные помогают клиницисту определить источники аллергии (один-единственный, несколько близкородственных или множество различных).
Заказывайте:
+7 (495) 799-11-65 / 725-11-69
sale@fooke.ru / info@fooke.ru
www.fooke.ru
1
Dr. Fooke - Доктор Фооке - www.fooke.ru
Молекулярная аллергодиагностика
2
Аллергология компонента или
молекулярная диагностика аллергии
В конце 1980-ых гг., когда началось внедрение ДНК-технологий, удалось
охарактеризовать и клонировать молекулы аллергенов, что помогло определить антигенные детерминанты при различных аллергических заболеваниях. Все это сыграло немаловажную роль в появлении нового вида
диагностики – молекулярной диагностики, которая, в свою очередь, способствовала разработке более эффективного лечения аллергии.
В основе стратегии молекулярной диагностики аллергии лежит выявление сенсибилизации к
аллергенам на молекулярном уровне с использованием природных высоко очищенных и рекомбинантных молекул аллергенов, то есть их компонентов, а не экстрактов. Технологии молекулярной диагностики становятся неотъемлемой частью клинической практики. Молекулярные технологии повышают точность диагностики и прогнозирования течения аллергии.
Они играют важную роль в трёх ключевых аспектах диагностики аллергии:
позволяют дифференцировать истинную сенсибилизацию и сенсибилизацию
вследствие перекрёстной реактивности при поливалентной (смешанной) сенсибилизации и тем самым выявить аллергены индукторы;
в отдельных случаях помогают оценивать риск возникновения тяжёлых реакций
системного характера при пищевой аллергии, тем самым избавляя от необходимости прибегать к провокационным тестам;
помогают осуществить подбор препарата для аллерген-специфической иммунотерапии (АСИТ).
Для молекулярной диагностики аллергии используются моно и миксты рекомбинантных и высоко очищенных нативных аллергенов производства Доктор Фооке. На сегодняшний день наиболее информативной панелью является твердофазный реверсивный аллергосорбентный тест
«capture» REAST и литеральный проточный иммуноанализ ALFA, с помощью которых можно
определить уровень специфических IgE к более чем 100 аллергенов посредством иммуноферментного анализа и/или экспресс-теста ALFA, не требующего лабораторного оборудования.
Наборы реагентов и аллергенов для молекулярной диагностики аллергии производства Доктор Фооке, будут полезными практикующему специалисту аллергологу-иммунологу в его каждодневной работе.
Внедрение практики применения аллергенных компонентов в лабораторной in vitro аллергодиагностике будет способствовать повышению специфичности и воспроизводимости проводимых анализов, а также получению знаний об индивидуальном профиле чувствительности
пациента для назначения правильной и своевременной терапии.
В настоящее время коммерчески доступно множество высоко очищенных и рекомбинантных
аллергенов. Полный, обновлённый перечень доступных аллергенов для ИФА и ИХА, их описания, характеристики и особенности применения смотрите на сайте компании www.fooke.ru
3
Dr. Fooke - Доктор Фооке - www.fooke.ru
Терминология и концепции
молекулярной диагностики аллергии
Для того чтобы начать использовать компоненты аллергенов и правильно интерпретировать результаты тестов в клинике, полезно выучить некоторую базовую информацию о компонентах
аллергенов и их клиническом применении. Во-первых, молекулам аллергенов дают наименование, вначале первые три буквы латинского названия рода, затем первая буква вида и арабская цифра – номер аллергена (номер зависит от порядка выделения и/или клинической важности). Например: Dermafophagoides pteronyssinus – Der р 1; Арахис – Ага h 1, Ага h 2, Ага h 3;
Рожь – Sec с 1; Яблоко – Mal d 1; Береза – Bet v 1, Bet v 2 и т.д. Варианты аллергенов (изоформы) обозначаются дополнительными цифрами, например Amb а 1.01, Amb а 1. Во-вторых знать,
что молекулы аллергенов классифицируются по семействам белков в зависимости от их структуры и биологической функции. В-третьих, важно понимать некоторые свойства компонентов
аллергенов.
Основные термины и понятия
Для описания частоты встречаемости аллергокомпонентов применяются термины «мажорные» и «минорные». Мажорные аллергокомпоненты это такие аллергенные молекулы, антитела к которым встречаются более чем у половины
пациентов в популяции, реагирующей на данный источник. Они устойчивые к
нагреванию и более иммуногенные. Крупные по размеру и содержатся в данном аллергене в большем количестве. Минорные это более мелкие по размеру и менее иммуногенные аллергенные молекулы, которые в составе аллергена, обычно содержатся в меньшем количестве, но присутствуют во многих
разных аллергенах, иногда не близкородственных, обеспечивая перекрёстную
аллергию. То есть аллергены с распространенностью более 50% называются
мажорными, а менее 10% – минорными. Надо учитывать, что классификация
аллергенов на мажорные и минорные полностью зависит от профиля сенсибилизации исследуемой популяции и аллергенных источников, преобладающих в
данной географической области.
Молекулы аллергенов классифицируются по семействам белков в зависимости от их структуры и биологической функции. У различных молекул имеются общие эпитопы (антиген-связывающие сайты), а одни и те же IgE-антитела способны взаимодействовать с молекулами
аллергенов, имеющими сходную структуру, но различное происхождение, и индуцировать
иммунный ответ на них. Изучение таких перекрёстно реагирующих аллергенов предоставляет ценную информацию о сенсибилизации к разным объектам. И напротив, некоторые
молекулы являются уникальными маркерами специфических аллергенов, что позволяет
идентифицировать первичный сенсибилизатор. Классификация белковых семейств может
способствовать пониманию вышесказанного:
Полкальцины (кальций-связывающие белки)
Аллергены пыльцы кустарников, деревьев и трав, но не пищевых продуктов. Высокая степень
серологической перекрёстной реактивности между представителями семейства. Основные аллергены группы полкальцинов: Bet v 4 Берёза, Phl p 7 Тимофеевка.
Молекулярная аллергодиагностика
4
Компоненты аллергенов по
принадлежности к белковым семействам
Профилины
Неспецифические белки-переносчики липидов, (nsLTP)
Аллергены продуктов питания растительного происхождения, латекса, пыльцы кустарников, деревьев и трав. Считаются минорными аллергенами растений. Сенсибилизация к профилинам
может привести к множественным положительным результатам при тестировании на экстрактах
пыльцы растений, однако в большинстве случаев это имеет низкую клиническую значимость.
Белки восприимчивы к действию высоких температур и пищеварительных ферментов, термически обработанные продукты зачастую не вызывают аллергических реакций. Редко ассоциируемы с клиническими симптомами, но могут вызывать видимые или даже тяжёлые аллергические
реакции. Высокая степень серологической перекрёстной реактивности между представителями
семейства. Основные аллергены группы профилинов: Ингаляционные аллергены – пыльца Amb
a 8 Амброзии, Art v 4 Полыни, Bet v 2 Берёзы, Che a 2 Лебеды, Cor a 2 Лещины, Cyn d 12 Пальчатника, Hel a 2 Подсолнечника, Hor v 12 Ячменя, Mer a 1 Пролесника, Ole e 2 Оливы, Par j 3
Постенницы, Phl p 12 Тимофеевки, Ric c 8 Клещевины, Sal k 4 Солянки, Tri a 12 Пшеницы, Zea m
12 Кукурузы, Hev b 8 Латекса, Пищевые аллергены – Ana c 1 Ананас, Api g 4 Сельдерей, Ara h 5
Арахис, Cap a 2 Сладкий перец, Cit s 2 Апельсин, Cora 2 Лесной орех, Dau c 4 Морковь, Fra a 4
Клубника, Gly m 3 Соя, Lyc e 1 Томат, Mal d 4 Яблоко, Mus a 1 Банан, Pet c 2 Петрушка, Pru du 4
Миндаль, Pru av 4 Черешня, Pru p 4 Персик, Sola t 8 Картофель, Tri a 12 Пшеница, Vit v 4 Виноград.
Тропомиозины
Аллергены ракообразных (креветок, крабов), клещей домашней пыли, тараканов, гельминтов.
Тропомиозины – белки, обнаруживаемые у всех членистоногих. Устойчивы к действию высоких
температур и пищеварительных ферментов, аллергические реакции вызывают и термически
обработанные продукты. Пищевые аллергены провоцируют не только оральный аллергический
синдром, но и более тяжёлые (в том числе системные) реакции. Высокая степень перекрёстной реактивности между представителями семейства. Могут использоваться в качестве маркеров перекрёстной реактивности между ракообразными, клещами, тараканами и нематодами.
Чаще всего сенсибилизация к тропомиозинам происходит при контакте с аллергенами клещей
домашней пыли (Der p 10), при употреблении морепродуктов (Pen a 1 Pen i 1, Pen m 1). Основные аллергены группы тропомиозинов: Pen a 1 Креветка, Pen m 1 Креветка, Pen i 1 Креветка,
Ani s 3 Anisakis (гельминт), Bla g 7 Таракан, Der p 10 Dermatophagoides (клещь).
Сывороточные альбумины
Аллергены коровьего молока, крови, мяса и эпителия. Достаточно восприимчивы к действию
высоких температур и пищеварительных ферментов. Сенсибилизация к сывороточным альбуминам может привести к реакциям дыхательных путей на млекопитающих животных, а также
пищевые реакции на молоко и мясо. Высокая степень серологической перекрёстной реактивности между представителями семейства, клиническая значимость неизвестна. Широко представлены в различных биологических жидкостях и тканях. Содержатся в молоке коровьем, говядине,
яйцах и курином мясе. Основные аллергены группы сывороточных альбуминов: Fel d 2 Кошка,
Can f 3 Собака, Ecu c 3 Лошадь, Bos d 6 Молоко и говядина, Gal d 5 Яичный желток. Эти аллергены также представлены практически во всех пищевых продуктах животного происхождения:
мясе, молоке, яйцах, субпродуктах.
5
Компоненты аллергенов по
принадлежности к белковым семействам
Dr. Fooke - Доктор Фооке - www.fooke.ru
Аллергены фруктов, овощей, орехов и пыльцы. В группу белков LTP входят, прежде всего, аллергены персика, лесного ореха, пыльцы полыни и еще 134 аллергенных компонента. Эти белки устойчивы к действию высоких температур и пищеварительных ферментов, аллергические
реакции вызывают и термически обработанные продукты, и любые блюда из содержащих их
продуктов могут вызывать симптомы пищевой аллергии. Часто ассоциируемы с системными и
тяжёлыми реакциями в добавление к оральному аллергическому синдрому и аллергическими
реакциями на фрукты и овощи (кроме Art v 3 и Par j 2). Степень перекрёстной реактивности между представителями семейства различная. Основные аллергены группы nsLTP: Ингаляционные
аллергены – пыльца Amb a 6 Амброзии, Art v 3 Полыни, Hel a 3 Подсолнечника, Hor v 15 Ячменя,
Ory s 14 Риса, Par j 1 Постенницы, Pla a 3 Платана, Tri a 14 Пшеницы, Hev b 12 Латекс. Пищевые
аллергены – Api g 2 Сельдерей, Ara h 2 Арахис, Bra o 3 Капуста, Bra r 1 Репа, Cit s 3 Апельсин, Cor
a 8 Лесной орех, Dau c 3 Морковь, Fra a 3 Клубника, Gly m 2S Albumin Соя, Hel a 2S Albumin Подсолнечник, Hor v 14 Ячмень, Jug n 1 Грецкий орех, Lyc e 3 Томат, Mal d 3 Яблоко, Pha v 3 Фасоль,
Pru ar 3 Абрикос, Pru av 3 Черешня, Pru d 3 Слива, Pru du 3 Миндаль, Pru p 3 Персик, Pyr c3 Груша,
Ses i 1 Кунжут, Tri a gliadin Пшеница, Zea m 14 Кукуруза.
Патогенез-асоциированная семья белков 10 (PR-10), гомолог Bet v 1
Аллергены пыльцы, фруктов, овощей и орехов. До сих пор описаны 42 аллергена, относящихся
к группе PR-10 белков. Большинство белков суперсемейства PR-10 proteins восприимчивы к
действию высоких температур и пищеварительных ферментов, термически обработанные продукты зачастую не вызывают аллергических реакций. Провоцируют локальные симптомы, в
частности оральный аллергический синдром и аллергическими реакциями на фрукты и овощи.
Высокая гомологичность белков обусловливает их значительное иммуногенное сходство, что
является причиной проявления иммунологической кросс-реактивности аллергенов различной
природы (фрукты из семейства розоцветных, лесного ореха, моркови и сельдерея). Основные
аллергены группы PR-10: Ингаляционные аллергены пыльца – Aln g 1 Ольхи, Bet v 1 Берёзы,
Car b 1 Граба, Cas s 1 Каштана, Cor a 1 и Cor he 1 Лещины, Fag s 1 Бука, Que a 1 Дуба. Пищевые
аллергены – Pru ar 1 Абрикос, Act c 8 Киви, Mal d 1 Яблоко, Pru p 1 Персик, Pru av 1 Черешня,
Pyr c 1 Груша, Fra a 1 Клубника, Api g 1 Сельдерей, Dau c 1 Морковь, Lyc e 4 Томат, Gly m 4 Соя,
Cas s 1 Каштан, Ara h 8 Арахис, Cor a 1 Лесной орех, Zea m 14 Кукуруза.
Запасные белки
Аллергены орехов и семян. Белки восприимчивы к действию высоких температур и пищеварительных ферментов, термически обработанные продукты зачастую не вызывают аллергических реакций. Устойчивы к действию высоких температур и пищеварительных ферментов,
аллергические реакции вызывают и термически обработанные продукты. Зачастую провоцируют не только оральный аллергический синдром, но и более тяжёлые (в том числе системные)
реакции. Низкая степень перекрёстной реактивности между представителями семейства. Основные аллергены группы запасных белков: Ara h 1, Ara h 2, Ara h 3, Ara h 6, Ara h 7 Арахис, Ana
o 2 Кешью, Ber e 1 Бразильский орех, Gly m 5, Cor a 9, Cor a 14 Фундук, Jug r 1, Jug r 2, Грецкий
орех, Ses i 1 Кунжут, Fag e 2 Гречиха, Gly m 5, Gly m 6 Соя.
Молекулярная аллергодиагностика
6
Компоненты аллергенов по
принадлежности к белковым семействам
Большая аккуратность и
выявление перекрёстной реактивности
Перекрёстная реактивность
Липокаины
Аллергены шерсти животных. Устойчивы к действию высоких температур и пищеварительных
ферментов, аллергические реакции вызывают и термически обработанные продукты. Степень
перекрёстной реактивности между представителями семейства различная, являются маркерами кросс-реактивности. Основные аллергены группы липокаинов: Fel d 4 Кошка, Can f 1, Can f
2 Собака, Ecu c 1 Лошадь, Mus m 1 Мышь.
Парвальбумины
Аллергены рыб и амфибий. Устойчивы к действию высоких температур и пищеварительных
ферментов, аллергические реакции вызывают и термически обработанные продукты. Зачастую
провоцируют не только оральный аллергический синдром, но и более тяжёлые (в том числе
системные) реакции. Высокая степень перекрёстной реактивности между представителями семейства. Основные аллергены группы парвальбуминов: Cyp c 1 Карп, Gad c 1 Треска.
Перекрёстная реактивность представляет собой феномен распознавания и связывания IgE-антител с последующей индукцией иммунного ответа на похожие (гомологичные) молекулы аллергенов. Так, IgE-антитела, связывающие аллерген
Bet v 1 пыльцы берёзы, взаимодействуют и с аллергеном Cor a 1 фундука благодаря структурному сходству (обычно речь идёт о гомологии последовательностей
первичной структуры белков на 50–70%). Перекрёстная реактивность часто имеет место в следующих случаях:
аллергенные молекулы близкородственных видов (трав, клещей домашней пыли и т. д.);
молекулы со сходными функциями, относящиеся к одному и тому же семейству белков, вне зависимости от видового происхождения источника аллергена (белки семейства тропомиозина, например, Der p 10 клеща домашней пыли и Pen m 1 чёрной тигровой креветки).
CCD (перекрёстно реагирующие углеводные детерминанты, не белки)
Углеводные цепи в составе пыльцы, продуктов питания растительного происхождения, насекомых и ядов. Могут быть использованы как маркеры к белковым карбогидратным фрагментам
(пыльца, перепончатокрылые насекомые). Редко вызывает аллергические реакции, но может
быть причиной положительных результатов тестов in vitro на аллергены, содержащие CCD.
Очень высокая степень серологической перекрёстной реактивности между представителями
семейства. Основные аллергены группы маркеров CCD: MUXF3 Бромелайн, Ana c 2 Ананас,
Arm rHRP Хрен обыкновенный, Cuc p AscO Цуккини.
Оценка риска и типа реакции
Оценка риска у больных аллергией – одна из потенциальных областей применения
молекулярной диагностики аллергии. Поскольку профили сенсибилизации пациентов могут различаться по степени выраженности и тяжести заболевания, выявление молекул «низкого риска» и «высокого риска» представляет большой интерес,
поскольку позволяет реже прибегать к таким потенциально опасным диагностическим процедурам, как провокационные тесты. Результаты молекулярной диагностики также позволяют формулировать более чёткие рекомендации по лечению
(например, касающиеся уменьшения экспозиции аллергенов). Это было продемонстрировано с применением методов молекулярной диагностики пищевой и респираторной аллергии, аллергии на яд перепончатокрылых и латекс. Кроме того,
профиль сенсибилизации может влиять на симптоматику – множественная сенсибилизация к различным аллергенам из одного источника усиливает выраженность
её проявлений.
7
Dr. Fooke - Доктор Фооке - www.fooke.ru
При аллергии вырабатываются IgE-антитела к аллергенам, которые специфичны для одногоединственного вида или являются общими для нескольких видов. Следовательно, у пациента может иметь место истинная сенсибилизация к конкретному аллергену или сенсибилизация к неродственным биологическим объектам вследствие иммунологической перекрёстной
реактивности к похожим по структуре аллергенам. Если говорить в целом, то чем ближе таксономическое родство между видами, тем больше структурное и иммунологическое сходство
между аллергенами.
Изучение таких перекрёстно реагирующих аллергенов способно предоставить ценную информацию о потенциальной сенсибилизации к различным источникам аллергенов и клинических реакциях на них. Например, IgE-антитела, специфичные в отношении аллергена
пыльцы берёзы Bet v 1 (белка семейства PR-10), перекрёстно реагируют с аллергеном яблока Mal d 1, и наоборот, вследствие чего возможна сенсибилизация и к берёзе, и к яблоку.
Примеры перекрёстных реакций между различными семействами аллергенов перечислены
на сайте www.fooke.ru. Некоторые перекрёстно реагирующие молекулы могут спровоцировать выраженную клиническую симптоматику, в то время как другие не дают проявлений. Исследования по молекулярной диагностике аллергии пока не позволяют полностью раскрыть
механизм возникновения перекрёстной реактивности, но скорее всего, анализ эпитопов ключевых аллергенов поможет отчасти разрешить эту проблему.
И напротив, специфические аллергены служат маркерами соответствующих источников аллергенов, что позволяет выявить источник первичной сенсибилизации. Одним из важнейших
преимуществ молекулярной диагностики аллергии является её способность обнаруживать
специфические молекулы аллергенов и дифференцировать их от маркеров перекрёстной реактивности. Следовательно, в некоторых случаях вероятность развития клинической реакции в ответ на экспозицию различных источников аллергенов можно определить по характеру сенсибилизации к различным аллергенам.
Молекулярная аллергодиагностика
8
Молекулярная диагностика и
современный взгляд на пищевую аллергию
Стабильность аллергена
Молекулярная диагностика аллергии получает всё более широкое распространение в клинической практике. Она позволяет улучшить качество оказания помощи
больным аллергией. Это особенно справедливо для пищевой аллергии. Имея на
руках информацию о том, к каким молекулам аллергенов сенсибилизирован пациент, можно сделать прогноз о склонности к развитию системной или локальной
реакции и персистенции клинической симптоматики. Например, известно, что некоторые аллергены, в частности, запасные белки орехов (Cor a 9) и арахиса (Ara h
2) вызывают тяжёлую аллергическую реакцию, а другие аллергены – практически
бессимптомную сенсибилизацию. Ещё один важный аспект, который не учитывается при выполнении традиционных тестов – стабильность аллергена. Аллергены, устойчивые к действию высоких температур и пищеварительных ферментов,
например арахиса (Ara h 2), провоцируют выраженную реакцию, а лабильные аллергены арахиса (Ara h 8) обуславливают локальные проявления или даже толерантность. Определение характера сенсибилизации (истинная или перекрёстная)
помогает спрогнозировать, каким будет ответ на экспозицию аллергенов из разных источников. Молекулярная диагностика позволяет вести более тщательный
отбор пациентов и осуществлять селекцию специфических (ингаляционных) аллергенов для аллерген-специфической иммунотерапии (АСИТ), в частности, при
аллергии на пыльцу, животных и яд перепончатокрылых.
Молекулярная диагностика аллергии входит в повседневную клиническую практику
благодаря своей способности совершенствовать оценку риска, особенно в случае пищевой аллергии.
Пищевые продукты содержат уникальные молекулы аллергенов, устойчивые к действию высоких температур и пищеварительных ферментов или подверженные ему.
Стабильность молекулы и клинические данные помогают оценить риск развития системных и локальных реакций. Лабильные аллергены вызывают локальные реакции
(как правило, оральные), а приготовленная пища зачастую не вызывает аллергии, в то
время как стабильные аллергены провоцируют не только системную, но и локальную
реакцию.
Молекулярная диагностика аллергии уменьшает потребность в провокационных тестах и позволяет дать более чёткие рекомендации касательно устранения контакта с
аллергенами.
9
Dr. Fooke - Доктор Фооке - www.fooke.ru
Молекулярная диагностика и
аллерген-специфическая иммунотерапия
Прогноз эффективности АСИТ
Аллерген-специфическая иммунотерапия (АСИТ) заключается в сублингвальном
или подкожном введении экстракта аллергена, обуславливающего клиническую
симптоматику, с целью индуцировать толерантность к нему и ослабить реактивность организма в отношении самого аллергена (то есть уменьшить выраженность проявлений аллергии). Это достигается благодаря комплексной модуляции
как гуморального, так и клеточного звена иммунного ответа. Противоаллергическая иммунотерапия является «специфической», то есть она модифицирует иммунные реакции только против конкретного аллергена, из которого изготовлена
вакцина. Следовательно, для подбора АСИТ нужно поставить точный этиологический диагноз, а для этого необходимо идентифицировать аллерген, провоцирующий клинические симптомы. В некоторых случаях бывает достаточно детального сбора анамнеза и стандартного теста на IgE с экстрактами аллергенов (кожные
прик-тесты и/или in vitro-тест на специфичесие IgE). Такое справедливо, в частности, при аллергии на растения с чётко установленными сроками сезона пыления,
на которую не накладываются другие виды аллергии.
Молекулярная диагностика аллергии позволяет дифференцировать истинную сенсибилизацию от перекрёстной реактивности у пациентов с поливалентной сенсибилизацией,
в то время как с помощью традиционных тестов невозможно выявить релевантный(е)
аллерген(ы) для аллерген-специфической иммунотерапии (АСИТ).
АСИТ является дорогостоящим методом лечения и, как правило, проводится в течение
долгого времени (3-5 лет), поэтому правильная постановка диагноза, отбор пациентов
и определение первичного сенсибилизирующего аллергена (аллергенов) имеют важное
значение для оптимизации лечебного процесса, в том числе с финансовой точки зрения.
Эффективность АСИТ будет высокой при повышенном уровне IgЕ на мажорные белки и
при отсутствии антител на минорные белки. Эффективность АСИТ может быть не достаточно эффективной при повышенном уровне IgЕ одновременно на мажорные и минорные
белки. АСИТ на этот аллерген проводить не рекомендуется, а так же необходимо провести до обследование пациента с целью выявления основного аллергена, при повышенном
уровне IgЕ на минорные белки и отсутствии антител на мажорные белки аллергена.
Но если в ходе традиционных диагностических тестов с использованием экстрактов аллергенов выявляется поливалентная сенсибилизация, а имеющиеся клинические данные не объясняют её природу, то поставить диагноз становится сложнее. Это имеет место у многих
пациентов. Хорошо известно, что в ряде случаев множественные положительные результаты тестов, в которых используются экстракты аллергенов (кожные прик-тесты и/или in vitroтесты на sIgE), объясняются перекрёстной реактивностью аллергенов в составе диагностических экстрактов. Некоторые белки (профилины, полкальцины, LTP, PR10, тропомиозины)
высококонсервативны и обнаруживаются у представителей самых разных видов. Поэтому
при проведении кожного прик-теста пациент, первично сенсибилизированный к травам, может давать положительную реакцию и на берёзу. В данном случае возникновение феномена
Молекулярная аллергодиагностика
10
Молекулярная диагностика и
оптимизация назначения иммунотерапии
перекрёстной реактивности объясняется тем, что экстракт берёзы, используемый в ходе кожного прик-теста, содержит профилин Bet v 2, который очень схож с профилином трав Phl p 12
тимофеевки. Применение рекомбинантных и высоко очищенных нативных аллергенов помогло дифференцировать истинную сенсибилизацию от перекрёстной реактивности к травам.
Если также выявляются sIgE-антитела к Phl p 12 (профилину), то, скорее всего, именно сенсибилизация к профилину служит причиной положительного результата кожного прик-теста
с использованием экстракта берёзы, в составе которого также есть профилин. Получив эти
данные, можно назначать АСИТ только с аллергеном трав. Аналогичное справедливо и в случае обнаружения сенсибилизации к стандартному экстракту с аллергеном клеща домашней
пыли: если IgE-антитела специфичны в отношении Der p 10 (тропомиозина), а не Der p 1 и 2
или Der f 1 и 2, АСИТ нецелесообразна, поскольку вакцины содержат преимущественно Der p
1 и 2 / Der f 1 и 2, а Der p 10 – лишь в небольшом или вариабельном количестве.
Наконец, молекулярная диагностика помогает вести более тщательный отбор пациентов на
АСИТ по поводу аллергии на яд перепончатокрылых. Наличие сенсибилизации к основным
аллергенам – Api m 1 медоносных пчёл и Ves v 5 и/или Ves v 1 ос – помогает отличить истинную двойную сенсибилизацию к яду пчёл и ос от перекрёстной реактивности вследствие CCD.
Кроме того, большинство доступных на рынке экстрактов аллергенов для АСИТ хорошо стандартизированы по основным аллергенам, а минорные аллергены присутствуют в малом или
вариабельном количестве. Поэтому пациенты, имеющие сенсибилизацию только к минорным
аллергенам, получат их меньше, чем требуется для достижения эффекта АСИТ. В недавно
завершенном исследовании было показано, что эффективность АСИТ с пыльцой берёзы или
трав продолжительностью 2 года гораздо выше в случае сенсибилизации к основным аллергенам, чем при сенсибилизации только к минорным перекрёстно реагирующим аллергенам.
У лиц с поливалентной сенсибилизацией самым точным способом определить наиболее релевантный аллерген, по поводу которого будет проводиться АСИЛ, служит молекулярная диагностика. Показано, что использование методов молекулярной диагностики заставляет сменить АСИТ, подобранную по результатам кожных прик-тестов, более чем в 50% случаев, а
следовательно, в группе пациентов с поливалентной сенсибилизацией высока вероятность
неправильного назначения АСИТ. Теоретически, выявление молекул, к которым специфичны
IgE-антитела, позволит выбрать АСИТ, направленную только против аллергенов с подтверждённым IgE-опосредованным ответом на них.
Считается, что на основании результатов только традиционных диагностических тестов можно подобрать препарат для АСИТ. Однако выявление специфических и перекрёстно реагирующих аллергенов открыло аллергологам новые варианты диагностики
и лечения, в том числе возможность определять состав препарата из аллергенов для
АСИТ.
Молекулярная диагностика аллергии оказывает большую помощь при подборе АСИТ,
выявлении перекрёстной реактивности и оценке выраженности реакций, ассоциированных с различными аллергенами.
11
Dr. Fooke - Доктор Фооке - www.fooke.ru
Особенности и применение аллергокомпонентов в молекулярной диагностики
Пищевые аллергены
К особенностям пищевых аллергенов относится способность изменять антигенные
свойства в процессе кулинарной обработки продуктов. Как правило, термостабильные и устойчивые к действию пищеварительных ферментов, аллергены вызывают
более тяжёлую аллергическую реакцию (например, анафилаксию), чем лабильные.
Последние, как правило, провоцируют локальную симптоматику, например, оральный аллергический синдром (ОАС). Пастеризация, стерилизация, глубокое замораживание мало влияют на степень аллергенности пищевых продуктов. Растительная
пища и БАД также может быть расценены как наиболее важный источник пищевых аллергических реакций, особенно у взрослых. Пищевые аллергены выделяют:
главный (мажорный) аллерген, средний (промежуточный) и малый (минорный) аллерген. Главный аллерген обладает способностью связываться с IgE антителами и
вызывать аллергию у > 50% сенсибилизированных больных, а минорный – у около
10% сенсибилизированных к нему пациентов. Средний аллерген обладает промежуточными свойствами между главным и минорным аллергенами.
Пищевые аллергены высокого и низкого риска, вызывающие анафилаксию:
Источник
Высокий риск
Арахис
Фундук
Грецкие орехи
Соя
Фрукты семейства розовые
Пшеницы
Ara h 1, 2, 3, 9
Cor a 8, 9, 14
Jug r 1, 2, 3
Gly m 5, 6, (4)
Pru p 3, Mal d 3
Tri a 14, Tri a 19
Низкий риск
Ara h 8, Профилин, CCD
Профилин, CCD
Профилин, CCD
Профилин, CCD
Pru p 1, Mal d 1, Профилин, CCD
Профилин, CCD
Арахис
Мажорными аллергенами арахиса являются Ara h 1, Ara h 2 и Ara h 6, а минорным Ara h 9. Выявление IgE-антител к так называемым запасным белкам, таким как Ara h 1, Ara h 2 и Ara h 3, свидетельствует об истинной аллергии к арахису, а изолированная сенсибилизация к Ara h 8 (белку PR-10 и Bet v 1-гомологу) служит маркером слабо выраженной локальной симптоматики. На
юге Европы в качестве сенсибилизирующего аллергена превалирует LTP (Ara h 9), который может выступать в качестве маркера тяжести клинических проявлений, поскольку он коррелирует
с системными и более тяжёлыми реакциями. Наконец, сенсибилизация к профилину или CCD
обычно сопровождается лишь локальной оральной симптоматикой (или она вообще отсутствует), а к термически обработанному арахису может развиться толерантность.
Молекулярная аллергодиагностика
12
Особенности и применение аллергокомпонентов в молекулярной диагностики
Фундук
Молоко
Мажорным аллергеном фундука является Cor а 1 паналлерген, семья белков PR-10. Аллергическая реакция к Cor a 1 (PR-10), как правило, представлена оральным аллергическим синдромом, реже анафилаксией, обусловленной сенсибилизацией к белку Сог а 8 (LTP), а распознавание IgE-антителами запасных белков (Cor a 9 и Cor a 14) чаще имеет место у пациентов с
тяжёлой аллергией. Сенсибилизация к профилину или CCD обычно сопровождается лишь локальной оральной симптоматикой (или она вообще отсутствует), а к термически обработанному фундуку может развиться толерантность. Аллерген фундука может быть скрытым аллергеном в кондитерских изделиях например, нуга или одним из ингредиентов во вторичных
продуктах (конфеты, сладости). Возможна профессиональная сенсибилизация к фундуку у работников пищевой промышленности.
Грецкий орех
Тяжёлые аллергические реакции на грецкие орехи ассоциированы с сенсибилизацией к запасным белкам (Jug r 1, Jug r 2 Грецкий орех) или LTP (Jug r 3). До последнего времени аллергены грецкого ореха не были доступны на рынке, чем и объясняется малое количество клинических исследований. Сенсибилизация к профилину или CCD обычно сопровождается лишь
локальной оральной симптоматикой (или она вообще отсутствует), а к термически обработанным грецким орехам может развиться толерантность.
Яйца
Показано, что высокий уровень sIgE-антител к овомукоиду Gal d 1 Яичный белок, служит фактором риска аллергии на яйца, в том числе подвергшимся кулинарной обработке. Если содержание этих антител ниже диагностического, то к подвергшимся кулинарной обработке яйцам
имеется толерантность. Аллергия к яйцу одна из наиболее часто распространенных пищевых
аллергий у детей до трёх лет. Среди обследованных детей с атопическим дерматитом около
35,5% имеют аллергию к яйцу, тогда как среди взрослых с аллергией к пище около 12% реагируют на яйца. В настоящее время описаны 4 аллергена яичного белка: Овальбумин (Gal d 2,
54% от общего белка яйца), Кональбумин, также известный под названием Овотрансферрин
(Gal d 3, 12%), Овомукоид (Gal d 1, 11%) и Лизоцим (Gal d 4, 3%). Овомукоид – основной аллерген белка яйца. Это сильно гликозилированный белок, устойчивый к протеазам и термической обработке, способный сохранять свои иммуногенные свойства даже после обработки при
100°С в течение часа. Овальбумин – является фосфорилированным гликопротеином, в четыре раза превышающим по количеству овомукоид. Это ещё один значимый аллерген, термически устойчивый белок, иммуногенность которого, по некоторым данным, снижается после воздействия высоких температур. Кональбумин – (ион связывающий гликопротеин) и Лизоцим
(гликозидаза), которые часто встречаются в составе многих продуктов из-за своих антибактериальных свойств, не устойчивы к термической обработке. Таким образом, определение антител к овомукоиду и овальбумину позволяет врачу определить необходимость назначения строгой диеты.
13
Особенности и применение аллергокомпонентов в молекулярной диагностики
Dr. Fooke - Доктор Фооке - www.fooke.ru
Специфические IgE-антитела к казеину (Bos d 8 Коровье молоко) и бета-лактоглобулину (Bos
d 5 Коровье молоко) – маркеры аллергии на молоко, с том числе кипячёное. Если содержание этих антител ниже диагностического, то к подвергшемуся кулинарной обработке молоку
имеется толерантность.
Рыба
Распространенность пищевой аллергии на различные виды рыб варьирует от 10 до 40% в
популяции лиц с пищевой аллергией, причём морская рыба более аллергенна, чем речная.
Развитие IgE-медиаторных реакций может вызвать употребление в пищу или вдыхание аллергенов любой рыбы. И ранее, и сейчас у врачей, при обнаружении аллергической реакции
на рыбу, существует противоречивое мнение о том, рекомендовать ли употребление в пищу
другие виды рыб и каков при этом риск развития аллергической реакции. Например, при аллергических реакциях на треску считалось, что употребление в пищу других видов рыб совершенно безопасно. Однако позднее выяснилось, что Cad с 1 – главный аллерген трески,
относится к группе мышечных белков, известный как парвальбумин, который присутствует
во многих других группах рыб и амфибий. Парвальбумины (Gad c 1 Треска и Cyp c 1 Карп)
служат основными аллергенами рыбы. Устойчивы к перевариванию, тепловой обработке и
протеолизису. Парвальбумины представляют группу аллергенов, способных вызвать серьёзные, часто угрожающие жизни аллергические реакции на рыбу. Парвальбумины обладают
широким спектром перекрёстной реактивности, поэтому при сенсибилизации к одному парвальбумину возможна реакция на парвальбумины других видов рыбы (карпа, трески, сельди,
камбалы, скумбрии, тунца, лосося, окуня, угря). Мажорным аллергеном карпа является Cyp
c 1 парвальбумин рыб, относится к наиболее иммуногенным пищевым аллергенам. Cad с 1
имеет три аллергенных домена, два из которых соединены с кальцием. По крайней мере 10
образцов рыб имеют этот антиген в составе и 29 – фрагменты этого антигена.
Моллюски
Аллергические реакции на ракообразных могут быть спровоцированы тропомиозином, для
которого характерен широкий спектр межвидовой перекрёстной реактивности, в том числе
с клещами. У креветок и других моллюсков также имеются и другие клинически значимые
аллергены, например, саркоплазматический кальций-связывающий белок и аргинин-киназы.
Аллергеном креветки является фибриллярный белок тропомиозин, являющийся мажорным
аллергеном моллюсков и ракообразных, к ракообразным относят: креветок, крабов, криля
(маленьких морских рачков), омаров, лангустов, и речных раков. Среди ракообразных высокой сенсибилизирующей активностью обладают креветки. Креветки, клещи домашней пыли,
ряд насекомых (мотыль, тараканы и др.), относятся к типу членистоногих и являются источниками тропомиозина. Анализ результатов современных исследований перекрёстной реактивности IgE-связывающих эпитопов тропомиозина различного происхождения позволяет обосновать участие этого аллергена в формировании перекрёстно-аллергических реакций.
Молекулярная аллергодиагностика
14
Особенности и применение аллергокомпонентов в молекулярной диагностики
Мясо
Пшеница
Галактоза-α-1,3-галактоза (α-Гал) новый маркер больных с аллергией на любое красное мясо
(кроме мяса домашних птиц и рыб). IgE-антитела, специфичные в отношении α-Гал, ассоциированы с выраженными аллергическими реакциями и анафилаксией замедленного типа. Важно помнить врачам, что Ламинин γ-1 и коллаген α-1 говядины являются α-Гал-содержащими
аллергенами, что объясняет перекрёстную реактивность красного мяса с желатином. Желатин входящий в состав сладостей, лекарственных капсул и вакцин, может стать причиной аллергических реакций (вплоть до анафилаксии) у пациентов, страдающих пищевой аллергией
на мясо. Сенсибилизация к α-Гал может быть индуцирована укусами клещей (что указывает
на взаимосвязь между укусом клеща и началом аллергии на красное мясо у взрослых) или
отдельными видами паразитарных инфекций. Клиническими проявлениями сенсибилизации
к α-Гал служат реакции замедленного типа в виде анафилаксии на красное мясо (говядина,
свинина, баранина, оленина). α-Гал также обнаруживается в противоопухолевом препарате
цетуксимаб (химерные антитела), что является причиной развития анафилаксии сразу после
первой внутривенной инъекции у ~20% онкологических больных. Поэтому перед использованием цетуксимаба необходимо сделать тест на сенсибилизацию к α-Гал. Бычий сывороточный альбумин (Bos d 6) – это разрушающийся при нагревании аллерген молока и говядины,
из-за наличия перекрёстной реактивности у которого могут возникать аллергические реакции на мясо различных млекопитающих.
Морковь
Мажорными аллергенами моркови является Dau c 1, семья белков PR-10. Наиболее изучено
три белковых компонента аллергена моркови: Dau c 1, Dau c4 (профилин) и Dau c 5 (гомолог
изофлавоновой редуктазы). Мажорный аллерген моркови Dau c 1 перекрёстно реагирует с
мажорным аллергеном берёзы Bet v 1, что связанно с наличием у них гомологичных конформационных эпитопов. У сенсибилизированных пациентов аллергия развивается при употреблении яблок, косточковых плодов, сельдерея, орехов, сои и на пыльцу полыни. Профилин
моркови Dau c 4 имеет гомологичное строение с белком берёзы Bet v 2, что также приводит
к развитию перекрёстных реакций. Установлены реакции перекрёста между Dau c 4 и профилинами сельдерея Api g 4, огурца и арбуза. Протеин Dau c 5 в настоящее время его свойства активно изучаются.
Соя
Сенсибилизация к Tri a 19 Пшеница (ω-5-gliadin) является фактором риска развития аллергической реакции немедленного типа у детей и системных реакций физического усилия у
взрослых. LTP пшеницы (Tri a 14 Пшеница) перекрёстно реагирует с LTP других продуктов питания, однако распространённость и клиническая значимость этого феномена требуют дальнейшего изучения. Сенсибилизация к профилину или CCD обычно сопровождается лишь
локальной оральной симптоматикой (или она вообще отсутствует), а к термически обработанной пшенице может развиться толерантность.
Плоды растений семейства розовых
Яблоко, груша и другие деревья с косточковыми плодами относятся к семейству розовых (ранее розоцветные). У лиц с аллергией на эти фрукты, особенно в случае сенсибилизации к белкам PR-10 (Mal d 1 Яблоко, Pru p 1 Персик) или профилинам (Pru p 4 Персик), чаще возникает локальная реакция, поскольку указанные белки разрушаются под действием высоких температур
и пищеварительных ферментов. И напротив, сенсибилизация к LTP (Pru p 3 Персик), особенно у
жителей средиземноморского побережья, ассоциирована с широким спектром клинических проявлений аллергии (от бессимптомного течения до анафилаксии) и, как правило, является маркером риска выраженных реакций, в том числе анафилаксии, которую провоцируют иные факторы (физическая активность, потребление алкоголя, приём лекарственных препаратов и т. д.)
Персик
Мажорными аллергенами персика является Pru р 1 паналлерген, семья белков PR-10 и Pru р 3
(LTP), обладает свойством вызывать первичную сенсибилизацию. Содержание липид-переносящих белков в кожице персика приблизительно в 7 раз выше, чем в мякоти. Это объясняет уменьшение степени выраженности клинических симптомов у сенсибилизированных пациентов при
употреблении очищенных фруктов. Pru p 1 обладает высокой перекрёстной реактивностью с
яблоком, черешней, вишней, абрикосом, сливой и в меньшей с морковью, соей, арахисом, сельдереем. Описаны выраженные аллергические реакции, развившиеся после употребления скрытого аллергена персика в мороженом, при косвенном контакте через посуду и поцелуй. Доказано,
что в высушенном состоянии персик и нектарины, сохраняют свои аллергенные свойства.
Яблоко
Сенсибилизация к Gly m 5 Соя и/или Gly m 6 Соя коррелирует с выраженной аллергической реакцией, в то время как сенсибилизация к Gly m 4 Соя (PR-10) вызывает ОАС. Впрочем, у лиц
с аллергией на пыльцу берёзы потребление большого количества слегка обработанной термически сои (например, соевых напитков) на фоне сенсибилизации к Gly m 4 Соя может спровоцировать клинически тяжёлые проявления. Сенсибилизация к профилину или CCD обычно
сопровождается лишь локальной оральной симптоматикой (или она вообще отсутствует), а к
термически обработанной сое может развиться толерантность.
15
Особенности и применение аллергокомпонентов в молекулярной диагностики
Dr. Fooke - Доктор Фооке - www.fooke.ru
Мажорными аллергенами яблока является Mai d 1 паналлерген, семья белков PR-10, так же изучено 3 компонента аллергена яблока: Mai d 2 (гомолог тауматина), Mai d 3 (LTP), тип 1, Mai d4
(профилин). Кожица яблока и других фруктов семейства розоцветных более аллергенна Mai d 1,
чем пульпа Mai d 2. Однако белки, присутствующие в кожице термолабильны, что объясняет возможность употребления печёных яблок сенсибилизированными к яблоку пациентами с поллинозом и перекрёстной пищевой аллергией. Протеины Mai d 1 и Mai d 3 содержатся в пыльце яблонь,
что объясняет появление симптомов пищевой аллергии у сенсибилизированных пациентов в период их цветения. Профилин яблока гомологичен профилинам Api g 4 Сельдерея, Bet v 2 Берёзы
и Dau с 4 Моркови, для белка Mai d 2 подтверждена гомология с Pru р 2 Персика.
Молекулярная аллергодиагностика
16
Особенности и применение аллергокомпонентов в молекулярной диагностики
Ингаляционные аллергены
Шерсть животных (Кошка)
Главным аллергеном кошки является Fer d 1 (утероглобин) обнаружен на шкуре и эпителии
кожи, а также в секрете сальных желез, моче, но не в слюне кошек. Более 80% больных с
аллергией на кошек имеют IgE-антитела именно к этому гликопротеину. 25% людей с аллергией на кошек чувствительны также к сывороточному альбумину кошек Fel d 2, который содержится в их сыворотке, перхоти и слюне, а 12% сенсибилизированы и к моче. У людей с
IgE-cенсибилизацией к Fel d 1 встречается перекрёстная аллергия на другие виды животных
(сибирский тигр, лев, ягуар, леопард), а также собаку, свинью и лошадь. Описан синдром «кошка-свинина», возможно, опосредованный перекрёстной реакцией между сывороточными альбуминами этих животных. Известны также случаи анафилаксии, индуцированной физической
нагрузкой после приёма свинины или говядины. Высокий уровень sIgE-антител к Fel d 1 коррелирует с развитием астмы у пациентов с аллергией на кошек. У шведских детей астму тяжёлого течения провоцирует распознавание антителами трёх и более аллергенов животного происхождения, таких как липокалины (Mus m 1 Мышь, Equ c 1 Лошадь, Fel d 4 Кошка, Can f 1 и 2
Собака), калликреин (Can f 5 Собака) и секретоглобулин (Fel d 1 Кошка).
Шерсть животных (Собака)
Главный аллергеном собаки является Can f 1 (липокалин) присутствует в больших количествах в домашней пыли, матрасах, кровати, а также там, где животные не живут. Основные
аллергены собак Can f 1, Can f 2 выделены из собачьей перхоти и шерсти, хотя в качестве источников аллергена выступают также слюна и моча. В связи с этим для диагностики аллергии к собаке важно определить три аллергена: перхоть, эпителий и сывороточный альбумин.
У пациентов с аллергией на кошек и собак часто обнаруживается IgE-реактивность на аллергены других домашних животных и грызунов. В качестве источников которых выступают
шерсть, моча и слюна. При этом между аллергенами грызунов (хомяки, кролики, мыши, крысы и пр.) часто наблюдается перекрёстная реактивность.
Плесень
Споры плесневых грибков (Asp f 1, 2 / Cla h 8 / Alt a 1, 6). Споры грибов и плесеней распространяются с воздухом и определяются повсеместно, образование спор усиливается в условиях высокой влажности и при высоких температурах, что объясняет сезонные вспышки заболевания.
Реакции гиперчувствительности на Aspergillus fumigatus и IgE-опосредованная реактивность в
отношении Asp f 2, 4 и 6 указывают на бронхо-легочный аспергиллез, а сенсибилизация к Asp f
1 и/илиr Asp f 3 – на аллергическую астму. Alt a 1 является мажорным термостабильным аллергеном, реагирующим с IgE сывороткой более чем 90% Alternaria alternata-сенсибилизированных
пациентов. Alt 2 распознается IgE антителами у 16 (61%) из 26 людей, страдающих аллергией к
Alternaria alternata. Также существуют минорные аллергены – Alt a 11 Alt a 3, Alt a 4, Alt a 6, Alt a
7, Alt a 10, Alt a 12. Одной диагностики и иммунотерапии с аллергеном Alt a 1 достаточно для обнаружения предполагаемой сенсибилизации и улучшения проявлений сенсибилизации ко всему комплексу аллергенов Alternaria alternata.
17
Dr. Fooke - Доктор Фооке - www.fooke.ru
Особенности и применение аллергокомпонентов в молекулярной диагностики
Тараканы
Основной представитель аллергенов тараканов является Bla g 1 Таракан-прусак, в регионах с
жарким и влажным климатом аллергия на тараканов встречается чаще, чем аллергия на пыльцу амброзии полыннолистной или клещей домашней пыли. Недавно было установлено, что
сенсибилизация к Per a 2 Таракан американский ассоциируется с тяжёлым течением аллергических заболеваний дыхательных путей у лиц с аллергией на тараканов. Пока аллерген Per a
2 не доступен коммерчески для проведения in vitro-тестов, но существует его гомолог – Bla g 2
Таракан (аспартатпротеаза). У тараканов также присутствует перекрёстно реагирующий тропомиозин Bla g 7 Таракан, который свидетельствует о риске аллергических реакций на креветок или улиток, которые могут иметь тяжёлое течение.
Клещи
Клещи домашней пыли представляют собой значительную часть аллергенов домашней пыли.
Наиболее важное значение в развитии сенсибилизации играют Dermatophagoides pteronyssinus (Der p), Dermatophagoides farinae (Der f), Euroglyphus maynei (Eur m), Lepidoglyphus destructor
(Lep d) и Blomia tropicalis (Blo t). Клещ Dermatophagoides pteronyssinus перёкрестно реагирует с
другими семействами клещей.
Мажорными аллергенами клеща домашней пыли Dermatophagoides pteronyssinus являются Der p 1 (цистеиновая протеаза) и Der p 2 (семейство NPC2). Существует высокая перекрёстная реактивность между аллергенами обеих групп.
Около 20% пациентов, сенсибилизированных к домашней
пыли, не имеют специфических IgE-антител к аллергенам
1 и 2 групп. Это связано с тем, что существует большое количество аллергенов клещей домашней пыли других групп,
обладающих высокой способностью к выработке специфических IgE-антител, однако в экстрактах домашней пыли
они присутствуют в незначительных концентрациях.
Наример, Der p 3 может считаться мажорным аллергеном клещей домашней пыли, сенсибилизация к нему определяется в 50% случаев, однако специфические IgE-антитела к Der p 3 встречаются в сыворотке крови в низких титрах из-за низкой встречаемости самого аллергена. Образование специфических IgE-антител к аллергенам Der p 4, 5, 6 и 9 встречается в 37-50% случаев,
однако в сыворотках крови они встречаются в низких титрах по этой же причине.
Der p 7 так же является мажорным аллергеном клещей домашней пыли наряду с Der p 1 и Der p 2. Более чем у 50%
пациентов с клещевой аллергией определяются специфические IgE-антитела к Der p 7, который способен стимулировать выработку специфических IgE-антител в той же
степени, что и Der p 2. Кроме того, пролиферативный и цитокиновый ответ на 1 и 7 группы аллергенов доказывает существование Т-клеточной перекрёстной реактивности. Возможна перекрёстная реакция между клещами, вызванная
тромиозином и животными группами: чесоточного клеща,
тараканов, комаров, мух, чешуйницы, ракообразных и т.д.
Молекулярная аллергодиагностика
18
Особенности и применение аллергокомпонентов в молекулярной диагностики
Клещи
Берёза
Мажорными аллергенами клещей домашней пыли Dermatophagoides farinae являются Der f 1 (цистеиновая протеаза) и Der f 2 (семейство NPC2), существует высокая перекрёстная реактивность
между аллергенами обеих групп. Аллергены Der p 1 и Der f 1 имеют гомологию (сходство) 80% за
счёт наличия перекрёстно-реагирующих эпитопов, но также имеют и видоспецифические эпитопы.
Степень гомологии Der p 2 и Der f 2 достигает 88%, также существует сходство между аллергенами
клещей домашней пыли и аллергенами амбарных клещей Der p 2 и Lep d 2 Lepidoglyphus (37%), Der
p 2 и Tyr p 2 Tyrophagus putrescentiae (40%). Таким образом, в случае обнаружения сенсибилизации к стандартному экстракту с аллергеном клеща домашней пыли: если IgE-антитела специфичны
в отношении Der p 10 (тропомиозина), а не Der p 1 и 2 или Der f 1 и 2, проведения аллерген-специфической иммунотерапии АСИТ нецелесообразна, поскольку вакцины содержат преимущественно
Der p 1 и 2 / Der f 1 и 2, а Der p 10 – лишь в небольшом или вариабельном количестве.
Особый интерес представляет определение уровня минорных аллергенов Der p 10 / Der f 10 (тропомиозины). 10% пациентов с сенсибилизацией к клещам домашней пыли имеют специфические
IgE-антитела к тропомиозину клещей домашней пыли. Der p 10 и Der f 10 имеют высокую степень
гомологии (98%) и, следовательно, высокую степень перекрёстной реактивности. Потенциально
пациенты с наличием специфических IgE-антител к Der p 10 имеют более высокий риск развития
аллергических реакций к морепродуктам, креветкам, улиткам, паразитам и насекомым. Исходя из
этих соображений, при прогнозировании эффективности АСИТ необходимо определение уровней
специфических IgЕ к мажорным аллергенам клещей домашней пыли и тропомиозину.
Ингаляционные аллергены пыльцы
Зерна пыльцы различных растений принадлежат к наиболее многочисленным воздушным аллергенам вообще, и сенная лихорадка (поллиноз) является наиболее
распространённым видом аллергических заболеваний. С точки зрения возможной
аллергизации, наиболее важными являются виды пыльцы весенних деревьев и кустарников, трав и сорняков (к наиболее важным сорнякам принадлежат растения
рода Ambrosia, Artemisia a Parietaria).
В ходе исследования, посвященного аллергии на пыльцу,
была предпринята попытка выяснить, какие аллергены являются истинными, а какие – перекрёстно реагирующими.
Однако о маркерах выраженных аллергических реакций известно немногое. В качестве маркера более тяжёлого течения аллергии на пыльцу может выступать сенсибилизация к
некоторым специфическим аллергенам, которая повышает риск системных реакций при проведении иммунотерапии
(например, Олива Ole e 9 (глюканаза) и Ole e 7 (LTP). Сенсибилизация к профилину часто встречается среди пациентов с аллергией на пыльцу и обычно ассоциируется с лёгким или бессимптомным течением аллергии.
Однако в некоторых случаях профилин может выступать в качестве фактора риска выраженных реакций при аллергии на оливу и некоторые другие растения (дыню, лимон). Доказано, что
перекрёстную реактивность между весенними деревьями вызывают разные типы аллергенов,
такие как Bet v 1 (протеин), Bet v 2 (профилин) или паналлергены.
19
Особенности и применение аллергокомпонентов в молекулярной диагностики
Dr. Fooke - Доктор Фооке - www.fooke.ru
Мажорный аллерген берёзы Bet v 1 (семейство PR-10). Антитела к Bet v 1 обнаруживаются у 95%
больных поллинозом, реагирующих на пыльцу берёзы. Этот аллерген относится к патогенетическим белкам (PR-10), содержание которых увеличивается в растениях, испытывающих стресс
(температурные воздействия, повреждения вредителями и т.п.). Множество пищевых продуктов
растительного происхождения содержат аналоги этого белка, и его перекрёстная реактивность
обусловлена высокой гомологией аминокислотной последовательности у различных таксономических растений. Протеин Bet v 1 отвечает за перекрёстную реактивность между весенними деревьями и кустарниками семейства Fagaceae, Betulaceae и Corylaceae.
Гомологичные Bet v 1 аллергены содержатся в пыльце
растений порядка Букоцветные, к которым относятся
семейства Берёзовых, Буковых, Ореховых, например,
Cor a 1 – аллерген пыльцы орешника, Aln g 1 ольхи, Car
b 1 граба, Cas s 1 каштана, Que a 1 белого дуба, плодах
растений семейства Розовых (Rosaceae) – это аллергены яблока (Mal d 1), черешни (Pru av 1), абрикоса (Pru ar
1), груши (Pyr c 1), персика (Pru p 1), семейства Зонтичных (Apiaceae) – аллергены сельдерея (Api g 1.01), моркови (Dau c 1) и семейства Бобовых (Fabaceae) – аллергены сои (Gly m 4), арахиса (Ara h 8), зелёных бобов (Vig r 1), а также гомологичные аллергены выявлены в клубнике (Fra a 1), картофеле (Sol t 1), киви (Act d 8) и петрушке. Гомологи аллергена берёзы Bet v 1 составляют основу перекрёстных реакций при развитии пищевой аллергии у больных
с сенсибилизацией к пыльце деревьев.
Минорные аллергены берёзы Bet v 2 (профилин) и Bet v 4 (полкальцин). Профилины могут быть
причиной тяжёлых анафилактических реакций на арахис и сою. Протеин Bet v 2 отвечает за перекрёстную реакцию между ботанически неродственными деревьями и кустарниками.
Пациенты сенсибилизированные к профилину Bet v 2
реагируют с высокой степени гомологии к аллергенам
пыльцы полыни (Art v 4), пыльцы пальчатника или бермудской травы (Cyn d 12), пыльцы оливы (Ole e 2), тимофеевки (Phi p 12), подсолнечника (Hel a 2), натурального
латекса (Hev-b 8), а также яблока (Mal d 4), персика (Pru
p 4), груши (Pyr c 4), черешни (Pru av 4), банана (Mus xp
1), мускусной дыни (Cuc m 2), сладкого апельсина (Cit s
2), личи (Lit c 1), ананаса (Ana c 1), сои (Gly m 3), сельдерея (Api g 4), томата (Lyc e 1), моркови (Dau c 4), сладкого перца (Cap a 2), лесного ореха (Cor a 2). Минорные аллергены берёзы Bet v 5 и Bet v 6 также могут участвовать
в перекрёстных реакциях.
Прогноз эффективности АСИТ на примере тестирования компонентов аллергенов пыльцы Берёзы
t3: эффективность АСИТ будет высокой для пациентов, имеющих IgE только к Bet v 1. В случае наличия специфических IgE как к мажорному, так и к минорным компонентам, эффективность будет
средней. АСИТ будет малоэффективна в случае отсутствия IgE к мажорному компоненту.
Молекулярная аллергодиагностика
20
Особенности и применение аллергоаллерго
компонентов в молекулярной диагностики
Олива
Особенности и применение аллергоаллерго
компонентов в молекулярной диагностики
Амброзия
Мажорные аллергены оливы Ole e 1, Ole e 4 и Ole e 7. Оливковое дерево является одним из самых
важных причин сезонной аллергии в районах, где это дерево произрастает. Пыльца оливы может
вызвать астму, аллергический ринит и аллергический конъюнктивит. Пациенты, скорее всего, будут полисенсибилизированными чем моно, чувствительными к пыльце оливы. Изучено десять белковых компонентов аллергена оливы: Ole e1 (ингибитор трипсина), Ole e2 (профилин), Ole e 3 и 8
(кальций-связывающий), Ole e 4, Ole e 5 (супероксиддисмутаза), Ole e 6, Ole e 7 (LTP), Ole e 9 (глюканаза), Ole e 10. Главный аллерген оливы Ole e 1 перекрёстно реагирует с аллергенами Fra e 1 Ясеня, Lig v 1 Бирючины, Syr v 1 Сирени, обладает значительной гомологией с основным аллергеном
пыльцы подорожника ланцетолистного Pla l 1. Приблизительно у половины пациентов с сенсибилизацией к главному аллергену пыльцы оливы (Ole e 1), были выявлены IgE-антитела к углеводам.
К наиболее важным сорнякам возможной аллергизации принадлежат пыльцевые зёрна растений
рода Амброзии (Ambrosia), Полыни (Artemisia) и Постенница (Parietaria). Мажорными аллергенами
Амброзии является Amb a 1 и Amb а 2 (пектатлиаза).
IgE-антитела к аллергену Amb a 1 выявляются у 95% пациентов, сенсибилизированных к пыльце амброзии. Amb a1 – аллерген цветочной пыльцы, реагирует перекрёстным образом
с аллергенами таксономически отличающихся видов и родов.
На основании данной перекрёстной реактивности аллергены сорняков можно разделить на три взаимно реагирующих
группы. У сенсибилизированных к амброзии больных положительные тесты с Amb а 1 и Аmb а 2 выявлены у 90-95%, с
Amb а 3 (пластоцианин) и Amb а 6 (LTP) у 20-25% и с Amb а 5 у
10% больных. Всего Амброзия содержит около 22 аллергенов.
Полынь обыкновенная
Мажорным аллергеном полыни обыкновенной является Art v 1 (дефензин), специфические IgE
антитела к которому выявляются у 95% пациентов с аллергией на пыльцу полыни. Полынь обыкновенная является одним из основных причин аллергических реакций в конце лета и осени в
Европе. Среди пациентов, страдающих от поллиноза, частота аллергических заболеваний вызванной пыльцой полыни составляет 10-14%. Аллерген Art v1 перекрёстно реагирует с гомологичными белками амброзии. Выявление аллергенспецифических белков к аллергенам полыни
позволяет судить о перекрёстных реакциях с группой сорных трав. Также аллергены полыни ответственны за перекрёстные реакции с пыльцой амброзии, маргаритки, ромашки, одуванчика, подсолнуха, календулы, девясила, череды, мать-и-мачехи, плодами цитрусовых, киви, манго,
семенем подсолнечника (в т.ч. халва), мёдом, цикорием,
петрушкой, морковью, помидорами, горохом, укропом, лесным орехом, арахисом, красным перцем. Пыльца полыни,
помимо профилина, содержит ещё один мажорный аллерген, гомологи которого широко представлены в различных
овощах и фруктах. Это Art v 3 (LTP), относящийся к группе
белков – переносчиков липидов.
Тимофеевка луговая
Среди аллергенов тимофеевки луговой мажорными являются Phl p 1 (группа I), более 95% пациентов с аллергией к пыльце трав имеют специфические IgE к этому семейству аллергенов и Phl p 5
(группа V), а минорными – Phl p 7 и Phl p 12. Аллерген Phl p12 является перекрёстно-реагирующим
аллергеном и относится к белковому семейству профилинов. Phl p12 перекрёстно реагирует с оливой европейской, свинороем пальчатым, постеницей, подсолнечником однолетним, фиником пальчатым. Профилины играют важную роль в аллергии к банану, ананасу и другим экзотическим фруктам. То есть, если у пациента развивается аллергическая реакция на белок Phl p12 Тимофеевка, то
с большой долей вероятности такая же реакция последует и на все перечисленные аллергены. Прогноз эффективности АСИТ на примере тестирования компонентов аллергенов пыльцы Тимофеевки
g6: эффективность АСИТ будет высокой для пациентов, имеющих IgE только к мажорным аллергокомпонентам Phl p 1 и Phl p 5. В случае наличия специфических IgE как к мажорным, так и к минорным компонентам, эффективность будет средней. АСИТ будет малоэффективна в случае отсутствия IgE к мажорным компонентам Phl p 1 и Phl p 5.
21
Dr. Fooke - Доктор Фооке - www.fooke.ru
Несмотря на высокую специфичность аллергенов Amb a 1 и Amb а 2, перекрёстная реактивность может отмечаться с другими растениями, также содержащими фермент пептатлиазу, среди которых томаты, кукуруза, табак и японская криптомерия. Аллерген Amb a 1 обладает схожей
структурой с аллергеном пыльцы тимофеевки Phl p 4, чем обуславливается перекрёстные аллергические реакции на пыльцу злаковых и сорных трав.
Пыльца амброзии может распространятся ветром на сотни километров от мест пыления и являться частой причиной респираторной аллергии во второй половине лета –
начале осени. Клиническими проявлениями аллергии на
пыльцу сорных трав является аллергический ринит, аллергический конъюнктивит, бронхиальная астма в период поллинации. Наиболее распространенным видом на
территории нашей страны является Амброзия полыннолистая.
Латекс
Мажорными аллергенами латекса являются Hev b 1, Hev b 2, Hev b 3, Hev b 5 и Hev b 6. Аллергены латекса могут поступать в организм человека через кожу, слизистые оболочки или парентерально – как контактным, так и аэрозольным путём. Структурный белок Hev b 5 (кислый белок)
является аллергеном среди медицинских работников и сенсибилизированных к латексу детей,
обладает выраженной IgE-связывающей активностью и перекрёстно реагирует с пищевыми аллергенами банана, авокадо, киви, персика, каштана, грецкого ореха, помидора, креветки и др.),
а также с пыльцевыми аллергенами. Белок Hev b 6 (предшественник гевеина) и гомологичные
ему пептиды содержат многие фрукты и овощи, особенно авокадо, бананы, киви, фиги, каштаны,
томаты и картофель, что приводит к возникновению фруктово-латексного синдрома. Очевидным
является тот факт, что определенные аллергены имеют отношение к конкретным клиническим
ситуациям. Так, при наличии spina bifida (SB) у детей с повышен ной чувствительностью к латексу
чаще выявляется сенсибилизация к Hev b 1, Hev b 3 и Hev b 7, у медицинского персонала с аллергией к латексу – к Hev b 1, Hev b 5, Hev b 6, а недавно показано, что и к Hev b 14 (гевамин). При
латексно фруктовом синдроме наиболее распространена чувствительность к Hev b 2 и Hev b 8.
Молекулярная аллергодиагностика
22
Особенности и применение аллергоаллерго
компонентов в молекулярной диагностики
Яд перепончатокрылых
Большинство аллергенов яда перепончатокрылых представляют собой CCD (аллергены с углеводными перекрёстно-реактивными детерминантами), которые в некоторой степени отвечают за клинически не значимый феномен IgE-опосредованной перекрёстной реактивности между ядом пчёл и ядом ос.
У пациентов с положительными результатами традиционных тестов на IgE, в которых используются экстракты аллергенов, выявление рекомбинантных аллергенов яда перепончатокрылых
поможет дифференцировать истинную сенсибилизацию от перекрёстной реактивности, обусловленной CCD.
Яд пчелы медоносной
Мажорными аллергенами яда пчелы являются Api m 1 и Api
m 2 . Аллерген Api m 1 (гликопротеин фосфолипазы А2) перекрёстно реагирует с гомологичными белками осы и шмеля. Аллерген Api m 2 (гиалуронидаза) перекрёстно реагирует с различными ядами насекомых (ос, шершней и др.). Аллергией к
яду пчелы страдает до 4% населения. У пчеловодов, относящихся к группе риска, аллергия к яду пчелы встречается в 22
- 43% случаев. Анафилактический шок развивается спустя несколько секунд или минут после ужаления.
Яд осы обыкновенной
Мажорным аллергеном яда осы является Ves v 5, одним из трёх основных аллергенов, найденных в жёлтой осе: Ves 1 (фосфолипаза A1), Ves v 2 (гиалуронидаза) и антиген Ves v 5 (антиген
5). Аллерген Ves v 5 связан аминокислотной последовательностью с гомологичными белками
включая белки из млекопитающих, рептилий, насекомых, грибков и растений. Наблюдались
больные, у которых, укус муравья вызывал сильно выраженную местную аллергическую реакцию и одновременно у этих пациентов отмечена реакция на укус осы.
Перекрёстно-реагирующие углеводные детерминанты (CCD)
Семейство белков которые используются в качестве маркера чувствительности к карбогидратным
частицам белков (пыльца, гименоптера и т.д.). Редко ассоциируемы с клиническими симптомами,
но могут вызывать неблагоприятные реакции у некоторых пациентов. Известно, что расхождение
результатов кожных Prick-тестов (SPT), анамнеза и результатов анализа in-vitro может быть обусловлено специфическими IgE-антителами к CCD. CCD вызывает в большом количестве перекрёстные реакции со всеми видами растений, пыльцы, ядов насекомых, пищевых аллергенов, латекса. Наличие CCD маркера позволит нам выявить ложноположительные реакции и исключить
только те аллергены, которые действительно будут вызывать аллергию. К примеру, если у нас CCD
маркер проявился как 2 класс реакции, а помидор и арахис – 5 класс, пшеничная мука – 2 класс,
то мы отнимаем от класса реакции продукта, класс реакции CCD маркера, и получаем: помидор,
арахис – 3 класс, пшеничная мука – отрицательный. Результат анализа влияет на дальнейшую тактику лечения, а третий класс реакции и пятый класс существенно отличаются по степени проявления клинических признаков, а вследствие и лечения. Определение специфических IgE к CCD реко-
23
Dr. Fooke - Доктор Фооке - www.fooke.ru
Особенности и применение аллергоаллерго
компонентов в молекулярной диагностики
мендовано в следующих случаях: А) положительный тест на sIgE к ядам пчелы и осы при отрицательном результате кожных прик-тестов и/или отрицательном анамнезе; Б) сенсибилизация к растительной пище (особенно к овощам и фруктам, а также семенам) без клинических симптомотических
реакций; В) сенсибилизация к латексу у лиц с аллергией на пыльцу, но без проблемы, связанной с
использованием, например, латексных перчаток; Г) пациентам с многочисленными положительными
результатами тестов определения специфических IgE-антител.
Аллергокомпоненты производства Доктор Фооке
Рекомбинантные и высоко очищенные нативные аллергены (аллергокомпаненты) производства
Dr. Fooke Laboratorien GmBH – это отдельные, синтетически созданные белки, которые входят в
состав белковых молекул окружающих нас аллергенов. Аллергокомпоненты находятся в жидкой
биотинилированной форме, готовы к использованию и предназначены для применения в реверсивном аллергосорбентном тесте «capture» REAST и/или в экспресс-аллерго-тесте ALFA.
Кат. №
ND 11
ND 12
ND 21
ND 22
RE 11
NF 24
RF 131
RF 132
RF 136
RF 139
RF 171
RF 180
RF 311
RF 491
RF 533
NFgal
RT 901
RT 301
RT 302
RG 601
RG 605
RG 607
RG 612
RG 620
RG 621
RW 601
RK 825
RK 826
RI 101
RI 102
RI 305
NF 253
Аллерген
Источник
Der p 1
Der p 2
Der f 1
Der f 2
Fer d 1
Тропомиозин
Ara h 1
Ara h 2
Ara h 6
Ara h 9
Cor a 1
Cyp c 1
Dau c 1
Mal d 1
Pru p 3
α-Gal
Ole e 1
Bet v 1
Bet v 2
Phl p 1
Phl p 5
Phl p 7
Phl p 12
Phl p 1 и Phl p 5
Phl p 7 и Phl p 12
Art v 1
Hev b 5
Hev b 6
Api m 1
Api m 2
Ves v 5
CCD
Dermatophagoides pteronyssinus
Dermatophagoides pteronyssinus
Dermatophagoides farinae
Dermatophagoides farinae
Кошка
Креветка
Арахис
Арахис
Арахис
Арахис
Фундук
Карп
Морковь
Яблоко
Персик
Галактоза-α-1,3-галактоза
Олива
Берёза
Берёза
Тимофеевка луговая
Тимофеевка луговая
Тимофеевка луговая
Тимофеевка луговая
Тимофеевка луговая
Тимофеевка луговая
Полынь обыкновенная
Латекс
Латекс
Яд пчелы
Яд пчелы
Яд осы
Пероксидаза хрена
Значение
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Минорный аллерген
Паналлерген
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Паналлерген
Паналлерген
Маркер альфа-Гал
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Минорный паналлерген
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Минорный аллерген
Минорный паналлерген
Мажорный микст
Минорный микст
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
Мажорный аллерген
CCD Маркер
Работы по расширению панели компонентов аллергенов, как самых востребованных для диагностики аллергии продолжаются. Полный, обновлённый перечень доступных аллергенов для ИФА и
ИХА смотрите на сайте компании www.fooke.ru
Молекулярная аллергодиагностика
24
Классификация аллергенов
растительного происхождения
Группа белков
Отдельные аллергены и их источники
Классификация аллергенов
животного происхождения
Группа белков
Отдельные аллергены и их источники
Проламины (2S альбумины,
LTP, ингибиторы α-амилазы
и протеазы, гидрофобный
белок сои, индолины,
α-глобулины)
Лещина (Cor a 14, Cor a 8), Платан (Pla a 3, Pla or 3), Амброзия (Amb
a 6), Полынь (Art v 3), Постенница (Par j 1,Par j 2), Гречиха (Fag e 2,
Fag t 2), Подсолнечник (Hel a 2S Albumin, Hel a 3), Злаки (Hor v 14, Hor
v 15, Hor v 21, Hor v BDAI, Ory s 14, Ory s 17kD, Ory s 19kD, Tri a 14, Tri
a 15, Tri a 29, Zea m 14, Zea m 27kD), Бобовые (Ara h 2, Ara h 6, Ara h
7, Ara h 9, Gly m 2S Albumin), Сельдерей (Api g 2), Грецкий орех (Jug n
1, Jug r 1, Jug r 3), Кунжут (Sesi 1, Sesi 2), Горчица (Bra j 1, Sin a 1, Sin
a 3), Морковь (Dau c 3), Томат (Lyc e 3), Апельсин (Cit s 3), Розоцветные (Mal d 3, Prua r 3, Pru p 3, Pyr c 3), Латекс (Hev b 12)
Тропомиозины
Моллюски (Bal r 1 Sin c 1, Myt e 1, Per v 1, Oct v 1, Cra g 1), Тараканы
(Bla g 7, Per a 7, Per f 7), Крабы (Cha f 1, Eri i 1, Eri s 1, Par c 1, Port r 1),
Клещи домашней пыли (Der f 10, Der p 10, Tyr p 10), Креветки (Lit v 1,
Mar j 1, Met e 1, Pan b 1, Pan e 1, Pen a 1)
Белки, связывающие
кальций (парвальбумины,
полькальцины, тропонин С)
Крупный рогатый скот (Bos d 3, Bos d PRVB), Креветки (Cra c 4, Cra c
6, Lit v 3, Lit v 4, Pen m 3, Pen m 4), Тараканы (Bla g 6, Bla g 8, Per a 6),
Лошади (Equ c PRVB), Куры (Gal d PRVB), Свиньи (Sus s PRVB), Рыбы
(Thu a 1, Mer ca 1, Onc m 1, Par ol 1, Sal s 1, Sco j 1, Seb m 1, Tra j 1)
Профилины
Берёза (Bet v 2), Лещина (Cor a 2), Амброзия (Amb a 8), Полынь (Art v
4), Подсолнечник (Hel a 2), Злаки (Hor v 12, Ory s 12, Tri a 12, Phl p 12,
Zea m 12), Олива (Ole e 2), Сладкий перец (Cap a 2), Морковь (Dau
c 4), Бобовые (Ara h 5, Gly m 3), Сельдерей (Api g 4), Томат (Lyc e 1),
Картофель (Sol at 8), Дыня (Cuc m 2), Розоцветные (Mal d 4, Pru p 4,
Pyr c 4), Виноград (Vit v 4), Апельсин (Cit s 2), Ананас (Ana c 1), Банан
(Mus a 1), Латекс (Hev b 8)
Группа 5 аллергенов
яда насекомых
Кошачьи блохи (Cte f 2), Перепончатокрылые (Dol a 5, Dol m 5, Vesp c
5, Pola 5, Pold 5, Pole 5, Polf 5, Polg 5, Ves m 5, Ves f 5, Ves m 5, Ves p 5,
Ves s 5 Pac c 3, Sol i 3), Слепни (Tab y 5)
Липокалины β-лактоглобулины, аллергены перхоти
млекопитающих, белки, связывающие жирные кислоты)
Клещи домашней пыли (Aca s 13, Der f 13, Der p 13, Tyr p 13), Крупный рогатый скот (Bos d 2, Bos d 5, Bub b BLG), Собаки (Can f 1, Can f
2, Can f 6), Лошади (Equ c 1 Equ c BLG), Кошки (Fel d 4, Fel d 7), Овцы
(Ovi a BLG), Тараканы (Per a 4), Крысы (Rat n 1)
Трипсиноподобные
сериновые протеазы
Перепончатокрылые (Api m 7, Pol d 4, Bom p 4), Крупный рогатый
скот (Bos d Thrombin), Собака (Can f 5), Тараканы (Bla g Trypsin), Клещи домашней пыли (Der f 3, Der f 6, Der p 3, Der p 9, Tyr p 3)
Сывороточные альбумины
Крупный рогатый скот (Bos d 6), Собаки (Can f 3), Лошади (Equ c 3),
Кошки (Fel d 2), Куры (Gal d 5), Кролики (Ory c RSA), Овцы (Ovi a SSA),
Крысы (Rat n RSA), Свиньи (Sus s PSA)
Липазы
Пальчатник (Cyn d 1, Cyn d 2, Cyn d 15), Злаки (Dac g 1, Dac g 2, Dac
g 3, Lol p 1, Lol p 2, Lol p 3, Ory s 1, Phl p 1, Phl p 2, Phl p 3, Poa p 1, Poa
p 2 , Tri a 1, Tri a 2, Zea m 1, Zea m 3), Киви (Act d 5)
Перепончатокрылые (Dol m 1, Pol a 1, Poly p 1, Ves m 1, Ves s 1, Sol i 1),
Свиньи (Sus s Lipase)
α/β-Казеины
Белки, связывающие
кальций
Берёза (Bet v 3, Bet v 4), Ольха (Aln g 4), Олива (Ole e 3, Ole e 8), Кипарис (Cup a 4), Тимофеевка (Phl p 7), Постенница (Par j 4), Амброзия (Amb a 9, Amb a 10), Полынь (Art v 5), Сирень (Syr v 3), Рапс (Вra
n 4, Bra n 7, Bra r 4)
Крупный рогатый скот (D Bos d 8 alphaS1, Bos d 8 alphaS2, Bos d 8
beta), Козы (Cap h Casein alpha S1, Cap h Casein beta), Овцы (Ovi a
Casein alphaS1, Ovi a Casein beta)
Клещевые аллергены
второй группы (NPC2)
Клещи домашней пыли (Der f 2, Der p 2, Der s 2, Eur m 2), Чесоточные
клещи (Gly d 2), Амбарные клещи (Lep d 2)
Тауматоноподобные белки
Кедр (Cry j 3, Jun a 3, Jun v 3), Кипарис (Cup a 3, Cup s 3), Олива (Ole
e 13), Пшеница (Tri a TLP), Томат (Lyc e PR23), Сладкий перец (Cap
a 1), Розоцветные (Mal d 2, Pru av 2, Pru p 2), Виноград (Vit v TLP), Киви (Act d 2)
Трансферрины
Крупный рогатый скот (Bos d Lactoferrin), Куры (Gal d 3), Крысы (Rat n
Transferrin), Утки (Ana p Conalbumin)
Гиалуронидазы
Перепончатокрылые (Api m 2, Dol m 2, Pol a 2, Ves g 2, Ves v 2), Слепни (Tab y 2)
Липопротеины
Тараканы (Bla g Vitellogenin), Клещи домашней пыли (Der p 14, Eur m
14), Куры (Gal d 6), Рыбы (Onc ke Vitellogenin, Onc mVitellogenin)
α-Лактоглобулины
Крупный рогатый скот (Bos d 4), Лошади (Equ c ALA), Куры (Gal d 4)
Купины
Лещина (Cor a 11, Cor a 9), Злаки (Fag e 1, Fag e 19kD, Fag t 1, Ory
s GLP63, Ory s NRA, Zea m G1, Zea m G 2), Бобовые (Arah 1, Ara h 3,
Ara h 4, Gly m 5, Gly m 6, Gly m Bd60K, Pha v Phaseolin, Pis s 1, Pis s 2),
Кунжут (Ses i 3, Ses i 6, Ses i 7), Грецкий орех (Jug n 2, Jug r 2, Jug r 4)
Патогенетически значимые
белки (PR-10), группа белков,
гомологичных Bet v 1
Берёза (Bet v 1), Ольха (Aln g 1), Бук (Fag s 1), Дуб (Que a 1), Каштан
(Cas s 1), Бобовые (Ara h 8, Gly m 4), Томат (Lyc e 4), Сельдерей (Api
g 1), Морковь (Dau c 1), Клубника (Fra a 1), Розоцветные (Mal d 1, Pru
ar 1, Pru p 1, Pyr c 1), Киви (Act c 8, Act d 8)
Экспансины
25
Гевеиноподобные белки
Каштан (Cas s 5), Злаки (Tri a 18, Zeam Chitinase), Репа (Bra r 2), Виноград (Vit v 5), Банан (Mus a 2, Mus xp Chitinase), Авокадо (Per s a 1),
Латекс (Hev b 6, Hev b 11)
Аллергены с углеводными
перекрёстно-реактивными
детерминантами (CCD)
Платан (Pla a 2), Олива (Ole e 1), Кипарис (Cup a 1), Кедр (Cry j 1, Cup
s 1, Jun a 1), Тимофеевка (Phl p 1, Phl p 4), Костер (Bro i 1), Пальчатник (Cyn d 1), Райграс (Lol p 1 Lol p 4), Ананас (Ana c 2), Бобовые (Ara
h 1, Pha va AI, Pha va AI.0101), Хрен (Arm rHRP)
Коллаген
Крупный рогатый скот (Bos d alpha2I), Рыбы (Onc m alpha2I, Par ol alpha2I)
Фосфолипазы А2
яда насекомых
Перепончатокрылые (Api c 1, Api m 1, Bom p 1, Bom t 1)
Группа Ole e 1 гомологичных
белков
Ясень (Fra e 1), Платан (Pla l 1), Олива (Ole e 1), Злаки (Phl p 11, Lol p
11, Zea m Zm13), Марь (Che a 1), Шафран (Cro s 1)
Папаиноподобные цистеиновые протеазы
Клещи домашней пыли (Der f 1, Der p 1, Eur m 1)
Dr. Fooke - Доктор Фооке - www.fooke.ru
Молекулярная аллергодиагностика
26
З
аключение
К
омпонентная диагностика – новый метод выявления IgE-антител к молекулярным компонентам – открывает новую эру в аллергологии. Использование цельных аллергенных экстрактов из натуральных источников не
даёт возможности точной диагностики различных клинических состояний,
обусловленных одним и тем же сенсибилизирующим микст-источником.
Точное объективное прогнозирование системных реакций, в том числе и
угрожающих жизни, возможно только при проведении анализа компонентной диагностики.
Dr. Fooke Laboratorien GmbH
Регис т р а ционно е Удо с тов ер ение
№ ФСЗ 2007/00940 от 05.05.2015
Dr. Fooke Laboratorien GmbH -Доктор Фооке
Редакция 05. 2015