ВИСМУТ-СУЛЬФИТ АГАР (ВИЛЬСОНА

КАТ № 1011
ВИСМУТ-СУЛЬФИТ АГАР (ВИЛЬСОНА-БЛЕРА)
Высокоселективная среда для выделения сальмонелл, в
частности Salmonella thyphi, из клинического материала
и еды
СОСТАВ В ГРАММАХ НА ЛИТР (Г/Л)
Бактериологический пептон
Висмут сульфит индикатор
Говяжий экстракт
Декстроза
pH 7.5 ± 0.2 при 25°C
10.00
8.00
5.00
5.00
Двунатриевый фосфат
Сульфат железа
Бриллиантовый зеленый
Бактериологический агар
4.00
0.30
0.025
20.00
ПРИГОТОВЛЕНИЕ
Растворить 52.3 г среды в одном литре дистиллированной воды. Хорошо
перемешать и растворить нагреванием при частом перемешивании. Кипятить в течение
одной минуты до полного растворения. Во избежание перегрева НЕ
АВТОКЛАВИРОВАТЬ. Остудить до 45 ° C (очень важно), хорошо перемешать и разлить
в чашки. Готовая среда должна храниться при 8-15 °С. Цвет готовой среды белый
непрозрачный с зеленым оттенком.
Обезвоженная среда должна быть однородной, сыпучей и светло-зеленого цвета.
При обнаружении каких-либо физических изменений следует отказаться от использования
среды.
ПРИМЕНЕНИЕ
АГАР ВИСМУТ-СУЛЬФИТНЫЙ является модификационной средой, которая
используется для обнаружения большинства Salmonella, в частности Salmonella typhi.
Пептон и говяжий экстракт содержат азот, витамины, минералы и аминокислоты,
важные для роста. Декстроза является ферментативным карбогидратом, источником
углерода и энергии, висмут сульфит – индикатор, бриллиантовый зеленый ингибирует
грамположительные бактерии и представителей группы колиформ. Динатрий фосфат
действует в качестве буферной системы и Бактериологический агар - связующий агент.
Сульфат железа включен для обнаружения образования H2S. Когда H2S
присутствует, Salmonella spp превращает соли железа в сульфат железа, который образует
черные колонии и превращает висмут индикатор в металлический висмут, придающим
яркий блеск вокруг колоний.
Как правило, посев на висмут-сульфитный агар делают штрихованием,
чтобы получить изолированные колонии, может быть использован поверхностный метод,
для этого смешивают образец с жидкой средой и дают застыть в чашке Петри. Все чашки
инкубируют в течение 40 - 48 ч при 35 ± 2 ° С. Затвердевшие чашки должны быть
однородными, непрозрачными, цвет от кремового до бледно-зеленого. При хранении в
холоде, среда будет медленно окисляться. Рекомендуется держать чашки в холодильнике
4 дня перед использованием, чтобы уменьшить ингибирование и, таким образом, чтобы
иметь возможность выделить Salmonella из менее загрязненных образцов.
Колонии бактерий S. typhi черные, окружены черной или коричневой зоной, с
металлическим блеском. В тяжелых условиях роста они могут выглядеть как светлозеленые колонии. Другие штаммы Salmonella образуют темно-зеленые колонии
практически без затемнения среды. Shigella spp, кроме Shigella flexneri и Shigella sonnei, не
растут. Рост E.coli частично подавляется, но иногда растет коричневыми или
зеленоватыми блестящими колониями. Некоторые штаммы Enterobacter могут расти в
виде выпуклых, слизистых колоний, имеющих серебристый блеск (более светлый чем
у бактерий S. typhi). Колонии колиформных бактерий, которые образуют H2S, образуют
колонии похожие на S. typhi. Они могут быть легко дифференцированы, поскольку они
образуют газ с лактозной средой, например, Агаром тройным сахарным железным
(Кат.1046) или Агаром железным Клигера (Кат. 1042). Гидролиз мочевины в Мочевом
бульоне (Кат. 1226) или Основе мочевого агара (Cat. 1110) может быть использован для
идентификации Proteus spp.
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ТЕСТ
Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых
культурах после инкубации при температуре 35 ± 2 ° C и наблюдались через 40-48 часов
Цвет колонии
Микроорганизмы
Рост
Escherichia coli ATCC 25922
Частично
Коричнево-зеленый
подавлен
Salmonela enteriditis ATCC 13076
Хороший
Черный с ярким
металлическим
Salmonela typhi ATCC 19430
Хороший
Черный с ярким
металлическим
Shigela flexneri ATCC 12022
Частично
Коричневый
подавлен
Enterococcus faecalis ATCC 29212
Нулевой
БИБЛИОГРАФИЯ
Wilson, W.J., and E.M. Blair 1.926 A combination of Bismuth and Sodium Sulfite affording an
enrichment and selective medium for the typhoid-paratyphoid groups of bacteria. J. Pathol.
Bactend 29:310.
United States Pharmacopoeia Convention 1.995. The United States Pharmacopoeia 23rd ed.
ХРАНЕНИЕ
После вскрытия хранить порошкообразную среду закрытой, чтобы избежать
гидратации