184 Áþëëåòåíü ýêñïåðèìåíòàëüíîé áèîëîãèè è ìåäèöèíû, 2009, ¹ 8, ïðèëîæåíèå ÄÎÊËÈÍÈ×ÅÑÊÈÅ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß ÎÁÙÅÒÎÊÑÈ×ÅÑÊÈÕ ÑÂÎÉÑÒ ÏÐÅÏÀÐÀÒΠÑÂÅÐÕÌÀËÛÕ ÄÎÇ ÀÍÒÈÒÅË Ê ÝÍÄÎÃÅÍÍÛÌ ÐÅÃÓËßÒÎÐÀÌ Ã.Â.Êàðïîâà, Ò.È.Ôîìèíà, Ò.Â.Âåòîøêèíà, Ò.Þ.Äóáñêàÿ, Î.Ë.Âîðîíîâà, Å.À.Òèìèíà, Å.Â.Àáðàìîâà, Ë.À.Åðìîëàåâà, À.Â.Ïåðîâà ÃÓ ÍÈÈ ôàðìàêîëîãèè ÒÍÖ ÑÎ ÐÀÌÍ, Òîìñê Ïðîâåäåíî äîêëèíè÷åñêîå èçó÷åíèå áåçîïàñíîñòè 6 ïðåïàðàòîâ ñâåðõìàëûõ äîç àíòèòåë ê ýíäîãåííûì ðåãóëÿòîðàì. Ïîêàçàíî, ÷òî îíè ÿâëÿþòñÿ îòíîñèòåëüíî áåçâðåäíûìè, õîðîøî ïåðåíîñÿòñÿ æèâîòíûìè â äîçàõ, áîëåå ÷åì â 1000 ðàç ïðåâûøàþùèõ òåðàïåâòè÷åñêóþ äîçó äëÿ ÷åëîâåêà, è íå îêàçûâàþò îáùåòîêñè÷åñêîãî äåéñòâèÿ íà îðãàíèçì ëàáîðàòîðíûõ æèâîòíûõ. Êëþ÷åâûå ñëîâà: ñâåðõìàëûå äîçû àíòèòåë, îñòðàÿ òîêñè÷íîñòü, õðîíè÷åñêàÿ òîêñè÷íîñòü, ìåñòíîðàçäðàæàþùåå äåéñòâèå, äîêëèíè÷åñêîå èññëåäîâàíèå  íàñòîÿùåå âðåìÿ ê êëèíè÷åñêîìó ïðèìåíåíèþ ðàçðåøåí ðÿä ïðåïàðàòîâ, îòíîñÿùèõñÿ ê íîâîìó êëàññó ëåêàðñòâåííûõ ñðåäñòâ ñâåðõìàëûõ äîç àíòèòåë (ÑÌÄ ÀÒ) [8,9]. Öåëüþ íàñòîÿùåãî èññëåäîâàíèÿ áûëî èçó÷åíèå îáùåòîêñè÷åñêîãî äåéñòâèÿ (îñòðàÿ, õðîíè÷åñêàÿ òîêñè÷íîñòü è ìåñòíîðàçäðàæàþùåå äåéñòâèå) 6 ïðåïàðàòîâ ÑÌÄ ÀÒ. ÌÅÒÎÄÈÊÀ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß Èññëåäîâàíèÿ ïðîâåäåíû â ñîîòâåòñòâèè ñ ìåòîäè÷åñêèìè óêàçàíèÿìè ïî èçó÷åíèþ îáùåòîêñè÷åñêîãî äåéñòâèÿ ôàðìàêîëîãè÷åñêèõ âåùåñòâ [6]. Èñïûòóåìûå ëåêàðñòâåííûå ñðåäñòâà: àíàôåðîí (ÑÌÄ ÀÒ ê ÈÔÍ-γ â ðàçâåäåíèÿõ Ñ12+ Ñ30+Ñ200), àðòðîôîîí (ÑÌÄ ÀÒ ê ÔÍÎ-α â ðàçâåäåíèÿõ Ñ12+Ñ30+Ñ200), àôàëà (ÑÌÄ ÀÒ ê ïðîñòàòîñïåöèôè÷åñêîìó àíòèãåíó â ðàçâåäåíèÿõ Ñ12+Ñ30+Ñ200), èìïàçà (ÑÌÄ ÀÒ ê NO-ñèíòàçå â ðàçâåäåíèÿõ Ñ12+Ñ30+Ñ200), ïîýòàì (ÑÌÄ ÀÒ ê ýðèòðîïîýòèíó â ðàçâåäåíèÿõ Ñ12+Ñ30+Ñ200) è ïðîïðîòåí-100 (ÑÌÄ ÀÒ ê áåëêó S-100 â ðàçâåäåíèÿõ Ñ1000) ïðåäñòàâëÿþò ñîáîé áåñöâåòíóþ æèäêîñòü ãîìåîïàòè÷åñêèå ðàçâåäåíèÿ àôôèííîî÷èùåííûõ àíòèòåë ê ñîîòâåòñòâóþùèì ýíäîãåííûì ðåãóëÿòîðàì â ðàñòâîðå (ýêâèâàëåíòíàÿ êîíöåíòðàöèÿ 1024 ìàññîâûõ äîëåé). Ýêñïåðèìåíòû ïîñòàâëåíû íà ïîëîâîçðåëûõ áåëûõ íåëèíåéíûõ êðûñàõ è ìûøàõ ðàçâîäêè ëàáîðàòîðèè ýêñïåðèìåíòàëüíîãî áèîìîäåëèðî- âàíèÿ ÍÈÈ ôàðìàêîëîãèè ÒÍÖ ÑÎ ÐÀÌÍ, à òàêæå íà êðîëèêàõ ïîðîäû øèíøèëëà ðàçâîäêè ïèòîìíèêà Ðàññâåò (ã. Òîìñê). Ñîäåðæàíèå èõ îñóùåñòâëÿëîñü â ñîîòâåòñòâèè ñ ïðàâèëàìè, ïðèíÿòûìè Åâðîïåéñêîé êîíâåíöèåé ïî çàùèòå ïîçâîíî÷íûõ æèâîòíûõ (Ñòðàñáóðã, 1986). Îñòðóþ òîêñè÷íîñòü èñïûòóåìûõ ïðåïàðàòîâ îïðåäåëÿëè ïðè îäíîêðàòíîì (àðòðîôîîí, ïðîïðîòåí-100) èëè äâóêðàòíîì ÷åðåç 3 ÷ (àíàôåðîí, àôàëà, èìïàçà, ïîýòàì) ââåäåíèè ïðåïàðàòîâ â ìàêñèìàëüíî äîïóñòèìîì îáúåìå â çàâèñèìîñòè îò ïóòè ââåäåíèÿ [6]: ìûøàì âíóòðèæåëóäî÷íî â äîçå 25 ìë/êã è âíóòðèáðþøèííî â äîçå 50 ìë/êã; êðûñàì âíóòðèæåëóäî÷íî â äîçå 15 ìë/êã è âíóòðèáðþøèííî â äîçå 25 ìë/êã. Ïðè èññëåäîâàíèè õðîíè÷åñêîé òîêñè÷íîñòè ïðåïàðàòû ÑÌÄ ÀÒ ââîäèëè êðûñàì â äîçàõ 7.5 è 15.0 ìë/êã (ïåðâàÿ äîçà áëèçêà ê ýôôåêòèâíîé, âòîðàÿ ñîîòâåòñòâóåò ìàêñèìàëüíî äîïóñòèìîìó îáúåìó äëÿ âíóòðèæåëóäî÷íîãî ââåäåíèÿ) 7 ðàç â íåäåëþ.  êîíòðîëüíîé ãðóïïå ââîäèëè äèñòèëëèðîâàííóþ âîäó â îáúåìå 15 ìë/êã. Êðîëèêè ïîëó÷àëè ëåêàðñòâåííûå ïðåïàðàòû â äîçå ñóòî÷íîé íîðìû ïèòüÿ 50 ìë/êã åæåäíåâíî (âîäó ýòèì æèâîòíûì íå äàâàëè) â òå÷åíèå 6 ìåñ.  êàæäóþ ãðóïïó âõîäèëî 10 æèâîòíûõ (5 ñàìöîâ è 5 ñàìîê). Î òîêñè÷íîñòè èñïûòóåìûõ ñðåäñòâ ñóäèëè ïî îáùåìó ñîñòîÿíèþ, äèíàìèêå îáùåé ìàññû, òåìïåðàòóðå òåëà, äàííûì èññëåäîâàíèÿ ïîêàçà- 185 òåëåé ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè, êîñòíîãî ìîçãà, ôóíêöèè ïå÷åíè, ïî÷åê, ÖÍÑ, ñåðäöà (ÝÊÃ), à òàêæå ïî ðåçóëüòàòàì ìîðôîëîãè÷åñêîãî èññëåäîâàíèÿ âíóòðåííèõ îðãàíîâ è èõ ìàññû (ãîëîâíîé ìîçã, ñåðäöå, ëåãêîå, ïå÷åíü, òèìóñ, ñåëåçåíêà, ïî÷êè, æåëóäî÷íî-êèøå÷íûé òðàêò, íàäïî÷å÷íèêè, ïîëîâûå æåëåçû, ïîäæåëóäî÷íàÿ è ùèòîâèäíàÿ æåëåçà, ãèïîôèç) [2-5,10]. Èññëåäîâàíèÿ êðûñ ïðîâîäèëè ÷åðåç 3 è 6 ìåñ ââåäåíèÿ ïðåïàðàòîâ è ÷åðåç 2 íåä ïîñëå èõ îòìåíû. Êðûñ çàáèâàëè ïóòåì äåêàïèòàöèè ïîä ýôèðíûì íàðêîçîì. Ó êðîëèêîâ ÷åðåç 3 è 6 ìåñ ââåäåíèÿ çàáèðàëè êðîâü èç êðàåâîé âåíû óõà äëÿ îïðåäåëåíèÿ ïàðàìåòðîâ îáùåãî àíàëèçà êðîâè è áèîõèìè÷åñêèõ ïîêàçàòåëåé. ×åðåç 6 ìåñ ïðîèçâîäèëè ýâòàíàçèþ êðîëèêîâ (âíóòðèâåííîå ââåäåíèå íàñûùåííîãî ðàñòâîðà KCl, 1 ìë/êã). Ïîñëå îñòàíîâêè ñåðäöà æèâîòíûõ âñêðûâàëè, ïðîèçâîäèëè çàáîð ìî÷è äëÿ áèîõèìè÷åñêîãî èññëåäîâàíèÿ è âíóòðåííèõ îðãàíîâ äëÿ èõ ìàêðî- è ìèêðîñêîïè÷åñêîãî èçó÷åíèÿ. Ïîëó÷åííûå ïðè èññëåäîâàíèè öèôðîâûå äàííûå îáðàáàòûâàëè ñ ïðèìåíåíèåì t êðèòåðèÿ Ñòüþäåíòà è êðèòåðèÿ ÌàííàÓèòíè [1]. ÐÅÇÓËÜÒÀÒÛ ÈÑÑËÅÄÎÂÀÍÈß Îäíîêðàòíîå ââåäåíèå èñïûòóåìûõ ñðåäñòâ â ìàêñèìàëüíî âîçìîæíûõ äîç íå âûçûâàëî ëåòàëüíîñòè æèâîòíûõ, ÷òî íå ïîçâîëèëî óñòàíîâèòü ïàðàìåòðû îñòðîé òîêñè÷íîñòè ïðåïàðàòîâ.  ñâÿçè ñ ýòèì çà ËÄ50 ìîæíî óñëîâíî ïðèíÿòü âåëè÷èíó áîëüøóþ ââåäåííûõ ìàêñèìàëüíî äîïóñòèìûõ äîç ïðåïàðàòîâ ñîîòâåòñòâåííî ïóòè ââåäåíèÿ, ÷òî äàåò îñíîâàíèå îòíåñòè èçó÷åííûå ëåêàðñòâåííûå ñðåäñòâà ñîãëàñíî ÃÎÑÒ 12.1.00776 ê 4-ìó êëàññó (ìàëîîïàñíûå âåùåñòâà) [7]. Ïðè èññëåäîâàíèè õðîíè÷åñêîé òîêñè÷íîñòè âûÿâëåíî, ÷òî ââåäåíèå èñïûòóåìûõ ïðåïàðàòîâ åæåäíåâíî â äîçàõ 7.5 è 15.0 ìë/êã âíóòðèæåëóäî÷íî êðûñàì è ïðè ïîòðåáëåíèè ýòèõ ïðåïàðàòîâ êðîëèêàìè â äîçå 50 ìë/êã â òå÷åíèå 6 ìåñ íå âûçûâàëî ãèáåëè æèâîòíûõ; íå íàáëþäàëîñü èçìåíåíèÿ ïîâåäåíèÿ, àïïåòèòà, âûäåëåíèé, ñîñòîÿíèÿ ñëèçèñòûõ, øåðñòè, êîæè è äð. Íå âûÿâëåíî ïàòîëîãè÷åñêèõ èçìåíåíèé èçó÷åííûõ ïîêàçàòåëåé, õàðàêòåðèçóþùèõ ôóíêöèè îñíîâíûõ âíóòðåííèõ îðãàíîâ è ñèñòåì (òåìïåðàòóðà è ìàññà òåëà, ñîñòîÿíèå ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè, êîñòíîãî ìîçãà, ïå÷åíè, ïî÷åê, ÝÊÃ, ÖÍÑ). Ïàòîìîðôîëîãè÷åñêîå (ìàêðî- è ìèêðîñêîïè÷åñêîå) èññëåäîâàíèå êðûñ è êðîëèêîâ ÷åðåç 6 ìåñ ââåäåíèÿ ïðåïàðàòîâ è êðûñ íå ìåíåå ÷åì ÷åðåç 2 íåä ïîñëå îòìåíû êóðñà íå âûÿâèëî ïàòîëîãè÷åñêèõ èçìåíåíèé îñíîâíûõ âíóòðåííèõ îðãàíîâ. Ãèñòîëîãè÷åñêîå èññëåäîâàíèå ìåñòà ââåäåíèÿ ïðåïàðàòîâ ïîêàçàëî, ÷òî îíè íå îáëàäàþò ìåñòíîðàçäðàæàþùèì äåéñòâèåì íà ñëèçèñòóþ îáîëî÷êó æåëóäêà. Âìåñòå ñ òåì ñëåäóåò îòìåòèòü ðÿä èçìåíåíèé, âûçûâàåìûõ íåêîòîðûìè èñïûòóåìûìè ïðåïàðàòàìè ïðè äëèòåëüíîì ââåäåíèè â áîëüøîé äîçå. Òàê, ÷åðåç 6 ìåñ ââåäåíèÿ àíàôåðîíà ó êðûñ âûÿâëåíî óìåðåííîå îáðàòèìîå ñíèæåíèå â êîñòíîì ìîçãå ñðåäíèõ âåëè÷èí ñîäåðæàíèÿ íåçðåëûõ è çðåëûõ íåéòðîôèëüíûõ ãðàíóëîöèòîâ. Âûÿâëåííûé ôàêò íå ÿâëÿåòñÿ ñïåöèôè÷åñêèì òîêñè÷åñêèì ïðîÿâëåíèåì äåéñòâèÿ Òàáëèöà 1. Ìàññà òåëà êðûñ (ã, ÷èñëèòåëü) è ïðèðîñò ìàññû (%, çíàìåíàòåëü) â òå÷åíèå ââåäåíèÿ àôàëû (̱m) Ñðîê èññëåäîâàíèÿ Äîçà, ìë/êã Êîíòðîëü ñàìöû ñàìêè 7.5 15.0 ñàìöû ñàìêè ñàìöû ñàìêè Äî ââåäåíèÿ 281±5 228±6 273±7 227±5 268±6 230±3 3 ìåñ 448±14 359±11 460±12 334±9 454±22 325±5 61±4 57±5 73±5 48±3 72±6 42±2* 4 ìåñ 482±20 367±14 502±14 354±9 484±19 334±9 73±6 61±5 89±6 57±3 85±6 46±3*+ 498±18 376±13 519±14 357±10 500±21 345±7 79±5 65±6 95±7 59±4 91±7 51±2* 517±14 386±16 533±14 363±10 508±19 346±7 83±5 69±6 101±6* 61±3 94±6 52±2*+ 521±20 414±22 533±24 370±16 537±17 338±5 87±3 86±8 105±10 61±5* 112±7* 53±2* 5 ìåñ 6 ìåñ ×åðåç 2 íåä ïîñëå êóðñà Ïðèìå÷àíèå. Çäåñü è â òàáë. 2, 3: p<0.05 ïî ñðàâíåíèþ ñ *êîíòðîëåì, +ñàìêàìè îïûòíûõ ãðóïï. 186 Áþëëåòåíü ýêñïåðèìåíòàëüíîé áèîëîãèè è ìåäèöèíû, 2009, ¹ 8, ïðèëîæåíèå Òàáëèöà 2. Ìàññà òåëà êðûñ (ã, ÷èñëèòåëü) è ïðèðîñò ìàññû (%, çíàìåíàòåëü) â òå÷åíèå ââåäåíèÿ èìïàçû (̱m) Ñðîê èññëåäîâàíèÿ Äîçà, ìë/êã Êîíòðîëü 7.5 ñàìöû ñàìêè Äî ââåäåíèÿ 190.9±6.1 197.3±9.1 200.0±8.0 202.7±4.9 198.0±6.9 200.7±5.3 3 ìåñ 439.1±11.5 310.9±9.8 444.7±13.1 325.8±5.3 445.0±6.4 322.7±7.8 131.7±8.1 59.4±5.6 124.7±6.3 61.1±3.5 129.7±8.3 61.1±2.2 4 ìåñ 453.8±8.7 312.5±15.1 475.5±18.6 320.0±5.4 473.3±5.8 348.2±9.3* 135.4±8.0 55.2±5.4 137.3±7.9 58.4±4.7 154.2±11.4 71.0±3.2* 5 ìåñ 456.3±19.5 326.3±17.0 507.3±18.1 328.8±5.2 498.9±7.9 364.6±11.7 135.5±8.9 61.6±4.7 153.1±7.5 62.7±4.7 168.2±13.0* 78.9±4.3* 382.0±17.2 6 ìåñ ×åðåç 2 íåä ïîñëå êóðñà ñàìöû 15.0 ñàìêè ñàìöû ñàìêè 506.7±6.7 335.0±20.2 538.0±17.4 347.5±8.5 525.0±9.6 148.6±14.9 77.8±9.4 164.8±15.8 64.1±5.4 192.9±11.1* 92.7±7.6 490.0±5.8 335.0±20.2 528.0±13.9 337.5±2.5 517.5±6.3* 374.0±22.1 140.0±14.6 77.8±9.4 160.2±15.8 59.6±6.1 188.7±10.1* 87.9±5.9 Òàáëèöà 3. Ñîäåðæàíèå ýîçèíîôèëîâ (ã/ë) â ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè êðûñ ÷åðåç 6 ìåñ ââåäåíèÿ ïîýòàìà è ÷åðåç 2 íåä ïîñëå åãî îòìåíû (̱m) Ñðîê èññëåäîâàíèÿ Äîçà, ìë/êã Êîíòðîëü ñàìöû 7.5 ñàìêè ñàìöû 15.0 ñàìêè ñàìöû ñàìêè 6 ìåñ 0.87±0.24 0.43±0.09 0.24±0.09* 0.27±0.06 0.36±0.12* 0.18±0.05* ×åðåç 2 íåä ïîñëå êóðñà 0.59±0.14 0.44±0.11 0.24±0.09* 0.19±0.03* 0.39±0.13 0.10±0.09* ïðåïàðàòà, ò.ê. ÷èñëî ëåéêîöèòîâ â ïåðèôåðè÷åñêîé êðîâè íå èçìåíÿëîñü.  òå÷åíèå 6 ìåñ ââåäåíèÿ àôàëû ó êðûñ-ñàìîê âûÿâëåíî äîçîçàâèñèìîå ñíèæåíèå ïðîöåíòà ïðèðîñòà îáùåé ìàññû â êîíöå ýêñïåðèìåíòà (òàáë. 1). Èìïàçà ïðè äëèòåëüíîì ââåäåíèè â ìàêñèìàëüíî äîïóñòèìîì îáúåìå êðûñàì (ñàìöàì è ñàìêàì) âûçûâàëà àíàáîëè÷åñêèé ýôôåêò (òàáë. 2). Ñëåäóåò îáðàòèòü âíèìàíèå íà ñíèæåíèå ÷èñëà ýîçèíîôèëîâ (òàáë. 3) ó êðûñ ïîñëå äëèòåëüíîãî ââåäåíèÿ ïîýòàìà, íå âûõîäèâøåå, îäíàêî, çà ïðåäåëû íîðìû. Òàêèì îáðàçîì, äîêëèíè÷åñêîå èçó÷åíèå òîêñè÷åñêèõ ñâîéñòâ ëåêàðñòâåííûõ ïðåïàðàòîâ ÑÌÄ ÀÒ ê ýíäîãåííûì ðåãóëÿòîðàì ôóíêöèé ïîêàçàëî, ÷òî îíè ÿâëÿþòñÿ îòíîñèòåëüíî áåçâðåäíûìè, õîðîøî ïåðåíîñÿòñÿ æèâîòíûìè â äîçàõ, çíà÷èòåëüíî (áîëåå ÷åì â 1000 ðàç) ïðåâûøàþùèõ òåðàïåâòè÷åñêóþ äîçó äëÿ ÷åëîâåêà, íå îêàçûâàþò îáùåòîêñè÷åñêîãî äåéñòâèÿ. Âûÿâëåííûå åäèíè÷íûå íàðóøåíèÿ ïîñëå äëèòåëüíîãî ââåäåíèÿ íåêîòîðûõ ïðåïàðàòîâ â ÌÏÄ íå ÿâëÿþòñÿ ïðîòèâîïîêàçàíèåì ê èõ êëèíè÷åñêîìó ïðèìåíåíèþ. ËÈÒÅÐÀÒÓÐÀ 1. Áåëåíüêèé Ì.Ë. Ýëåìåíòû êîëè÷åñòâåííîé îöåíêè ôàðìàêîëîãè÷åñêîãî ýôôåêòà. Ë., 1963. 2. Áåðõèí Å.Á., Èâàíîâ Þ.È. Ìåòîäû ýêñïåðèìåíòàëüíîãî èññëåäîâàíèÿ ïî÷åê è âîäíî-ñîëåâîãî îáìåíà. Áàðíàóë, 1972. 3. Ãîëüäáåðã Ä.È., Ãîëüäáåðã Å.Ä., Øóáèí Í.Ã. Ãåìàòîëîãèÿ æèâîòíûõ. Òîìñê, 1973. 4. Êîëá Â.Ã., Êàìûøíèêîâ Â.Ñ. Êëèíè÷åñêàÿ áèîõèìèÿ. Ìèíñê, 1982. 5. Ïîêàçàòåëè íîðìû ó ëàáîðàòîðíûõ æèâîòíûõ â òîêñèêîëîãè÷åñêîì ýêñïåðèìåíòå / Ïîä ðåä. È.Ì.Òðàõòåíáåðã è äð. Ì., 1978. 6. Ðóêîâîäñòâî ïî ýêñïåðèìåíòàëüíîìó (äîêëèíè÷åñêîìó) èçó÷åíèþ íîâûõ ôàðìàêîëîãè÷åñêèõ âåùåñòâ / Ïîä ðåä. Ð.Ó.Õàáðèåâà. Ì., 2005. 7. Óëàíîâà È.Ï., Àâèëîâà Ã.Ã., Òóòàðèêîâà Â.À. Ìåòîäû îïðåäåëåíèÿ òîêñè÷íîñòè è îïàñíîñòè õèìè÷åñêèõ âåùåñòâ. Ì., 1970. 8. Ýïøòåéí Î.È. Íåéðîôèçèîëîãè÷åñêèå ìåõàíèçìû ôàðìàêîëîãè÷åñêèõ ýôôåêòîâ ïîòåíöèðîâàííûõ (ãîìåîïàòèçèðîâàííûõ) àíòèòåë ê ìîçãîñïåöèôè÷åñêîìó áåëêó S-100. Àâòîðåô. äèñ. ... êàíä. ìåä. íàóê. Òîìñê, 1999. 9. Ýïøòåéí Î.È., Øòàðê Ì.Á., Äûãàé À.Ì. è äð. Ôàðìàêîëîãèÿ ñâåðõìàëûõ äîç àíòèòåë ê ýíäîãåííûì ðåãóëÿòîðàì ôóíêöèé. Ì., 2005. 10. Brady J.K., Nauta W.J.H. // J. Ñomp. Physiol. 1953. Vol. 46, N 3. P. 339-340.