Молекулярные основы патологии
реклама
Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Сибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО СибГМУ Минздрава России) Научно­образовательный курс Молекулярные основы патологии При поддержке Федеральной целевой программы «Научные и научно­ педагогические кадры инновационной России» на 2009 – 2013 годы» Соглашение на предоставление гранта от 23 октября 2012 г. № 8302 Томск, 2013 Cоциально-значимые заболевания ­ это болезни, возникновение и (или) распространение которых в определяющей степени зависит от социально­ экономических условий. Перечень социально-значимых заболеваний Код заболеваний по МКБ-10 Наименование заболевания 1. А 15­А 19 туберкулез 2. А 50­А 64 инфекции, передающиеся преимущественно половым путем 3. В 16; В 18.0; В 18.1 гепатит В 4. В 17.1; В 18.2 гепатит С 5. В 20­В 24 болезнь, вызванная вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) 6. С 00­С 97 злокачественные новообразования 7. Е 10­Е 14 сахарный диабет 8. F 00­F 99 психические расстройства и расстройства поведения 9. I 10­I 13.9 болезни, характеризующиеся повышенным кровяным давлением ПРАВИТЕЛЬСТВО РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ПОСТАНОВЛЕНИЕ от 1 декабря 2004 г. N 715 Злокачественные новообразования в Российской Федерации 4 Современный глобальный взгляд на злокачественные опухоли постепенно перемещается: от диагностики и лечения к предупреждению и прогнозированию заболевания В связи с этим особое внимание уделяется вопросу своевременной диагностики предрасположенности к заболеванию, либо диагностики до клинических проявления (на более ранней стадии). 5 Опухолевые маркеры Tumor markers Молекулярные маркеры Опухолевые маркёры (онкомаркеры) представляют собой группу белков, гормонов, ферментов, рецепторов и других продуктов клеточного метаболизма, которые могут вырабатываться только клетками опухоли, или наряду с нормальными клетками только в повышенном количестве. От соединений, продуцируемых нормальными клетками, они отличаются: или качественно (опухолеспецифичные) или количественно (ассоциированные с опухолью, но присутствующие также и в нормальных клетках). 7 История открытия Интенсивные исследования маркеров начались с 1963 г. после открытия акад. Г.И. Абелевым маркера рака печени – α­ фетопротеина (АФП). Первый опухолевый маркер был описан в 1846 г. врачом Бенс­Джонсом, обнаружившим избыток особого белка в моче больной множественной миеломой. 8 «Идеальный» опухолевый маркер - надежность и воспроизводимость; - широкий аналитический диапазон; - разумная стоимость и умеренная занятость персонала; - высокая специфичность ˃95%; - высокая чувствительность ˃50%; - положительные и отрицательные оптимальные прогностические показатели; - корреляция с массой опухоли; - экологически неагрессивные реагенты и упаковка. К сожалению, до сих пор не охарактеризован ни один опухолевый маркер, обладающий 100% специфичностью по отношению к какому-либо органу (исключением можно считать простатический специфический антиген (ПСА)). 9 Направления использования онкомаркеров: •Проверка эффективности терапии •Мониторинг течения заболевания •Идентификация резидуальных опухолей. Неадекватное слабое снижение уровня опухолевого маркера или отсутствие такового вообще говорит либо о неполном удалении опухоли, либо о наличии множественных опухолей •Раннее выявление. Использование опухолевых маркеров дает возможность раннего выявления ряда опухолей, например: первичной гепатоцеллюлярной карциномы у пациентов с циррозом печени; карциномы простаты у пациентов с аденомой простаты; карциномы толстого кишечника у пациентов с полипозом кишечника •Прогнозирование некоторых опухолей 10 Классификации опухолевых маркеров I II (1) генетические маркеры По своей природе: •иммунологические ­ ассоциированные с опухолью антигены или антитела к ним; •гормоны ­ (ХГЧ, адренокортикотропный гормон); •ферменты ­ фосфатазы, лактатдегидрогеназы и др.; •продукты обмена ­ креатин, гидроксипролин, полиамины, свободная ДНК; •белки плазмы ­ ферритин, церулоплазмин, β2­микроглобулин; •белковые продукты распада опухолей при наследственных и ненаследственных опухолях; (2) клеточные и тканевые маркеры; (3) эпигенетические маркеры; (4) циркулирующие опухолевые маркеры. 11 Общая классификация опухолевых маркеров (III): 1. Онкофетальные антигены (АФП, СЕА, панкреатичнеский онкофетальный антиген, фетальный сульфогликопротеин и др.); 2. Опухоль ассоциированные антигены (CA125, CA19­9, CA15­3, CA72­4 CA50, простат специфический ангиген (PSA) и др.); 3. Гормоны (β-ХГЧ, кальцитонин, плацентарный лактоген и др.); 4. Рецепторы гормонов (рецепторы к эстрогену, рецепторы к прогестерону и др.); 5. Ферменты и изоферменты (α­амилаза, простатическая кислая фосфатаза (PAP), нейрон енолазы (NSE), гликозилтрансферазы, плацентарная щелочная фосфатаза (PALP), лизоцим и др.); 6. Белки сыворотки и тканей (β2-микроглобулин, парапротеины, белок S­100, ферритин, продукты деградации фибриногена и др.); 7. Другие биомолекулы, например, полиамины 12 Маркер Мониторинг опухоли CEA Колоректальный рак, рак легкого, рак молочной железы СА­125 Рак яичников СА15­3, 27, 29 Рецидив рака молочной железы АФП Герминативные опухоли, рак печени Общий ПСА Скрининг и мониторинг рака предстательной железы Свободный ПСА Дифференциальный диагноз рака и доброкачественной гиперплазии предстательной железы Рецепторы гормонов Определяет терапию рака молочной железы MMP 22, BTA, FDP Мониторинг рецидива рака мочевого пузыря Только несколько маркеров опухоли выдержали испытание временем и вступили в диагностические алгоритмы или управленческие алгоритмы для клиницистов. 13 Онкофетальный антиген: АФП Альфа-фетопротеин • Гликопротеин с молекулярной массой 70 000 дальтон • Является физиологическим продуктом желточного мешка, печени и ЖКТ плода • В организме взрослого человека АФП отсутствует или обнаруживается в минимальных количествах • АФП является специфическим маркером эмбриональной карциномы: гепатоцеллюлярная аденокарцинома тератобластома дисгерминома стромально-клеточные опухоли 14 Опухоль ассоциированные антигены: СА-125 Опухолевый антиген 125 • Гликопротеин с молекулярной массой 200 000 дальтон • Получен и охарактеризован благодаря гибридомной технологии, используя мышинное моноклональное антитело ОС 125 • Синтезируется в целомическом эпителии плода, в незначительном количестве в эпителиальных клетках дыхательных путей у взрослого человека СА 125 – основной опухолевый маркер при серозной карциноме яичника СА--125 СА рак молочной железы (17,9%) колоректальный рак (15,1%) рак поджелудочной железы (52,6%) рак эндоментрия (31,8%) рак пищевода (10,5%) рак печени (15,1%) рак легкого (29,5%) 15 Опухоль ассоциированные антигены: PSA Простатический специфический антиген - белок, который образуется в нормальных клетках предстательной железы и выделяется в ее протоки. свободный ПСА в крови связанный с α­1­антихимотрипсином Общий ПСА связанный с α­2­макроглобулином Норма: 4 мг/мл ПСА обладает органной специфичностью, но не раковой специфичностью 16 Применение ПСА в клинической практике Простатический специфический антиген 1. Мониторинг эффективности терапии рака предстательной железы 2. Мониторинг состояния пациентов с гипертрофией предстательной железы в целях как можно более раннего обнаружения рака предстательной железы Динамическое исследование уровня ПСА у больных раком предстательной железы позволяет выявлять доклиническое развитие рецидива болезни раньше, чем при использовании других методов диагностики, и своевременно назначать лечение или изменять схему консервативной терапии. 17 Онкофетальный антиген: СEA Раковый эмбриональный антиген Открыт Gold и Freedman в 1965, как маркер колоректального рака • • Молекулярная масса составляет 200 000 kA • На 50-85% гликопротеин представлен углеводными остатками • Уровень СЕА 5-8 раз выше при колоректальном раке, чем в норме • СЕА не используется для скрининга колоректального рака 18 Диагностическое значение СЕА Причины повышения уровня •Злокачественные новообразования •Метастазы злокачественных опухолей в печень, костную ткань. •Рецидив онкологического процесса. •Цирроз печени и хронические гепатиты. •Полипы толстого кишечника и прямой кишки. •Язвенный колит. •Панкреатит. •Туберкулёз. •Пневмония, бронхит, эмфизема легких. •Муковисцидоз. •Почечная недостаточность. •Болезнь Крона. •Аутоиммунные заболевания. •Курение. % распределение по уровню СЕА 0­3 нг/мл 3.1 ­10 нг/мл > 10 нг/мл Колоректальный рак 28 20 52 Рак молочной железы 50 27 23 Рак яичника 80 16 4 Рак легкого 39 29 32 Референсные значения для некурящих: 0 ­ 2,5 нг/мл; для курящих: 0 ­ 5 нг/мл. 19 Гормоны: β-ХГЧ β-хорионический гонадотропин человека • Гликопротеин с молекулярной массой 46 000 дальтон • Состоит из двух субъединиц – α и β. • В норме синтезируется в трофобластических клетках плаценты в течение беременности • У мужчин и небеременных женщин увеличение концентрации наблюдается при: опухоли трофобласта герминогенные опухоли пузырные занос хорионкарцинома мелкоклеточный бронхогенный рак легкого рак яичек 20 Рецепторы гормонов: ER и PR Рецепторы эстрогена, рецепторы прогестерона Исследование ER и PR в клетках рака молочной железы важно для эффективного применения гормональной терапии, поскольку эстроген и прогестерон участвуют в возникновении и прогрессии РМЖ. Изменение чувствительности опухолевой ткани к этим гормонам может влиять на скорость роста новообразований, способность опухолевых клеток к диссеминации. 21 Галектины Галектин-1, галектин-3, В 1994 г. было открыто новое семейство лектинов, названное галектинами, которое объединяет β­галактозидсвязывающие низкомолекулярные белки. Галектины в настоящее время являются предметом активного изучения, поскольку эти белки вовлечены в многочисленные процессы жизнедеятельности клеток – регуляцию клеточного цикла, адгезию клеток, передачу межклеточных сигналов, некоторые галектины являются маркерами трансформации клетки и медиаторами воспаления С функциями галектинов, как молекул клеточной адгезии, связана их роль в процессах онкотрансформации и метастазирования. 22 Галектин-1 Опухолевые клетки гиперсекреция Galectin-1 •Ходжкинская лимфома •Меланома •Рак простаты •Рак легких •Глиома •Рак поджелудочной железы Индукция апоптоза лимфоцитов Ускользание опухолевых клеток из-под иммунного надзора Галектин-3 Галектин-3 — низкомолекулярный белок, массой около 30 кДа, относится к семейству животных лектинов, способных распознавать β­галактозу. В настоящее время галектин3 считают маркером опухолевой трансформации клеток. Показано его участие в регуляции всех этапов опухолевой прогрессии: способствует опухолевому перерождению клеток, стимулирует их пролиферацию, опосредует адгезию и агрегацию к экстрацеллюлярному матриксу, увеличивает миграционную способность, усиливает ангиогенез. Исследования рака щитовидной железы, простаты, толстой кишки и желудка показали, что экспрессия галектина­3 возрастает пропорционально прогрессированию роста клеток опухолей. 24 Молекулярные мишени Molecular targets Таргетная терапия - стратегия, направленная против хорошо обозначенных молекулярных мишеней, вовлеченных в процесс неопластической трансформации Мишень – это фермент (либо другая биологическая молекула, функциональная особенность и т.д.), который присутствует в опухолевой клетке и необходим для ее жизнеспособности, но при этом отсутствует в нормальных клетках организма. Таким образом, лекарственные препараты, обладающие способностью специфически ингибировать молекулы­мишени, должны характеризоваться исключительно широким терапевтическим индексом, а именно демонстрировать высокую противоопухолевую активность при минимуме побочных эффектов. 26 Концепция Вирхова «Волшебная пуля» 1900 Первые объяснения биохимических механизмов опухолевой химиорезистентности 60-70 гг. Открытие первого онкогена 70 гг. Снижение смертности от злокачественных опухолей 1990 Исторические вехи таргетной терапии 1930 Первая химиотерапия Нитроген Мустард 1965 Комбинированная химиотерапия 1972 Адъювантная химиотерапия 27 FDA одобрил Паклитаксель (Taxol) 1992 Иматиниб (Гливек) 1996 Открыт BRAF онкоген 2002 FDA одобрил моноклональное АТ ­ Avastin 2004 Исторические вехи таргетной терапии 1998 FDA одобрил моноклональное антитело – Trastuzumab (herceptin) для лечения HER2+ РМЖ 2001 Расшифровка генома 2003 EGFR антитело Cetuximab + ингибитор топоизимеразы Irinotecan (Campto) при колоректальном раке 28 FDA одобрил малую молекулу ингибитор Sunitinib 2006 Внутриопухолевая клональная гетерогенность 2011 Исторические вехи таргетной терапии Скрининг 2007 Снижение смертности при применении таргетной терапии 2011 FDA одобрил ингибитор киназы Veramufenib (Zelboraf) при меланоме Продолжается процесс интенсивного изучения молекулярно­ генетических особенностей опухолевой клетки, что позволит найти новые мишени для направленной терапии 29 6 основных биологических признаков злокачественных новообразований: 1. Автономность сигналов роста 2. Уклонение от рост‐тормозящих сигналов 3. Подавление апоптоза 4. Нелимитированный потенциал репликации 5. Извращенный ангиогенез 6. Способность к инвазии и метастазированию Применительно к каждому из перечисленных признаков ведутся изыскания таргетной терапии 30 Мишени для таргетной терапии злокачественных опухолей: 1. Опухолевые клетки сохраняют некоторые физиологические свойства нормальных клеток. К ним относятся ткань специфические молекулы, которые могут быть использованы в качестве мишеней (CD20, CD52, EGFR, рецепторы стероидных гормонов); 2. Опухолевые клетки имеют усиленную экспрессию определенных нормальных молекул, которые могут служить мишенью для терапии (Her2/neu, С­комплект, VEGF); 3. Генетические изменения в опухолевых клетках приводят к образованию новых патологических молекул, которые отсутствуют в нормальной ткани (BCR-ABL, FIP1L1­PDGFRα, EGF-R). 31 Таргетные препараты Антитела Продукт природного происхождения Очень высокая специфичность Не проникают внутрь клетки (мишени:рецепторы) Не проникают через гематоэнцефалический барьер Внутривенное введение Высокая стоимость производства Малые молекулы Продукт химического синтеза Умеренная специфичность («мультитаргетные препараты») Проникают внутрь клетки (широкий спектр мишеней) Проникают в ЦНС (профилактика и лечение метастазов в мозг) Пероральное введение Умеренная стоимость производства 32 Моноклональные антитела: Monoclonal antibody Химерные антитела – константные регионы имеют человеческое происхождение, а вариабельные – мышинное Гуманизированные АТ – мышинное происхождение имеют лишь небольшие участки вариабельных районов Полностью человеческое АТ – полученное с помощью генноинженерных способов 33 Компоненты сигнальных путей, активирующиеся после воздействия факторов роста, как мишени терапии 34 Мишень Локализация опухоли Молекула, действие Специфический препарат Рецепторы стероидных гормонов Молочная железа Ядерный рецептор Tamoxifen, ингибитор ароматазы Her2/neu Молочная железа, легкое, тимус Мембранный рецептор тирозин киназы, амплификация генов Гуманизированное моноклональное антитело против Her2, Trastuzumab VEGF Различные опухоли Растворимый цитокин, обладает паракринным действием Гуманизированное моноклональное антитело (Bevacizumab, Авастин) Bcr­abl ХМЛ, ОЛЛ Тирозин киназа, продукт пат. гена в результате транслокации Imatinib (Гливек) СD20 Нормальные и патологические В­ЛФ Мембранный гликопротеин Гуманизированное моноклональное антитело (Rituximab) 35 CD20 ­ это фосфопротеин, молекулярная масса которого равна 33 ­ 37 кДа. Полипептидная цепь состоит из 297 аминокислот. Rituximab Локализация: CD20 экспрессирован у человека и мышей только на В­ лимфоцитах . У человека он встречается на В­лимфоцитах, но отсутствует на плазматических клетках. CD20 Функции: CD20 принимает участие в активации и пролиферации В­клеток. 36 Rituximab Ритуксан, Мабтера Ритуксимаб стал первым МАТ, одобренным для применения в онкологии (1997 г.). • это химерное моноклональное антитело, имеющее вариабельный мышиный и константный человеческий регион, специфически связанное с антигеном CD20 на В­лимфоцитах и инициирующее иммунологические реакции, которые опосредуют лизис В­клеток. Показания для применения: 1. В­клеточные вялотекущие неходжкинские лимфомы; 2. CD20­позитивные диффузные В­крупноклеточные лимфомы (в сочетании с режимом СНОР); 3. Некоторых вариантов ревматоидного артрита. Для обеспечения эффективности лечения перед началом терапии рекомендуется провести скрининг на уровень экспрессии CD20-рецепторов. 37 Рецепторы стероидных гормонов Антиэстрогенные мероприятия для лечения опухолей репродуктивной системы имеют длительную историю: 1896г. – первое сообщение о положительном эффекте овариэктомии на течение рака молочной железы Продукция эстрогенов у пожилых женщин осуществляется преимущественно в жировой и мышечной тканях Тамоксифен изначально разрабатывался как контрацептивное средство, но оказалось, что он неспособным контролировать фертильность у женщин 38 ER+ и ER- рак молочной железы 39 Стратегии антиэстрогенной терапии ТАМОКСИФЕН является антогонистом рецепторов эстрогена. Он способен оказывать антипролиферативное воздействие на клетки опухолей молочной железы. ФАЗЛОДЕКС оказывает прямое разрушающее воздействие на рецепторы эстрогена. ФЕМАРА, АРИМИДЕКС, АРОМАЗИН являются ингибиторами фермента ароматазы, который осуществляет конверсию андрогенов в эстрогены, тем самым угнетают синтез эстрогенов. 40 Her2/neu Human Epidermal growth factor Receptor 2 Ген Her2 кодирует рецепторную тирозинкиназу, способную к самостоятельной передаче сигналов от мембраны к ядру. Гиперкспрессия HER2/neu в ткани рака молочноэй железы обнаруживается у 20–30% больных и сопровождается резким снижением апоптоза, усилением пролиферации, уменьшением числа рецепторов эстрогенов в опухоли, снижением эффективности химио­ и эндокринотерапии. Препарат разрешен к применению в монотерапии больных с экспрессией HER2/neu в сочетании с метастатическим раком молочной железы, а также в комбинации с цитостатическими агентами у больных, ранее не получавших химиотерапию. Перед началом лечения необходимо проводить скрининг на уровень экспрессии HER2-рецепторов 41 Трастузумаб (Герцептин) Her2/neu Трастузумаб — рекомбинантные гуманизированные МАТ против HER2/neu­рецепторов. Трастузумаб Р Р SOS Ras Raf MAP Р PI­3K Пролиферация Блокирует пролиферацию, вызывает апоптоз клеток­мишеней и обладает антиангиогенной активностью 42 VEGF Vascular Endotelial Growth Factor Judah Folkman экспериментально доказал, что опухолевые клетки продуцируют факторы неоангиогенеза. Клетки испытывающие гипоксию синтез фактора транскрипции (HIF – фактор, индуцируемый гипоксией) высвобождения белков VEGF рецепторами на клектах эндотелия стимуляция связывание с VEGF­ запуск ангиогенеза 43 Бевацизумаб (Авастин) Бевацизумаб (Авастин) представляет собой рекомбинантные гуманизированные моноклональные антитела, которые избирательно связываются с биологически активным эндотелиальным сосудистым фактором роста (VEGF) и нейтрализуют его, что приводит к снижению васкуляризации и угнетению роста опухоли. В клинических исследованиях показано, что Авастин обладает цитостатическим и цитотоксическим эффектом при многих солидных опухолях, что выражалось в регрессии опухоли, замедлении опухолевого роста или увеличении времени до прогрессии. Кроме того, бевацизумаб усиливает противоопухолевый эффект ряда цитостатиков. В настоящее время проводится более 130 клинических исследований бевацизумаба при 25 разных типах злокачест­венных опухолей, включая рак молочной железы, ободочной кишки, светлоклеточный рак почки, немелкоклеточный рак легкого, меланому. 44 Селективное управление внутриклеточной газовой сигнализацией NO, СО и H2S Cпецифические свойства: 1. Газовые мессенджеры являются простыми молекулами; 2. Легко проникают через клеточные мембраны, внутриклеточные эффекты газовых мессенджеров не связаны с распознаванием мембранных рецепторов; 3. Образуются эндогенно с участием ферментов; 4. Внутриклеточное действие газовых посредников сопряжено с химической модификацией белков­ мишеней. 45 NO, СО и H2S ОКСИД АЗОТА Физиологические эффекты поддержание сосудистого тонуса, участие в качестве нейротрансмиттера в неадренергической и МОНООКСИД УГЛЕРОДА нехолинергической синаптической вовлечен в регуляцию тонуса сосудов и передаче, регуляции апоптоза ангиогенеза, способствует индукции анти­ иммунокомпетентных клеток инфламаторных и анти­пролиферативных механизмов. СУЛЬФИД ВОДОРОДА участвует в индукции потенциала действия в гиппокампе, развитии мозга и регуляции артериального давления Научной группой НОЦ молекулярной медицины было установлено, что H2S может избирательно индуцировать апоптоз опухолевых клеток, не влияя на «здоровые». 46 Селективные ингибиторы Hsp90, Hsp70 Белки теплового шока ­участвуют в формировании правильной трехмерной конформации вновь синтезированных полипептидов, поддерживают функциональную активность внутриклеточных белков и элиминацию поврежденных белковых форм, а также обеспечивают транспорт протеинов через клеточные мембраны. Кроме того, белки теплового шока обладают анти­ и проапоптотической функцией. Hsp90­зависимые сигнальные пути включают в себя такие компоненты – Akt, Rat, Her2/neu, ERK, pS6, NF­ƙB, которые регулируют клеточную жизнеспособность и пролиферацию. Поэтому Белки теплового шока являются привлекательной мишенью для противоопухолевой терапии Селективные ингибиторы Hsp Geldamicin, его аналог 17-N-allylamino17-demethoxygeldamycin, KRIBB-3 проходят клинические испытания 47 Заключение Несмотря на бурное развитие молекулярной онкологии, механизмы опухолевой трансформации остаются на данный момент до конца не раскрытыми. Только углубленное изучение молекулярных механизмов дисрегуляции клеточного гомеостаза на вне- и внутриклеточном уровне при злокачественных новообразованиях позволяет внедрять в клиническую практику новые молекулярные маркеры, а также разрабатывать технологические платформы действия мишень-направленных биологически активных молекул для таргетной терапии злокачественных заболеваний. 48 Список рекомендуемой литературы: Опухолевые маркеры 1. Laboratory medicine practice guidelines: Use of tumor markers in testicular, prostate, colorectal, breast and ovarian cancers / Edited by C.M. Sturgeon, E.P. Diamandis, 2009. 2. Gupta G.S. Animal Lectins: Form, Function and Clinical Applications / G.S. Gupta, 2012 3. Wu A.M. The Molecular Immunology of Complex Carbohydrates­3/A.M. Wu, 2011 4. Malati T. Tumor markers: an overview/ T. Malati // Indian Journal of Clinical Biochemistry, 2007, 22(2), p. 17­31 5. Duffy M.J. Tumor Markers in Clinical Practice: A Review Focusing on Common Solid Cancer/ M.J. Duffy//Med Princ Pract, 2013, 22, p. 4­11 6. Онкомаркеры, их характеристика и некоторые аспекты клинико­ диагностического использования (обзор литературы) / М.А. Алексеева, Е.В. Гусарова, С.М. Муллабаева, Т.С. Понкратова// Проблемы репродукции, 2005, №3, С. 65­79 7. Васильева О.А., Якушина В.Д., Рязанцева Н.В., Новицкий В.В. Возможности использования галектина­3 в лабораторной диагностике (мини обзор) // Клинико­лабораторный консилиум. – 2011. ­ №2(38). – 12­16. 49 Список рекомендуемой литературы: Молекулярные мишени 1. Dietel M. Targeted Therapies in Cancer /M. Dietel, 2007, p.262 2. Molecular targeting and signal transduction / Edited by R. Kumar, 2004, p. 330 3. Molecularly Targeted Therapy for Childhood Cancer / P. J. Houghton, R.J. Arceci, 2010, p. 547 4. Targeted cancer therapy / Edited by R. Kurzrock, FM. Markman, 2008, p.440 5. Molecular Targeting in Oncology / Edited by H.L. Kaufman, S. Wadler, K. Antman, 2008, p. 770 6. Имянитов Е.Н. Общие представления о таргетной терапии / Е.Н. Имянитов // Практическая онкология, 2010, Т.11, Т3, С. 123­129 7. Кайгородова Е.В., Рязанцева Н.В., Новицкий В.В., Марошкина А.Н., Белкина М.В. Влияние шаперона HSP27 на апоптоз опухолевых клеток линии THP // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. – 2012. ­ № 6. – С. 87­90. 8. Старикова Е.Г., Рязанцева Н.В., Новицкий В.В., Таширева Л.А., Стариков Ю.В., Степовая Е.А., Осихов И.А., Васильева О.А., Якушина В.Д. Роль внутриклеточных газовых трансмиттеров сульфида водорода и оксида азота в регуляции апоптоза нормальных и бласттрансформированных клеток // 50 Бюллетень сибирской медицины. – 2011. – №6. – 40­44.
