ALT/GPT (IFCC)

Page 31
D01297_10_Insert_ALT_GPT (IFCC)_MU
RU
Хранение (3)
Образцы можно хранить, как указано ниже.
АЛТ/ГПТ (IFCC)
981361
981769
7 x 50 ml (Konelab™)
8 x 20 ml (Konelab™, Indiko™)
ДАННЫЙ ЛИСТОК-ВКЛАДЫШ ПРЕДНАЗНАЧЕН ДЛЯ
ИСПОЛЬЗОВАНИЯЗА ПРЕДЕЛАМИ США.
НАЗНАЧЕНИЕ
Используется в диагностике in vitro для количественного определения активности
аланинаминотрансферазы (L-аланин: 2-оксоглутарат аминотрансфераза (АЛТ), EC 2.6.1.2)
в человеческой сыворотке или плазме крови с помощью анализаторов Konelab и Indiko.
Любая информация, касающаяся систем Konelab, также относится к анализаторам
серии T.
КРАТКАЯ СПРАВКА (1)
Аланинаминотрансфераза (АлАТ/АЛТ), ранее называемая глутаминовой пировиноградной
трансаминазой (ГПТ), и аспартатаминотрансфераза (АсАТ/АСТ), ранее называемая
глутаминовой щавелевоуксусной трансаминазой (ГЩТ), принадлежат к группе
аминотрансфераз или трансаминаз — ферментов, которые катализируют обратимое
превращение α-кетокислот в аминокислоты путем переноса аминогруппы.
АСТ и АЛТ в норме присутствуют в человеческой плазме, желчи, спинномозговой жидкости
и слюне, но не обнаруживаются в моче, если нет поражения почек. При вирусных
гепатитах и других заболеваниях, связанных с некрозом печени, уровни АСТ и АЛТ в
сыворотке повышаются еще до того, как появляются клинические признаки и симптомы
заболевания. Уровни обоих ферментов могут достигать значений, превышающих верхнюю
границу нормы в 100 раз, хотя чаще всего наблюдается 20- или 50-кратное превышение.
Хотя уровни АСТ и АЛТ в сыворотке повышаются при любых процессах, влияющих на
целостность клеток печени, АЛТ является более специфичным маркером печеночной
недостаточности. Повышение уровня АСТ может наблюдаться при повреждениях сердца
или скелетных мышц, а также паренхимы печени. Увеличение активности АЛТ в сыворотке
обычно наблюдается при паренхиматозных заболеваниях печени и редко при других
состояниях.
ПРИНЦИП АНАЛИЗА
АЛТ катализирует перенос аминогруппы с аланина на оксоглутарат с образованием
глутамата и пирувата. Под действием лактатдегидрогеназы (ЛДГ) пируват
восстанавливается до лактата.
АЛТ
L-аланин+ 2-оксоглутарат<> L-глутамат + пируват
ЛДГ
Пируват + NADH + H+ <> D-лактат + NAD+
В ходе той же самой реакции эквивалентное количество NADH окисляется до NAD.
Наблюдаемое в результате уменьшение поглощения на длине волны 340 nm прямо
пропорционально активности АЛТ в сыворотке.
Эталонный метод Международной федерации клинической химии (IFCC) предполагает
использование пиридоксал-5’-фосфата (P-5´-P) в концентрации 0.1 mmol/l, которой, как
показано, достаточно для активации apo-АЛТ через 5 минут (2).
ИНФОРМАЦИЯ О РЕАГЕНТЕ
Комплект с кодом 981361 содержит
7 флаконов с 40 ml реагента А
7 флаконов с 10 ml реагента В
Набор с кодом 981769 содержит
8 флаконов с 16 ml реагента А
8 флаконов с 4 ml реагента В
Образец
ПРОЦЕДУРА ТЕСТИРОВАНИЯ
Подробная информация содержится в указаниях по выполнению автоматической
процедуры тестирования для используемой модели анализатора. Результаты любого
тестирования, не подтвержденного компанией Thermo Fisher Scientific Oy, не могут быть
гарантированы, и пользователю придется оценивать их самостоятельно.
Настройки аппарата Indiko
Введите соответствующие области применения параметры с помощью штрихкода в
краткой инструкции по применению или из электронного файла в зависимости от ситуации.
Входящие в комплект материалы
Перечисленные выше реагенты.
Необходимые материалы, не входящие в комплект
Пиродоксал-5’-фосфат (код 981839) для системы с 3 реагентами.
Контрольные материалы приведены ниже.
Калибровка
Изменение dA/min преобразуется в единицы измерения результата с помощью
коэффициента пересчета.
Либо используйте в качестве калибратора eCal (981830) в соответствии с инструкциями,
приведенными на листке-вкладыше калибратора eCal.
Прослеживаемость результатов
См. листок-вкладыш калибратора eCal.
Контроль качества
Используйте образцы для контроля качества (КК) как минимум один раз в день, а также
после каждой замены флакона с реагентом. Рекомендуется использовать образцы или
группы образцов для контроля как минимум двух уровней (низкого и высокого). При
проведении процедуры контроля качества соблюдайте все местные, региональные и
федеральные нормативные требования.
Имеющиеся в наличии контрольные материалы:
Nortrol (код 981043)
Abtrol (код 981044)
Интервалы анализа контрольных образцов и предельные значения должны
соответствовать требованиям, установленным в конкретной лаборатории. Результаты
анализа контрольных образцов должны находиться в пределах, заранее установленных в
лаборатории.
РАСЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Анализатор автоматически рассчитывает результаты следующим образом:
Активность в U/l = dA/min x коэффициент
TV x 1000
Теоретический коэффициент = - -6.3 x SV x P
TV
SV
6.3
P
Концентрация
Реагент А: фермент
Трис-буфер (pH 7.15)
L-аланин
ЛДГ
NaN3
3 суток при температуре 20…25 °C, 7 суток при
температуре 4…8 °C или 2 суток при температуре -20 °C
Общий объем реакции в ml
Объем образца в ml
Коэффициент поглощения NADH при
340 nm
Длина оптического пути кюветы = 1
Коэффициент преобразования µkat/l = (U/l)/60
137.5 mmol/l
700 mmol/l
> 1650 U/l
< 0.1 %
Реагент В: субстрат
2-оксоглутарат
82.5 mmol/l
NADH
1.0 mmol/l
NaN3
< 0.1 %
Примечание. Жидкий пиродоксал-5’-фосфат не входит в комплект. Его можно заказать
отдельно по коду 981839.
Меры предосторожности
Только для лабораторной диагностики in vitro. Необходимо соблюдать стандартные меры
предосторожности, установленные для всех лабораторных реагентов.
Реагенты содержат азид натрия в качестве консерванта. Не глотать. Избегайте попадания
на кожу и слизистые оболочки.
Подготовка
Примечание. Помещая флаконы или другие емкости с реагентами в анализатор,
убедитесь в том, что в горлышке флакона или на поверхности реагента нет пузырьков
воздуха.
Система с 1 реагентом (без P-5´-P)
Добавьте содержимое флакона с реагентом В во флакон с реагентом А. Закройте флакон
и смешайте содержимое. Монореагент должен быть защищен от воздействия света!
Система с 3 реагентами (с P-5´-P)
Реагенты готовы к использованию.
Одновременный анализ одного исследуемого вещества с помощью нескольких методов,
требующих использования 1, 2 или 3 реагентов, невозможен. Выберите один метод
анализа и выполните загрузку только необходимых для него реагентов.
Хранение и стабильность реагентов
Реагенты в невскрытых, защищенных от воздействия света флаконах остаются
стабильными при температуре 2…8 °C до истечения указанного на этикетке срока
годности.
Сведения о стабильности реагентов в анализаторе см. в указаниях по применению
конкретного анализатора.
СБОР ОБРАЗЦОВ
Примечание. При обработке образцов в пробирках соблюдайте все инструкции
производителя пробирок чтобы избежать получения ошибочных результатов. Особое
внимание на преаналитическом этапе следует уделять таким факторам, как смешивание,
время от момента взятия образца до центрифугирования и настройки центрифуги.
Тип образца
Можно использовать прозрачную сыворотку или плазму крови с гепарином.
Меры предосторожности
При исследовании и утилизации все взятые у людей образцы должны рассматриваться как
потенциально инфицированные.
Если в качестве калибратора используется eCal (981830), результаты рассчитываются
анализатором автоматически с использованием кривой калибровки.
ОГРАНИЧЕНИЯ
При постановке диагноза результаты лабораторных исследований следует всегда
оценивать совместно с данными анамнеза, клинического обследования и другими
показателями.
Искажение результатов анализа
Исследование проводилось в соответствии с рекомендациями EP7-A Института
клинических и лабораторных стандартов (CLSI).
Критерий: различие в пределах ±10% от первоначальных значений.
Konelab: система с использованием 1 реагента
Интерферент
Концентрация
интерферента
Связанный билирубин
Свободный билирубин
Гемоглобин в
гемолизате
Липемия: Intralipid
(товарный знак
компании Fresenius
Kabi AB).
Целевое
значение
АЛТ (U/l)
42
49
38
47
37
47
Отклонение от
целевого
значения (%)
- 4.0
+ 0.3
+ 0.1
- 0.2
+ 10.0
+ 10.0
43
52
+ 0.7
+ 1.6
500 µmol/l (29 mg/dl)
500 µmol/l (29 mg/dl)
1000 µmol/l (58 mg/dl)
1000 µmol/l (58 mg/dl)
4 g/l
5 g/l
Целевое
значение
АЛТ (U/l)
40
50
38
47
38
47
Отклонение от
целевого
значения (%)
+ 0.2
- 0.1
+ 2.4
+ 0.7
+ 10.0
+ 10.0
2 g/l
2 g/l
42
52
+ 3.2
+ 3.6
500 µmol/l (29 mg/dl)
500 µmol/l (29 mg/dl)
1000 µmol/l (58 mg/dl)
1000 µmol/l (58 mg/dl)
8 g/l
9 g/l
2 g/l
2 g/l
Konelab: система с использованием 3 реагентов
Интерферент
Концентрация
интерферента
Связанный билирубин
Свободный билирубин
Гемоглобин в
гемолизате
Липемия: Intralipid
(товарный знак
компании Fresenius
Kabi AB).
Template: D01162_5 © 2014 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific Inc. and its subsidiaries. This information is not intended to encourage use of these products in any manner that
might infringe the intellectual property rights of others.
ALT/GPT (IFCC)
D01297_10_Insert_ALT_GPT (IFCC)_MU
Indiko: система с использованием 1 реагента
Интерферент
Концентрация
интерферента
Связанный билирубин
Свободный билирубин
780 µmol/l (46 mg/dl)
970 µmol/l (57 mg/dl)
1000 µmol/l (58 mg/dl)
1100 µmol/l (64 mg/dl)
6 g/l
6 g/l
Целевое
значение
АЛТ (U/l)
68
189
73
199
77
211
Отклонение от
целевого
значения (%)
-10.0
-7.4
-10.0
-8.5
+7.3
+2.0
Гемоглобин в
гемолизате
Липемия: Intralipid
(товарный знак
2.5 g/l*
76
-3.8
компании Fresenius
2.5.g/l*
208
-2.1
Kabi AB).
* В ходе испытаний на помехи появлялись сообщения об ошибках, связанных с высоким
исходным уровнем поглощения.
Indiko: система с использованием 3 реагентов
Интерферент
Концентрация
интерферента
Связанный билирубин
Свободный билирубин
750 µmol/l (44 mg/dl)
970 µmol/l (57 mg/dl)
1100 µmol/l (64 mg/dl)
1100 µmol/l (64 mg/dl)
6 g/l
6 g/l
Целевое
значение
АЛТ (U/l)
72
196
75
203
78
212
Отклонение от
целевого
значения (%)
-10.0
-8.4
-9.0
-7.6
+3.9
+1.1
Гемоглобин в
гемолизате
Липемия: Intralipid
(товарный знак
1.3 g/l*
78
-1.6
компании Fresenius
1.3 g/l*
213
-1.2
Kabi AB).
* В ходе испытаний на помехи появлялись сообщения об ошибках, связанных с высоким
исходным уровнем поглощения.
Мутность образцов слабо коррелирует с уровнем концентрации триглицеридов.
Информация о других мешающих веществах содержится в публикации (4).
В очень редких случаях наличие гаммапатии, в частности обусловленной нарушением
синтеза иммуноглобулинов класса M (макроглобулинемия Вальденстрема), может
привести к получению недостоверных результатов (5). Это не проверялось компанией
Thermo Fisher Scientific Oy.
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (2)
Мужчины
< 45 U/l (< 0.74 µkat/l) при температуре 37 °C
Женщины
< 34 U/l (< 0.56µkat/l) при температуре 37 °C
Приведенные значения носят исключительно справочный характер. Каждой лаборатории
рекомендуется подтвердить этот диапазон значений или установить собственный
референтный диапазон для той категории пациентов, которой она предоставляет услуги.
Коэффициент преобразования
µkat/l = (U/l)/60
ДИАПАЗОН ИЗМЕРЕНИЙ
Система с использованием 1 реагента
4 - 300 U/l (0.07 - 5.00 µkat/l)
Расширенный диапазон измерений после вторичного разведения: 4 - 1800 U/l (0.07 - 30.00
µkat/l)
Система с использованием 3 реагентов
5 - 250 U/l (0.08 - 4.17 µkat/l)
Расширенный диапазон измерений после вторичного разведения: 5 - 1500 U/l (0.08 - 25.00
µkat/l)
РАБОЧИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Результаты, полученные в конкретных лабораториях, могут отличаться от приведенных
рабочих характеристик.
Предел обнаружения
Konelab Система с использованием 1 реагента 2 U/l (0.03 µkat/l)
Система с использованием 3 реагента 2 U/l (0.03 µkat/l)
Предел обнаружения представляет собой наименьшую измеряемую
концентрацию/активность, отличную от нуля. Он рассчитывается как концентрация
нулевого образца + 3 SD (в пределах цикла анализа, n=24).
Indiko
Система с использованием 1 реагента LoB: 0.6 U/l (0.01 µkat/l)
Предел холостой пробы (LoB) представляет собой максимальный результат измерения,
который можно получить в образце без аналита (n = 60).
Система с использованием 1 реагента
LoD: 1.1 U/l (0.02 µkat/l)
Предел обнаружения (LoD) представляет собой наименьшее количество аналита в
образце, которое можно обнаружить (n = 60).
Система с использованием 1 реагента LoQ: 1.1 U/l (0.02 µkat/l)
Предел количественного определения (LoQ) представляет наименьшую фактическую
концентрацию в образце, которую можно определить количественно (n = 60).
Система с использованием 3 реагентов LoB: 0.3 U/l (0.005 µkat/l)
Предел холостой пробы (LoB) представляет собой максимальный результат измерения,
который можно получить в образце без аналита (n = 96).
Система с использованием 3 реагентов LoD: 1.0 U/l (0.02 µkat/l)
Предел обнаружения (LoD) представляет собой наименьшее количество аналита в
образце, которое можно обнаружить (n = 60).
Система с использованием 3 реагентов LoQ: 1.0 U/l (0.02 µkat/l)
Предел количественного определения (LoQ) представляет наименьшую фактическую
концентрацию в образце, которую можно определить количественно (n = 45).
Примечание. При использовании анализатора Indiko исследование проводилось в
соответствии с рекомендациями EP17-A Института клинических и лабораторных
стандартов (CLSI).
Погрешность
Погрешность результатов анализа на АЛТ ≤ 5.0 % от общего коэффициента вариации
(CV).
Konelab: система с использованием 1 реагента
Среднее
Среднее
значение 33 U/l
значение 90 U/l
SD
CV%
SD
CV%
В пределах одной
0.6
1.8
0.6
0.6
серии
Между циклами
0.5
1.5
0.9
1.0
анализа
Всего
1.0
3.0
1.8
2.0
Konelab: система с использованием 3 реагентов
Среднее
Среднее
значение 31 U/l
значение 89
U/l
SD
CV%
SD
CV%
В пределах одной
0.6
1.8
0.6
0.7
серии
Между циклами
0.2
0.7
0.8
0.9
анализа
Всего
0.2
2.6
1.5
1.7
Среднее
значение 108 U/l
SD
CV%
0.9
0.8
1.0
0.9
2.7
2.4
Среднее
значение 109 U/l
SD
1.0
CV%
0.9
0.8
0.8
2.2
2.0
Исследование точности измерений проводилось соответствии с Руководством по оценке
прецизионности количественных методов измерения (EP5-A) Института клинических и
лабораторных стандартов (CLSI) с использованием анализатора Konelab 60 на
протяжении 20 дней, за которые было выполнено восемьдесят измерений (n = 80).
Indiko: система с использованием 1 реагента
Среднее
значение 46
U/l
SD
CV%
Повторяемость (в
0.3
0.6
пределах одной серии)
В пределах устройства
0.7
1.4
(всего)
Indiko: система с использованием 3 реагентов
Среднее
значение 43
U/l
SD
CV%
Повторяемость (в
0.4
0.8
пределах одной серии)
В пределах устройства
0.8
1.8
(всего)
Среднее
значение 91
U/l
SD
CV%
0.5
0.5
Среднее
значение 164
U/l
SD
CV%
0.7
0.5
1.3
2.6
1.4
1.6
Среднее
значение 86
U/l
SD
CV%
0.6
0.7
Среднее
значение 159
U/l
SD
CV%
0.9
0.6
1.2
2.6
1.4
1.6
Исследование точности измерений проводилось в соответствии с Руководством по оценке
прецизионности количественных методов измерения (EP5-A2) Института клинических и
лабораторных стандартов (CLSI) в одном исследовательском центре с использованием
трех анализаторов Indiko , двух операторов, двух партий реагента, одной партии
калибратора и шести процедур калибровки в течение 21 дня, за которые было выполнено
восемьдесят четыре измерения (n = 84). Результаты, полученные на каждом из
анализаторов, объединялись.
Сравнение методов
Konelab: система с использованием 1 реагента
Сравнительное исследование было проведено в соответствии с Руководством по
сравнению методов исследования биологических образцов и расчету стандартных ошибок
(EP9-A) Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) с использованием
анализатора Konelab и системы с 2 реагентами в качестве эталонного метода.
Линейная регрессия (единица измерения — U/l):
y = 0.75 x + 2.8
r = 0.988
n = 60
Концентрация аналита в образцах находилась в пределах от 7 до 190 U/l.
Konelab: система с использованием 3 реагентов
Сравнительное исследование было проведено в соответствии с Руководством по
сравнению методов исследования биологических образцов и расчету стандартных ошибок
(EP9-A2) Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) с использованием
одной из имеющихся на рынке методик анализа в качестве эталонного метода.
Линейная регрессия (Deming) (единица измерения — U/l):
y = 0.95x + 0.6
r = 0.983
n = 92
Концентрация аналита в образцах находилась в пределах от 5 до 209 U/l.
Indiko: система с использованием 1 реагента
Сравнительное исследование проводилось в соответствии с Руководством по сравнению
методов исследования биологических образцов и расчету стандартных ошибок (EP9-A2)
Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) с использованием анализатора
Konelab Prime 60 и системы с одним реагентом для анализа АЛТ в качестве эталонного
метода.
Линейная регрессия (Deming) (единица измерения — U/l):
y = 1.00x + 0.26
r = 1.00
n=105
Концентрация аналита в образцах была в пределах от 4 до 244 U/l.
Indiko: система с использованием 3 реагентов
Сравнительное исследование проводилось в соответствии с Руководством по сравнению
методов исследования биологических образцов и расчету стандартных ошибок (EP9-A2)
Института клинических и лабораторных стандартов (CLSI) с использованием анализатора
Konelab Prime 60 и системы с тремя реагентами для анализа АЛТ в качестве эталонного
метода.
Линейная регрессия (Deming) (единица измерения — U/l):
y = 0.99x + 0.72
r = 1.00
n=103
Концентрация аналита в образцах была в пределах от 6 до 244 U/l.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1)
Burtis, CA and Ashwood, E R (ed.), Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry, 5th edition,
W B Saunders Company, Philadelphia, 2001, pp. 354 - 355.
2)
IFCC 2002/5: IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement of Catalytic
Activity Concentrations of Enzymes at 37 °C, Part. 4 Reference Procedure for the
Measurement of Catalytic Concentrations of Alanine Aminotransferase,
Clin.Chem.Lab.Med. 2002, 40(7): 718 - 724.
3)
Guder WG, Narayanan S, Wisser H, Zawta B. List of Analytes; Preanalytical variables.
Brochure in: Образцы: From Patient to the Laboratory. GIT Verlag GmbH, Darmstadt,
1996.
4)
Young DS, Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, Fifth Edition, AACC Press,
Washington, D.C, 3-8 - 3-23, 2000.
5)
Bakker A.J. e. al. Gammopathy interference in clinical chemistry assays: mechanisms,
detection and prevention. Clin Chem Lab Med 2007; 45(9), 1240 - 1243.
ПРОИЗВОДИТЕЛЬ
Thermo Fisher Scientific Oy
Analyzers & Automation
Clinical Diagnostics
Ratastie 2, P.O. Box 100, FI-01621 Vantaa, Finland
Тел.: +358-9-329-100; факс: +358-9-3291-0300
www.thermoscientific.com
Дата редактирования (гггг-мм-дд)
2014-10-09
Изменения по сравнению с последней версией
Изменения указаны линией возле текста.
Template: D01162_5 © 2014 Thermo Fisher Scientific Inc. All rights reserved. All trademarks are the property of Thermo Fisher Scientific Inc. and its subsidiaries. This information is not intended to encourage use of these products in any manner that
might infringe the intellectual property rights of others.
Page 32