УДК 619:616.98:579.843.95-036.22UDC 619:616.98:579.843.95-036.22053.2:636.22/.28 053.2:636.22/.28 ВЫЯВЛЕНИЕ АССОЦИАЦИЙ ВИРУСОВ И DETECTION OF VIRUSES AND БАКТЕРИЙ РЕСПИРАТОРНОГО BACTERIA ASSOCIATIONS OF КОМПЛЕКСА У ИМПОРТНОГО СКОТА RESPIRATORY COMPLEX IN ПРИ ОСТРЫХ ВСПЫШКАХ IMPORTED CATTLE IN BIG DAIRY БРОНХОПНЕВМОНИЙ НА МОЛОЧНЫХ FARMS КОМПЛЕКСАХ Т.И. Глотова, доктор биол. наук, Glotova T.I., Dr. Biol. Sci. профессор; Semenova O.V., Cand. Biol. Sci. О.В. Семенова, кандидат биол. наук; Koteneva S.V., Cand Vet. Sci. С.В. Котенева, кандидат ветер. наук; Glotov A. G., Dr. Vet. Sci. А.Г. Глотов, доктор вет. наук, I профессор ГНУ ИЭВСиДВ Россельхозакадемии EVSiDV RAAS t-glotova@mail.ru Представлены данные по выявлению There are presented the data on the ассоциаций вирусов и бактерий associations of viruses and bacteria in респираторного комплекса, возникающих respiratory complex resulting in acute при острых вспышках бронхопневмоний на outbreaks of bronchopneumonia in calves молочных комплексах при завозе in big dairy farms at delivery of the импортного скота. imported cattle. В первые 2-3 года после завоза животных In the first 2-3 years after the entering of респираторные болезни вызываются animals respiratory diseases are caused взаимодействием нескольких by interaction of several infectious agents инфекционных агентов, из которых with the predominant role of bovine viral преобладающими являются вирус diarrhea virus and M. haemolytica with вирусной диареи-болезни слизистых infectious bovine rhinotracheitis virus, оболочек и бактерия M. haemolytica с bovine respiratory syncytial virus and участием вирусов инфекционного bacteria P. multocida of A and D. ринотрахеита,респираторно-инцитиального serotypes вируса крупного рогатого скота и бактерии P. multocida серотипов А и D. Ключевые слова: крупный рогатый скот, Keywords: cattle, respiratory diseases, респираторные болезни, вирусы, бактерии, viruses, bacteria, association of causative ассоциации возбудителей agents ВЕДЕНИЕ Повышение молочной продуктивности коров, нарастающие темпы импорта крупного рогатого скота и сосредоточение большого количества животных на ограниченных территориях значительно повышают риск возникновения инфекционных заболеваний. Многие авторы считают, что клинические проявления болезней у крупного рогатого скота являются результатом смешанных инфекций [1, 3, 4, 7]. В литературе существует понятие о синергизме инфекционных агентов, означающее их взаимодействие и усиление патогенности друг друга [6, 9, 10]. Наиболее характерным примером такого взаимодействия являются респираторные болезни крупного рогатого скота, часто объединяющиеся под термином «респираторный комплекс» [7, 9]. Одними из наиболее значимых этиологических агентов этого комплекса являются вирусы инфекционного ринотрахеита (ИРТ), вирусной диареи - болезни слизистых оболочек (ВД-БС) и респираторносинцитиальной инфекции (РСИ) крупного рогатого скота (КРС). Типичным признаком респираторных болезней считается развитие вторичной бактериальной бронхопневмонии после предрасполагающей вирусной инфекции. В основном ее возникновение обусловливается присутствием бактерий семейства Pasteurellaceae, а именно Mannheimia haemolytica и Pasteurella multocida. Долгое время считалось, что вирусы ИРТ, ВД-БС и РСИ КРС имеют общие «клетки-мишени» в органах респираторного тракта животного и размножение в них приводит к возникновению смешанной патологии. Однако по мере углубления научных исследований выяснили, что они обладают различной степенью тропизма к органам и тканям животного [6, 7, 8, 9, 12]. Особую роль в синергизме инфекционных агентов многие авторы отводят вирусу ВД-БС КРС. Имея тропизм преимущественно к лимфоидной ткани, он является мощным иммуносупрессором и способствует активизации других вирусов и бактерий [6, 8, 9, 10]. Целью работы являлось изучение частоты выявления ассоциаций вирусов и бактерий респираторного комплекса в органах животных при острых вспышках бронхопневмоний на молочных комплексах, возникающих при завозе импортного скота. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Работа выполнена в 2005 - 2014 гг. Bсего исследовали 1032 пробы: 470 – органы респираторного тракта (легкие, слизистая оболочка носа и трахея) и 562 – лимфоидные органы (миндалины, тимус, легочные, бронхиальные и брыжеечные лимфатические узлы, селезенка) от абортплодов, телят мертворожденных и различного возраста, нетелей, телок и коров. Все пробы биоматериала отобраны от павших или вынужденно убитых животных из 8 хозяйств во время вспышек болезней. Их предварительно обрабатывали по методике, описанной ранее [2]. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ОБСУЖДЕНИЕ Частота выявления инфекционных агентов в органах респираторного тракта в моноварианте составила для вирусов: ИРТ 22,9 %, ВД-БС - 6,7%, РСВ - 3,5 %, для бактерий: M. haemolytica – 30, 9 % и P. multocida - 7,4%. Вирус ИРТ выявляли чаще в трахее и слизистой носа, реже – в легких; РСВ – в легких и бронхах, вирус ВД-БС и бактерии сем. Pasteurellaceae – в легких. Ассоциации вирусов присутствовали в 5,9 % исследованных проб. Чаще встречали сочетание одного вируса и бактерии. Геномы вирусов выявляли одновременно с M. haemolytica в 6,9%, с P. multocida - в 5,7 % исследованных проб, а ассоциации нескольких вирусов и бактерий только в 1,6% проб. Обе бактерии одновременно изолировали из 8,5% проб. Не удалось одновременно выявить ассоциации трех вирусов. Полученные данные свидетельствуют о том, что, несмотря на смешанную этиологию респираторных болезней, в конкретно взятое время отбора проб биоматериала из органов респираторного тракта ассоциации нескольких вирусов выявляются относительно редко, что подтверждает мнение о различном их тропизме к клеткам респираторного тракта [11, 12]. Ассоциации вирусов и бактерий встречались чаще, но реже, чем вирусы в моноварианте. В пробах лимфоидных органов в моноварианте чаще присутствовал геном вируса ВД-БС (50,4%). Геном вируса ИРТ выявили в 8,0% проб от телят до 30-дн. возраста, что свидетельствует о системной форме инфекции. Ассоциации вирусов и P. multocida выявили в 6,0 %, а с M. haemolytica – в 12,2%, одновременно P. multocida и M. haemolytica – в 9% проб. Ассоциации вирусов ИРТ и ВД-БС КРС наблюдали в 2,5 % проб. Нам не удалось обнаружить ДНК вируса ИРТ в лимфоидных органах телят старше 30 дн., что подтверждает данные о слабой способности его к размножению в лимфоидной ткани [5]. Вирус ВД-БС чаще присутствовал в тимусе, брыжеечных и легочных лимфатических узлах, селезенке, что подтверждает данные о преимущественном его тропизме к лимфоидным органам [6, 8, 10]. Количество проб, содержащих M. haemolytica, составило 1,4 %, а P. multocida – 7,3 %. Их выявляли в легочных лимфатических узлах и селезенке соответственно. По результатам генотипирования, 66,6% культур бактерий P. multocida принадлежали к генотипу А и 33,3% - D. В некоторых случаях (до 10%) у телят до 10-дневного возраста одновременно с описанной патологией регистрировали септицемию, вызванную патогенными серовариантами E. coli. Полученные данные свидетельствуют о том, что массовые вспышки острых респираторных болезней, возникающие у животных в первые 2-3 года после завоза, вызываются взаимодействием нескольких инфекционных агентов, из которых преобладающими являются вирус ВД-БС и бактерия M. Haemolytica, с участием вирусов ИРТ, РСИ КРС и P. multocida серотипов А и D. Описанные ассоциации возбудителей выявляли у нетелей при завозе, первотелок, а также у телят первоговторого отелов до 4-6 мес. с частотой: нетели и первотелки - до 10%, телята до 30 дней - до 30%, 30-60 дней - до 50%, от 2-х до 6-ти мес. - 6080%. Таким образом, синергетическое взаимодействие микроорганизмов различных классов играет важную роль в возникновении массовых бронхопневмоний у КРС в естественных условиях. Понимание и расшифровка механизмов, способствующих развитию смешанных форм инфекций, являются важными при разработке эффективных мер специфической профилактики данной патологии крупного рогатого скота, особенно при завозе из других источников. ЛИТЕРАТУРА: 1. Антигенные свойства нецитопатогенных штаммов вируса диареи-болезни слизистых крупного рогатого скота / Г.К. Юров [и др.] // Российский Ветеринарный Журнал. 2013. №2. С. 24-28. 2. Глотов, А.Г. Выявление респираторно-синцитиального вируса крупного рогатого скота при помощи ОТ-ПЦР/ А.Г. Глотов, Т.И. Глотова, И.Я. Строганова // Вопросы вирусологии, №5, 2011, С. 34-37. 3. Крюков Н.Н., Семенюта А.Т., Шегидевич Э.А. Микробный пейзаж и иммунологическая реактивность у телят, выращиваемых в условиях промышленной технологии / Н.Н. Крюков, А.Т. Семенюта, Э.А. Шегидевич // Труды ВИЭВ. 1984. Т.60. С.15-23. 4. Мищенко, В.А. Особенности массовых ассоциированных респираторных заболеваний взрослого КРС / В.А. Мищенко, В.В. Думова, О.Ю. Черных // Ветеринария Кубани. 2011.№2. С.6-7. 5. Babiuk L.A., S. Van Drunen Littel-van den Hurk, Tikoo S.K. Immunology of bovine herpesvirus 1 infection // Veterinary Microbiology. 1996. Vol. 53. Р.31-42. 6. Bovine viral diarrhea viral infections in feeder calves with respiratory disease: interactions with Pasteurella spp., parainfluenza-3 virus, and bovine respiratory syncytial virus / R.W. Fulton [et al.] //Journal Veterinary Research. 2000. Vol. 64. P.151-159. 7. Brogden K.A., Guthmiller J.M. Polymicrobial diseases // ASM Press. 2000. 328 p. 8. Chase C.C. The impact of BVDV infection on adaptive immunity // Biologicals. 2013. Vol.41. P. 52-60. 9. Ellis J.A. The immunology of the bovine respiratory disease complex // Veterinary Clinics of North America Food Animal Practice. 2001. Vol.17. P.535 - 550. 10. Grooms D.L. Role of bovine viral diarrhea virus in the bovine respiratory disease complex // Bovine Practice. 1998. Vol.32. P.7-10. 11. Singh K.J., Ritchey W., Confer A.W. Mannheimia haemolytica: Bacterial-Host Interactions in Bovine Pneumonia // Veterinary Pathology. 2010. Vol. 48(2). P. 338 -348. 12. Valarcher J.-R., Schelcher R., Bourh H. Evolution of bovine respiratory syncytial virus // Journal Virology. 2000. Vol. 74. P.10714 - 10728.