Латентная зараженность винограда бактериальным раком

ДИАГНОСТИКА И ПРОГНОЗЫ
УДК 634.8:632.4
Латентная
зараженность винограда
бактериальным раком
В.Ф. БУРДИНСКАЯ,
руководитель группы
защиты растений
Всероссийского НИИ
виноградарства и виноделия
имени Я.И. Потапенко
Н.О. АРЕСТОВА,
старший научный сотрудник
Бактериальный рак распростра$
нен во всех зонах выращивания ви$
нограда, его высокая вредонос$
ность отмечается как у нас в стра$
не, так и за рубежом, и несмотря на
применение различных мер борь$
бы, в том числе и фитосанитарных,
отмечается его ежегодное прогрес$
сирование [2].
Возбудитель заболевания – поч$
вообитающая бактерия Agrobacte
rium tumefaciens, – индуцирует опу$
холеобразование у широкого круга
растений. Наиболее восприимчивы
двудольные из семейств розоцвет$
ные, толстянковые, пасленовые,
1. Бактериальный рак винограда
38
сложноцветные. Практически все
однодольные (кроме Liliaes и Arales)
не реагируют на инокуляцию бакте$
рией образованием опухоли.
Виды Agrobacterium на винограде
представлены различными штам$
мами – вирулентными (A. tumefa
ciens) и авирулентными (A. radio
bacter), единственным и достовер$
ным различием которых является
способность вызывать опухоль
(рис. 1). Для индукции опухоли не$
обходимо сочетание целого ряда
условий: наличие раны, вирулент$
ного штамма A. tumefaciens, благо$
приятных условий внешней среды,
наиболее важными из которых яв$
ляются температура и влажность,
время инокуляции и продолжитель$
ность воздействия бактерии.
Под влиянием различных причин
вирулентность агробактерий может
ослабевать, кратковременно или
полностью исчезать. Кроме того,
опытным путем доказана способ$
ность передачи вирулентности от
A. tumefaciens к A. radiobacter в од$
ной опухоли, вызванной смешанной
инфекцией [1].
После заражения растения бак$
терия A. tumefaciens может дли$
тельное время существовать в его
сосудах без проявления внешних
симптомов. Такое бессимптомное
(латентное) сохранение в лозе при$
войных и подвойных сортов созда$
ет угрозу заражения при производ$
стве и выращивании привитых и
корнесобственных саженцев. Как
отмечает А.И. Талаш, заготовка
лозы, пораженной бактериальным
раком в латентной форме, ведет к
получению в школке больных са$
женцев, которые после высадки на
постоянное место погибают на 2–
7$й год [5].
Изучена латентная зараженность
бактериальным раком ряда сортов
винограда селекции ВНИИВиВ име$
ни Я.И. Потапенко. Наличие бакте$
рии A. tumefaciens в сосудистой си$
стеме бессимптомных растений ви$
нограда устанавливали по ее спо$
собности вызывать образование
опухоли на индикаторах. Материа$
лом для тестирования служила па$
сока исследуемых сортов. Предва$
рительно при визуальном обследо$
вании была отобрана группа внеш$
не здоровых растений, не проявля$
ющих признаков заболевания. В пе$
риод весеннего сокодвижения с
этих кустов провели сбор пасоки
для последующего исследования
на наличие возбудителя бактери$
ального рака, используя методику
И. Маленина [4]. Весеннее тестиро$
вание пасоки предпочтительнее,
чем побегов, поскольку, согласно
данным электронной микроскопии,
концентрация бактерий в ней наи$
высшая [3].
После удаления 0,5 % раствором
формалина поверхностной микро$
флоры на побег, используя стериль$
ные материалы и инструменты, на$
вешивали пробирку и оставляли ее
на 2 суток. Собранную пасоку ис$
ДИАГНОСТИКА И ПРОГНОЗЫ
пользовали для заражения трех ин$
дикаторных растений: Kalanchoe
pinnatum, гороха (проростки), мор$
кови (диски).
Молодые стебли каланхое на
уровне 2 см от точки роста заража$
ли уколом с помощью шприца с
последующим нанесением в место
ранения пасоки. Место укола обо$
рачивали ватой, смоченной пасо$
кой, и заматывали пленкой. На ли$
стьях уколы делали в главную жил$
ку. После заражения растения изо$
лировали во влажную камеру с по$
вышенной влажностью и оптималь$
ной для опухолеобразования тем$
пературой 25 °С.
У проростков гороха после дости$
жения ими длины 2,5 см срезали
верхушку, инокулировали место
среза пасокой и помещали затем в
термостат при 26 °С.
Диски моркови с соблюдением
строгой стерильности укладывали в
чашки Петри на увлажненную дис$
тиллированной водой фильтро$
вальную бумагу. Затем на поверх$
ность дисков наносили несколько
капель пасоки исследуемого расте$
ния, а на контрольные образцы –
дистиллированную воду. В первые
7 дней после заражения чашки Пет$
ри держали в термостате при 26 °С
и влажности 80 %, а затем в лабо$
ратории при естественном освеще$
нии и комнатной температуре.
Не все тест$объекты одинаково
реагировали на инокуляцию, наи$
ние пасокой была слабой. Только в
двух случаях отмечали аномалию в
виде утолщения стеблей. Рост опу$
холи хотя бы в одном из индикато$
ров свидетельствует о наличии бак$
терии A. tumefaciens в пасоке про$
веряемого растения, то есть расте$
ние является латентным носителем
возбудителя заболевания.
Данный метод искусственного за$
ражения индикаторов позволил вы$
явить от 1,3 до 25 % растений с ла$
тентным протеканием заболевания
и исключить их из дальнейшего раз$
множения (см. таблицу).
а
Работа выполнена при поддержке гран
та РФФИ № 090499133.
ЛИТЕРАТУРА
b
2. Развитие опухоли на дисках моркови:
а – на 14Eй день после заражения;
b – на 30Eй день
лучшим индикатором были диски
моркови. Начальный процесс опу$
холеобразования в виде белых бу$
горков отмечали уже через 12–14
дней (рис. 2а). Конечный результат
заражения фиксировали через 30
дней, визуально определяя наличие
(+) либо отсутствие (–) опухолевых
разрастаний тканей индикаторов
(рис. 2b). У каланхое опухоли раз$
вивались только на побегах, на ли$
стьях они отсутствовали. Реакция
проростков гороха на инокулирова$
Ð å çó ë ü òà òû ï ð î âå ð ê è áå ñ ñ è ì ï òî ì í û õ ê ó ñ òî â âè í î ãð à ä à
í à í à ë è ÷ è å ë à òå í òí î é è í ô å ê ö è è
È í äè ê àòîðí û å ðàñòåí è ÿ
ï ðîðîñòê è
äè ñê è
ê àëàí õîå
ãî ð î õà
ìîðêîâè
 î ñ òî ð ã
+
+
+
À ãà ò ä î í ñ ê î é
+
–
+
à ð ó ø å âñ ê è é áå ë û é
–
–
+
Ñ òå ï í î é
–
–
+
Ñ òå ï í ÿê
+
+
+
Ñêèô
–
–
+
Ì óñêàò äîíñêîé
+
–
+
Ð î çî âè í ê à
+
–
+
+ – î áð à çî âà í è å î ï ó õ î ë å é , – – î òñ ó òñ òâè å î ï ó õ î ë å é .
Ñ îðò
Ë àòåí òí î
çàðàæ åí í û å ê óñòû
(% )
7 ,3
9 ,5
4 ,2
3 ,6
25
1 ,3
1 0 ,4
1 2 ,6
1. Байдербек Р. Опухоли растений. –
М.: Колос, 1981, 303 с.
2. Ключникова Г.Н. Сорта винограда
нового поколения, устойчивые к бактери$
альному раку. // Виноград и вино России,
2000, № 5, с. 25–27.
3. Леманова Н.Б. Бактериальный рак
винограда и способы борьбы с заболева$
нием. – Кишинев: «Штиинца», 1988, 98 с.
4. Маленин И. Метод за установяване
на Agrobacterium tumefaciens в лозовите
растения. // Градин. и лозарска наука,
1974, № 11, с. 120–124.
5. Талаш А.И., Дробот К.О., Евдокимо
ва Е.А. Методы управления патосисте$
мами виноградных агроценозов /Нова$
ции и эффективность производственных
процессов в виноградарстве и виноде$
лии. т. I. – Краснодар, 2005, с. 277–283.
Аннотация. Проведен анализ пасоки
визуально здоровых растений виногра$
да с помощью растений$индикаторов.
Выявлено присутствие возбудителя бак$
териального рака в сосудистой системе
исследуемых растений.
Ключевые слова. Бактериальный рак,
латентная зараженность, пасока, расте$
ния$индикаторы.
Abstract. The analysis of a bleeding sap
of visually healthy plants of a grape with the
help of plants of indicators is carried out.
Presence of causal organism of an
Agrobacterium tumefaciens at vascular
system of researched plants is revealed.
Keywords. Agrobacterium tumefaciens,
latent contamination, a bleeding sap, plants
indicators.
39