134 ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2008. Ò. 49. ¹ 2 ÓÄÊ 577.15:577.151.03:577.152.311:544.773.32 ÎÑÎÁÅÍÍÎÑÒÈ ÂÛÁÎÐÀ ÒÅÌÏÅÐÀÒÓÐÛ ÄËß ÏÐÎÂÅÄÅÍÈß ÐÅÀÊÖÈÈ ÊÀÒÀËÈÒÈ×ÅÑÊÎÃÎ ÃÈÄÐÎËÈÇÀ ÌÀÑËÀ ÑÀÔËÎÐÀ ÏÎÄ ÄÅÉÑÒÂÈÅÌ ËÈÏÀÇÛ ÈÇ Candida rugosa Ìàéäèíà, À.Á. Áåëîâà, À.Â. Ëåâàøîâ, Í.Ë. Êëÿ÷êî (êàôåäðà õèìè÷åñêîé ýíçèìîëîãèè; e-mail: klyachko@enzyme.chem.msu.ru) Ðàáîòà ïîñâÿùåíà èçó÷åíèþ êàòàëèçèðóåìîãî ëèïàçîé èç Candida rugosa ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà â ýìóëüñèè òèïà ìàñëî â âîäå, ñòàáèëèçèðîâàííîé ïîâåðõíîñòíî-àêòèâíûì âåùåñòâîì, äåçîêñèõîëàòîì íàòðèÿ, ïîä äåéñòâèåì òåìïåðàòóðû. Ïîêàçàíî, ÷òî âûáîð îïòèìàëüíîé äëÿ ïðîâåäåíèÿ äàííîé ðåàêöèè òåìïåðàòóðû îïðåäåëÿåòñÿ íå òîëüêî åå âëèÿíèåì íà êàòàëèòè÷åñêóþ àêòèâíîñòü è ñòàáèëüíîñòü ôåðìåíòà, íî è äåéñòâèåì íà ñîñòîÿíèå ðåàêöèîííîé ñðåäû, ýìóëüñèè, îò «êà÷åñòâà» êîòîðîé ñóùåñòâåííûì îáðàçîì çàâèñÿò êàê êèíåòè÷åñêèå ïàðàìåòðû ëèïàçû, òàê è âûõîä ïðîäóêòà ðåàêöèè, ëèíîëåâîé êèñëîòû. Òàê, íàïðèìåð, íåñìîòðÿ íà òî, ÷òî íàèáîëüøåå çíà÷åíèå íà÷àëüíîé ñêîðîñòè ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè íàáëþäàåòñÿ ïðè 40°Ñ è ôåðìåíò ïðàêòè÷åñêè íå èíàêòèâèðóåòñÿ ïðè åãî èíêóáàöèè (45°Ñ), íàèáîëüøèé âûõîä ðåàêöèè íàáëþäàåòñÿ ïðè 30°Ñ, è ïðè ïîâûøåíèè òåìïåðàòóðû ðåàêöèîííîé ñìåñè îí ñíèæàåòñÿ, ÷òî îáóñëîâëåíî èìåííî èçìåíåíèåì “êà÷åñòâà” ýìóëüñèè. Ëèïàçà (ãèäðîëàçà òðèãëèöåðèäîâ Ê.Ô.3.1.1.3) – ôåðìåíò, êàòàëèçèðóþùèé ãèäðîëèç òðèãëèöåðèäîâ äî ìîíîãëèöåðèäîâ è æèðíûõ êèñëîò, ñîäåðæèòñÿ â îðãàíèçìå æèâîòíûõ [1], â ðàñòåíèÿõ [2] è â ìèêðîîðãàíèçìàõ [3–5]. Ëèïàçà – óíèêàëüíûé áèîêàòàëèçàòîð, èìåþùèé øèðîêóþ ñóáñòðàòíóþ ñïåöèôè÷íîñòü; â íàñòîÿùåå âðåìÿ øèðîêî èñïîëüçóåòñÿ â îðãàíè÷åñêîì ñèíòåçå [6, 7], ìåäèöèíå [8–10] è öåëëþëîçíî-áóìàæíîé ïðîìûøëåííîñòè [12] (ñì. òàêæå îáçîðû [13–14]). Ñóáñòðàòàìè ëèïàçû ÿâëÿþòñÿ íåðàñòâîðèìûå â âîäå òðèãëèöåðèäû, â òî âðåìÿ êàê ôåðìåíò õîðîøî ðàñòâîðèì â âîäå, èíûìè ñëîâàìè, ðåàêöèè äîëæíû ïðîòåêàòü íà ïîâåðõíîñòè ðàçäåëà ôàç. Îñíîâíîé îòëè÷èòåëüíîé îñîáåííîñòüþ ìíîãèõ ëèïàç ÿâëÿåòñÿ èõ ñïîñîáíîñòü ê ïîâåðõíîñòíîé àêòèâàöèè ôåðìåíòà â ïðèñóòñòâèè àãðåãèðîâàííûõ ìîëåêóë ñóáñòðàòà (æèðîâûõ êàïåëü) [15–17]. Èçâåñòíî, ÷òî ðàñòèòåëüíûå ìàñëà ðàçëè÷àþòñÿ ïî ñîñòàâó âõîäÿùèõ â íèõ æèðíûõ êèñëîò. Ìàñëî ñàôëîðà ÿâëÿåòñÿ óíèêàëüíûì, â íeì ìîæåò ñîäåðæàòüñÿ äî 80% öåííîé ïîëèíåíàñûùåííîé ëèíîëåâîé êèñëîòû (öèñ-, öèñ-îêòàäåêàäèåí-912-îâàÿ êèñëîòà) [18]. Ôåðìåíòàòèâíîå ïîëó÷åíèå ñâîáîäíûõ æèðíûõ êèñëîò èç òðèãëèöåðèäîâ ïðåäñòàâëÿåòñÿ âåñüìà ïåðñïåêòèâíûì ñïîñîáîì. Ïðèâëåêàòåëüíîñòü ôåðìåíòàòèâíûõ ïðîöåññîâ ñâÿçàíà ñ òåì, ÷òî, âî-ïåðâûõ, íå îêèñëÿþòñÿ äâîéíûå ñâÿçè íåíàñûùåííûõ æèðíûõ êèñëîò, à, âî-âòîðûõ, òåõíîëîãè÷åñêèå ïðîöåññû, îñíîâàííûå íà ïðèìå- íåíèè ëèïàç, íå îêàçûâàþò îòðèöàòåëüíîãî âîçäåéñòâèÿ íà îêðóæàþùóþ ñðåäó [19].  ñëó÷àå ëèïàç (ïîìèìî òðàäèöèîííûõ äëÿ ôåðìåíòàòèâíûõ ðåàêöèé ïàðàìåòðîâ) ñâîéñòâà ðåàêöèîííîé ñðåäû, â ÷àñòíîñòè “êà÷åñòâî” ýìóëüñèè, èãðàþò îñîáóþ ðîëü.  äàííîé ðàáîòå ìåòîäîì ðÍ-ñòàòèðîâàíèÿ áûëè èçó÷åíû ïàðàìåòðû ðåàêöèè ôåðìåíòàòèâíîãî ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà ïîä äåéñòâèåì ëèïàçû â ýìóëüñèè òèïà ìàñëî â âîäå, ñòàáèëèçèðîâàííîé ïîâåðõíîñòíî-àêòèâíûì âåùåñòâîì (ÏÀÂ), äåçîêñèõîëàòîì íàòðèÿ, ïðè ðàçíûõ çíà÷åíèÿõ òåìïåðàòóðû ñ öåëüþ âûáîðà îïòèìàëüíîãî òåìïåðàòóðíîãî ðåæèìà äëÿ ñêîðîñòè ðåàêöèè è âûõîäà ïîëó÷àåìîãî ïðîäóêòà. Ïðîâåäåíî èçó÷åíèå âëèÿíèÿ òåìïåðàòóðû êàê íà ôåðìåíò, òàê è íà ðåàêöèîííóþ ñðåäó, à èìåííî ñîñòîÿíèå ýìóëüñèè. Ýêñïåðèìåíòàëüíàÿ ÷àñòü Ìàòåðèàëû è ìåòîäû  ðàáîòå áûëè èñïîëüçîâàíû ïîëó÷åííûå èç ðàçíûõ èñòî÷íèêîâ êîììåð÷åñêèå ïðåïàðàòû ëèïàç (ÊÔ 3.1.1.3) ôèðìû “Sigma” (ÑØÀ): Alcaligenes, Burkholderia, Candida rugosa.  êà÷åñòâå ñóáñòðàòà èñïîëüçîâàëè ìàñëî ñàôëîðà êðàñèëüíîãî (Carthamus tinctori) ïðîèçâîäñòâà ÊÍÐ. Äåçîêñèõîëàò, õëîðèä è ãèäðîêñèä íàòðèÿ (“îñ.÷.”) èçãîòîâëåíû ôèðìîé “ÄÈÀ-Ì”. Âûäåëèâøóþñÿ ïðè ãèäðîëèçå ìàñëà êèñëîòó òèòðîâàëè 25 ìÌ ðàñòâîðîì ãèäðîêñèäà íàòðèÿ â àâòîìàòè÷åñêîì ðåæèìå ñ èñïîëüçîâàíèåì ðÍ-ñòàòà ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2008. Ò. 49. ¹ 2 (TTT80, ABU80, “Radiometer”, Äàíèÿ) ñ òåðìîñòàòèðóåìîé ÿ÷åéêîé. Äîïîëíèòåëüíóþ ñòàáèëèçàöèþ ýìóëüñèè òèïà ìàñëî â âîäå ïðîâîäèëè óëüòðàçâóêîâîé îáðàáîòêîé ñ èñïîëüçîâàíèåì óëüòðàçâóêîâîé âàííû (“Bransonic 1510E-MTH”, “150W”, “50-60Hz”). Ïðèãîòîâëåíèå ñòàáèëüíîé ýìóëüñèè. Ê 5 èëè 10 ìë 20–50 ìÌ âîäíîãî ðàñòâîðà NaCl, pH 7,5–9,5, äîáàâëÿëè 50–300 ìêë çàïàñíîãî (20%) ðàñòâîðà äåçîêñèõîëàòà íàòðèÿ (íåîáõîäèìàÿ îïòèìàëüíàÿ êîíöåíòðàöèÿ ÏÀ áûëà îïðåäåëåíà â ñïåöèàëüíîì ýêñïåðèìåíòå ïî çàâèñèìîñòè àêòèâíîñòè èñïîëüçóåìûõ ôåðìåíòîâ îò êîíöåíòðàöèè ÏÀÂ), 60–100 ìêë ìàñëà ñàôëîðà. Ýìóëüñèþ ïîäâåðãàëè äåéñòâèþ óëüòðàçâóêà 2 ðàçà ïî 10 ìèí, òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàÿ â ïðîìåæóòêå ìåæäó îáðàáîòêàìè. Èçìåðåíèå ñêîðîñòè è îïðåäåëåíèå âûõîäà ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè.  ïðåäâàðèòåëüíî ïðèãîòîâëåííóþ ýìóëüñèþ äîáàâëÿëè 100 ìêë çàïàñíîãî (10 ìã/ìë) ðàñòâîðà ôåðìåíòà (â ñëó÷àå ïðåïàðàòà íåðàñòâîðèìîé èììîáèëèçîâàííîé ëèïàçû ôåðìåíò äîáàâëÿëè íåïîñðåäñòâåííî â ÿ÷åéêó ðÍ-ñòàòà â êîíöåíòðàöèè 2 ìã/5 ìë) è îïðåäåëÿëè êîëè÷åñòâî âûäåëèâøåéñÿ êèñëîòû ìåòîäîì àâòîìàòè÷åñêîãî òèòðîâàíèÿ åå ãèäðîêñèäîì íàòðèÿ ïðè ïîñòîÿííîì çíà÷åíèè ðÍ ðàñòâîðà, îïòèìàëüíîì äëÿ êàæäîé èç ëèïàç. Èçó÷åíèå çàâèñèìîñòè àêòèâíîñòè, ñòàáèëüíîñòè ôåðìåíòà è âûõîäà ïðîäóêòà îò òåìïåðàòóðû. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñêîðîñòè ôåðìåíòàòèâíîé ðåàêöèè â çàâèñèìîñòè îò òåìïåðàòóðû ïðîâîäèëè èçìåðåíèÿ â ÿ÷åéêå ðÍ-ñòàòà ïðè ñîîòâåòñòâóþùåé òåìïåðàòóðå. Äëÿ îïðåäåëåíèÿ ñòàáèëüíîñòè (îñòàòî÷íîé àêòèâíîñòè) ôåðìåíòà åãî èíêóáèðîâàëè ïðè òåìïåðàòóðå 20–55°Ñ. ×åðåç îïðåäåëåííûå ïðîìåæóòêè âðåìåíè îòáèðàëè àëèêâîòû, äîáàâëÿëè â ïðèãîòîâëåííóþ ýìóëüñèþ è èçìåðÿëè êîëè÷åñòâî âûäåëèâøåéñÿ êèñëîòû ìåòîäîì ðÍ-ñòàòèðîâàíèÿ â ñòàíäàðòíûõ óñëîâèÿõ ïðè 30°Ñ. Ñòàáèëüíîñòü ýìóëüñèè è âëèÿíèå åå “êà÷åñòâà” íà àêòèâíîñòü ôåðìåíòà îïðåäåëÿëè ïðè 30 è 45°Ñ, èíêóáèðóÿ èìåííî ýìóëüñèþ ïðè äàííûõ òåìïåðàòóðàõ. ×åðåç îïðåäåëåííûå ïðîìåæóòêè âðåìåíè îòáèðàëè àëèêâîòû, äîáàâëÿëè ëèïàçó è èçìåðÿëè êîëè÷åñòâî âûäåëèâøåéñÿ êèñëîòû ìåòîäîì ðÍ-ñòàòèðîâàíèÿ â ñòàíäàðòíûõ óñëîâèÿõ ïðè 30°Ñ. Ðåçóëüòàòû è èõ îáñóæäåíèå Èçâåñòíî, ÷òî òåìïåðàòóðà ÿâëÿåòñÿ îäíèì èç ôàêòîðîâ, âëèÿþùèõ íà ñêîðîñòü êàê õèìè÷åñêèõ, òàê è 135 Ðèñ. 1. Çàâèñèìîñòü íà÷àëüíîé ñêîðîñòè ðåàêöèè ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà, êàòàëèçèðóåìîé ëèïàçàìè èç Alcaligenes (1), Burkholderia (2) è Candida rugosa (3), îò òåìïåðàòóðû. Óñëîâèÿ ýêñïåðèìåíòà: êîíöåíòðàöèÿ ôåðìåíòà, ìã/ìë: 1, 3 – 1; 2 – 2; êîíöåíòðàöèÿ äåçîêñèõîëàòà íàòðèÿ 1,2%; ðÍ 9,5; 50 ìÌ NaCl ôåðìåíòàòèâíûõ ðåàêöèé. Çàâèñèìîñòè íà÷àëüíîé ñêîðîñòè ðåàêöèè ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà, êàòàëèçèðóåìîé ëèïàçàìè èç ðàçíûõ èñòî÷íèêîâ, ïðèâåäåíû íà ðèñ. 1. Êàê âèäíî, âî âñåõ ñëó÷àÿõ ïîâûøåíèå òåìïåðàòóðû ðåàêöèè ïðèâîäèò ê åå óñêîðåíèþ äî íåêîòîðîãî ïðåäåëà, çà êîòîðûì ìîæåò ñëåäîâàòü óìåíüøåíèå ñêîðîñòè, êàê ýòî ïîêàçàíî íà ïðèìåðàõ ëèïàç èç Alcaligenes è Candida rugosa. Äëÿ ëèïàçû èç Burkholderia îáíàðóæèâàåòñÿ êàæóùàÿñÿ íåçàâèñèìîñòü ñêîðîñòè ðåàêöèè îò òåìïåðàòóðû. Òàêîé õîä çàâèñèìîñòè ìîæåò áûòü îáóñëîâëåí ðàçëè÷íûìè ïðîöåññàìè (èíàêòèâàöèÿ ôåðìåíòà, ïåðåõîä ðåàêöèè â äèôôóçèîííî-êîíòðîëèðóåìûé ðåæèì è ò.ä.). Áûëî ïîêàçàíî, ÷òî íåêîòîðîå ïîíèæåíèå ñêîðîñòè ðåàêöèè ïðè ïîâûøåíèè òåìïåðàòóðû íå ñêàçûâàëîñü ñóùåñòâåííî íà âûõîäå ïðîäóêòà ðåàêöèè ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà – ëèíîëåâîé êèñëîòû. Èñêëþ÷åíèåì ÿâëÿëàñü ëèïàçà èç Candida rugosa, äàííûå äëÿ êîòîðîé ïðèâåäåíû íà ðèñ. 2. Êàê âèäíî èç ðèñóíêà, íàðÿäó ñ óìåíüøåíèåì ñêîðîñòè ðåàêöèè ïðè òåìïåðàòóðàõ âûøå 30°Ñ (ðèñ. 2, à) íàáëþäàëîñü ñóùåñòâåííîå óìåíüøåíèå âûõîäà ïðîäóêòà (ðèñ. 2, á). Òàê, âûõîä ïðîäóêòà ðåàêöèè ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà, êàòàëèçèðóåìîé ëèïàçîé èç Candida rugosa ïðè 45°Ñ, óìåíüøàåòñÿ áîëåå ÷åì â 2 ðàçà ïî ñðàâíåíèþ ñ íàáëþäàåìûì ïðè 30°Ñ (ðèñ. 2, á). Êàê óæå îòìå÷àëîñü âûøå, ëèïàçà ÿâëÿåòñÿ îäíèì èç ôåðìåíòîâ, äëÿ ôóíêöèîíèðîâàíèÿ êîòîðûõ âàæíî íàëè÷èå ïîâåðõíîñòè ðàçäåëà ôàç [15–17].  íàøåì ñëó÷àå ïîâåðõíîñòü ðàçäåëà ôàç ñòàáèëèçèðîâàíà íàëè÷èåì ïîâåðõíîñòíîàêòèâíîãî âåùåñòâà – äåçîêñèõîëàòà íàòðèÿ. ×åì ìîæåò áûòü îáóñëîâëåíî ñòîëü ñóùåñòâåííîå ñíèæå- 136 ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2008. Ò. 49. ¹ 2 Ðèñ. 2. Çàâèñèìîñòü íà÷àëüíîé ñêîðîñòè (a) è êîíöåíòðàöèè ïðîäóêòà (á) ðåàêöèè ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà, êàòàëèçèðóåìîé ëèïàçîé èç Candida rugosa, îò òåìïåðàòóðû. Óñëîâèÿ ýêñïåðèìåíòà ïðåäñòàâëåíû â ïîäïèñè ê ðèñ. 1 íèå âûõîäà, èíàêòèâàöèåé ôåðìåíòà èëè “êà÷åñòâîì” ýìóëüñèè? Äëÿ îòâåòà íà ýòîò âîïðîñ â ñïåöèàëüíîì ýêñïåðèìåíòå áûëî ïðîâåäåíî èíêóáèðîâàíèå ïðè 45°Ñ êàê ôåðìåíòà, òàê è ýìóëüñèè â òå÷åíèå 45 ìèí, ò.å. âðåìåíè ïðîâåäåíèÿ ðåàêöèè äî ïîëíîãî åå èñòîùåíèÿ, ïðè êîòîðîì ôèêñèðîâàëîñü êîëè÷åñòâî îáðàçîâàâøåãîñÿ ïðîäóêòà (ðèñ. 2, á). Ðåçóëüòàòû ïðåäñòàâëåíû íà ðèñ. 3. Êàê âèäíî, ïðåäâàðèòåëüíîå èíêóáèðîâàíèå ôåðìåíòà (1) ïðàêòè÷åñêè íå ïðèâîäèëî íè ê èçìåíåíèþ íà÷àëüíîé ñêîðîñòè (ðèñ. 3, à) ðåàêöèè ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà, êàòàëèçèðóåìîãî ëèïàçîé èç Candida rugosa, íè ê èçìåíåíèþ âåëè÷èíû âûõîäà ïðîäóêòà ðåàêöèè (ðèñ. 3, á).  òî æå âðåìÿ ïðåäâàðèòåëüíîå èíêóáèðîâàíèå ýìóëüñèè (2) ñêàçûâàëîñü êàê íà íà÷àëüíîé ñêîðîñòè (ðèñ. 3, à), òàê è íà âûõîäå ïðîäóêòà ðåàêöèè (ðèñ. 3, á), ñóùåñòâåííî ñíèæàÿ îáà ïàðàìåòðà êàòàëèçèðóåìîãî ëèïàçîé èç Candida rugosa ïðîöåññà. Òàêèì îáðàçîì, äëÿ ëèïàçû èç Candida rugosa âûáîð òåìïåðàòóðû ðåàêöèè èìååò ïðèíöèïèàëüíîå Ðèñ. 3. Çàâèñèìîñòü îñòàòî÷íîé àêòèâíîñòè ôåðìåíòà (à) è âûõîäà ïðîäóêòà (á) ðåàêöèè ãèäðîëèçà ìàñëà ñàôëîðà, êàòàëèçèðóåìîé ëèïàçîé èç Candida rugosa, èçìåðåííîé â ñòàíäàðòíûõ óñëîâèÿõ ïðè 30°Ñ ïîñëå èíêóáèðîâàíèÿ ôåðìåíòà (1) è ýìóëüñèè (2) ïðè 30 è 45°Ñ â òå÷åíèå 45 ìèí. Óñëîâèÿ ýêñïåðèìåíòà ïðåäñòàâëåíû â ïîäïèñè ê ðèñ. 1 137 ÂÅÑÒÍ. ÌÎÑÊ. ÓÍ-ÒÀ. ÑÅÐ. 2. ÕÈÌÈß. 2008. Ò. 49. ¹ 2 çíà÷åíèå íå òîëüêî êàê ôàêòîð, âëèÿþùèé íà àêòèâíîñòü è ñòàáèëüíîñòü ôåðìåíòà, íî è êàê ôàêòîð, âëèÿþùèé íà ñîñòîÿíèå ðåàêöèîííîé ñðåäû è/èëè ïîâåðõíîñòè ðàçäåëà ôàç. ÑÏÈÑÎÊ ËÈÒÅÐÀÒÓÐÛ 1. Carrier F., Bezzine S., Verger R. // J. Mol. Catalysis. B. 1997. 3. P. 55. 2. Borgstrom B., Brockman H.L. Lipases. Amsterdam, 1984. 3. Jaeger K.E., Ransas S., Dijkstra B.W., Colson C., van Heuvel M., Misset O. // FEMS Microbiol. Rev. 1994. 15. P. 29. 4. Gilbert E.J. //Enzyme Microb. Technol. 1993. 15. P. 634. 5. Wohlfahrt S., Jaeger K. E. // Bio Engineering. 1993. 9. P. 39. 6. Gutman A.L., Shapira M. //Adv. Biochem. Eng. Biotechnol. 1995. 52. P. 87. 7. Chopineau J., Kieboom P.G., Klibanov A.M., Riva S. // J. Amer. Chem. Soc. 1998. 110. P. 584. 8. Wicke-Planquart C., Canaan S., Riviere M., Dupius L., Verger R. // Protein Eng. 1996. 9. P. 1225. 9. Carriere F., Moreau H., Raphel V., Laogier R., Benicourt C., Junien J.L., Verger R. // Eur. J. Biochem. 1991. 202. P. 75. 10. Suzuki A., Mizumoto A., Sarr M.J., Dimagno E.P. // Gastroenterology. 1997. 112. P. 2048. 11. Gudmundsson B.O., Almarsson O., Haraldsson G.G. // Tetrahedron Lett. 1993. 34. P. 5791. 12. Fijita Y., Matsukura M., Hata K., SHimoto H., Sharyo M., Skaguchi H., Gibson K. // Tappi J. 1992. 75. P. 117. 13. Reetz M.T., Jaeger K.-E. // TIBTECH 1998. 161. P. 396. 14. Reetz M. // Curr. Opin. Chem. Biol. 2002. 6. P. 145. 15. Áðîêåðõîô Õ., Äæåíñåí Ð. Ëèïîëèòè÷åñêèå ôåðìåíòû. Ì., 1978. 16. Schmid R.D., Verger R. // Angew. Chem. Int. Ed. 1998. 37. P. 1608. 17. Verger R. // TIBTECH. 1997. 15. P. 32. 18. ×åí Õàî., Æèíü Ëè Õóà. Õèìèÿ ëèïèäîâ. Ïåêèí, 2004. 19. Xu X., Fomuso L. B., Akoh C. C. // J. Agric. Food Chem. 2000. 48. P. 3. Ïîñòóïèëà â ðåäàêöèþ 23.11.07 PECULIARITIES OF TEMPERATURE CHOISE FOR LYPASE CATALISED HYDROLYSIS OF SUFFLOWER OIL Ìaidina, A.B. Belova, A.V. Levashov, N.L. Klyachko (Division of Chemical Enzymology) The article is devoted to investigation of temperature influence on catalytic hydrolysis of safflower oil in surfactant- stabilized water-in-oil emulsion. It was shown, that the choice of optimal temperature is defined not only by the temperature influence on the enzyme stability, but on the reaction media state also.