28 Pierre Köenig St., Talpiot Industrial Area P.O.B 53231 Jerusalem 91531 ISRAEL Phone: 972-2-6781861; Fax : 972-2-6781852 e-mail: info@novamed.co.il Стреп А Стик ЭКСПРЕСС-ТЕСТ ДЛЯ КАЧЕСТВЕННОГО ОДНОЭТАПНОГО ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИГЕНОВ СТРЕПТОКОККОВ ГРУППЫ А В МАЗКАХ ИЗ ЗЕВА. Кат. № R-6010. ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ НАЗНАЧЕНИЕ Стреп А Стик - иммунохроматографическая тест-система для экспресс-диагностики инфекции, вызванной стрептококком группы А, в мазках из зева. КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ Среди ß-гемолитических стрептококков наиболее актуальны стрептококки групп А, В, С и G. В частности, стрептококки группы А вызывают такие заболевания, как острый стрептококковый фарингит и другие гнойные инфекции, а также играют роль в развитии ревматических проявлений и острого гломерулонефрита после перенесенной стрептококковой инфекции. Для назначения адекватных терапевтических препаратов необходим точный и эффективный метод диагностики инфекционного агента. Основные диагностические методики изучения и выявления данного возбудителя: исследование антибиотикочувствительности с помощью бацитрациновых дисков, помещенных на кровяной агар, латекс-агглютинация, а также разнообразные иммунологические методики, в том числе ИФА и иммунохроматографический метод. ПРИНЦИП Стреп А Стик представляет собой полоску нитроцеллюлозной мембраны с нанесенными моноклональными антителами к углеводному антигену стрептококков группы А, конъюгированными с коллоидными частицами золота. Поликлональные антитела зафиксированы в контрольной зоне полоски. Искомый антиген, содержащийся в пробе, реагирует со специфическими моноклональными мечеными антителами. Формируется комплекс антиген-антитело, который мигрирует по мембране, образуя в тестовой зоне розово-сиреневую полоску, что оценивается как положительный результат. Непрореагировавший конъюгат мигрирует к контрольной зоне, где захватывается поликлональными антителами, формируя розово-сиреневую полоску, подтверждающую корректность результатов теста. КОМПЛЕКТАЦИЯ НАБОРА В состав набора входит: 25 полосок Стреп А Стик, упакованных в индивидуальные алюминиевые пакеты с осушителем; 25 стерильных зондов-тампонов; 25 пустых пластиковых одноразовых пробирок в пластиковом штативе; 1 флакон-капельница с реагентом А для экстракции образца (2M натрия нитрит); 1 флакон-капельница с реагентом В для экстракции образца(0,4 M уксусная кислота)); положительный контрольный образец, 1 флакон (содержит 0,09 % NaN3, неинфекционные стрептококки А); отрицательный контрольный образец, 1 флакон (содержит 0,09 % NaN3, неинфекционные стрептококки С); инструкция по применению. ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ 1. Не допускается использование набора и его компонентов после истечения срока годности. 2. Необходимо избегать попадания едких реагентов для экстракции на кожу, глаза, слизистые оболочки. В случае контакта реагентов с кожными покровами немедленно промыть водой место контакта. 3. Набор предназначен только для использования in vitro в целях лабораторной диагностики. 4. Внимательно прочтите инструкцию перед использованием. ХРАНЕНИЕ Стреп А Стик необходимо хранить при температуре 4-30оС. Не замораживать!. ОТБОР, ХРАНЕНИЕ И ПОДГОТОВКА ПРОБ. Рекомендуется использовать реагенты и стерильные тампоны, поставляемые в наборе. Тампоном производят соскоб материала с области миндалин и задней поверхности зева, прочих участков воспаления, на касаясь тампоном щек, языка, зубов. Исследование пробы рекомендуется проводить непосредственно после сбора. Если немедленное исследование невозможно, тампон с материалом помещают в чистую сухую пробирку или пробирку с транспортными средами Эймса, Стюарта и хранят до 8 ч при комнатной температуре или 72 ч при температуре 2-8 °С. В случае если один и тот же зонд-тампон используется для засева микроорганизмов на селективный кровяной агар для стрептококков группы А , сначала производят штриховой посев тампоном на питательную среду, а затем используют тампон для проведения иммунохроматографического исследования. Экстракция и подготовка пробы. 1.Внести 4 капли реагента А для экстракции (приблизительно 240 мкл) в пробирку. Цвет реагента А при этом красный. 2.Внести 4 капли реагента В для экстракции (приблизительно 160 мкл) в пробирку с реагентом А (реагент В бесцветный). 3.Перемешать содержимое, аккуратно поворачивая пробирку. При этом цвет смеси растворов меняется от красного к желтому. 4.Поместить тампон с материалом в пробирку, осуществляя, по крайней мере, 10 вращательных движений тампоном в пробирке. Оставить тампон в пробирке на 1 мин. Извлечь тампон, тщательно отжимая жидкость о стенки пробирки. Утилизировать тампон в специальный контейнер для отходов. 5.Погрузить Стреп А Стик вертикально в раствор с экстрагированным образцом (стрелками вниз), запустить таймер. 6.Оставить полоску в пробирке до появления окрашенной(ых) линии(ий). Результат анализа учитывают через 5 мин, но не позднее чем, через 10 минут после извлечения полоски из пробирки с разведенной пробой. ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ Отрицательный результат Проявляется розово-сиреневой полоской в контрольной зоне C и тестовой зоне T. T C Положительный результат Проявляется розово-сиреневой полоской в аналогичной полоской в контрольной зоне. T C тестовой зоне T и Сомнительный результат При отсутствии видимой розово-сиреневой полоски в контрольной зоне C результаты анализа оценивают как сомнительные. Тест проводят повторно. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Каждый тест имеет встроенный процедурный контроль. Процедура проведения теста может считаться корректной при появлении контрольной линии в зоне С мембраны. Перед началом работы каждую новую серию набора необходимо как минимум 1 раз тестировать с положительным и отрицательным контрольными образцами. Аналогичное тестирование должно производиться при смене лаборанта, работающего с определенной серией набора. Данная мера позволит обеспечить необходимую валидацию качества реагентов, тестовых полосок и работы лаборанта. Положительные и отрицательные контрольные образцы поставляются с каждым набором. 1.Внести в пробирку по 4 капли каждого из двух реагентов для экстракции (А и В), перемешать раствор, поворачивая пробирку. 2.Внести в пробирку 1 каплю позитивного или негативного образца. 3.Поместить чистый тампон в пробирку, осуществляя, по крайней мере, 10 вращательных движений тампоном в пробирке. Оставить тампон в пробирке на 1 мин. Извлечь тампон, тщательно отжимая жидкость о стенки пробирки. Утилизировать тампон. 4.Продолжить исследование, начиная с этапа 4 пункта «Отбор, хранение и подготовка проб». При отсутствии достоверного результата исследования контрольной пробы набор считают непригодным к применению. Повторите тестирование или свяжитесь с Вашим поставщиком. ОГРАНИЧЕНИЯ 1. Отрицательный результат теста не исключает возможность наличия инфекции в отдельных случаях по причине низкой концентрации вирусных антигенов. 2. Для постановки корректного диагноза необходимо сопоставление результатов теста с прочей клинической информацией. 3. Набор предназначен только для профессионального использования в диагностике in vitro. Тест может быть использован только для идентификации стрептококков группы А в мазках из зева. Тест не дает информации о количестве антигена в образце, обеспечивая исключительно качественную идентификацию. 4. Тест идентифицирует исключительно антигены стрептококков группы А и не дифференцирует жизнеспособных и нежизнеспособных микроорганизмов. 5. Для проведения исследования необходимо использовать только материалы, поставляемые в наборе (стерильные зонды, реагенты). Использование зондов, не поставляемых в наборе, может повлиять на качество отбора пробы. 6. Примесь крови, слюны в пробе могут привести к появлению ложноположительных результатов. При отборе пробы избегайте касаться тампоном щек, языка, зубов, кровоточащих слизистых. ХАРАКТЕРНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ТЕСТА. Чувствительность и специфичность В исследовании принимали участие 3 медицинских центра, всего были отобраны пробы в количестве 499 от пациентов с выраженными симптомами фарингита. Каждый зонд-тампон с пробой использовался для посева на кровяной агар и затем тестировался с помощью Стреп А Стик. Инкубирование посевов производитлось с бацитрационовыми дисками при 37 °С в течение 18-24 ч в атмосфере 5-10 % CO2. Чашки, на которых отсутствовали колонии инкубировались дополнительно в течение 18-24 ч. Предположительные колонии стрептококков группы А повторно пересевались. Принадлежность колоний подтверждалось с помощью метода латекс-агглютинации в коммерческом тесте. Из 499 проб 375 были отрицательны и 124 были положительны на этапе культурального исследования. В ходе исследования было выявлено 2 положительные пробы, содержащие стрептококков группы F, 1 из которых после цикла повторного культивирования и тестирования выявила отрицательный результат. 3 прочих штамма стрептококков группы F, также выявленные на этапе культивирования, были отрицательны при использовании Стреп А Стик. Метод Стреп А Стик Культивирование Общие результаты Результаты + - + - 120 4 20 355 140 359 124 375 499 Общие результаты Относительная чувствительность 97 % (91-99%)*, относительная специфичность теста – 95% (92%-97%)* *95% доверительный интервал. Количество позитивных колоний редкие 1+ 2+ 3+ 4+ Стреп А Стик /культивирование 10/11 9/9 17/19 36/37 48/48 % совпадения с культуральным методом 91% 100% 89% 97% 100% Перекрестные реакции Тест не дает неспецифических перекрестных реакций со следующими возбудителями: Стрептококки группы В Стрептококки группы F Streptococcus pneumoniae Streptococcus mutans Staphylococcus aureus Corynebacterium diphtheria Candida albicans Pseudomonas aeruginosa Neisseria meningitidis Serratia marcescens Neisseria sicca Klebsiella pneumoniae Branhamella catarrhalis Bordetella pertussis Group C Streptococcus Group G Streptococcus Streptococcus sanguis Neisseria gonorrhea Neisseria subflava Hemophilus influenza Enterococcus faecalis Staphylococcus epidermidis Концентрация исходных суспензий микроорганизмов 107 КОЕ/мл УТВЕРЖДАЮ Генеральный директор ООО «ГЕМ» ________________С.А. Гольдберг «17» сентября 2010 г. Представительство в РФ: ООО «ГЕМ» г. Москва, Зыковский проезд, д. 4А. +7 (495) 787-04-32 www.hemltd.ru Новый IFU-StrepAStick-R-6010-HEM-russ.-v.02-11.12.10