Микрофлора кишечника человека и преддиабет

реклама
Микрофлора
кишечника и
преддиабет
В.М.Червинец
ГБОУ ВПО Тверской ГМУ Минздрава России
23 сентября 2015 г.
1
– Цель и содержание работы:
• Отбор и характеристика образцов
содержимого желудочно-кишечного
тракта и крови у людей с нормальным
содержанием сахара и с
предрасположенностью к диабету 2
типа; изучение качественных и
количественных характеристик
микроорганизмов, выделенных из
кишечника.
2
• В исследование включены студенты
Тверской государственной медицинской
академии. Испытуемые были разделены
на 2 группы. В первую группу вошли 30
человек, без признаков сахарного
диабета. Во вторую группу вошли 30
человек, страдающие сахарным
диабетом 2 типа.
• Исследования проводились с разрешения этического
комитета Тверской государственной медицинской
академии. Все лица давали добровольное
информированное согласие на бактериологическое
исследование их материла.
3
• Для изучения спектра и количества
микроорганизмов, населяющих кишечник, собирали
кал и доставляли в бактериологическую
лабораторию в течение 1 часа. Подготовка
содержимого кишечника для исследования
проводилась следующим образом: 1 г фекалий
вносили в 9 мл стерильного изотонического раствора
хлорида натрия (NaCl) и тщательно суспендировали
путем встряхивания в шуттель-аппарате в течение
20-30 мин. Затем отстаивали и через 1 час из
надосадочной жидкости делали разведения с
изотоническим раствором хлорида натрия 102, 103,
104, 105. Из разведений 103, 104, 105 делали посев
петлей на питательные среды.
4
• Культивирование осуществляли как в анаэробных
условиях с использованием микроанаэростата и
системы GasPak+, в эксикаторе со свечой при
повышенном содержании CO2, так и в аэробном
режиме. Инкубировали в течение 24 часов при
температуре 37°С в термостате. После инкубации
определяли культуральные, морфологические,
тинкториальные свойства микроорганизмов по
традиционной методике, а также производили
подсчет числа колониеобразующих единиц (КОЕ)
каждого типа колоний и пересчет КОЕ на 1 г
исследуемого материала. Далее накапливали чистую
культуру для идентификации и дальнейшего
изучения.
5
• Биохимическая активность
определялась с помощью тест систем
api® (bio Mérieux) и программного
обеспечения API WEB на базе
бактериологической лаборатории
кафедры микробиологии и вирусологии
с курсом иммунологии ГБОУ ВПО
Тверская ГМА Минздрава России.
• Получение образцов капиллярной
крови осуществляли с помощью
прибора MICROLET 2 «Bayer».
6
Спектр и частота встречаемости микроорганизмов в
кале здоровых людей
.
7
• Количество выделяемых
микроорганизмов было разным.
Бифидобактерии в нормальном
количестве выделялись в 56,5%
случаев, превышающим норму на 1-3
порядка – в 30,4% и не выявлялись в
13,1%.
• Лактобациллы в нормальном
количестве изолировались в 60,9%
проб фекалий, в 4,3% - в количестве
превышающим норму и не выделялись
в 34,8%.
• Энтерококки в нормальном количестве
выявлялись в 82,6% случаев, в 4,3% превышали норму и в 8,7% - меньше
нормы.
• Типичные эшерихии выделялись в
73,9% проб кала в количестве,
превышающим норму на 1-2 порядка –
в 8,7%, ниже нормы – в 8,7% и на
выявлялись также в 8,7%.
• Необходимо отметить, что лактозонегативные
эшерихии изолировались в количестве
превышающим норму на 2-4 порядка в 78,3%
случаев, и в 21,7% не выделялись.
• Клостридии выявлялись в 43,5% и во всех
случаях их количество было выше
нормального на 2-4 порядка. Количество
пептококков, пептострептококков, золотистого
стафилококка, эпидермального
стафилококка, актиномицет также превышали
нормальные значения.
Микробиологические
исследования кала на
дисбактериоз опытной группы
людей
• В опытную группу входили юноши и
девушки с показателем сахара в крови
от 5,6 до 6,6.
Спектр и частота встречаемости микроорганизмов в кале опытной
группы людей.
• Количество выделенных микроорганизмов также
варьировало и отличалось от нормального
содержания. Так, бифидобактерии в нормальном
количестве выявлялись только в 20% проб кала,
а в 70% - выше нормы на 1-2 порядка логарифма.
Лактобациллы в нормальном количестве
выделялись в 25% положителльных изолятов, в
10% - превышали норму на 3 порядка, а в 5% меньше нормы на 1 порядок. Энтерококки
выделялись практически все в нормальном
количестве. Количество кишечных палочек в
норме было 60%, выше нормы – 15%, ниже – в 5%.
Количество пептококков и стрептококков
выявлялось выше нормы на 1-2 порядка.
Сапрофитные и эпидермальные стафилококки
изолировались в количестве превышающим
норму на только 1 порядок.
• На фоне измененного количественного
содержания нормальной микрофлоры
отмечено повышенние количества
условно-патогенной микрофлоры. Так,
количество всех выделенных
клостридий превышало нормальное на
4-6 порядка, количество
лактозонегативных эшерихий – на 2-4
порядка, золотистого стафилококка – на
4-6 порядков, дрожжевых грибов
Candida albicans – на 6 порядков,
стрептобацилл – на 4-6 порядков.
• Таким образом у лиц с
предласположенностью к сахарному
диабету отмечается изменение
качественное и количественное
соотношение микрофлоры,
характеризующееся как дисбактериоз 12 степени.
Выводы
• Состояние микрофлоры кишечника здоровых
людей в возрасте 18-22 года можно
характеризовать как нормобиоценоз и
дисбактериоз 1 степени.
• Микрофлора фекалий у людей с
предрасположенностью к сахарному диабету
изменяется в сторону дисбактериоза 1-2
степени за счет повышения содержания
условно-патогенной микрофлоры на фоне
снижения уровня лактобацилл.
Скачать