Ассоциации редких аллелей гена HFE (C282Y, H63D, S65C) с

Ассоциации редких аллелей гена HFE (C282Y, H63D, S65C) с диффузной …
231
Т. Н. Бабаева, Т. И. Поспелова

Ассоциации редких аллелей гена
HFE (C282Y, H63D, S65C)
с диффузной В-крупноклеточной лимфомой
ГБОУ ВПО «Новосибирский государственный медицинский университет»
Минздрава России
ГБУЗ НСО «Городская клиническая больница № 2»
А
ктуальность исследования. Полиморфизмы гена наследственного гемохроматоза HFE (C282Y, H63D, S65C) широко
распространены в популяции европейского происхождения, частота гомозигот и компаундных гетерозигот достигает 4-5%. Частоты аллельных замен среди здоровых жителей России (исключая население сибирских этнических групп) составляют: C282Y –
3,7%, H63D – 13,3% [Mikhailova S. V., Kobzev V. F. et al., 2003], по
данным другого исследования, среди постоянных жителей югозапада европейской части России 3,3% и 16,3% соответственно
[Kondrashova T. V., Neriishi K., Ban S. Et al., 2006], что соответствует распределению частот данных аллелей в популяции Европы.
В настоящее время известно, что носительство генотипа
C282Y/C282Y или C282Y/H63D является одним из основных
условий развития наследственного гемохроматоза типа 1, однако клиническая пенетрантность этих генотипов невысока. Частота клинически диагностируемых случаев намного ниже частот полиморфизмов, а пенетрантность заболевания составляет
всего 1-5%, при крайне вариабельной экспрессивности. Наличие
полиморфизмов гена НFE ассоциировано с увеличением общего
содержания железа. Наибольшей пенетрантностью обладает гомозиготный генотип C282Y, способствуя клиническим проявлениям у 2% лиц без дополнительных факторов риска. При генотипе C282Y/H63D только 0,5-2,0% лиц будут иметь клинические
признаки перегрузки железом, лица, имеющие гомозиготный
H63D генотип, могут не иметь фенотипических проявлений
[Alexander J, Kowdley K. V., 2009]. Аллельные замены с меньшей
пенетрантностью способны вносить свой вклад в развитие син-
232
Вопросы онкогематологии
дрома перегрузки железом, однако, проявляются преимущественно в условиях нарушенного эритропоэза или трансфузионной нагрузки. Таким образом, лица гомозиготные по C282Y аллелю, имеют более высокие уровни сывороточного ферритина,
чем пациенты с диким типом, или H63D вариантом.
Согласно современным представлениям, ферритин представляет собой многофункциональную молекулу, которая одновременно участвует во многих аспектах онкогенеза. В том числе,
приводит к ускорению пролиферации, стимуляции ангиогенеза
и супрессии лимфоцитарного ответа. Множественные наблюдения ассоциаций уровня ферритина сыворотки крови и риска
развития злокачественных новообразований с наличием HFEполиморфизмов позволяет говорить о вероятном прогностическом значении редких аллелей HFE.
Цель исследования. Оценить результаты генотипирования полиморфизмов гена HFE (C282Y, H63D, S65C) у больных
диффузной В-крупноклеточной лимфомой.
Материал и методы. В группу обследованных больных вошли пациенты Городского гематологического центра г. Новосибирска (41 человек) с диагнозом диффузная В-крупноклеточная
лимфома (ДВККЛ). Средний возраст больных – 50,78±17,01 лет.
Гендерное распределение в группе обследуемых было следующим:
20 (48,9%) мужчин и 21 (51,1%) женщина. Гистологический вариант лимфом оценивался согласно классификации лимфоидных
неоплазий ВОЗ 2008г. Все пациенты были обследованы до начала
специфической терапии. Геномная ДНК выделялась из цельной
венозной крови, исследование полиморфизмов гена HFE (C282Y,
H63D, S65C) проводилось методом полимеразной цепной реакции
(RT-PCR). Доверительные интервалы оценок частот аллелей были
подсчитаны по формуле: √p(1-p)/2N, где p частота аллеля, N – размер выборки. Для определения соотношения Харди-Вайнберга в
качестве группы контроля были использованы частоты аллелей и
генотипов гена HFE, полученные для выборки русских при исследовании в популяциях России [С. В. Михайлова, В. Ф. Кобзев,
И. В. Куликов, А. Г. Ромащенко, В. И. Хаснулин, М. И. Воевода. Полиморфизм гена HFE, ассоциированного с наследственным гемохроматозом, в популяциях России // Генетика, 2003]. Для вычисления
достоверности различий в частотах полиморфизмов гена HFE в несопряженных группах использовался критерий хи-квадрат. Для
оценки влияния полиморфизмов гена HFE на развитие заболевания применялся критерий Фишера φ* (угловое преобразование
Фишера). Достоверными считали различия между сравниваемыми
параметрами при уровне значимости р<0,05.
Ассоциации редких аллелей гена HFE (C282Y, H63D, S65C) с диффузной …
233
Результаты исследования. При исследовании полиморфизмов гена HFE редкие аллели выявлены в 43,9% случаев
(18 пациентов). В результате проведенного генотипирования
установлено, что в группе обследованных больных ДВККЛ частота аллеля H63D составляет 18,3%, аллеля S65C – 3,65%. Редкий аллель C282Y не был выявлен ни в одном случае. В группе
контроля частоты редких аллелей C282Y, H63D, S65C составили
3,7%, 13,3% и 1,7% соответственно. У всех больных с обнаруженными редкими аллелями выявлен гетерозиготный генотип, во
всех случаях регистрировались генотипы, обладающие меньшей
пенетрантностью – H63D/WT у 15 пациентов (36,6%) и S65C/WT
у 3 пациентов (7,3%). В группе контроля процентное распределение соответствующих генотипов было следующим: H63D/WTгенотип был выявлен в 31 случае (20,7%), S65C/WT в 4 случаях
(2,7%).
Для оценки ассоциации между редкими аллелями и генотипами с риском развития гематологического процесса также
было рассчитано отношение шансов (OR) с 95% доверительным
интервалом (C.I.). Для полиморфного локуса H63D гена HFE –
OR = 2,21, C.I. [1,05-4,68] и для полиморфизма S65C – OR = 2,88,
C.I. [0,62-13,43]. Проведенные расчеты позволяют утверждать,
что в группе обследованных больных носительство редкого аллеля/гетерозиготного генотипа H63D оказывает значимое влияние на развитие заболевания. Кроме того, точность оценки подтверждает узкий доверительный интервал со смещением в сторону негативного влияния фактора (редкого аллеля). В то же
время, носительство аллеля S65C не оказывает значимого влияния на развитие заболевания, также как значительная ширина
C.I. не позволяет говорить о протективном, либо негативном
влиянии фактора.
Выводы. Выявлено увеличение частоты встречаемости
редкого аллеля/гетерозиготного генотипа H63D/H63D/WT в
группе больных диффузной В-крупноклеточной лимфомой по
сравнению с общей популяцией. Обнаружена ассоциация данного генотипа с повышением риска развития ДВККЛ в 2 раза, что
может свидетельствовать о возможном участии полиморфизмов
гена HFE в патогенезе неходжкинских злокачественных лимфом.