действие селенсодержащего аналога феназепама на

Манвелян Э.А.
«Действие селенсодержащего аналога феназепама на поведение животных…»
Медицинские науки и физиология
ДЕЙСТВИЕ СЕЛЕНСОДЕРЖАЩЕГО АНАЛОГА
ФЕНАЗЕПАМА НА ПОВЕДЕНИЕ ЖИВОТНЫХ
ПРИ СОВМЕСТНОМ ВВЕДЕНИИ С ЭПИФИЗАРНЫМ ГОРМОНОМ МЕЛАТОНИНОМ
Э.А. Манвелян
THE EFFECT OF PHENAZEPAM
SELENIUM-CONTAINING ANALOGUE
UPON ANIMALS’ BEHAVIOUR UNDER
COMBINED INJECTION WITH
EPIPHYSIAL HORMONE – MELATONIN
Manvelian E.A.
Under combined application of epiphysial hormone, melatonin, and new synthesized benzodiazepine, that is the selenium-containing analogue of
phenazepam, female rats were registered the maximal anti-anxiety effect in morning hours under multiparameter testing.The combination of melatonin (0,1
mg/kg) and phenazepam selenium-containing analogue in a small dose (0,1 mg/kg) turned out to be
most effective. At the same time under melatonin
influence the effect of benzodiazepine upon anxietyphobia level of the animals tended to weakening.
При совместном использовании эпифизарного гормона мелатонина и нового синтезированного бензодиазепина – селенсодержащего
аналога феназепама у самок крыс наибольший
противотревожный эффект отмечен в утренние
часы при многопараметровом тестировании.
Наиболее эффективной оказалась комбинация:
мелатонин (0,1 мг/кг) и селенсодержащий аналог
феназепама в малой дозе (0,1 мг/кг).
УДК 612.843.367:616.89-008.447
158
Актуальность поиска высокоэффективных транквилизаторов обусловлена ростом числа психо-неврологических заболеваний и пограничных уровней. Основными
средствами фармакотерапии неврозоподобных состояний являются анксиолитики,
прежде всего бензодиазепинового ряда. В
этой связи продолжается интенсивный поиск новых препаратов в ряду синтетических
аналогов эффективных атарактиков. Особенно актуальна проблема создания лекарственных средств с заданными свойствами.
Вместе с тем, в последние годы пристальное внимание уделяется физиологической роли микроэлемента селена и интенсивно исследуются фармакологические
свойства селенсодержащих препаратов, в
частности, антиоксидантные, противоинфарктные, противоопухолевые и другие.
Указанные моменты позволили предположить возможность наличия фармакологических свойств у синтетического селенсодержащего аналога феназепама (рис. 1) – 7бром-5-(0–хлорфенил)-1,2-дигидро-3-Н-1,4бензодиазепин-2-селенона [R0] (вещество
синтезировано под руководством доктора
химических наук, профессора Аксенова А.В.) (1). Учитывая вовлечение эпифиза
(пинеальной железы) в механизмы реализации специфических эффектов бензодиазепинов (8) и то, что введение экзогенного мелатонина расценивается как гиперфункция железы (4, 5), было интересно оценить влияние
комбинации синтезированного вещества и
42/2005
Вестник Ставропольского государственного университета
эпифизарного гормона на поведение животных в разное время суток.
Проводили относительный сравнительный анализ опытных и контрольных
данных. Достоверность обнаруженных отличий определяли при помощи критерия
Вилкоксона-Манна-Уитни (7).
Результаты исследования и их обсуждение
Рис. 1. 7-бром-5/0-хлорфенил/-1,2-дигидро-3Н,1,4-бензодиазепин-2-селенон.
Методика
Экспериментальным материалом служили лабораторные крысы – половозрелые
крысы-самки. Поведение животных оценивали методикой многопараметрового тестирования (11), позволяющей характеризовать
индивидуальный тревожно-фобический уровень крыс по ранжированной шкале. Растворяли эпифизарный гормон мелатонин в растворе этилового спирта (1:90) и применяли в
дозе 0,1 мг/кг за 1 час до опыта. Исследуемое вещество вводили в дозах 0,1; 0,2; 0,5;
1,0 мг/кг за 30 минут до тестирования. Контролем служили животные, получавшие
инъекции одного растворителя. Учитывая,
что при введениях в клинических условиях
транквилизаторов бензодиазепиновой структуры наблюдается снижение активности
препаратов, все вещества инъецировались
внутрибрюшинно остро.
Учитывая неодинаковую циркадианную чувствительность к экзогенному мелатонину, особенно заметно меняющуюся в
переходные фазы суток – утром и вечером
(14), действие препаратов оценивали в утренние (8-10) и вечерние (18-20) часы при
изменении внешней освещенности с переходом от темноты к свету и наоборот.
Выполненные эксперименты показали,
что при введении мелатонина 0,1 мг/кг совместно с селенсодержащим аналогом феназепама в дозе 0,1 мг/кг утром понижался
уровень тревожности самок крыс (рис. 2), о
чем свидетельствовало понижение интегрального показателя тревожности ИПТ
(р<0,001). При этом комбинация препаратов
влияла практически на все показатели теста,
лишь ограничивая переходы в двухкамерном боксе. Вечером под действием веществ
величина ИПТ незначительно понижалась. В
это время суток комплекс препаратов заметно снижал эмоциональную реактивность, но
ограничивал двигательную активность.
С увеличением дозы исследуемого
вещества (0,2 мг/кг) в комбинации с эпифизарным гормоном противотревожное влияние сохранялось в утренние часы, но индекс
тревожности понижался на меньшую величину. Вечером суммарный показатель ИПТ
несколько повышался, что прежде всего было связано с уменьшением подвижности животных. Вместе с тем, и утром и вечером
при сочетанном использовании веществ
эмоциональная реактивность самок крыс
подавлялась.
Как было установлено, при совместном введении мелатонина и вещества в дозе
0,5 мг/кг отмечалось некоторое понижение
индекса тревожности самок крыс. При этом
заметных различий в утренних и вечерних
исследованиях не наблюдалось. Понижение
ИПТ было связано с подавлением реакций
животных на «живой объект». Однако при
этом утром ограничивались переходы в
двухкамерном боксе, а вечером еще и замедлялись спуск с высоты и выход из освещенного «домика».
С увеличением дозы вещества (1
мг/кг) в комбинации с гормоном индекс тревожности достоверно понижался, но утром
эффект был более выражен и статистически
159
Манвелян Э.А.
«Действие селенсодержащего аналога феназепама на поведение животных…»
Рис. 2. Влияние комбинированного использования мелатонина и R0 на тревожно-фобический
уровень самок крыс при многопараметровом тестировании.
А-результаты утреннего, Б – вечернего тестирования. Столбики и векторограммы: черной линией -1МТ 0,1 мг/кг и R0 0,1мг/кг;2-МТ 0,1 мг/кг и R0 0,2мг/кг;3-МТ 0,1 мг/кг и R0 0,5мг/кг; 4-МТ 0,1 мг/кг и
R0 1,0мг/кг. Серой линией обозначен контрольный уровень поведенческих показателей (самки крыс,
получавшие растворитель). На векторограмме:I-IV-латентные периоды соответственно спуска с высоты, прохождения через отверстие, выхода из «домика» и центра «открытого поля»(с), V-VI-пячение
1и2, VII-затаивание,VIII-вокализация, IX-прижимание ушей. * - р <0,05;* -р<0,01
**- р<0,01
*и**-статистически значимые сдвиги показателей по отношению к контролю, соответственно при Р
высокозначим (р<0,01). При этом спектр его
влияния на поведение животных был аналогичен действию комплекса с малой дозой
бензодиазепина и мелатонина.
Таким образом, при многопараметрической оценке поведения самок крыс при
комплексном введении эпифизарного гормона мелатонина (0,1 мг/кг) и селенсодержащего аналога феназепама наибольший
противотревожный эффект отмечался в утренние часы.
Для более точного и полного представления о взаимном влиянии веществ при
совместном введении полученные данные
сравнивали с результатами изолированного
применения транквилизатора и гормона. Для
того проводили анализ характера воздействия комбинации препаратов на тревожный
статус крыс в сравнении с поведением животных, получавших вещества раздельно.
В частности, вычленяли эффект последнего, принимая показатели многопараметрического тестирования на фоне изоли-
160
рованного введения мелатонина за точку
отсчета, по отношению к которой и высчитывались отклонения при комплексном использовании препаратов (рис. 3).
При анализе с вычленением эффектов
препаратов обнаруживалось сохранение эффектов селенсодержащего аналога феназепама в виде понижения ИПТ в утренние часы (9, 10).
На фоне мелатонина величина сдвигов
несколько увеличивалась.
Вместе с тем, в вечерние часы эпифизарный гормон ослаблял противотревожное
действие малой дозы синтезированного бензодиазепина (0,1 мг/кг), изменяя направленность сдвига ИПТ.
Таким образом, на фоне мелатонина
влияние селенсодержащего аналога феназепама на тревожно-фобический статус самок
крыс несколько усиливалось в утреннее
время, и имело тенденцию к ослаблению в
вечерние часы.
42/2005
Вестник Ставропольского государственного университета
Рис. 3. Bлияние комбинированного использования мелатонина и R0 на тревожно-фобический
уровень у самок крыс при многопараметрическом тестировании.
Сплошной серой линией обозначен контрольный уровень поведенческих показателей (самки крыс,
получавшие соответственно мелатонин 0,1 мг/кг), принятый за 100%.
Остальные обозначения см. рис. 2.
Интересным представляется факт, что
совокупный эффект гормона и селенсодержащего бензодиазепина по ряду показателей
был даже слабее активности бензодиазепина.
Подобный результат, может быть, в
первую очередь, объяснен тем, что мелатонин, согласно многочисленным наблюдениям, обладает модулирующими свойствами
(6, 8, 16). Во-вторых, он является мощным
индуктором микросомальных ферментов
печени (3), в связи с чем может резко увеличиваться метаболизм транквилизаторов, и,
следовательно, ослабляться их эффект.
Естественно предположить, что эффекты нового вещества, реализуемые с участием эпифиза, связаны с влиянием препарата на специфические рецепторы в железе.
Действительно, в эпифизе уже сравнительно
давно обнаружены места специфического
связывания меченого диазепама. В этой связи предполагается, что именно таким путем
диазепам повышает активность эпифизарной
N-ацетилтрансферазы. Последняя играет
важную роль в синтезе мелатонина (2, 4, 5).
Вместе с тем, возможен и иной уровень участия эпифизарных факторов в регуляции эффектов вещества.
Согласно современным представлениям, эпифизарный мелатонин способен, влияя
на специфические мелатониновые рецепторы повысить проницаемость мембран к ионам хлора, что в свою очередь, обуславливает возрастание чувствительности ГАМКбензодизепиновых комплексов (12, 13).
Вместе с тем, имеются данные и о
способности мелатонина тормозить связывание меченого диазепама с синаптосомами
мембран, полученными из переднего мозга
крыс (15). Следовательно, и на этом уровне
прослеживается модулирующее влияние мелатонина.
Таким образом, выполненные исследования и анализ данных литературы позволяет думать о том, что эпифизарные механизмы вовлечены в регуляцию специфической психотропной активности нового синтезированного вещества – селенсодержащего аналога феназепама.
ЛИТЕРАТУРА
1. Аксенова И.В., Манвелян Э.А., Самсонова
О.Е., Аксенов А.В. Синтез Se-содержащего аналога феназепама как возможного противотревожного средства // Материалы I Международной научно-практической конференции «Биоэлементы». – Оренбург, 2004. – С.210-233.
161
Манвелян Э.А.
«Действие селенсодержащего аналога феназепама на поведение животных…»
2. Арушанян Э.Б., Батурин В.А. Основы хрофармакологии. – Ставрополь, 1989. – 84 с.
3. Арушанян Э.Б. К фармакологии мелатонина
// Фармакология и токсикология. – 1992. – № 3. –
С. 68–74.
4. Арушанян Э.Б. Хронофармакология. –
Ставрополь, 2000. – 424 с.
5. Арушанян Э.Б. Анксиолитические средства.
– Ставрополь, 2001. – 238 с.
6. Бейер Э.В. Хронофармакологические аспекты действия бета-адреноблокаторов: Автореф.
дис… канд. мед. наук. – Ростов-на-Дону, 1994. 24 с.
7. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов.
– М.: Медицина, 1978. – 152 с.
8. Манвелян Э.А. Роль эпифизарных механизмов в реализации специфической психотропной
активности бензодиазепиновых транквилизаторов: Автореф. дис… канд. фармацевт. наук. –
Пятигорск: Пятиг. гос. Фарм. акад., 1997. –
25 с.
9. Манвелян Э.А. Нейрофизиология влияния
селенсодержащего аналога феназепама на тревожно-фобический статус самок и самцов крыс
// Материалы ХIХ съезда физиологического общества имени И.П. Павлова. – Екатеринбург,
2004. – С. 148-149.
10. Манвелян Э.А. Влияние селенсодержащего
аналога феназепама на тревожно-фобический
статус самок крыс // Материалы I Международной научно-практической конференции «Биоэлементы». – Оренбург, 2004. – С. 232-233.
11. Многопараметровый метод комплексной
оценки тревожно-фобического состояния у
крыс / Родина В.И., Крупина Н.А., Крыжанов-
162
ский Г.Н., Окнина М.Б. // Журн. высш. нервн. деят. – 1993. – № 5. – С. 1006-1017.
12. Acuna Dario, Fernandes Begona, Gomar
Maria D., Aguila Carmen M., Castillo Jose L. Influens of the pituitary-adrenal axis on benzodiadiazepin receptor binding to rat cerebral cortecs //
Neuroendocrinology. – 1990. – № 1. – Р. 97-103.
13. Kennaway D.J., Hugel H.M. Melatonin, melatonin metabolites and the suprachiasmatic nucleus //
Adv. Pineal Res. – 1991. -V. 6. – P.169-178.
14. Lynch H.J., Deng M.H. Pineal responses to
stress // J. Neural Transm. – 1986. – Suppl. 21. – P.
461 – 473.
15. Maranges P., Patel J. Hirata F., Sonhein D.,
Paul S.M. Inhibition of diazepam binding by trypthophan derivatives including metabolite N-acetyl-5methoxykynurenamine // Life sci – 1981.-V.29p.259-267.
16. Orchii Paul B. Infuence of propranolol on the
circadian variantons of the anaesthetic effects and
hexobarbital sodium // Pol.J. Pharmacol. And
pharm. – 1992. – Suppl. 44. – P. 195.
Об авторе
Манвелян Элеонора Аслибековна, кандидат
фармацевтических наук, доцент кафедры анатомии, физиологии и гигиены человека Ставропольского государственного университета. Сфера научных интересов – хронофармакология,
фармакология анксиолитических средств, хронофизиология. Автор 32 научных и научнометодических трудов, получено свидетельство на
рационализаторское предложение.