УДК 612.1/.8:616-092.9]:612.45

УДК 612.1/.8:616-092.9]:612.45-001.1
ВЛИЯНИЕ СТРЕССА НА МОРФОЛОГИЮ ВНУТРЕННИХ ОРГАНОВ БЕЛЫХ
КРЫС
С.Н. Мельник
Учреждение образования «Гомельский государственный медицинский университет»
г. Гомель, Республика Беларусь
Введение
В наше время проблема стрессов приобрела первостепенное значение в жизни
современного общества. Эмоциональный стресс может выступать как фактор этиологии и
патогенеза при самых различных формах патологии, а также потенцировать уже имеющиеся
заболевания. При этом на первый план выходят негативные последствия интенсивного
эмоционального стресса [3].
Стресс способствует увеличению кардиологических, неврологических, эндокринных и
других заболеваний и является важным этиологическим фактором ухудшения здоровья
населения на обширных территориях радиоактивного загрязнения, в том числе и Беларуси.
Известна более высокая резистентность
женского организма к стрессорным
воздействиям психогенного и соматического характера и более низкая частота заболеваний
среди женщин репродуктивного возраста, связанных с перенесенным стрессом, в частности
патологии со стороны ССС и заболеваний органов пищеварительного тракта. Это
объясняется
различиями
в
гормональном фоне
женского и
мужского организма,
особенностями психо-эмоциональной реакции на стресс, особенностями метаболизма [1].
Цель исследования: изучить морфологические изменения надпочечников, миокарда и
яичников белых крыс на разных этапах постстрессоргного периода.
Материалы и методы исследования
Опыты проведены в институте Радиобиологии НАН Бларуси и
Гомельском
государственном медицинском университете. Эксперименты выполнены на беспородных
крысах - самках 6-7 месяцев массой 180-200 г с соблюдением всех правил проведения работ
при использовании экспериментальных животных. В эксперименте было использовано 30
животных. Острый стресс вызывали путем фиксации в положении на спине в течение 6
часов. Морфологические исследования проводили на 3- («стадия резистентности»), 10- и 30-е
сутки (отдаленные периоды постстрессорного периода).
Для исследования были выбраны надпочечники (как орган, непосредственно
участвующий в стрессорных реакциях), миокард (как орган подверженный стрессу) и
яичники (как источник эстрадиола).
Секционный материал от крыс забирали после декапитации животных, которую
проводили с соблюдением правил гуманного отношения к экспериментальным животным.
Материал фиксировали в 10% нейтральном формалине, проводка материала стандартная,
окраска гистологических препаратов гематоксилин-эозином.
Статистическую обработку полученного материала осуществляли с использованием
пакетов компьютерных программ “Microsoft Excel`2000” и “STATISTICA`6.0”. Гипотезу о
нормальном распределении величин проверяли с помощью критериев КолмогороваСмирнова и Шапиро-Уилка. Данные, подчиняющиеся закону нормального распределения,
были представлены в формате (М±SD), где М – средняя арифметическая, SD – стандартное
отклонение и для сравнения 2-х независимых групп использовался критерий Стьюдента (ttest). При распределении количественных признаков, отличающихся от нормального, данные
были представлены в формате Ме (25%;75%), где Ме – медиана, 25 % – нижний перцентиль,
75 % – верхний перцентиль и при сравнении независимых групп использовали
непараметрический метод – U-критерий Манна-Уитни. Результаты анализа считались
статистически значимыми при р<0,05 [2].
Результаты исследований
В результате проведенных исследований установлено, что у животных контрольной
группы надпочечники располагались в области верхних полюсов почки и имели типичное
для данного органа строение: четко дифференцировались корковое и мозговое вещество.
Корковое вещество включало 3 зоны: клубочковую, сетчатую и пучковую. Между
эндокриноцитами располагались капилляры синусоидного типа. Толщина коркового слоя
надпочечников составила 0,78 (0,57÷0,96) мм, мозгового – 0,53 (0,40÷0,66) мм.
У стрессированных животных на 3-и сутки после воздействия надпочечники включали
корковое и мозговое вещество, которые хорошо дифференцировались между собой. В
корковом
веществе
определялась
клубочковая
зона,
представленная
мелкими
эндокриноцитами формирующими скопления в виде клубочков. В пучковой зоне мелкие
клетки формировали структуры в виде колонок. Между колонками располагались
гемокапилляры синусоидного типа, большинство из которых были несколько расширены в
сравнении с контролем.
Сетчатая зона была представлена тяжами клеток, между которыми располагались
гемокапилляры. В сетчатой зоне определялись очаги полнокровия. Мозговое вещество было
отделено от коркового тонкой прослойкой соединительной ткани. Между скоплениями
эндокриноцитов определялись кровеносные сосуды с явлениями выраженного полнокровия. В
отдельных эндокриноцитах определялась гидропическая дистрофия. Толщина коркового
вещества надпочечников у этой группы животных составила 0,84 (0,73÷0,88) мм, мозгового –
0,78 (0,69÷0,81) мм.
Сравнительный анализ морфометрических параметров надпочечников свидетельствует
о том, что на 3-и сутки после воздействия изучаемых факторов изменениям, в большей
степени, подвергается мозговое вещество надпочечников. Так, его толщина в контрольной
группе животных составляла 0,53 (0,40÷0,66) мм. Под влиянием стресса выявлено значимое
увеличение толщины мозгового вещества у крыс до 0,78 (0,69÷0,81) мм (р=0,026) по
сравнению с контролем.
На 10-е сутки после стресса в корковом веществе сохранялась дифференцировка на
клубочковую,
пучковую
и
сетчатые
зоны.
Гемокапилляры
синусоидного
типа,
располагающиеся в пучковой зоне, были несколько расширены в сравнении с контролем. В
отдельных участках нормальное строение пучковой зоны было несколько стерто, вследствие
гиперплазии эндокриноцитов. Сетчатая зона была представлена тяжами клеток, между
которыми располагались гемокапилляры с очаги полнокровия. Мозговое вещество было
отделено от коркового тонкой прослойкой соединительной ткани. В мозговом веществе
определялись кровеносные сосуды с явлениями выраженного полнокровия. В отдельных
эндокриноцитах выявлялась гидропическая дистрофия. Толщина коркового вещества
надпочечников составила 0,82 (0,69÷0,92) мм, мозгового – 0,59 (0,41÷0,67) мм.
Сравнительный анализ морфометрических параметров надпочечников показал, что на
10-е сутки отмечалась нормализация толщины мозгового слоя надпочечников у животных
опытной группы, наблюдаемые различия были статистически не значимы.
На 30-е сутки после воздействия стресса морфологическая и морфометрическая
картина надпочечников у крыс опытной группы соответствовала морфологической и
морфометрической картине надпочечников крыс в контрольной группе.
При сравнении динамики коркового и мозгового вещества надпочечников у животных
опытной группы на 3-, 10- и 30-е сутки эксперимента были выявлены значимые изменения
толщины мозгового вещества. Данные, полученные на 3-и сутки у крыс были значимо выше
по сравнению с 10- и 30-ми сутками (р=0,03).
У животных контрольной группы в срезах сердца, проведенных во фронтальной
плоскости на уровне верхней трети желудочков, определялась четкая дифференцировка на
эндо-, мио- и перикард. Миокард был представлен пучками кардиомиоцитов (КМЦ),
располагавшимися в разных направлениях (продольное, поперечное, косое). КМЦ четко
разделялись на сократительные и проводящие. Между пучками КМЦ располагались
гемокапилляры соматического типа. Более толстые пучки КМЦ отделялись друг от друга
тонкой прослойкой соединительной ткани, которая включала гемокапилляры, артерии и вены
мелкого калибра, рыхлые волокна соединительной ткани.
На 3-и сутки после стрессового воздействия миокард крыс был представлен хорошо
выраженными 3-мя оболочками. В миокарде пучки КМЦ располагалось в различных
направлениях, в отдельных участках пучки КМЦ имели контрактурные изменения с
участками
потери
поперечной
исчерченности.
Определялись
очаги
полнокровия
гемокапилляров, отек межклеточного вещества.
В КМЦ определялись включения липофусцина в виде гранул желто-коричневого цвета,
расположенных, в основном, в перинуклеарной области. Липофусцин – это конечный
продукт окисления внутриклеточных липидов и белков. Он известен также как «пигмент
старения» «пигмент изнашивания», так как накапливается в неделящихся клетках с
возрастом, а также при многих патологиях, например, при заболеваниях, связанных с
атрофией органов.
Сравнительный анализ абсолютного количества КМЦ с включениями липофусцина у
крыс показал, что данный показатель у животных контрольной группы составил 0,25±0,45.
У крыс на 3-и сутки после действия стресса абсолютное количество КМЦ с
включениями липофусцина составило 0,36±0,50. Указанные различия, по сравнению с
контролем были статистически не значимы.
На 10-е сутки после стресса сердце включало 3 оболочки обычного строения. В
миокарде определялись отдельные очаги контрактурных функциональных цепочек из КМЦ,
гемокапилляры имели обычное строение. Наблюдалось значимое увеличение абсолютного
количества КМЦ с включениями липофусцина по сравнению с крысами контрольной группы
в 5,8 раз (р=0,008).
На 30-е сутки у животных экспериментальной группы строение стенок сердца, не
отличалось от такового в контроле, но абсолютное количество КМЦ с включениями
липофусцина, по сравнению с КМЦ контрольных крыс, оставалось значимо повышенным на
68,4 % (р=0,018).
При сравнении динамики абсолютного количества КМЦ с включениями липофусцина у
животных подопытной группы на 3-, 10- и 30-е сутки эксперимента были выявлены
значимые изменения данного показателя. Абсолютное количество КМЦ с включениями
липофусцина на 3-и сутки были значимо ниже по сравнению с 10-ми сутками (р<0,048).
Яичники крыс контрольной группы имели нормальное строение: округлую или
овальную форму, снаружи были покрыты соединительнотканной капсулой. На срезах было
заметно нечеткое деление на корковое и мозговое вещество. В корковом веществе
определялись фолликулы различной степени зрелости. Мозговое вещество включало рыхлую
волокнистую соединительную ткань с крупными сосудами различного калибра.
У крыс, подвергнутых стрессу, на 3-и сутки яичник по своему органотипическому
строению практически не отличался от такового в группе контрольных животных.
Единственным отличием от контроля явилось наличие полнокровия артерий и артериол
мелкого калибра в мозговом веществе.
На 10- и 30-е сутки у крыс опытной группы морфологическая картина яичника
соответствовала таковой в контроле.
Заключение
Проведенное исследование показало, что воздействие стресса вызывало нарушение
микроциркуляции в надпочечниках, которые сохранялись до 10-х суток наблюдения, и
значимое увеличение толщины мозгового слоя надпочечникв на 3-и сутки эксперимента
(р<0,03).
В миокарде воздействие стресса вызывало контрактурные изменения с участками
потери поперечной исчерченности, полнокровия гемокапилляров, отек межклеточного
вещества на 3-и сутки и значимое увеличение содержания липофусцина в КМЦ в поздние
сроки исследования (р<0,05). Наименее чувствительными к действию стресса явились
яичники. Патологические изменения в них проявлялись в виде слабовыраженных нарушений
микроциркуляции в виде полнокровия кровеносных сосудов мозгового вещества в ранние
сроки наблюдения.
На основании наших результатов можно констатировать, что стресс нарушает
микроциркуляцию
надпочечников, миокарда
яичников. Разрастание
мозгового слоя
надпочечников в ранние сроки исследования доказывает увеличение тонуса симпатического
отдела вегетативной нервной системы. Увеличение пигмента липофусцина в КМЦ может
свидетельствовать о кислородном голодании
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1
Кобрин, В. И. Механизмы действия эстрогенов на сердечно-сосудистую систему / В.
И. Кобрин, Е. Е. Порман // Вестник аритмологии. – 2000. – № 19. – С. 72–83.
2
Платонов, А. Е. Статистический анализ в медицине и биологии: задачи, терминология,
логика, компьютерные методы / А. Е. Платонов. — М.: Изд-во РАМН,2000. — 52 с.
3
Пшенникова, М. Г. Феномен стресса. Эмоциональный стресс и его роль в патологии
(лекция) / М. Г. Пшенникова // Патологическая физиология и экспериментальная терапия.
Начало. – 2000. – № 2. – С. 24–26; 2001. – № 4. – С. 28–35.