«

1
«УТВЕРЖДАЮ»
Генеральный директор
ОАО «Агрофирма Дмитрова гора»,
Конаковского района, Тверской обл.
_____________________Крикун И.М.
«____»_____________________2013 г.
АКТ
по результатам определения эффективности инактивированной ассоциированной
вакцины Ваколин против мастита крупного рогатого скота
30 октября 2013 г
Мы, нижеподписавшиеся, главный ветеринарный врач ОАО «Агрофирма Дмитрова гора»,
с. Дмитрова Гора, Конаковского района, Тверской обл. Котляров П.А., главный зоотехник
ОАО «Агрофирма Дмитрова гора» Мурзаева М.Е., заведующая кафедрой микробиологии
ФГБОУ
ВПО
«Московская
государственная
академия
ветеринарной
медицины
и
биотехнологии имени К.И. Скрябина», доктор биологических наук, профессор Грязнева Т.Н.,
доцент кафедры акушерства, гинекологии и биотехники репродукции животных ФГБОУ ВПО
МГАВМиБ, кандидат биологических наук Борунова С.М. и аспирант кафедры микробиологии
ФГБОУ ВПО МГАВМиБ Амануллин Р.А. составили настоящий акт о том, что с мая по
октябрь 2013 г, на базе ОАО Агрофирма «Дмитрова гора» были проведены исследования по
определению эффективности инактивированной ассоциированной вакцины Ваколин против
мастита крупного рогатого скота.
Вакцина Ваколин была предоставлена ООО «ПРОБИОТИК-ПЛЮС» в количестве 2800
доз, расфасованная по 100 мл.
В состав вакцины входят инактивированные 0,4% формалином культуры штаммов
Streptococcus agalactiae, Staphylococcus aureus, Esherichia coli, Klebsiella pneumonia, Candida
albicans, выделенные из молока больных маститом коров. Вакцина депонированная – содержит
% гидроокись алюминия.
В соответствии с инструкцией по применению, вакцина Ваколин вводится коровам
двукратно, с интервалом 14 дней, по 5 мл, подкожно в области средней трети шеи.
Из ОАО «Агрофирма Дмитрова гора» на кафедру микробиологии ФГБОУ ВПО
МГАВМиБ 22 мая 2013 г. поступило 3 пробы молока от больных маститом коров для
2
бактериологического исследования с целью установления причины возникновения мастита у
коров.
13 июня 2013 г из этого хозяйства поступило еще 6 проб молока (табл. 1).
Таблица № 1
Результаты исследования молока от больных маститом коров, принадлежащих ОАО
Агрофирма «Дмитрова гора»
№
Номер пробы
п/п
молока
Результат исследований
Дата поступления - 22.05.2013
1
1
Е.сoli гемолитическая, Staphylococcus aureus, Candida albicans
2
2
Е.сoli гемолитическая
3
3
Staphylococcus aureus, Candida albicans
Дата поступления - 13.06.2013
1
1
Е.сoli гемолитическая
2
2
Streptococcus agalactiae гемолитический
3
3
Klebsiella pneumonia
4
4
Е.сoli гемолитическая
5
5
Роста нет (стерильное)
6
6
Роста нет (стерильное)
В результате проведенных бактериологических исследований было установлено
следующее:
- в 3-х пробах молока, поступившего 22.05.2013 г обнаружены патогенные бактерии –
эшерихии и золотистый стафилококк (потенциальные возбудители мастита крупного рогатого
скота), а также кандиды, присутствие которых в паренхимном молоке свидетельствует о
нерациональном применении антибиотиков;
- в 2-х пробах молока, поступившего 13.06.2013 г., обнаружены патогенные эшерихии, в
1 пробе – патогенный стрептококк (возбудитель мастита крупного рогатого скота), в 1 пробе –
патогенная клебсиелла (существует потенциальная опасность возникновения и развития у
молодняка крупного рогатого скота респираторных инфекций и бронхопневмонии, вызванной
данным возбудителем), в 2-х пробах микроорганизмы не были обнаружены.
В соответствии с представленной разработчиком инструкцией по применению Вакциной
Ваколин было вакцинировано 1400 коров дойного стада.
Вакцинации подвергались как здоровые животные, так и больные маститом.
По результатам исследований коров на скрытые и клинические маститы, проведенные
ветеринарной службой хозяйства в мае 2013 г, было установлено, что из 1400 голов
3
вакцинированных коров 15% животных (210 голов) были с субклиническими маститами, 3%
коров (42 головы) были с клинической формой мастита.
После однократной и повторной вакцинации, с интервалом в 2 недели после вакцинации,
от животных отбирали паренхимное молоко (последние струйки после сдаивания), и
сыворотку крови, которые доставляли на кафедру микробиологии ФГБОУ ВПО МГАВМиБ
для микробиологического, цитологического и серологического исследования.
Таблица № 2
Результаты исследования молока от однократно вакцинированных вакциной Ваколин коров,
больных маститом коров
№
п/п
Номер
пробы
Бактериологически
е исследования
1
1
Е.сoli
2
2
Е.сoli, C.albicans
3
3
C.albicans
4
4
Нет роста
5
5
Нет роста
6
6
Е.сoli, C.albicans
7
7
Е.сoli, C.albicans
8
8
Е.сoli, C.albicans
9
9
Нет роста
10
10
Е.сoli, C.albicans
Серологические исследования, титр
антител в РА
Е.сoli - 1:512, S.agalactiae – 1:216,
S.aureus - 1:64, K.pneumonia -1:128,
C.albicans - 1:64
Е.сoli - 1:124, S.agalactiae – 1:216,
S.aureus - 1:64, K.pneumonia - 1:128,
C.albicans - 0
Е.сoli - 1:124, S.agalactiae – 1:1024,
S.aureus - 1:216, K.pneumonia -1:64,
C.albicans - 1:64
Е.сoli – 1024, S.agalactiae – 1:512,
S.aureus - 1:64, K.pneumonia - 1:128,
C.albicans - 1:128
Е.сoli - 1:124, S.agalactiae – 1:1024,
S.aureus - 1:64, K.pneumonia - 1:128,
C.albicans - 0
Е.сoli - 1:512, S.agalactiae – 1:512,
S.aureus - 1:64, K.pneumonia - 1:128,
C.albicans - 0
Е.сoli - 1:1024, S.agalactiae – 1:512,
S.aureus - 1:64, K.pneumonia - 1:128,
C.albicans - 1:128
Е.сoli - 1:512, S.agalactiae – 1:64,
S.aureus - 1:64, K.pneumonia - 1:128,
C.albicans - 0
Е.сoli - 1:1024, S.agalactiae – 1:128,
S.aureus - 1:256, K.pneumonia - 1:128,
C.albicans - 1:256
Е.сoli - 1:512, S.agalactiae – 1:128,
S.aureus - 1:64, K.pneumonia - 1:128,
C.albicans - 1:256
Количество
соматических
клеток, кл/мл.
50000
100000
500000
250000
100000
200000
100000
50000
150000
250000
При исследовании проб молока и сыворотки крови коров после однократной вакцинации
вакциной Ваколин было установлено следующее:
4
- из 60% проб молока были выделены непатогенные эшерихии и дрожжеподобный гриб
Candida albicans;
- из 30% проб молока никакая микрофлора не выделялась, паренхимное молоко было
стерильным;
- у 60% коров в сыворотке крови были обнаружены в высоких титрах антитела ко всем 5
вакцинным штаммам вакцины Ваколин;
- у 40% коров антитела к вакцинному штамму C.albicans не были обнаружены;
- количество соматических клеток в 1 мл молока превышало допустимую норму у 10%
коров, у 90% коров количество соматических клеток было в пределах нормы (от 50000 до
250000 кл/мл).
Результаты исследования молока и сыворотки крови двукратно вакцинированных коров
представлены в табл. 3.
Таблица № 3
Результаты исследования молока от двукратно вакцинированных вакциной Ваколин коров,
больных маститом коров
№
п/п
Номер
пробы
Бактериологические
исследования
Серологические
Количество
исследования, наличие соматических
антител в РА
клеток, кл/мл.
1
1
Е.сoli
Ес+ Sta+ Str+ Ca+
50000
+
+
+
+
2
2
Нет роста (стерильное)
Ес Sta Str Ca
100000
+
+
+
+
3
3
Е.сoli
Ес Sta Str Ca
50000
4
4
Нет роста (стерильное)
Ес+ Sta- Str+ Ca+
25000
+
+
+
+
5
5
Нет роста (стерильное)
Ес Sta Str Ca
100000
6
6
Е.сoli
Ес+ Sta+ Str+ Ca20000
+
+
+
+
7
7
Нет роста (стерильное)
Ес Sta Str Ca
10000
8
8
Нет роста (стерильное)
Ес+ Sta+ Str+ Ca+
5000
+
+
+
+
9
9
Нет роста (стерильное)
Ес Sta Str Ca
150000
+
+
+
+
10
10
Е.сoli
Ес Sta Str Ca
250000
Примечание: Ес – кишечная палочка; Sta – стафилококк; Str – стрептококк; Ca – кандида; + наличие антител; – - отсутствие антител.
После повторной вакцинации коров вакциной Ваколин было установлено следующее:
- у 60% вакцинированных коров паренхимное молоко не содержит микроорганизмов и
является стерильным;
- у 40% коров была выделена непатогенная для белых мышей кишечная палочка;
- в реакции агглютинации у всех исследованных животных были обнаружены антитела к
вакцинным штаммам вакцины Ваколин;
- у 100% коров количество соматических клеток не превышало допустимую норму и
обнаруживалось в пределах 5000-250000 кл/мл.
Все вакцинированные клинически больные маститом коровы выздоровели в течение 20-45
суток без дополнительного лечения.
5
Случаев возникновения мастита у вакцинированных клинически здоровых коров в течение
последующих 4 месяцев наблюдений (с июля по октябрь) не отмечалось.
Заключение
1. Профилактическая эффективность инактивированной ассоциированной вакцины
Ваколин против мастита крупного рогатого скота составляет 100%.
2. Вакцина Ваколин обладает высокой антигенной активностью и иммуногенностью и
вызывает выработку антител в отношении вакцинных штаммов Е.сoli, S.agalactiae, S.aureus,
K.pneumonia и C.albicans в титрах от 1:64 до 1:1024.
3. Вакцина Ваколин обладает лечебным действием. Все вакцинированные клинически
больные маститом коровы выздоравливали в течение 20-45 суток без дополнительного
лечения.
4. Количество соматических клеток в молоке во всех пробах после повторной вакцинации
коров было в пределах допустимой нормы и составило 5000-250000 кл/мл, что
свидетельствует о положительной динамике течения воспалительного процесса.
Главный ветеринарный врач
ОАО «Агрофирма Дмитрова гора»
П.А. Котляров
Главный зоотехник
ОАО «Агрофирма Дмитрова гора»
М.Е. Мурзаева
Заведующая кафедрой микробиологии
ФГБОУ ВПО МГАВМиБ,
доктор биологических наук, профессор
Т.Н. Грязнева
Доцент кафедры акушерства,
гинекологии и биотехники репродукции
животных ФГБОУ ВПО МГАВМиБ,
кандидат биологических наук
С.М. Борунова
Аспирант кафедры микробиологии
ФГБОУ ВПО МГАВМиБ
Р.А. Амануллин