1 УДК 612.017:615.834:615.83 О.Н.Гирина, Л.В.Кузнецова, Л.И.Романюк, А.П.Гришило, В.И.Власенко*,

1
УДК 612.017:615.834:615.83
О.Н.Гирина, Л.В.Кузнецова, Л.И.Романюк, А.П.Гришило, В.И.Власенко*,
В.И.Кучеренко**
ИЗМЕНЕНИЕ ИММУННОГО И ЦИТОКИНОВОГО СТАТУСА БОЛЬНЫХ
БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ В РЕЗУЛЬТАТЕ ЛЕЧЕНИЯ В
ГИПОАЛЛЕРГЕННОЙ ПАЛАТЕ, ОСНАЩЕННОЙ ЭКОЛОГИЧЕСКИ ЧИСТЫМИ
ТЕКСТИЛЬНЫМИ МАТЕРИАЛАМИ
Национальный медицинский университет имени А.А. Богомольца, г.Киев
* Киевский национальный университет технологий и дизайна, г.Киев
** НПВП «ЭКМА», г.Киев
Цель работы - изучение эффективности лечения больных бронхиальной
астмой (БА) в гипоаллергенной палате, оборудованной экологически чистыми текстильными материалами (ПЭЧТМ), на фоне традиционной терапии.
Палата была оснащена антиаллергическим постельным бельем, а также
гардинами, чехлами на мягкую мебель и ковриками из антистатической полиэфирной ткани. Отличительная особенность всех использованных материалов –
высокая устойчивость к истиранию, практическое отсутствие собственного пыле- и
ворсоотделения, хорошая очищаемость при стирках.
Ткань для антиаллергического постельного белья имеет очень плотную
структуру и в тоже время - хорошие гигроскопические свойства и высокую сорбционную емкость по отношению к жидкостям. Такие свойства, с одной стороны,
предотвращают переход бытовых клещей и продуктов их жизнедеятельности на
матрасы, подушки, ковры, в воздушную среду, а с другой – обеспечивают приятный микроклимат в постели больных БА. Это белье особенно рекомендуется
страдающим аллергией на домашнюю пыль, которая содержится в перьевых и пуховых одеялах и подушках.
Текстиль для гардин и чехлов содержит токопроводящие углеродные нити,
которые обеспечивают его антистатические свойства и тем самым обеспечивается отсутствие оседания пыли на мебели и гардинах.
Изделия для оснащения специальной гипоаллергенной палаты изготовлены
и переданы научно-производственным внедренческим предприятием «ЭКМА» при
2
Киевском национальном университете технологии и дизайна. Исследования физико-химических и потребительских свойств текстильных материалов проведены в
этом университете.
Вступление
В формировании аллергических реакций (АлР) важное значение имеют
факторы окружающей среды. Именно они могут создавать тот избыток аллергенов
(АГ) в воздухе, воде, пищевых продуктах, который иногда ведет к формированию
аллергических заболеваний (АЗ) у лиц без генетических предпосылок к аллергии
(1, 5, 7, 10, 19).
Среди причин возникновения аллергии, обусловленных воздействием
внешней среды, первоочередное значение имеет аллергия к домашней пыли. Она
проявляется чиханием, насморком (ринит), зудом век, слезотечением (конъюнктивит) и даже приступами удушья, характерными для БА. Самой частой причиной
БА является домашний клещ, чувствительность к которому выявляется у 90%
больных БА.
В значительной мере аллергенность домашней пыли обусловлена присутствием микроклещей Dermatophagoides pteronissinus, постоянно находящихся в
ней в огромном количестве: в 1 г пыли от 500 до 2270. Они преимущественно обитают в постельных принадлежностях, мягкой мебели, коврах, а при уборке помещений оказываются и в воздухе. Аллергенностью обладает как сам клещ, так и
его экскременты (6, 8, 9, 12, 14, 20).
Этот антиген содержит кроме того неорганические компоненты и органические частицы, преимущественно продукты бытовой деятельности человека (волокна шерстяных и растительных тканей, отделившиеся эпителиальные клетки,
волосы человека), шерсть домашних животных, плесенный мицелий и споры, бактерии. Гомогенизации домашней пыли благоприятствует продолжительное пребывание при комнатной температуре, особенно в условиях повышенной влажности. Не исключено, что при этом происходят химические реакции, увеличивающие
общую аллергенность домашней пыли (2, 3, 4, 11, 15, 21).
Домашняя пыль обладает как специфическими свойствами, присущими
определенному помещению, так и общими для домашней пыли, находящейся в
различных помещениях. Так, известны примеры, когда приступы БА возникают
при смене квартиры или мягкой мебели, или избирательно на одном из нескольких домашних диванов.
3
Установлено, что у взрослых и детей с БА наступает улучшение после прекращения контакта с домашней пылью, и значительно уменьшаются или исчезают
ринит и конъюнктивит (13, 16, 17, 18).
Необходимо напомнить, что Т-хелперы являются ключевыми клетками иммунной системы (ИС), определяющими тип иммунного ответа на поступающие в
организм чужеродные агенты. Они дифференцируются из Т-лимфоцитов (СD4+
Т-клеток), вслед за их пролиферацией, проходя этап так называемых Т-нулевых
клеток (Tho). При этом образуются две основные разновидности Т-хелперов (Th1
и Th2), которые отличаются набором секретируемых цитокинов.
Как считает Р.М.Хаитов (2002), Th1 выполняет функции хелперов реакций
клеточного типа, в числе которых реакции ИС, реализуемые при участии макрофагов (гиперчувствительность замедленного типа) и цитотоксических лимфоцитов. Th2 являются хелперами гуморального иммунного ответа и, в частности, способствуют развитию АлР. Ряд авторов считают, что для их возникновения также
необходимы контактные взаимодействия В-клеток и Т-хелперов. Между Th1 и Th2
существуют антагонистические взаимоотношения, а фиксирующийся генетически
или в процессе жизни перевес одного типа хелперов над другим определяет преобладающую форму иммунного ответа (5, 10, 21).
Таким образом, в зависимости от типа реагирования ИС иммунная реакция
может приобретать характер сугубо защитной или АлР.
При контакте АГ с группой клеток (преимущественно с Th2- хелперами)
начинает продуцироваться ряд интерлейкинов (ИЛ), среди которых наиболее важными являются ИЛ-3, ИЛ-4, ИЛ-5. Вследствие этого активированные В-лимфоциты
превращаются в плазматические клетки, которые продуцируют IgE (в меньшей
мере - IgG4), увеличивается количество тучных клеток или базофилов крови, на
их поверхности значительно возрастает количество рецепторов к Fc-фрагменту
IgE. “Активизируются” также эозинофилы, усиливается их миграционная активность, способность к продукции ИЛ. Этот этап иммунологической реакции называется сенсибилизацией (20, 21).
Следует упомянуть и о таком важном свойстве сенсибилизированных лимфоцитов как хоминг. Благодаря ему, сенсибилизированные В-лимфоциты, предшественники плазматических клеток-продуцентов иммуноглобулинов, мигрируют
по лимфатическим сосудам, попадают в селезенку и затем расселяются в слизистой оболочке различных органов (носа, бронхов, кишечника и прочее). Последующие поступления АГ аэрозольно может вызвать АлР в слизистой носа, бронхов
4
с соответствующими проявлениями аллергии (ринит, приступ удушья), несмотря
на то, что сенсибилизация произошла в кишечнике. Поэтому аллергия – это всегда системный феномен.
Анализ механизма возникновения АлР свидетельствует о том, что количество интерлейкинов ИЛ-1α, ИЛ-4, ФНО-α и ФНО-γ в сыворотке крови больных БА
может служить мерой степени воспалительной реакции, которая определяет глубину патологического процесса, а также является важным критерием, позволяющим
индивидуально подойти к назначению лечебных мероприятий. На наш
взгляд, одним из действенных вспомогательных факторов, повышающих эффективность лечения, может быть проведение его в гипоаллергенной палате, т.е. палаты, в которой созданы условия значительно снижающие содержание пыли в
воздухе. Такая палата создана во втором аллергологическом отделении Городской клинической больницы № 8. Палата оснащена антиаллергическим постельным бельем; гардинами и чехлами на мягкую мебель и ковриками из антистатической полиэфирной ткани.
Гигиена и прохладная спальная комната (16-18 °С), снижение влажности
воздуха, а также использование непылящих экологически чистых текстильных материалов для постельных принадлежностей и оформления интерьера может снизить аллергизирующее влияние в помещении.
При лечение БА в гипоаллергенной палате отмечено значительное уменьшение проявлений аллергии уже через несколько недель после лечения в ней.
В результате, у пациентов с легкими формами аллергии (ринит, конъюнктивит, БА) необходимость в применении лекарств отпала, а у больных с более тяжелыми формами заболевания значительно уменьшилась необходимость приема
противоаллергических препаратов. Таким образом, такой довольно простой прием, как оснащение палаты для лечения больных БА непылящими гипоаллергенными текстильными материалами оказывает благоприятное действие на пациентов с аллергией к домашней пыли, и его можно рекомендовать с целью профилактики и элиминации.
Методика
Субпопуляции Т-лимфоцитов (CD3+, CD4+, CD8+), В-лимфоцитов (CD20+),
IgG и IgE в сыворотке крови определялись помощью иммуноферментного анализа
(ИФА). Состав сыворотки исследуемых цитокинов изучался спектрофотоколориметрическим методом с использованием наборов реактивов для ИФА анализа, ко-
5
торый был разработан Государственным НИИ особо чистых биопрепаратов
(Санкт-Петербург) и фирмой «Протеиновый профиль».
Традиционная терапия включала бронхолитики, симпатомиметики, ксантиновые производные, кортикостероиды в ингаляционной форме, муколитические
препараты. Лечение больных БА проводилось в течение 20 дней. Объектом исследования были 107 больных с диагнозом БА в различных формах. В зависимости от получаемой терапии больные были разделены на следующие группы: в
первую группу входили пациенты, получающие лечение в ПЭЧТМ на фоне традиционной терапии – 57 человек; вторая группа – 50 больных БА, получавших только базисную терапию. Контрольную группу составляли 20 практически здоровых
лиц, доноров крови.
Результаты и их обсуждение
При оценке результатов проведенного лечения вначале определяли эффективность лечения по клиническим проявлениям болезни.
У больных БА, которые лечились в ПЭЧТМ, на фоне базисного лечения отмечено 20% положительных результатов – эффективность лечения 5 баллов, что
показывает – приступы удушья и дыхательного дискомфорта не наблюдались,
трудоспособность не нарушалась. У 58% пациентов отмечен хороший эффект – 4
балла – приступы удушья исчезли в процессе лечения, но периодически беспокоил небольшой сухой кашель, легкая одышка с затруднением выдоха, что требовало использования β2-агонистов короткого действия и отхаркивающих препаратов.
Трудоспособность больных сохранилась полностью. Удовлетворительный эффект
– 3 балла – определен у 30% больных – приступы удушья сохранились, но стали
более легкими и редкими, требовали приема бронхолитических препаратов, профилактических курсов лечения кромогликатом или недокромилом натрия, приема
отхаркивающих препаратов, трудоспособность сохранилась.
У пациентов контрольной группы, которые на фоне базисного лечения не
лечились в ПЭЧТМ, только в 10% случаев были получены отличные результаты; в
40% был хороший эффект; удовлетворительный – у 50% больных БА, что подтверждает эффективность использования ПЭЧТМ при лечении больных БА.
Исходное состояние иммунологической реактивности больных БА до лечения было вполне сопоставимым.
Результаты анализа изменений состояния клеточного иммунитета у больных свидетельствует о достоверно более низком уровне относительного числа Т-
6
лимфоцитов (CD3+) у пациентов изучаемых групп в сравнении с контрольной
группой (таблица 1).
Таблица 1
Субпопуляционный состав лимфоцитов у больных БА в процессе лечения (M±m)
№
Группа
п/п
обследованных лиц
1
Контрольная
2
1я (ПЭЧТМ)
Количество лиц
Субпопуляционный состав Т-лимфоцитов (%)
CD4+/
CD3+
CD4+
CD8+
20
60,3±1,2
35,4±1,3
25,1±1,5
1,50±0,04
в группе
CD8+
Экспериментальная
3

до лечения
57
35,4±1,1*
25,8±0,7*
17,5±1,2
1,40±0,09

после лечения
57
63,1±1,3**
36,9±1,1**
24,2±0,4**
1,50±0,01**
50
36,3±1,1*
25,9±0,8*
18,2±1,3*
1,39±0,07*
50
48,2±1,1
29,5±0,9
20,1±0,9
1,35±0,01
2я (базисное лечение)
Экспериментальная

до лечения

после лечения
Примечание: * - достоверность различий в сравнении с показателями у лиц контрольной группы (р<0,05)
** - достоверность с данными до лечения (р<0,05)
Оказалось, что у всех пациентов до лечения был довольно низкий уровень
CD4+ (23,7±0,8%) и особенно CD8+ (18,4±1,4%). В результате проведенного лечения вышеуказанные показатели
нормализовались при лечении в ПЭЧТМ, а в
группе больных, получавших обычную терапию, отмечалась тенденция к улучшению показателей, однако уровня здоровых лиц они не достигали. Клинически это
проявлялось более быстрым улучшением общего состояния больных – более
редким приемом симпатомиметиков, уменьшением дозы ингаляционных кортикостероидов, улучшением спирометрических показателей. Состояние гуморального
иммунитета представлено в таблице 2. Количество В-лимфоцитов у больных достоверно не отличалось от нормы. У всех больных БА содержание IgE до лечения
было значительно повышенным, и только после лечения в ПЭЧТМ снизилось до
нормы.
7
Таблица 2
Состояние В-звена иммунитета у больных БА в процессе лечения (M±m)
№
Группа
Количество
CD20+
IgG
IgE общ
п/п
обследованных лиц
лиц в группе
(%)
(%)
(ке/л)
20
15,9±3,2
11,4±0,9
26,3±1,5
57
18,7±0,8
15,5±0,4*
59,3±2,3*
57
16,1±0,5**
11,9±0,2**
30,1±2,9**
1
2
Контрольная
1я (ПЭЧТМ)
Экспериментальная
3

до лечения

после лечения
2я (базисное лечение)
Экспериментальная

до лечения
50
18,5±0,4
16,1±0,3*
64,8±2,7*

после лечения
50
17,9±0,5
15,1±0,2**
49,4±2,5**
Примечание: * - достоверность различий в сравнении с показателями у
лиц контрольной группы (р<0,05).
** - достоверность с данными до лечения (р<0,05)
Как говорилось выше, в данном исследовании основное внимание уделялось изучению некоторых иммунологических показателей до и после проведенного лечения, проведенного в ПЭЧТМ. При обследовании группы больных до лечения определены следующие изменения в группе цитокинов (таблица 3): концентрация ИЛ-1α в сыворотке крови у больных БА, которые лечились в ПЭЧТМ на
фоне базовой терапии была определенно увеличена в сравнении со здоровыми
людьми (р<0,05).
До лечения показатели ИЛ-1α, ИЛ-4, ФНО-α, ИНФ-γ во всех группах исследуемых больных достоверно не отличались. После проведенного лечения вместе
с отмеченной выше положительной динамикой клинической симптоматики был
определен ряд изменений цитокинового профиля. Так, уровень ИЛ-4 в сыворотке
крови пациентов, которые получали лечение в ПЭЧТМ, достоверно снизился в
сравнении с таким до лечения и не отличался от показателей у здоровых лиц.
О наличии воспалительных явлений в остром периоде БА с некоторой долей вероятности свидетельствует повышение в сыворотке крови типичных воспалительных цитокинов ИЛ-1α и ИЛ-4, тогда как снижение содержания ФНО-α может
свидетельствовать о факторах, которые ограничивают реализацию воспаления.
8
Таблица 3
Показатели производства некоторых цитокинов у больных БА
до и после лечения (M±m)
Показатели
Здоровые люди,
n=20
Больные БА, лечившиеся
в ПЭЧТМ , n=57 (І)
до лечения
после лечения
Больные БА, получавшие обычную
терапию
n=50 (ІІ)
до лечения
после лечения
ИЛ-1α
спонтанная
индуцированная
80,4±10,1
1855,0±9,8
733,4±101,5
4725±670,0
450,1±50,1
3525,0±550,0
731,2±100,4
4720±650,0*
690,1±16,7
2010±10,5
In vivo
30,0±2,2
11,0±1,4*
21,1±5,7
11,2±1,2*
25,1±9,2
ИЛ-4, пг/мл
25,1±1,5
81,3±12,4*
25,7±0,9**
80,9±11,9*
75,1±15,1
ФНО-α, пг/мл
25,0±4,0
560±11,7*
25,1±10,2**
561±11,9*
230,1±0,2**
Примечание: *- достоверность различия от контроля, р<0,05;
** - достоверность различия от группы больных после лечения, р<0,05
9
Выводы
Таким образом, лечение в гипоаллергенной палате, оснащенной экологически чистыми текстильными материалами (ПЭЧТМ), в комплексной терапии больных БА способствует нормализации иммунологической реактивности организма,
вызывает повышение количества Т-лимфоцитов, нормализует соотношения субпопуляций Т-лимфоцитов.
Комплексная терапия на фоне лечения больных БА в специальной палате
выявила непрямые признаки снижения активности Th2 – составляющей иммунной
системы, что свидетельствует о нормализации уровня ИЛ-4 в сыворотке крови.
Нормализация уровня сывороточного ФНО-α – одного из факторов, который дестабилизирует тучную клетку, может рассматриваться как положительный эффект
лечения в гипоаллергической палате, что способствует снижению клеточных проявлений БА. При лечении больных БА в комплексе в ПЭЧТМ сохраняется высокий уровень спонтанной продукции ИЛ-1α, возможно, в ответ на длительное поступление аллергенов. Включение в комплексное лечение больных БА нахождения в ПЭЧТМ приводит к сокращению сроков пребывания больных в стационаре
на 35 %.
CПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Балаболкин И.И. Современные проблемы детской аллергологии. //М.- Педиатрия. -1997.- №2.-с.5-7.
2. Бронхиальная астма. Глобальная стратегия. Пульмонология. (1996.)
3. Гущин И.С. Аллергическое воспаление и его фармакологический контроль.
//М.-Фармарус принт. –1998.-252с.
4. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С., Воробьев А.А. Эндогенные иммуномодуляторы. //М. -Гиппократ.-1992 .-256 с.
5. Порядин Г.В., Салмаси Ж.М., Макарков А.И. Молекулярные механизмы IgE
опосредованной аллергии. //М.- РГМУ.- 1996.- 123 с.
6. Потапнев М.П., Печковский Д.В. Молекулярные и клеточные механизмы иммунопатологии при бронхиальной астме. //М.- Пульмонология.- 1997.-с. 74-81.
7. Пыцкий В.И., Адрианова Н.В., Артомасова А.В. Аллергические заболевания.
//М.- Триада-Х.- 1999.- 470 с.
8. Симбирцев А.С.Биология интерлейкиеа –1 человека в норме и патологии.
//Авторефер. Дисс.доктора мед.наук.- 1993.-255 с.
10
9. Тотолян А.А. Иммуноглобулин Е. Структура, продукция, биологические эффекты и диагностическое использование. //М.- Аллергология.- 1998.- № 2.- 4-7.
10. Тузанкина И.А., Синявская О.А., Шершнев В.Н. Иммунопатологические состояния в педиатрической практике. //Екатеринбург. - 1998.- 135 с.
11. Федосеев Г.Б. Механизмы воспаления бронхов и противовоспалительная терапия. //М.- Нормед-Издат.- 1998.- 688 с.
12. Федосеев Г.Б. Механизмы обструкции бронхов. //М. -Медицинское информационное агенство.-1995.-336 с.
13. Ханферян Р.А. Механизмы регуляции синтеза IgE. //Вестник АМН СССР.1991.- №12.с.-29-32.
14. Ярилин А.А. Молекулярные основы межклеточной кооперации при иммунном
ответе. //М.- Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии
и иммунофармакологии.- 1998.- 59-80.
15. Aggarwal B.B., Eessalu T.E. Induction of receptors for tumor necrosis factor-a by
interferons is not a major mеchanism for their synergistic cytotoxic respons// J. Biol. Chem.- 1987.-Vol. 262.-p. 10000-10007.
16. Aggarwal B.B., Ееssalu T.E., Hass P.E. Characterizasion of receptors for human
tumor necrosis factor and their regulation by y-intergeron. //Nature.- 1985.-Vol.
318.-p. 665-667.
17. Bocher B.S., Chaflesworth E.N., Lichtenstein L.M., Ders C.P., Gillis S.,Dinarello
C.A., Schleimer R.P. Interleukin-1 is released at siter of human cutaneous allergic
reaction. //J.Allergy Clin. Immunol.- 1990.-Vol. 86.-p. 830- 836.
18. Candler R.V., Rouse B.T., Moore R.N. Regulation of interleukin-1 production by aand y-interferons: Tvidence for both direct and indirect enhancement. //J. Interferon
Res.- 1985.- № 5.-p. 179-189.
19. Growth Factors, Differentiation Faktors and Cytokines ( ed. A. Habenicht)// Dtulinnev-yorc.- 1990.-p.234-567.
20. Hadden J.W. T-cell adjuvancy response// Int. Immunofarmacol.- 1964.- Vol.16.- p.
703-710.
21. Kurt-Jones E.A., Beiler D.I., Mizel S.B., Unanue E.R. Identification of a membrane_associated interleukin 1 in macrophages. //Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A.- 1985.Vol.82.-p. 1204-1208