Занятие № 1 Темы 1. ФИЗИОЛОГИЯ СИСТЕМЫ КРОВИ. 2. ЭРИТРОН.

Занятие № 1
Темы:
1. ФИЗИОЛОГИЯ СИСТЕМЫ КРОВИ.
2. ЭРИТРОН.
3. ДЫХАТЕЛЬНЫЕ ПИГМЕНТЫ.
Цель: приобрести знания о составе и функциях крови, механизмах
гуморальных связей органов и систем, поддержки гомеостаза, механизмах
регуляции эритропоеза, рН-метрии крови; научиться определять количество
эритроцитов, приобрести знания об основных функциях гемоглобина и
миоглобина, научиться определить современными методами количество
гемоглобина в крови и рассчитать показатели насыщения эритроцитов
гемоглобином, приобрести знания о факторах, которые влияют на
реологические свойства крови, вязкость крови, гематокрит, механизмы,
которые обусловливают скорость оседания эритроцитов, их деформацию;
научиться определять основные показатели, которые предопределяют
реологические свойства крови, приобрести знания о развитии и становлении
органов кроветворения, реологические особенности крови в возрастном
аспекте.
Профессиональная
ориентация
студентов:
кровь
является
соединительной тканью организма. С её помощью осуществляется связь всех
органов и систем, происходит регуляция функций. По изменениям
показателей крови можно думать о функциональном состоянии конкретной
системы и организма в целом.
Одной из составляющих форменных элементов крови есть эритроциты,
которые принимают участие в транспорте газов, белков, физиологически
активных веществ, ионов и тому подобное. Знание о системе крови
необходимы для врачей любой специальности.
Гемоглобин - основной дыхательный пигмент эритроцитов, который
принадлежит к хромопротеидам и обеспечивает ткани кислородом.
Изменения количества гемоглобина бывают как в норме (увеличено
содержание у новорожденных), так и в патологии (анемии,
миелопролиферативные заболевания). Определение миоглобина применяется
для диагностики поражений сердца.
Знание о реологических свойствах крови необходимые врачам для
практической работы, поскольку патология системы крови находится на
одном из первых мест среди причин заболеваемости и смертности населения.
Знание о скорости оседания эритроцитов необходимы для диагностики
общих процессов, интоксикаций, инфекционных заболеваний.
1. ПРОГРАММА САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ ПОДГОТОВКИ
СТУДЕНТОВ К ЗАНЯТИЮ
Тема № 1. ФИЗИОЛОГИЯ СИСТЕМЫ КРОВИ.
1. Общая характеристика системы крови:
а) понятие о системе крови;
б) функции крови;
в) объем крови, понятия о депо;
г) состав крови, количественная оценка;
д) состав плазмы (сыворотки), количественная оценка;
е) функциональное значение белков плазмы;
ж ) буферные системы крови.
2. Влияние состава плазмы на реологию крови:
а) влияние белковых и небелковых компонентов;
б) влияние физико-химических факторов.
в) реологические особенности крови у детей и лиц преклонных лет.
Тема № 2. ЭРИТРОН.
1. Функциональная система эритрона:
а) количественные параметры эритроцитов, их изменения;
б) функции эритроцитов;
в) развитие эритроцитов;
г) регуляция эритропоеза.
2. Деформационная способность эритроцитов:
а) мембранные механизмы;
б) роль эритроцитарного содержимого.
3. Физиологичный анализ скорости оседания эритроцитов (СОЭ):
а) понятие об агрегации эритроцитов;
б) влияние состава крови на СОЭ;
в) влияние физиологических состояний организма на СОЭ.
4. Общая характеристика резистентности эритроцитов:
а) определение понятий "резистентность" и "гемолиз";
б) виды гемолиза.
Тема № 3. ДЫХАТЕЛЬНЫЕ ПИГМЕНТЫ.
1. Гемоглобин:
а) количественная характеристика и химическая структура;
б) методы определения;
в) соединения гемоглобина, их особенности;
г) обмен железа в организме;
д) деструкция эритроцитов и гемоглобина;
е) понятие о цветовом показателе, среднем содержании гемоглобина.
2. Миоглобин:
а) локализация, структура;
б) функциональные особенности.
2. ОБРАЗЦЫ ТЕСТОВЫХ ЗАДАНИЙ И СИТУАЦИОННЫХ
ЗАДАЧ
1. Какова нормальная величина гематокpитного показателя крови?
A 45%
B 35%
C 68%
D 87%
E 20%
2. Какова продолжительность жизни эpитpоцитов в крови:
A 1-2 месяцы
B 100 - 120 дней
C 5 - 6 месяцев
D 1 год
E 2 года
3. Какую функцию в процессах газообмена выполняет фермент
карбоангидраза и где она содержится? Выберите наиболее правильный ответ.
A обеспечивает образование угольной кислоты в эритроцитах
B обеспечивает образование угольной кислоты в плазме
C обеспечивает диссоциацию угольной кислоты в плазме
D обеспечивает отщепление СО2 от гемоглобина в эритроцитах
E обеспечивает отщепление СО2 от гемоглобина в плазме
4. Активной частью гемоглобина является сложное соединение
протопорфирина с катионом. Этот катион представлен:
A K+
B Mg2+
C Ca2+
D Fe2+
E Na+
5. Активная реакция крови обусловлена наличием в ней:
A Лейкоцитов
B Эритроцитов
C Водородных (Н+) и гидроксильных (ОН-) ионов Лейкоцитов
D Солей
E Тромбоцитов
1. В общем анализе крови обследуемого количество эритроцитов
составляет 3,7 Т/л, концентрация гемоглобина – 120 г/л, цветовой показатель
– 0,97, СОЭ – 36 мм/час. Что вы можете сказать об обследуемом?
2. У обследуемого количество эритроцитов в крови - 3,9 Т/л,
концентрация гемоглобина - 126 г/л. Определите цветовой показатель и
среднее содержание гемоглобина в эритроцитах.
3. ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ НА ТЕСТЫ И СИТУАЦИОННЫЕ
ЗАДАЧИ
1. А; 2. В; 3. А; 4. D; 5. С.
1. Обследуемый – беременная женщина. 2. ЦП=(3 х 126)/390=0,97,
среднее содержание гемоглобина в эритроцитах = 126/3,9 х 1012 = 32 пг.
4. ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ
Основные:
1. Нормальная физиология /Под ред. В.И. Филимонова. - К., 1994. - С.
244-258, 284-287.
2. Пособие по нормальной физиологии /Под ред. В.Г. Шевчука, Д.Г.
Наливайка. - К., 1995. - С. 105-108, 113-126.
3. Основы функциональной диагностики (учебное пособие) /Вадзюк
С.Н. - Тернополь, 2001. - С. 5-8, 30-31, 32-33.
4. Справочник основных показателей жизнедеятельности здорового
человека /Под ред. проф. С.Н. Вадзюка. - Тернополь, 1996. - С. 3-5, 13.
5. Лекционные материалы.
Дополнительные:
1. Физиология человека /Под ред. Г.И. Косицкого. - Г., 1985. - С.с. 210222, 229-232, 237-239.
5. МЕТОДИКА ВЫПОЛНЕНИЯ ПРАКТИЧЕСКОЙ РАБОТЫ
Тема № 1. ФИЗИОЛОГИЯ СИСТЕМЫ КРОВИ.
Работа 1. Определение гематокритного показателя
Перед заполнением кровью, гематокрит промыть раствором оксалата
натрия. Чтобы кровь не вылилась во время центрифугирования, на капилляр
надеть резиновое кольцо (фрагмент медицинской резиновой рукавицы).
Центрифугировать на протяжении 30 минут при 3000 оборотов. Отметить
объем эритроцитов и выразить его в СИ.
В выводе указать, отвечает ли физиологичной норме определенный
гематокритный показатель, если нет, то раскрыть возможную причину этого
отклонения.
Тема № 2. ЭРИТРОН.
Работа 1. Подсчет эритроцитов в камере Горяева.
Набрать кровь в меланжер (смеситель) для эритроцитов до отметки 0,5
и заполнить его до отметки 101 гипертоническим (3 %) раствором хлорида
натрия.
Разведение в 200 раз можно сделать и без смесителя, используя сухую
чистую пробирку.
В сухую чистую пробирку внести 4 мл раствора 3 % хлорида натрия и
внести 0,02 мл крови.
На выступающие бруски чистого и сухого стекла камеры с сеткой
Горяева положить покровное стекло. Двигая покровное стекло в
саггитальном направлении, притереть его. Появление цветных колец в
местах контакта стеклянных поверхностей будет свидетельствовать об
образовании наилучшего контакта между покровным стеклом и гранями
камеры Горяева. При этом высота образованной камеры над сеткой Горяева
будет 0,1 мм.
Из капилляра смесителя выпустить растворитель на вату, а камеру
заполнить раствором крови и 3 % натрия хлорида из расширения.
Если разведение было в пробирке, то пастеровской пипеткой или
другим капилляром набрать смесь и заполнить камеру. При этом необходимо
следить, чтобы в камере не образовались воздушные пузырьки и радужные
круги в зонах контакта стёкол камеры и покровного стекла не исчезли.
Через 1-2 минуты, когда эритроциты осядут, подсчитать их количество
в 5 больших, разделенных на 16 малых квадратов, при малом увеличении
микроскопа в затемненном поле зрения. Подсчет проводить из верхнего
квадрата по диагонали вниз. Количество эритроцитов в 1 л циркулюющей
крови рассчитать по формуле:
х = [(а · 200) : 80] · 4 · 109, где
х - количество эритроцитов в 1 л крови,
а - количество эритроцитов в 5 больших квадратах
200 - разведение крови
80 - количество малых квадратов, в которых производили подсчёт.
В протоколе схематически изобразить сетку Горяева с размещенными
над ней эритроцитами.
В выводе указать, отвечает ли установленное количество эритроцитов
физиологичной норме, если нет, то раскрыть возможную причину этого
отклонения.
Работа 2. Определение скорости оседания эритроцитов
Капилляр Панченкова заполнить раствором цитрата натрия к отметке Р
(раствор) и вылить его в специальную фарфоровую чашечку. Потом дважды
набрать кровь к отметке К (кровь) и внести ее в отмеренный цитрат натрия,
смешать. Заполнить капилляр смесью к отметке "К" и установить его в
строго вертикальном положении в аппарате Панченкова.
Определить надлежащую СОЭ в соответствии с предварительно
полученными данными количества эритроцитов по формуле:
СОЭ = 42-(7,5 • количество в 1 л)= мм/час, где
42 и 7,5 - коэффициенты
Сопоставить надлежащую величину СОЭ с фактической
В выводе указать, отвечает ли физиологичной норме определённая
СОЭ, если нет, то раскрыть возможную причину этого отклонения .
Тема № 3. ДЫХАТЕЛЬНЫЕ ПИГМЕНТЫ.
Работа 1. Определение гемоглобина с помощью гемометра Салли.
В среднюю, градуированную пробирку гемометра Салли к нижней
круговой метке пипеткой налить 0,1 N хлористоводородной кислоты (0,1
нормальной HCl). Туда же внести 0,02 мл крови, осторожно выдувая.
Содержание пробирки перемешать и оставить на 5 минут для превращения
гемоглобина в хлорид гематин. Дистиллированной водой довести
содержание средней пробирки до цвета стандартов. Расцветку сравнивать в
проходящем свете, держа гемометр на уровне глаз.
В протоколе схематически изобразить гемометр Салли.
В выводе указать отвечает ли полученный результат физиологичной
норме. Если нет, то раскрыть возможную причину этого отклонения.
Работа 2. Определение гемоглобина цианметгемоглобиновым
методом.
В сухую чистую пробирку внести 5 мл трансформирующего раствора и
0,02 мл исследуемой крови. Содержание пробирки хорошо перемешать и
оставить на 10 минут. Потом определить оптическую плотность полученной
смеси и стандартного раствора на фотоэлектроколориметре (длина волны
500-600 нм, зеленый светофильтр) против трансформирующего раствора.
Содержание гемоглобина рассчитать по формуле:
Нв г/л = [(Е иссл. пр. : Е станд. пр.) • 251] • С, где
Е исследуемой и Е стандартной проб - оптическая плотность.
С - концентрация Нв в стандартном растворе - 0,5975 г/л.
251 - коэффициент разведения крови.
В выводе указать, отвечает ли полученный результат физиологичной
норме. Если нет, то раскрыть возможную причину этого отклонения.
Работа 3. Определение цветового показателя, среднего содержания
гемоглобина в эритроцитах
Цветовой показатель (ЦП) высчитать по формуле:
ЦП = (3 • К1) : К2, где
К1 - количество гемоглобина;
К2 - первые три цифры количества эритроцитов.
Среднее содержание гемоглобина (СВГ) в одном эритроците
рассчитать по формуле:
СВГ = К1 : К2, где
К1 - количество гемоглобина;
К2 - количество эритроцитов.
В выводе указать, отвечают ли полученные результаты физиологичной
норме. Если нет, то раскрыть возможную причину этого отклонения.
6. СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:
1. Функции крови, эритроцитов
2. Состав крови, количественную её оценку
3. Функциональное значение элементов крови
4. Буферные системы крови.
5. Регуляцию эритропоэза.
6. Гемоглобин, его соединения. Миоглобин.
7. Пути обмена железа в организме.
8. Физиологичный анализ скорости оседания эритроцитов (СОЭ):
9. Виды гемолиза.
10. Состав крови новорожденных и людей преклонных лет:
7. СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:
1. Подсчитать количество эритроцитов в камере Горяева и дать оценку
результатам.
2. Определить концентрацию гемоглобина и дать оценку результатам.
3. Определить цветовой показатель, среднее содержание гемоглобина в
эритроцитах и дать оценку результатам.
4. Определить гематокритный показатель и дать оценку результатам.
5. Определить скорость оседания эритроцитов и дать оценку
результатам.
Методическое указание составила асистент Толокова Т.И.
Обсуждено и утверждено на заседании кафедры физиологии
“31”августа 2011р. протокол № 1
Занятие № 2
Темы:
1. ФИЗИОЛОГИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ.
2. ЛЕЙКОЦИТАРНАЯ ФОРМУЛА.
3. ГРУППЫ КРОВИ.
Цель: приобрести знания о функциях лейкоцитов, механизмах
регуляции лейкопоеза, научиться определять количество лейкоцитов в
периферической крови, научиться подсчитывать лейкоцитарную формулу и
анализировать ее, приобрести знания об антигенных системах, их роли и
значении в физиологичном развитии организма, физиологичное действие на
организм перелитой крови и кровезаменителей и правила их перелвиния,
научиться определять группы крови по стандартным сывороткам, резусафактор моноклональными антителами.
Профессиональная ориентация студентов: лейкоциты - клетки крови,
которые имеют характерную структуру и сложный внутриклеточный
метаболизм. Это высокоспециализированные клетки, которые владеют
разными защитными функциями.
Количество лейкоцитов в крови изменяется под воздействием разных
внешних факторов, а также при разных физиологичных состояниях
организма (возрастные изменения, беременность, фазы менструального
цикла и тому подобное) и разнообразных патологиях. Потому исследование
количества лейкоцитов в крови – самое распространённое в лабораторной
практике.
Изменения лейкоцитарной формулы сопровождают многие заболевания
и нередко являются специфическими. Подсчет лейкоцитарной формулы
имеет диагностическое значение, так как дает понятие о тяжести состояния
больного, эффективности проводимой терапии.
Знание антигенных систем и умение определения их является
фундаментальным основным для будущей врачебной деятельности при
решении вопросов отцовства, донорства, судебно-медицинской экспертизе.
1. ПРОГРАММА САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ ПОДГОТОВКИ СТУДЕНТОВ
К ЗАНЯТИЮ
Тема1. ФИЗИОЛОГИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ.
1. Физиологическая оценка белой крови:
а) общие функции лейкоцитов;
б) количество лейкоцитов и их изменения;
в) лейкоцитопоез.
2. Значение лейкоцитов в обеспечении иммунитета:
а) физиологическая роль Т-лимфоцитов;
б) функциональное значение В-лимфоцитов;
3. Система мононуклеарных фагоцитов (СМФ):
а) происхождение СМФ;
б) распространение в организме;
в) функции СМФ.
Тема 2. ЛЕЙКОЦИТАРНАЯ ФОРМУЛА
1. Общая характеристика лейкоцитарной формулы:
а) виды лейкоцитов, основа их деления;
б) определение понятия “лейкоцитарная формула” и ее количественное
выражение;
в) индекс ядерного сдвига нейтрофилов, его интерпретация.
2. Функциональные особенности лейкоцитов:
а) нейтрофилов;
б) эозинофилов;
в) базофилов;
г) моноцитов.
Тема 3. ГРУППЫ КРОВИ.
1. Эритроцитарные группы крови:
а) определение понятия "группа крови";
б) антигены и антитела системы АВ0;
в) антигенный набор системы резус;
г) механизмы развития резус-конфликта при беременности;
д) методы определения групп крови в системах АВ0 и CDE по стандартным
гемаглютинирующим сывороткам и моноклональным антителам.
2. Лейкоцитарные группы крови:
а) общие антигены лейкоцитов;
б) антигены гранулоцитов, лимфоцитов.
3. Сывороточные группы крови:
а) иммуноглобулинов;
б) альбуминов, глобулинов.
4. Переливание крови и кровезаменителей:
а) проба на индивидуальную совместимость;
б) биологическая проба;
в) физиологические эффекты перелитой крови;
г) классификация кровозаменителей.
5. Состав крови новорожденных и людей преклонных лет:
а) лейкоцитарный состав;
б) иммуногенетические особенности крови людей разных возрастных груп.
2. ОБРАЗЦЫ ТЕСТОВЫХ ЗАДАНИЙ И СИТУАЦИОННЫХ
ЗАДАЧ
1. При определении группы крови по системе АВ0 с помощью стандартных
сывороток наблюдалась агглютинация в сыворотках I и II групп. Какие
агглютиногены содержатся в исследуемой крови?
AВ
BА
CАиВ
D Нет агглютиногенов
E Невозможно определить
2. Какие из перечисленных ниже клеток не относятся к зрелым лейкоцитам?
А. Базофил
В. Лимфоцит
С. Моноцит
D. Эозинофил
Е. Метамиелоцит.
3. Во время определения у пациента группы крови в системе АВО с
помощью цоликлонов наблюдается реакция с анти- А и В. К какой группе
крови принадлежит результат?
A АВ (IV)
B В (III)
C А (II)
D 0 (I)
E Ошибочный результат
4. Деление крови на группы в системе АВ0 зависит от наличия антигенов. В
каких форменных элементах крови они определяются?
A Эритроциты
B Лейкоциты
C Тромбоциты
D Нейтрофилы
E Эозинофилы
5. В какой группе крови отсутствуют аглютиногены А и В?
A Первой
B Второй
C Третьей.
D Четвертой
E Такого не может быть.
1. Как изменится количество лейкоцитов после приема еды, при
беременности, выраженных эмоциях? Как называется такое состояние?
2. Какие клетки преобладают у детей 5-6 месяцев, 5-6 лет?
3. ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ НА ТЕСТЫ И СИТУАЦИОННЫЕ
ЗАДАЧИ
1. А; 2. Е; 3. А; 4. А; 5. А.
1. Увеличится. Физиологический лейкоцитоз. 2. Лимфоциты, равное
количество лимфоцитов и нейтрофилов.
4. ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ
Основные:
1. Нормальная физиология /Под ред. В.И. Филимонова. - К., 1994. - С.
252, 255-261, 263-276, 284-287.
2. Пособие по нормальной физиологии /Под ред. В.Г. Шевчука, Д.Г.
Наливайка. - К., 1995. - С. 106-113, 126-138.
3. Основы функциональной диагностики (учебное пособие) /Вадзюк
С.Н.. - Тернополь, 2001. - С. 8-9, 30-32.
4. Справочник основных показателей жизнедеятельности здорового
человека /Под ред. проф. С.Н.Вадзюка - Тернополь, 1996. - С. 3-9.
5. Лекционные материалы.
Дополнительные:
1. Физиология человека /Под ред. Г.И. Косицкого. - Г., 1985. - С. 212213, 217-222, 226-229, 231-237.
2. Физиология человека /Под ред. Р. Шмидта и Г. Тевса. - М.: Мир, 1996.
- Т. 2. - С. 431-439.
5. МЕТОДИКА ВЫПОЛНЕНИЯ ПРАКТИЧЕСКОЙ РАБОТЫ
Тема 1. ФИЗИОЛОГИЯ ЛЕЙКОЦИТОВ.
Работа 1. Изготовление мазка крови
Мазок крови изготовить на обезжиренном предметном стекле без
шлифуемых граней. Для этого, на расстоянии 1-1,5 см от короткого ребра
нанести каплю крови. Правой рукой взять предметное стекло с
шлифоваными гранями и подвести его слева к капле крови так, чтобы она
находилась под углом 45°. Когда капля крови расплывется на ширину стекла,
быстро и равномерно переместить его слева вдоль обезжиренного стекла, не
доходя к краю на 1 см.
Изготовленный мазок высушить, зафиксировать с помощью этилового
спирта (не меньше 20 минут) и покрасить (до 45 минут) краской
Романовского-Гимзе. После этого мазок промыть и высушить.
В выводе указать, отвечает ли основным требованиям изготовленный
мазок крови.
Работа 2. Подсчет общего количества лейкоцитов.
Набрать в смеситель для лейкоцитов к отметке 0,5 кровь и к отметке 11
раствор уксусной кислоты 3 %, окрашенной генцианвиолетом.
Чаще разведение изготавливают в пробирке. В сухую чистую пробирку
внести 0,4 мл 3 % раствора уксусной кислоты, окрашенной генцианвиолетом
и 0,02 мл крови. Полученной смесью заполнить камеру Горяева, как при
подсчете эритроцитов.
Лейкоциты подсчитать в предварительно подготовленной камере
Горяева, в сетке в 100 больших квадратах, сгруппированных по 4, при малом
увеличении микроскопа, в затемненном поле зрения.
Количество лейкоцитов определить по формуле:
х = [(А · 20) : 1600] · 4 · 10٩, где
х
- количество лейкоцитов в 1 л крови
А - количество лейкоцитов, подсчитанных в 100 больших квадратах
20 - разведение крови
1600 - количество малых квадратов в 100 больших.
В протоколе схематически изобразить сетку Горяева с размещенными
над ней лейкоцитами.
В выводе указать или отвечает установленное количество лейкоцитов
физиологичной норме. Если нет, то раскрыть возможную причину этого
отклонения.
Тема 2. ЛЕЙКОЦИТАРНАЯ ФОРМУЛА
Работа 3. Подсчет лейкоцитарной формулы.
В мазке крови здорового человека, под имерсионным объективом найти
100 лейкоцитов, перемещая поле зрения зигзаговидной линией (линией
меандра). Из полученных результатов вывести соотношение между
отдельными видами лейкоцитов и это подать в виде таблицы, а также
схематически изобразить обнаруженные лейкоциты.
Единицы
Виды лейкоцитов
Базо- Эозино- Лимфо- МоноНейтрофилы
циты
циты
юные паличко- сегменто- фили филы
ядерные ядерные
Условные
Абсолютные
Количество указывать в условных и абсолютных единицах.
В выводе указать, отвечает ли лейкоцитарная формула физиологической
норме.
Работа 4. Определение индекса ядерного сдвига нейтрофилов.
Индекс ядерного сдвига нейтрофилов (ИЯЗ) рассчитать по формуле:
ИЯЗ = (М + Ю + П) : С, где
М - миелоциты; Ю - юные; П - палочкоядерные; С - сегментоядерные.
В выводе указать, отвечает ли лейкоцитарная формула, индекс ядерного
сдвига физиологической норме. Если нет, то раскрыть возможную причину
этих отклонений.
Тема 3. ГРУППЫ КРОВИ.
Работа 5. Определение групп крови в системе АВ0 с помощью
стандартных сывороток.
На чистую белую плоскость, после соответствующих записей
стеклографом, нанести стандартные сыворотки первой, второй и третьей
групп крови двух серий. В каждую из капель стандартной сыворотки, углом
чистого предметного стекла, внести в десять раз меньшее количество крови,
а через 2-3 минуты прибавить по одной капле физиологического раствора. За
появлением агглютинации наблюдать на протяжении 5 минут. Установить
группу крови. В случае четвертой группы крови, провести дополнительное
определение со стандартной сывороткой этой группы.
В протоколе схематически изобразить полученные результаты.
Работа 6. Определение групп крови в системе АВ0 с помощью
цоликлональных антител
Чистую белую плоскость стеклографом разделить на 2 сектора: Анти-А,
Анти-В. Нанести в соответствующий сектор по 1 капле цоликлонов Анти-А и
Анти-В. Уголком предметного стекла внести в десять раз меньшее
количество крови в обе капли цоликлонов. Наблюдение за ходом реакции
провести, покачивая тарелку на протяжении 2,5 минуты.
Полученные результаты изобразить схематически.
В выводе к проведенным работам указать, к какой группе в системе АВ0
принадлежит исследуемая кровь и что лежит в основе использованных
методик.
Работа 7. Определение резуса-фактор с помощью цоликлональных
антител
Нанести на чистую белую плоскость 1 краплю цоликлона анти-D.
Уголком предметного стекла внести в десять раз меньшее количество крови.
Наблюдение за ходом реакции провести, покачивая тарелку на протяжении
2,5 минуты.
Получены результаты изобразить схематически.
В выводе указать, резус-позитивная или резус-негативная исследуемая
кровь и на чем основывается определение резуса-фактор.
Работа 8. Определение индивидуальной совместимости крови
В пробирку внести 1 мл крови реципиента и процентрифугировать для
разделения плазмы и клеток. Потом взять каплю плазмы и прибавить в 10 раз
меньше количество крови донора, смешать. Через 5 минут оценить результат.
Отсутствие агглютинации указывает на совместимость крови донора и
реципиента.
В выводе указать совместимая или несовместимая кров реципиента с
кровью донора, на выявление чего направленная данная проба.
6. СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:
1. Функции лейкоцитов
2. Количество лейкоцитов и их изменения.
3. Виды лейкоцитов, количественное выражение лейкоцитарной формулы.
4. Эритроцитарные группы крови.
5. Антигены и антитела системы АВ0, антигенный набор системы резус.
6. Механизмы развития резус-конфликта при беременности;
7. Методы определения групп крови в системах АВ0 и CDE по стандартным
гемаглютинирующим сывороткам и моноклональным антителам.
8. Лейкоцитарные группы крови.
9. Принципы переливание крови и кровезаменителей.
10. Физиологические эффекты перелитой крови.
11. Классификацию кровозаменителей.
7. СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:
1. Изготовить мазок крови.
2. Подсчитать общее количество лейкоцитов и дать оценку результатам.
3. Подсчитать лейкоцитарную формулу, определить индекс ядерного сдвига
нейтрофилов и дать оценку результатам.
4. Определить группу крови в системе АВ0 и резус-фактор и дать оценку
результатам.
Методическое указание составила асистент Толокова Т.И.
Обсуждено и утверждено на заседании кафедры физиологии
“31”августа 2011р. протокол № 1
Занятие № 3
Темы:
1. СОСУДИСТО-ТРОМБОЦИТАРНЫЙ ГЕМОСТАЗ
2. КОАГУЛЯЦИОННЫЙ (ВТОРИЧНЫЙ ГЕМОСТАЗ)
3. ПРОТИВОСВЁРТЫВАЮЩИЕ МЕХАНИЗМЫ. ФИБРИНОЛИЗ.
Цель: приобрести знания о роли сосудисто-тромбоцитарного гемостаза
в механизмах функционирования свёртывающей и противосвёртывающей
системы, научиться определять отдельные показатели коагулограммы,
приобрести знания о механизмах вторичного гемостаза, научиться оценивать
основные показатели коагулограммы, приобрести знания о механизмах
поддержки крови в жидком состоянии, лизис тромба, научиться определять
отдельные показатели фибринолиза.
Профессиональная ориентация студентов: нарушение сосудистотромбоцитарного
гемостаза
встречается
при
тромбоцитопениях,
тромбоцитопатиях и ангиопатиях. Они могут быть как врожденные, так и
приобретенные. А так как клиническая картина заболеваний характеризуется
полиморфизмом, то больные с патологией сосудисто-тромбоцитарного
гемостаза будут лечиться у врачей разных специальностей: педиатров,
ревматологов, хирургов, дерматологов и тому подобное. Знание о факторах
свёртывания крови дадут возможность диагностировать разные нарушения
коагуляционного гемостаза, что очень важно как при вроджених
(гемофилии), так и приобретенных патологиях (заболевания печени,
десименованное
внутрисосудистое
свёртывание
крови).
Знание
протисвёртывающих механизмов, фибринолиза, необходимые для
диагностики и лечения патологий, что сопровождаются повышенным
свёртыванием крови, в частности при дисеминованном внутрисосудистом
свёртывании крови.
1. ПРОГРАММА САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ ПОДГОТОВКИ
СТУДЕНТОВ К ЗАНЯТИЮ
Тема 1. ФИЗИОЛОГИЯ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА. СОСУДИСТОТРОМБОЦИТАРНЫЙ (ПЕРВИЧНЫЙ ГЕМОСТАЗ)
1. Общая характеристика системы гемостаза:
а) определение понятия “система гемостаза”;
б) функционально-структурные компоненты системы гемостаза;
в) механизмы гемостаза.
2. Сосудисто-тромбоцитарный гемостаз:
а) активирование тромбоцитов;
б) свойства и функции тромбоцитов;
в) этапы сосудисто-тромбоцитарного гемостаза;
г) исследование сосудисто-тромбоцитарного гемостаза.
Тема 2. КОАГУЛЯЦИОННЫЙ (ВТОРИЧНЫЙ ГЕМОСТАЗ)
1. Анализ механизмов коагуляционного гемостаза:
а) характеристика факторов свёртывания крови;
б) внешний механизм первой фазы;
в) внутренний механизм первой фазы;
г) протекание второй и третьей фаз;
д) регуляция свёртывания крови.
2. Оценка свёртывания крови:
а) коагулограмма;
б) тромбоэластография.
Тема 3. ПРОТИВОСВЁРТЫВАЮЩИЕ МЕХАНИЗМЫ. ФИБРИНОЛИЗ.
1. Общая характеристика физиологических антикоагулянтов:
а) свойства антитромбина ІІІ;
б) значение гепарина;
в) роль альфа2-макроглобулина, альфа1-антитрипсина, протеина С;
г) функционирование вторичных антикоагулянтов.
2. Фибринолитическая система:
а) фазы фибринолиза;
б) механизмы активации протифибринолиза;
в) регуляция фибринолиза;
г) понятие о неферментативном фибринолизе.
3. Функционирование противосвёртывающих механизмов
а) при изменении концентрации тромбина в крови;
б) роль эндотелия сосудов в поддержке крови в жидком состоянии.
4. Особенности функционирования системы свёртывания крови:
а) новорожденных;
б) людей преклонных лет.
2. ОБРАЗЦЫ ТЕСТОВЫХ ЗАДАНИЙ И СИТУАЦИОННЫХ
ЗАДАЧ
1. При проведении пробы на ломкость капилляров (проба Кончаловского
- наложение жгута на 5 минут на плечо) на предплечье появилось 15 петехий
(в норме - до 10). О патологии каких клеток это свидетельствует?
А. Базофилов;
В. Эритроцитов;
С. Тромбоцитов;
D. Моноцитов;
E. Эозинофилов.
2. У больного в крови определили высокую активность протромбина, что
является угрозой тромбоза сосудов, Какой препарат следует применить в
данном случае?
A Гепарин.
B Оксалат натрия.
C Оксалат калия.
D Цитрат натрия.
E Этилендиаминтетраацетат (ЕДТА)
4. Мальчик 6 лет, неосторожно обращаясь с ножом порезал палец, из
которого течет кровь. Сколько времени будет продолжаться кровотечение?
A 5-8 минут
B 40-50 секунд
C 30 минут
D 15 минут
E 10 секунд
4. Какой из перечисленных ниже факторов запускает процесс фибринолиза?
А. ІІ;
B. ІV;
C. V;
D. X;
E. XІІ.
5. Какой белок крови в процессе ее свертывания переходит из растворимой
формы в нерастворимую?
A. Фибриноген
B. Тромбин
C. Протромбин
D. Альбумин
E. Глобулин
1. У обследуемого количество тромбоцитов в крови равняется 170·10 9/л.
О чем это свидетельствует и как это будет влиять на первичный гемостаз?
2. Как изменится время свёртывания крови после введения гепарина и
почему?
3. ПРАВИЛЬНЫЕ ОТВЕТЫ НА ТЕСТЫ И СИТУАЦИОННЫЕ
ЗАДАЧИ
1. С; 2. А; 3. А; 4. А; 5. А.
1. Количество тромбоцитов снижено. Будет увеличено время капиллярного
кровотечения. 2. Время свёртывания крови после введения гепарина
увеличится потому, что гепарин – это первичный антикоагулянт.
4. ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ
Основные:
1. Нормальная физиология /Под ред. В.И. Филимонова. - К., 1994. - С. 272286.
2. Пособие по нормальной физиологии /Под ред. В.Г. Шевчука, Д.Г.
Наливайка. - К., 1995. - С. 136-148.
3. Основы функциональной диагностики (учебное пособие) /Вадзюк С.Н.. Тернополь, 2001. - С. 10-12, 31-32, 34.
4. Справочник основных показателей жизнедеятельности здорового человека
/Под ред. проф. С.Н.Вадзюка. - Тернополь, 1996. - С. 10-11.
5. Лекционные материалы.
Дополнительные:
1. Физиология человека /Под ред. Г.И. Косицкого. - Г., 1985. - С. 217-226.
2. Физиология человека /Под ред. Р. Шмидта и Г. Тевса. - М.: Мир, 1996. - Т.
2. - C. 430-439.
5. МЕТОДИКА ВЫПОЛНЕНИЯ ПРАКТИЧЕСКОЙ РАБОТЫ
Тема 1. ФИЗИОЛОГИЯ СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА. СОСУДИСТОТРОМБОЦИТАРНЫЙ (ПЕРВИЧНЫЙ ГЕМОСТАЗ)
Работа 1. Определение длительности капиллярного кровотечения по
методу Дюке
У обследуемого стерильным скарификатором сделать прокол кожи
безымянного пальца левой руки глубиной 3-4 мм, не нажимая на палец, через
каждые 30 секунд прикасаться фильтровальной бумагой к месту прокола.
Исчезновение красного цвета свидетельствует о прекращении кровотечения.
В выводе указать, отвечает ли полученный результат физиологической
норме.
Работа 2. Подсчет количества тромбоцитов.
На предварительно изготовленный мазок крови нанести каплю
иммерссионного масла. Под объктивом 100х и окуляром 10х подсчитать 1000
эритроцитов и то количество тромбоцитов, которые встречаются при этом.
Содержание тромбоцитов в 1 л рассчитать по формуле:
х = (а х в) : 1000, где
х - количество тромбоцитов в 1 л крови
а - количество тромбоцитов при подсчете 1000 эритроцитов
в - количество эритроцитов в 1 л крови.
В выводе указать, отвечает ли установленное количество тромбоцитов
физиологической норме.
Тема 2. КОАГУЛЯЦИОННЫЙ (ВТОРИЧНЫЙ ГЕМОСТАЗ)
Работа 3. Определение времени рекальцификации плазмы.
В пробирку внести 0,3 мл раствора хлорида кальция и поместить ее в
водяную баню при t 37 °С. Через 60 секунд туда добавить 0,1 мл оксалатной
плазмы и с помощью секундомера определить время образования сгустка.
В выводе указать, отвечает ли полученный показатель физиологической
норме.
Работа 4. Тромбопластиновий тест Квика.
В пробирку внести 0,1 мл исследуемой крови и 0,1 мл суспензии
тромбопластина. Смесь поместить в водяную баню при t 37 °С на 60 секунд.
Потом прибавить 0,1 мл раствора хлорида кальция, включить секундомер и
определить время появления сгустка.
На основе полученных данных рассчитать тромбопластиновий индекс
(ТИ) по формуле:
ТИ = (Тромбопластиновий время здорового человека :
Тромбопластиновий время обследуемого) • 100 %
В выводе указать, что такое протромбиновое время и протромбиновый
индекс и отвечают ли эти показатели физиологической норме.
Работа 5. Тромботест.
В пробирку внести 5 мл раствора хлорида кальция и прибавить 0,1 мл
оксалатной плазмы, смешать и поставить в водяную баню при t 37 °С на 30
минут. При этом можно наблюдать семь степеней коагуляции: І опалесценция; ІІ - мелкие крупинки фибрина; ІІІ - хлопья фибрина; ІV - нити
фибрина; V - сетка из нитей фибрина; VІ - неплотный фибриновий сгусток;
VІІ - плотный фибриновий сгусток. Первые три степени наблюдаются при
гипокоагуляции, ІV, V, VІ - при нормальном свёртывании крови, VІІ - при
гиперкоагуляции.
В выводе указать состояние коагуляционного гемостаза.
Тема 3. ПРОТИВОСВЁРТЫВАЮЩИЕ МЕХАНИЗМЫ. ФИБРИНОЛИЗ.
Работа 6. Этаноловый тест
В пробирку внести 0,1 мл раствора этанола и 0,4 мл плазмы. Смешать и
поставить в штатив при t 37 °С на 10 минут. При наличии в плазме продуктов
фибринолиза образуется гель. В норме проба отрицательная.
Работа 7. Протаминсульфатный тест
К 0,1 мл плазмы прибавить 0,1 мл протаминсульфата, Встряхнуть и
поставить в штатив. Через 10 минут определить, образовался ли
желеобразный сгусток. В норме - проба отрицательная.
6. СТУДЕНТ ДОЛЖЕН ЗНАТЬ:
1. Общая характеристика системы гемостаза
2. Функционально-структурные компоненты системы гемостаза
3. Этапы и механизмы сосудисто-тромбоцитарного гемостаза.
4. Методы исследование сосудисто-тромбоцитарного гемостаза.
5. Механизмы коагуляционного гемостаза.
6. Механизмы регуляции свёртывания крови.
7. Коагулограмму.
8. Общую характеристику физиологических антикоагулянтов.
9. Фибринолитическую систему: фазы, механизмы, регуляцию.
10. Функционирование противосвёртывающих механизмов
11. Роль эндотелия сосудов в поддержке крови в жидком состоянии.
7. СТУДЕНТ ДОЛЖЕН УМЕТЬ:
1. Определить длительность капиллярного кровотечения по методу Дюке и
дать оценку результатам.
2. Подсчитать количество тромбоцитов и дать оценку результатам.
3. Определить время рекальцификации плазмы и дать оценку результатам.
4. Определить тромбопластиновое время и тромбопластиновый индекс по
Квику и дать оценку результатам.
5. Сделать тромботест и дать оценку результатам.
6.
Дать
оценку
результатам
фибринолиза
(по
этаноловомуи
протаминсульфатному тесту).
Методическое указание составила асистент Толокова Т.И.
Обсуждено и утверждено на заседании кафедры физиологии
“31”августа 2011р. протокол № 1