РНП.2.2.2.3.10046

АННОТАЦИЯ
к проекту «РНП.2.2.2.3.10046 Создание и апробация тест-систем на основе биочипов для
изучения
генетической
предрасположенности
к
развитию
наиболее
частых
мультифакториальных заболеваний (онкологических и сердечно-сосудистых)»
Ключевые слова: медицинская генетика, генетический полиморфизм, мутация, сердечнососудистые заболевания, артериальная гипертензия, тромбоз, тромбофилия, биочипы.
Цель работы: разработка и апробация тест-систем на основе биочипов для изучения
генетической предрасположенности к развитию наиболее частых мультифакториальных
заболеваний (онкологических и сердечно-сосудистых).
Объект исследования: образцы ДНК базы данных Лаборатории пренатальной диагностики
ГУ НИИ АГ им.Д.О.Отта РАМН, биочиповая технология.
Методика: использован метод гибридизации на олигонуклеотидном биочипе и предложен
метод бальной оценки ассоциации ген (полиморфизм) – болезнь.
Результаты работы: проведен анализ генов REN (I9-83G>A), AGT (M235T), AGTR1
(1166A>C), AGTR2 (3123C>A), BKR2 (-58T>C), MTHFR (677C>T), ADRB2 (48A>G и
81C>G) у детей, больных артериальной гипертонией и в контроле. Получены распределения
частот аллелей и генотипов проанализированных генов. Выявлено, что аллели генов BKR2
(С-аллель) и AGTR2 (А-аллель) ассоциированы с развитием артериальной гипертензии у
мальчиков. Показано, что наличие вариантов генов REN (А-аллель и А/А генотип), AGT (Таллель) и АСЕ (D-аллель) ассоциировано с формированием стабильной формы артериальной
гипертензии у детей. Обнаружено, что показатели диастолического АД значимо выше у
пациентов с T/T генотипом гена AGT по сравнению с M/M и/или M/T генотипами. Впервые
применен метод комплексной оценки полиморфизма генов ренин-ангиотензиновой и кининбрадикининовой систем, который подтвердил роль данных каскадов в развитии
артериальной гипертензии (АГ) и формировании стабильного артериального давления (АД).
Начата разработка биочипа для тестирования наследственной предрасположенности к
тромбофилии – MTHFR (677C>T), F5 (1691G>A), GPIIIa (196C>T), PAI-1 (4G/5G), FGB
(455G>A), F2 (20210G>A). Проанализированы методом ПЦР/ПДРФ образцы ДНК банка
данных, отобраны “контрольные” ДНК. Сконструирована схема микрочипа.
Основные
конструктивные,
технологические
и
технико-эксплуатационные
характеристики:
все
биочипы
обладает
определенной
специфичностью
и
чувствительностью. 1. Специфичность. Биочипы специфично определяют генетические
изменения (полиморфизм) в исследуемом образце крови или слюны. В качестве основных
параметров выступают характеристики сравнения интенсивности флуоресценции
дискриминирующих олигонуклеотидов. 2. Чувствительность. Биочипы способны выявлять
указанные генетические изменения при наличии не менее 10 000 геном-эквивалентов
(молекул ДНК) в 1 мл крови или в 1 мл слюны.
Степень внедрения: биочипы внедрены и используются для научных и диагностических
задач в Лабораториях различных институтов (ГУ НИИАГ им. Д.О.Отта РАМН, ГУ НЦЗД
РАМН, ИОГен РАН и других).
Рекомендации по внедрению или итоги внедрения результатов НИР: показано, что
технология биочипов обладает значительным преимуществом как с точки зрения
наукоемкости и снижению себестоимости анализа, так и с точки зрения увеличения точности
определения генетических мутаций.
Область применения:
1.
исследования в области профилактической медицины;
2.
исследований в области изучения метаболизма лекарств и их дозирования;
3.
исследования в области генодиагностики.
Такие исследования актуальны для:
•
медицинских центров
•
лечебно-диагностических центров.
•
организации, осуществляющих комплексное медицинское обслуживание.
•
клиники.
•
НИИ и др.
Экономическая эффективность или значимость работы: результатом проекта является
создание принципиально новой продукции (материалов, образцов, технологий и др.).
Рыночная привлекательность продукта проекта заключается в том, что появляется
возможность в кратчайшие, приемлемые для практической медицины, сроки выявлять
текущее состояние исследуемых в ходе диагностики образцов и принимать оперативные
меры в интересах нейтрализации потенциального негативного воздействия.
Прогнозные предположения о развитии объекта исследования: развитием объекта
исследования может быть разработка новых диагностических биочипов под конкретные
задачи медицинской генетики и профилактической медицины.
Результаты опубликованы в 4 статьях и в 7 тезисах работ, а также доложены на 4
международных конференциях.