Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 1 з 20 КОМУНАЛЬНЕ НЕКОМЕРЦІЙНЕ ПІДПРИЄМСТВО МІСЬКИЙ ПОЛОГОВИЙ БУДИНОК № 1 ДНІПРОВСЬКОЇ МІСЬКОЇ РАДИ КЛІНІКО-ДІАГНОСТИЧНА ЛАБОРАТОРІЯ ЗАТВЕРДЖУЮ Генеральний директор КНП «МПБ № 1» ДМР ____________ О. Щербакова 12.01.2022 СИСТЕМА МЕНЕДЖМЕНТУ ЯКОСТІ СТАНДАРТНА ОПЕРАЦІЙНА ПРОЦЕДУРА ПОРЯДОК РАБОТЫ С ОДНОКАНАЛЬНОЙ ПИПЕТКОЙ ПЕРЕМЕННОГО ОБЪЕМА 20-200 мкл СОП-А18 Примірник Редакція 1 від 09.01.2022 ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 1 з 20 Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 2 з 20 Содержание …………………………………………………………………………... Область применения …………...……………………………………………………. Нормативные ссылки ………….…………………………………………………….. Термины определения понятий, обозначения и сокращения …………………….. Ответственность и контроль за соблюдением требований СОП………………… Описание методики (процедуры) …………………………………………………… Периодическое обслуживание ……………………………………………………… Последовательность разборки автоматического дозатора переменного объема 20-200 мкл ……………………………………………………………………………. Стерилизация ………………………………………………………………………… Необходимое оборудование и материалы для проведения калибровки автоматического дозатора переменного объема…………………………………… Требования, предъявляемые к условиям среды при выполнении калибровки дозаторов ……………………………………………………………………………... Описание методики (процедуры) калибровки ……………………………………... Регулировка дозатора ….…………………………………………………………….. Библиография ………………………………………………………………………… Приложение А Приложение Б ЗМІСТ 1 Призначення .................................................................................................. 3 2 Сфера застосування ...................................................................................... 3 3 Нормативні посилання ................................................................................. 4 4 Терміни, визначення, скорочення ............................................................... 4 5 Процедура виконання процесу ..................................................................... 5 5.1 Ціль дослідження, принцип методу 5.2 Референтні інтервали та клінічне значення ....................................... 5 5.3 Вид зразка для дослідження, правила збору та зберігання…….6 5.3 Реагенти, обладнання, расходні матеріали………………..6 5.5 Внутрішній контроль якості…………………………………..7 5.6 Порядок виконання .............................................................................. 8 ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 2 з 20 Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 3 з 20 6 Реєстрація результатів .................................................................................. 9 7 Ознайомлення персоналу ........................................................................... 10 8 Перегляд процедури .................................................................................... 11 1 ПРИЗНАЧЕННЯ 1.1 Ця задокументована процедура розроблена на вимогу ДСТУ EN ISO Метою цієї Стандартної операційної процедури (СОП) є стандартизація виконання аналізу аланінамінотрансферази у сироватці крові кінетичним методом з метою забезпечення коректності та відтворюваності результатів лабораторних тестів в клініко-діагностичній лабораторії КНП «МПБ№1» ДМР. 2 СФЕРА ЗАСТОСУВАННЯ, ВІДПОВІДАЛЬНІСТЬ Область применения 1.1 Настоящей стандартной операционной процедурой установлен порядок работы с автоматическим дозатором переменного объема. Автоматический дозатор предназначен для объемного дозирования проб биологических жидкостей и реактивов, применяемых в практике медицинских ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 3 з 20 Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 4 з 20 исследований, с использованием одноразовых наконечников. Дозатор служит для отбора и дозирования жидкостей, динамическая вязкость которых не превышает 1,3×10 -3 Па×с. Его использование позволяет отбирать жидкость с высокой точностью, а также повысить скорость манипулирования при отборе и дозировании. Принцип действия дозатора основан на создании в съемном, герметично надеваемом на штуцер дозатора наконечнике попеременно вакуума или избыточного давления, в результате чего в наконечник всасывается или сливается из него дозируемая жидкость. Вакуум и избыточное давление создаются при перемещении в камере, расположенной в штуцере, герметично уплотнённого калиброванного плунжера. Объем дозы дозатора определяется диаметром плунжера и размером его перемещения, которое регулируется изменением положения головки плунжера с помощью регулировочного барабана. Установленное значение объема дозы дозаторов отображается на цифровом окошке индикатора, встроенном в рукоятку дозатора, а значение номинальной дозы дозаторов указано на рукоятке дозатора. Для работы дозаторов используются сменные наконечники. Действующая стандартная операционная процедура устанавливает правила работы с автоматическим дозатором переменного объема. Процедура выполняется в клиникодиагностической лаборатории. 1.2 Требования настоящей стандартной операционной процедуры распространяются и являются обязательными для выполнения всеми сотрудниками клиникодиагностической лаборатории (КДЛ). Дія процедури поширюється на персонал клініко-діагностичної лабораторії, який виконує визначення концентрації аланінамінотрансферази у сироватці крові кінетичним методом. Відповідальність за встановлення та впровадження процесу покладена на завідувача клініко-діагностичної лабораторії. Відповідальність за розроблення та актуалізацію стандартної операційної процедури покладена на менеджера з якості. Відповідальність за виконання процесу покладена на виконавців. 3 НОРМАТИВНІ ПОСИЛАННЯ, ДОКУМЕНТИ СМЯ Настоящая стандартная операционная процедура разработана с учетом требований следующих нормативных документов: ДСТУ 1.5:2003 Національна стандартизація. Правила побудови, викладання, оформлення та вимоги до змісту нормативних документів ДСТУ ISO 9000:2000 Системи управління якістю. Основні положення та словник ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 4 з 20 Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 5 з 20 ДСТУ ISO 9001:2008 Системи управління якістю. Вимоги ДСТУ ISO 9004:2001 Системи управління якістю. Настанови щодо поліпшення діяльності ДСТУ ISO/IEC 17025:2006 Загальні вимоги до компетентності випробувальних та калібрувальних лабораторій. ДСТУ ISO 17511:2003. Медицинские устройства для диагностики in vitro. Измерение величин в биологических пробах. Метрологическая прослеживаемость значений, приписанных калибраторам и контрольным материалам. ДСТУ ISO 15189:2003 Медицинские лаборатории – особые требования к качеству и компетентности. ДСТУ 1.05-93. Государственная система стандартизации Украины. Общее требование к построению, изложению, оформлению и содержанию стандартов. Настанова. СТ-11 МОЗ України 42-4.0:2008 Лікарські засоби. Належна виробнича практика Приказ МЗ СССР № 545 от 23.04.1985 г. «О дальнейшем совершенствовании контроля качества клинических лабораторних исследований» Наказ МОЗ України № 4 від 14.01.2015 р. Про затвердження Порядку внутрішньо лабораторного контролю якості досліджень при виявленні серологічних маркерів ВІЛ методами імуноферментного та імунохемолюмінесцентного аналізів 1. Накази МОЗ України 1.Наказ МОЗ України від 21.09.210р.№798 Про затвердження методичних рекомендацій "Хірургічна та гігієнічна обробка рук медичного персоналу". 2.Наказ №120 МОЗ України від 25.05.2000р."Інструкція з профілактики внутрішньо-лікарняного та професійного зараження ВІЛ - інфекцією". 3. Закон України №1765 -4 від 15.06.2014р."Про метрологію та метрологічну діяльність." 4. Наказ Держстандарту України №71 від 29.03.05р."Про затвердження Правил уповноваження та атестації у державній метрологічній системі." 5. Держстандарт України наказу МОЗ Україні від 5.04.2019 № 794 «Про удосконалення системи управління якістю лабораторних досліджень у сфері протидії ВІЛ-інфекції/СНІДу», зареєстрованого в Міністерстві юстиції України 01 липня 2019 р. за № 698/33669 6. ДСТУ 2708:2006 "Повірка ЗВТ, організація та порядок проведення. 7.ДСТУ 3215 – 95 "Метрологічна атестація засобів вимірювальної техніки. Організація та порядок проведення". 8. "Тимчасові галузеві стандарти щодо забезпечення якості клінічних лабораторних досліджень,П.В.Проценко,Київ,2010р. 9. ДСТУ ISO 9001 – 2009 "Системи управління якістю. Вимоги.(ISO 9001:2008 IДT)". ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 5 з 20 Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 6 з 20 10. ДСТУ ISO /ІЕС 17025 – 2009 "Загальні вимоги до компетентності випробувальних та калібрувальних лабораторій." 11. ДСТУ ISO 9000:2007 "Системи управління якістю. Основні положення та словник термінів." 12. ДСТУ 10013:2003 "Керівні вказівки щодо розроблення настанови з якості.". 13. ДСТУ ISO 9004 – 2001 "Системи правління якістю. Настанови щодо поліпшення діяльності." 14.ДСТУ 3651.1 – 97 "Похідні одиниці фізичних величин міжнародної системи одиниць та позасистемні одиниці. Основні поняття, назви та позначення." 15. ДСТУ 3230 – 95 "Управління якістю та забезпечення якості. Терміни та визначення." Наказ №351 від 27.10.95р. 16.МОЗ України Наказ №96 від 10.02.2010р. Питання організації лабораторної служби. 17. Наказ МОЗ України № 644 від 01.10.2015р. Про затвердження Концепції системи менеджменту якості в медичних лабораторіях України у відповідності до вимог міжнародних стандартів та плану заходів щодо її реалізації. 18. Наказ МОЗ України №325 від 08.06.2015р.Про затвердження Державних санітарно-протиепідемічних правил і норм щодо проводження з медичними відходами. 19.Закон про стандартизацію №124 – 8 від 2015р.№14 ст 96. 20. Наказ національного органу з стандартизації № 145 від 05.11.2015р та доповнення №172 від 04.12.2015р. 21. ДСТУ EN ISO 17511:2015 01.01.2017 22. Наказ МОЗ України №30 від 01.01.2016р."про метрологію." 23. ДСТУ EN ISO 15189:2015 5.5.1.2. Стандарт про верифікацію. 24. ДСТУ EN ISO 15189:2015 "Медичні лабораторії. Вимоги до якості та компетентності." 4. Терміни, скорочення КДЛ, лабораторія – клініко-діагностична лабораторія; КНП "МПБ № 1" ДМР, лікарня - КОМУНАЛЬНЕ НЕКОМЕРЦІЙНЕ ПІДПРИЄМСТВО "МІСЬКИЙ ПОЛОГОВИЙ БУДИНОК № 1" ДНІПРОВСЬКОЇ МІСЬКОЇ РАДИ; ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 6 з 20 Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 7 з 20 НД – нормативні документи; СМЯ – система менеджменту якості; КЛ – керівник лабораторії; МЯ – менеджер з якості. АЛАТ-аланінамінотрансфераза 5. ПРОЦЕДУРА ВИКОНАННЯ ПРОЦЕСУ 5.1 Ціль дослідження. Ця стандартна операційна процедура (СОП) визначає порядок визначення аланінамінотрансферази у сироватці крові кінетичним методом з метою забезпечення коректності та відтворюваності результатів лабораторних тестів. Принцип методуВизначається визначення. активність ферменту АЛТ методом УФ кінетичного 5.2 Референтні інтервали та клінічне значення В сироватці , плазмі крові. АлАТ- нормальні величини – чоловіки до 40 Од/л,жінки до 31 од\л Лінійність вимірювання зберігається до 450 Од/л. Якщо отримане значення перевищує лінійність, сироватку необхідно розвести розчином натрію хлориду 0,9% у співвідношенні 1:5. Аланінамінотрансфераза (АлАТ) –це нетканинний специфічний розчинний фермент. Он каталізує передачу аміногруп в ході перетворень амінокислот і альфа-кетокислот. Фермент, виявлений в сироватці, головним чином походить з печінки і нирок. Активність сироваткового ферменту зростає під час різних хворобливих станів печінки, включаючи гепатит. Показання до призначення аналізу крові на аланінамінотрансфераза (АЛТ) присутність факторів ризику пошкодження печінки; ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 7 з 20 Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 8 з 20 клінічні прояви, характерні для патологій печінки; контакт з хворим на вірусний гепатит; моніторинг стану хворих на гепатити; контроль стану здоров'я пацієнтів, які тривалий час приймають гепатотоксичні препарати; Істотне підвищення рівня АЛТ, зазвичай, пов'язане з гострим вірусним гепатитом (може бути більше, ніж 10-кратне підвищення) або з гострим токсичним ураженням печінки з масивним ушкодженням гепатоцитів. Помірне підвищення АЛТ (перевищення в кілька разів) характерно для хронічних вірусних гепатитів, порушення відтоку жовчі і хронічних захворюваннях гепатобіліарної зони, зловживання алкоголем, ураження печінки при інфекційних захворюваннях. Підвищення АЛТ також може бути ознакою гострого інфаркту міокарда, травми або запалення скелетних м'язів. 5.3 Вид зразка для дослідження, правила збору та зберігання Для дослідження використовується сироватка або плазма . Напередодні дослідження необхідне голодування протягом 6-8 годин. Аналіз приймається строго натщесерце. Сироватка або плазма стабільна протягом 8 годин при t0 200-250С, 48 годин при t0 2-80 С. 5.3 Реагенти, обладнання, расходні матеріали Реагенти: - набір для визначеня АЛАТ «Fortress diagnostics »,Англія. Обладнання: - напівавтоматичний біохімічний аналізатор Myndray ВА-88А - центрифуга 1500-3000 об\хв - дозатори механічні з об'ємом 20-200 та 1000-5000мкл, Расходні матеріали: 5.1 Материалы, оборудование и реактивы. Одноразовые наконечники ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 8 з 20 Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 9 з 20 Автоматический дозатор Штатив для дозатора Одноразовые перчатки Емкость для сброса использованных наконечников -пробірка центрифужна. -перчатки разові -накінцівники до дозатору на 20 – 200 мкл.,1000-5000 мкл -спиртова серветка -шприц 5 мл -пробірка скляна 2 мл -накінцівники для механічних дозаторів 5.5 Внутрішній контроль якості Щодня перед серійним дослідженням проб пацієнтів необхідно провести дослідження контрольного матеріалу. Для внутрішнього контролю якості використовуюється контрольний матеріал Clin Chem Mults Control(рівень1) Отриманий результат повинен бути в межах допустимих значень, вказаних в паспорті контрольного матеріалу. Набори реагентів використовуються в межах встановлених строків придатності і зберігаються при регламентованих у паспорті умовах. Результати контролю якості реєструються у журналі, виводяться на комп'ютер і зберігаються в електронному вигляді . 5.6 Порядок виконання 1 Область применения 1.3 Настоящей стандартной операционной процедурой установлен порядок работы с автоматическим дозатором переменного объема. Автоматический дозатор предназначен для объемного дозирования проб биологических жидкостей и реактивов, применяемых в практике медицинских исследований, с использованием одноразовых наконечников. Дозатор служит для отбора и дозирования жидкостей, динамическая вязкость которых не превышает 1,3×10-3 Па×с. Его использование позволяет отбирать жидкость с высокой точностью, а также повысить скорость манипулирования при отборе и дозировании. Принцип действия дозатора основан на создании в съемном, герметично надеваемом ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 9 з 20 Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 10 з 20 на штуцер дозатора наконечнике попеременно вакуума или избыточного давления, в результате чего в наконечник всасывается или сливается из него дозируемая жидкость. Вакуум и избыточное давление создаются при перемещении в камере, расположенной в штуцере, герметично уплотнённого калиброванного плунжера. Объем дозы дозатора определяется диаметром плунжера и размером его перемещения, которое регулируется изменением положения головки плунжера с помощью регулировочного барабана. Установленное значение объема дозы дозаторов отображается на цифровом окошке индикатора, встроенном в рукоятку дозатора, а значение номинальной дозы дозаторов указано на рукоятке дозатора. Для работы дозаторов используются сменные наконечники. Действующая стандартная операционная процедура устанавливает правила работы с автоматическим дозатором переменного объема. Процедура выполняется в клиникодиагностической лаборатории. 1.4 Требования настоящей стандартной операционной процедуры распространяются и являются обязательными для выполнения всеми сотрудниками клиникодиагностической лаборатории (КДЛ). 2 Нормативные ссылки Настоящая стандартная операционная процедура разработана с учетом требований следующих нормативных документов: ДСТУ 1.5:2003 Національна стандартизація. Правила побудови, викладання, оформлення та вимоги до змісту нормативних документів ДСТУ ISO 9000:2000 Системи управління якістю. Основні положення та словник ДСТУ ISO 9001:2008 Системи управління якістю. Вимоги ДСТУ ISO 9004:2001 Системи управління якістю. Настанови щодо поліпшення діяльності ДСТУ ISO/IEC 17025:2006 Загальні вимоги до компетентності випробувальних та калібрувальних лабораторій. ДСТУ ISO 17511:2003. Медицинские устройства для диагностики in vitro. Измерение величин в биологических пробах. Метрологическая прослеживаемость значений, приписанных калибраторам и контрольным материалам. ДСТУ ISO 15189:2003 Медицинские лаборатории – особые требования к качеству и компетентности. ДСТУ 1.05-93. Государственная система стандартизации Украины. Общее требование к построению, изложению, оформлению и содержанию стандартов. Настанова. СТ-11 МОЗ України 42-4.0:2008 Лікарські засоби. Належна виробнича практика Приказ МЗ СССР № 545 от 23.04.1985 г. «О дальнейшем совершенствовании контроля качества клинических лабораторних исследований» Наказ МОЗ України № 4 від 14.01.2015 р. Про затвердження Порядку внутрішньо лабораторного контролю якості досліджень при виявленні серологічних маркерів ВІЛ методами імуноферментного та імунохемолюмінесцентного аналізів ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 10 з 20 Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 11 з 20 3 Термины, определения понятий, обозначения и сокращения В настоящей стандартной операционной процедуре применены термины по ГСТУ ISO 15189, ГСТУ ISO 17511. В настоящей стандартной операционной процедуре использованы обозначения: СОП – стандартная операционная процедура. 4 Ответственность и контроль за соблюдением требований СОП 2.1 Ответственность за выполнение требований настоящей СОП возлагается на сотрудников КДЛ, выполняющих работу с использованием автоматических дозаторов переменного объема. 2.2 Контроль за соблюдением требований настоящей СОП обеспечивается заведующим КДЛ. 5 Правила работы с автоматическим дозатором переменного объема 5.1 Материалы, оборудование и реактивы. Одноразовые наконечники Автоматический дозатор Штатив для дозатора Одноразовые перчатки Емкость для сброса использованных наконечников 5.2 Описание методики (процедуры) работы. 5.2.1 Настройте дозатор на нужный для измерения объем. Запрещается устанавливать объем, выходящий за границы диапазона дозирования пипетки (т.е. менее 20 и более 200 мкл)! Это достигается вращением головки плунжера по часовой стрелке (уменьшение объема), либо против часовой стрелки (увеличение объема). Каждый шаг вращения головки плунжера сопровождается щелчком. Выбранный объем зафиксируйте в окошке цифрового индикатора. Обратите внимание, что цифры должны быть полностью видны. Не допускается установка значений объема, выходящего за нормированный диапазон дозатора! 5.2.2 Рукоятку пипетки расположите в ладони как «рукоятку кинжала», ушко рукоятки необходимо навесить на указательный палец. Этим обеспечивается минимальное напряжение кисти руки при работе с пипеткой. 5.2.3 На кончик стволовой части пипетки плотно наденьте наконечник. До начала работы с новым наконечником смочите его той же жидкостью, которая подлежит дозированию. Для этого наберите и выпустите жидкость несколько раз. 5.2.4 При отборе жидкости пипетка должна всегда быть в строго вертикальном положении. Это позволит избежать ошибки при дозировании. 5.2.5 Отбор и дозирование жидкости осуществляйте непосредственно, оперируя плунжером. По ходу движения плунжера имеются две остановки. 5.2.6 Пипетирование можно осуществлять двумя способами: прямым и обратным. 5.2.7 Прямой способ дозирования. ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 11 з 20 Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 12 з 20 5.2.7.1 Нажмите на головку плунжера большим пальцем до первой остановки. 5.2.7.2 Осторожно погрузите наконечник дозатора в раствор на глубину примерно 1 см и медленно освобождайте плунжер. В наконечник набирается определенный объем жидкости 5.2.7.3 После насасывания нужного объема жидкости в наконечник подождите 2-3 секунды, после чего выньте его из сосуда с жидкостью. 5.2.7.4 Следите, чтобы на кончике пипетки не было капель. Капли жидкости с боковых сторон можно удалять только марлевой салфеткой. Не промокайте жидкость из носика – это приведет к ошибке дозирования. 5.2.7.5 Для того, чтобы слить жидкость в пробирку повторно нажмите на головку плунжера сначала до первой остановки и через секунду до второй остановки, т.е. до упора. При этом из наконечника удаляются все остатки жидкости. 5.2.7.6 Затем подымите палец, чтобы плунжер возвратился в исходное положение. 5.2.8 Обратный способ дозирования. 5.2.8.1 Обратный способ дозирования рекомендуется применять в следующих случаях: - при работе с легковоспламеняющимися жидкостями; - при работе с растворами большой вязкости; - при раскапывании очень малых объемов. Нажмите на головку плунжера большим пальцем до первой остановки. 5.2.8.2 Нажмите на головку плунжера большим пальцем до второй остановки. 5.2.8.3 Погрузите наконечник пипетки в раствор на глубину 1 см и медленно освобождайте плунжер. В наконечник набирается объем жидкости, но несколько больший, чем необходимо. 5.2.8.4 Для дозирования заданного объема медленно нажмите на головку плунжера только до первой остановки. Часть жидкости остается в наконечнике. 5.2.8.5 Оставшуюся после этого в наконечнике часть жидкости необходимо удалить (вылить в сосуд для реактива или в отходы), что осуществите путем нажатия плунжера до второй остановки, т.е. до упора. 5.2.8.6 Затем палец освободите и плунжер возвратиться в исходное положение. 5.2.9 Для того чтобы снять или заменить наконечник, необходимо нажать на удалитель (специальный механизм для сброса наконечников) до упора, после чего наконечник сам отсоединится от стволовой части дозатора. Помните, что сброс наконечников необходимо проводить в специальную емкость для сброса использованных наконечников! 5.2.10 После окончания работы с дозатором установите его на штатив. Хранить дозатор необходимо в вертикальном положении! Помните, что каждый раз перед началом работы необходимо проверять, чтобы на поверхности пипетки отсутствовали грязь или пыль. Особое внимание следует обратить на посадочный конус наконечника. Нельзя использовать для очистки поверхности дозатора растворители за исключением 70% этанола. ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 12 з 20 Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 13 з 20 6 Периодическое обслуживание В случае если автоматический дозатор используется каждый день, он должен подвергаться периодическому обслуживанию 1 раз в 3 месяца. 7 Последовательность разборки автоматического дозатора переменного объема 20-200 мкл 7.1 Отожмите вниз удалитель наконечника. 7.2 Вставьте клещи для разборки дозатора под толкатель удалителя наконечников, чтобы освободить удалитель наконечников (рис.1). Рис. 1. Рис. 2. 7.3 Снимите модуль конуса наконечника, сжимая его клещами (рис.2). 7.4 Вытащите плунжер и пружину. 7.5 Удалите прокладочные кольца, прокладочный кронштейн и пружину из конуса наконечника. Складывайте и храните все части на столе для обратной сборки дозатора. 7.6 Очистите плунжер, пружину плунжера и прокладочные кольца сухой неворсистой тканью. 7.7 Проверьте отсутствие посторонних частиц на конусе наконечника. 7.8 Смажьте очищенные части смазкой, которая входит в комплект поставки. 7.9 Соберите компоненты дозатора обратно. 7.10 При отжатой операционной кнопке прикрепите конус наконечника к рукоятке таким образом, чтобы адаптер был на стороне удалителя наконечника. Ни в коем случае не погните тонкий плунжер во время сборки дозатора. Нажмите на защелкивающее устройство. 7.11 Вставьте удалитель наконечников и проведите процедуру калибровки, описанную ниже (см. пп. 11.1-11.3). 8 Стерилизация Весь дозатор целиком может быть подвергнут стерилизации путем автоклавирования при 121°С (минимум 20 мин). Для этого не требуется специальных приготовлений. После автоклавирования дозатор должен быть охлажден до комнатной температуры, по крайней мере, в течение двух часов. Перед началом пипетирования следует убедиться в том, что дозатор сухой. ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 13 з 20 Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 14 з 20 В соответствии с рекомендациями производителя калибровку автоматического дозатора переменного объема следует проводить через каждые 25 циклов стерилизациии. 9 Необходимое оборудование и материалы для проведения калибровки автоматического дозатора переменного объема Одноразовые наконечники Аналитические весы. Помните, что цена деления аналитических весов должна быть выбрана в соответствии с объемом проверяемого автоматического дозатора. Таблица 1. Объем автоматического дозатора до 10 мкл 10-100 мкл больше 100 мкл Цена деления 0,001 мг 0,01 мг 0,1 мг Жидкость для калибровки: дистиллированная вода. Стаканчики для взвешивания жидкости Фильтровальная бумага Емкость для слива 10 Требования, предъявляемые к условиям среды при выполнении калибровки дозаторов Процедура калибровки должна выполняться в помещении, где отсутствуют сквозняки, при постоянной (0,5оС) температуре воды, дозатора и воздуха (в диапазоне от 20 до 25°С). Относительная влажность должна быть выше 55%. Особенно важно поддерживать повышенную влажность воздуха при калибровке объемов менее 50 мкл, чтобы уменьшить потери жидкости при испарении. 11 Описание методики (процедуры) калибровки Помните, что автоматические дозаторы переменного объема следует проверять на двух объемах: максимальном объеме (или номинальном объеме) и минимальном объеме или 10% от максимального объема или выше. 11.1 Настройте автоматический дозатор переменного объема на 20 мкл. 11.2 На кончик стволовой части пипетки плотно наденьте наконечник. До начала работы с новым наконечником смочите его дистиллированной водой путем забора и слива жидкости 3-5 раз. 11.3 Проведите процедуру подготовки к взвешиванию жидкости на аналитических весах в соответствии с инструкцией по работе на аналитических весах. 11.4 Отберите в 10 стаканчиков для взвешивания по 20 мкл дистиллированной воды. ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 14 з 20 КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Процедура СМЯ Сторінка 15 з 20 11.5 Проведите процедуру взвешивания образцов, регистрируя полученные данные веса дистиллированной воды для объема 20 мкл в Протокол калибровки автоматического дозатора переменного объема 20-200 мкл (см. Приложение А). 11.6 Процедуру, описанную в пп.11.1-11.5 повторите для объема 200 мкл. 11.7 Пересчитайте для каждого тестируемого объема (20 и 200 мкл) полученный вес дозы (Мi, мг) в объем (Vi, мкл) и найдите Vсред по следующим формулам: Vi Мi ρ = где: Мi – вес дозы в мг; ρ – удельная плотность воды равная 0,998 мг/мкл при температуре 20°С до 25°С. V1 + V2 + V3 +V4 + V5+ ………+ V10 10 Vсред = 11.8 Полученные данные внесите в Протокол калибровки автоматического дозатора переменного объема 20-200 мкл (см. Приложение А). 11.9 Вычислите точность (для 20 и 200 мкл соответственно) – величину, характеризующую разницу между дозируемым объемом и установленным объемом на пипетке, δ = ((Vсред ‒ Vномин )/ Vномин ) •100% 11.10 Полученные данные точности для тестируемых объемов (20 и 200 мкл) внесите в Протокол калибровки автоматического дозатора переменного объема 20-200 мкл (см. Приложение А). 11.11 По формулам, приведенным ниже, вычислите воспроизводимость (Ϭ) (для 20 и 200 мкл соответственно) – величину, характеризующую повторяемость дозирования. С этой целью сначала для каждого полученного объема (Vi) рассчитайте отклонение от его среднего значения (Vсред) и квадрат каждого отклонения (d²) (см. табл. 2). Таблица 2. № п/п 1. 2. 3. 4. 5. Отклонение от среднего значения dn = Vi – Vсред формула результат d1 = V1– Vсред d2 = V2– Vсред d3 = V3– Vсред d4 = V4– Vсред d5 = V5– Vсред ФСМ-СОП А18 Квадрат отклонения d² формула результат d1² = d2² = d3² = d4² = d5² = Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 15 з 20 Процедура СМЯ 6. 7. 8. 9. 10. КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 d6 = V6– Vсред d7 = V7– Vсред d8 = V8– Vсред d9 = V9– Vсред d10 = V10– Vсред Сторінка 16 з 20 d6² = d7² = d8² = d9² = d10² = ∑d²= Затем рассчитайте сумму квадратов отклонений (∑d² ) по формуле: ∑d²= d1² + d2² + d3² + …..+d10² На основании полученного значения вычислите воспроизводимость по формуле: ______ Ϭ = ((√∑d² ⁄ 9) / Vсред) •100% 11.12 Полученные данные воспроизводимости для тестируемых объемов (20 и 200 мкл) внесите в Протокол калибровки автоматического дозатора переменного объема 20200 мкл (см. Приложение А). 11.13 Сравните полученные данные точности и воспроизводимости для каждого тестируемого объема с пределами, указанными в таблице 3 Таблица 3. Диапазон Объем, мкл Точность, % Воспроизводимость, % 20-200 мкл 20 ±1,5 2,0 200 ±2,0 3,0 Калибровка пипетки считается правильной, если вычисленные результаты укладываются в пределы, указанные в табл. 3. Если результаты не укладываются в границы, дозатор должен быть отрегулирован и проверен заново. 12 Регулировка дозатора Регулировка выполняется с помощью специального ключа, поставляемого вместе с автоматическим дозатором. 12.1 Поместите ключ на калибровочное кольцо, расположенное под операционной кнопкой (рис. 3). 12.2 Поверните ключ по часовой стрелке для увеличения дозируемого объема и в противоположном направлении для уменьшения объема. После регулировки проведите повторно калибровку дозатора в соответствии с пп. 11.1-11.13. Рис. 3. ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 16 з 20 Процедура СМЯ КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Сторінка 17 з 20 13 Библиография. 1. Паспорт Дозатор пипеточный с регулируемым объемом дозы ДПАОП-20-200. 2.Горячковский А.М. Справочное пособие по клинической биохимии. – Одесса, ОКФА. – 1994. – 416 с. 3. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник. // В.В. Меньшиков, Л.Н. Делекторская, Р.П. Золотницкая и др. – М: Медицина, 1987 – 368 с. 4. Контроль якості серологічних досліджень при виявленні антитіл до ВІЛ: Метод. рек./ уклад.: А.Л. Гураль [та ін.]. – К.: Знання України, 2010. – 34 с. Приложение А (обязательное) Протокол калибровки автоматического дозатора переменного объема 20-200 мкл Лаборатория КДЛ ОЦПБС Дозатор автоматический переменного объема 20-200 мкл ____________________________№________________________ Прибор Весы аналитические__________________________________№_________________ Дата проведения калибровки _______ __________ для объема 20 мкл Вес дозы (Мi), мг Рассчитанный на основании веса объем (Vi) для объема 200 мкл Вес дозы (Мi), мг Рассчитанный на основании веса объем (Vi) 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10 ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 17 з 20 КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Процедура СМЯ Vсред, полученный при Сторінка 18 з 20 ------------- тестировании Точность (δ, %), полученная при заявленная тестировании производителем для объема 20 мкл для объема 200 мкл Воспроизводимость (Ϭ, %), полученная при заявленная тестировании производителем ± 1,5 ± 2,0 ± 2,0 ± 3,0 Вывод: калибровка автоматического дозатора переменного объема № _________ удовлетворительна / неудовлетворительна (неверное вычеркнуть) Исполнитель _______ __________ Приложение Б (обязательное) УСТРАНЕНИЕ НЕИСПРАВНОСТЕЙ Неполадка Утечка Неточное дозирование ФСМ-СОП А18 Причина Наконечник неплотно вставлен Пыль или посторонние частицы между наконечником и конусом Пыль или посторонние частицы между плунжером, прокладкой и цилиндром Цилиндр и прокладка плохо смазаны Повреждено соединительное кольцо Неправильная работа пипеткой Неправильно надет наконечник Нарушение калибровки, например, из-за небрежного отношения с пипеткой Редакція 1 від 12.01.2022 Рекомендация Плотно вставьте наконечник Очистите конус и вставьте новый наконечник Очистите и смажьте плунжер, прокладку и цилиндр Смажьте (см. инструкцию) Замените кольцо Внимательно следуйте инструкции Плотно насадите наконечник Повторите калибровку в соответствии с инструкцией Сторінка 18 з 20 КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Процедура СМЯ Неточное дозирование с некоторыми жидкостями Сторінка 19 з 20 Неподходящая калибровка. Перекалибруйте под Работа с вязкими жидкостями используемую требует перекалибровки жидкость 6. Реєстрація результатів Всі отримані результати записують до бланка направлення ,ставиться дата та підпис виконуючого аналіз, потім результати реєструються в журналі «Журнал реєстрації біохімічних досліджень» форма №250\0,затверджена наказом МОЗ України 04.01.2001р№1., та вноситься у МІС. Після реєстрації бланк передають до відділення. ОЗНАЙОМЛЕННЯ ПЕРСОНАЛУ № з/п ПІБ співробітника КДЛ 1. Курбатова О.В. Посада Підпис Дата Зав.КДЛ 23.01.2022 2. Маляр С.Л. Лікар-лаборант 23.01.2022 3. Логвин І.М Лікар-лаборант 23.01.2022 4. Пошванюк О.П. Лаборант 23.01.2022 5. Безкоровайна К.В. Лаборант 23.01.2022 6. Олійник С.А. Лаборант 23.01.2022 7. Черевік С.А. Лаборант 23.01.2022 8. Дубовік І.С. Лаборант 23.01.2022 ФСМ-СОП А18 Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 19 з 20 КНП «МПБ № 1» ДМР Клініко-діагностична лабораторія Визначення концентрації АЛАТ крові СОП-А18 вул. Воскресенська, 2, м. Дніпро, 49000 Процедура СМЯ 9. Громова Ю.С. Лаборант Сторінка 20 з 20 23.01.2022 10 23.01.2022 ДОДАТОК Б ПЕРЕГЛЯД СОП Дата Номер зміни ФСМ-СОП А18 Номер пункту, розділу Зміст зміни Редакція 1 від 12.01.2022 Сторінка 20 з 20